用于改進核酸合成反應的方法
【專利摘要】本發明提供以下：用于改進酸合成反應的反應性的方法，其包括向反應溶液添加ω-氨基酸的步驟；用于核酸合成反應的組合物，其包含DNA聚合酶、反應緩沖液、至少一條引物、至少一種脫氧核糖核苷酸三磷酸、和ω-氨基酸；和用于核酸合成反應的反應緩沖液，其包含ω-氨基酸。
【專利說明】用于改進核酸合成反應的方法 【技術領域】
[〇〇〇1] 本發明涉及用于改進核酸合成反應的反應性的方法、用于核酸合成反應的組合 物，和用于核酸合成反應的反應緩沖液。
[0002] 【背景技術】 核酸合成方法，特別是聚合酶鏈反應（PCR)方法是用于在試管中簡單擴增目的核酸片 段的技術，并且近來不僅成為用于遺傳研究的重要實驗手段，還成為了生物、醫學和農業廣 泛領域中的重要實驗手段。
[0003] 使用DNA聚合酶的核酸合成反應，如PCR在其反應性如特異性方面經常有問題。為 了避免非特異性的核酸合成反應，嘗試開發新型DNA聚合酶、改進引物設計方法、優化反應 溶液組成、添加化合物等。例如，發現添加甜菜堿在擴增富含CG的模板中有效(非專利參考 文獻1和2)。
[0004] 引用列表 非專利參考文獻 非專利參考文獻 1:''American Journal of Human Genetics"，1994 年 9 月 1 日，第 55卷，附錄第3號，第A238頁 非專利參考文獻2: "Nucleic Acids Research", 1997年10月1日，第25卷，第19 號，第 3957-3958 頁。
[0005] 發明概述 本發明待解決的問題 已經嘗試改進核酸合成反應的反應性。然而，核酸合成反應可能仍然伴隨有非特異性 反應或可能不能合成足夠量的DNA。由于這些原因，需要核酸合成反應的反應性中的進一步 改進。本發明的目標是提供用于改進核酸合成反應的反應性的方法、用于核酸合成反應的 組合物、和用于核酸合成反應的反應緩沖液。
[0006] 問題的解決方案 本發明人發現可以通過向反應溶液添加 ω-氨基酸來改進核酸合成反應的反應性。因 此，完成本發明。
[0007] 艮Ρ，本發明涉及：
[1] 用于改進核酸合成反應的反應性的方法，其包括向反應溶液添加 ω-氨基酸的步 驟；
[2] 根據[1]的方法，其中所述ω-氨基酸是下式1代表的化合物：
[化學式1]
【權利要求】
1. 用于改進核酸合成反應的反應性的方法，其包括向反應溶液添加 ω-氨基酸的步 驟。
2. 權利要求1的方法，其中所述ω -氨基酸是下式1代表的化合物： [化學式1]
其中η是2或更大的整數。
3. 權利要求2的方法，其中η是2-7的整數。
4. 權利要求1的方法，其中所述核酸合成反應是聚合酶鏈反應。
5. 權利要求1的方法，其包括制備含有ω-氨基酸、DNA聚合酶、至少一條引物和至少 一種脫氧核糖核苷酸三磷酸的反應溶液的步驟。
6. 權利要求1的方法，其進一步包括向所述反應溶液添加甜菜堿的步驟。
7. 用于核酸合成反應的組合物，其含有： DNA聚合酶， 反應緩沖試劑， 至少一條引物， 至少一種脫氧核糖核苷酸三磷酸，和 ω-氨基酸。
8. 權利要求7的組合物，其中所述ω -氨基酸是如權利要求2中定義的式1代表的化 合物。
9. 權利要求7的組合物，其進一步含有甜菜堿。
10. 用于核酸合成反應的反應緩沖液，其含有ω-氨基酸。
11. 權利要求10的反應緩沖液，其中所述ω-氨基酸是如權利要求2中定義的式1代 表的化合物。
12. 權利要求10的反應緩沖液，其進一步含有甜菜堿。
13. 用于核酸合成反應的試劑盒，其包含以下組分： DNA聚合酶， 反應緩沖試劑， 至少一種脫氧核糖核苷酸三磷酸，和 ω-氨基酸。
14. 權利要求13的試劑盒，其中所述ω-氨基酸是如權利要求2中定義的式1代表的 化合物。
15. 權利要求13的試劑盒，其進一步包含甜菜堿。
【文檔編號】C12Q1/68GK104093835SQ201380007277
【公開日】2014年10月8日 申請日期:2013年1月24日 優先權日:2012年1月31日
【發明者】松村清之, 上森隆司, 向井博之 申請人:寶生物工程株式會社