一類海洋真菌來源的Berkeleyones化合物及其制備方法和應用的制作方法
【專利摘要】本發明屬于藥物化合物【技術領域】，具體涉及一種海洋真菌來源的Berkeleyones化合物及其制備方法和應用。所述Berkeleyones化合物的結構如式（I）所示，該新化合物具有抑制癌細胞增殖的作用，可用于制備抗癌藥物。本發明所述Berkeleyones化合物是從一種海洋真菌菌核青霉Penicilliumsclerotiorum.SJ0167中分離得到，海洋微生物種類繁多，數量龐大，從微生物提取的方法簡單，步驟簡便，使得Berkeleyones化合物來源豐富，成本低廉；對癌細胞抑制活性高，應用前景廣闊。
【專利說明】—類海洋真菌來源的Berkeleyones化合物及其制備方法
和應用
【技術領域】
[0001] 本發明屬于藥物化合物【技術領域】,具體涉及一類海洋真菌來源的Berkeleyones化合物及其制備方法和應用。
【背景技術】
[0002]紅樹林是熱帶、亞熱帶海灣、河口泥灘上特有的常綠灌木和小喬木群落，具有呼吸根或支柱根，一般分布于高潮線與低潮線之間的潮間帶。在中國，紅樹林主要分布在海南島、廣西、廣東和福建。作為海洋真菌中的第二大類群，紅樹林真菌由于生長條件獨特,活性代謝產物非常豐富，在海洋資源開發方面有著重要的意義。目前科學家已從其里面的各種內生真菌代謝產物中分離出很多結構新穎、有顯著活性的化合物，許多已進入臨床試驗階段。
[0003]Berkeleyones化合物最初來源于從伯克利的礦井湖分離的青霉菌,這種菌株在惡劣的環境下依然可以存活，其代謝產物很可能有活性物質，因此研究人員進行了深入研究并發現了新結構的Berkeleyones化合物，并認為這類化合物在真菌體內發揮著重要作用(Donald B.Stierle, etal.0rg.Lett., 2004,6,1049-1052)。目前這類結構的化合物已報道的只有 15 個(Donald B.Stierle, etal.J.Nat.Prod., 2007，70，1820-1823; Donald Β.Stierle, etal.J.Nat.Prod., 2011，74，2273-2277; MotooIidaj etal.0rg.Lett., 2008，10，845-848; Yi Zhang, etal.J.Nat.Prod., 2012，75， 1888-1895)。
[0004]癌癥是嚴重威脅人類生命的常見病和多發病。研發高效、低毒、特異性強的新型抗癌藥物是當今抗腫瘤藥物研究的重要方向。海洋天然產物作為藥物先導化合物的重要來源之一，對新型藥物的研發有著重要的作用。
【發明內容】
[0005]本發明的目的在于提供一類新的海洋真菌來源的Berkeleyones化合物。所述BerkeIeyones化合物是從一種南海紅樹林內生真菌菌核青霉ciIliuni sclerotiorum.SJ 0167中分離得到的，該化合物對乳腺癌細胞(MDA-MB-435)、肝癌細胞(HepG2)、結腸癌細胞(HCT-116)和肺腺癌細胞(A549)均表現出較好的抗癌活性，可應用于制備抗癌藥物。
[0006]本發明的另一個目的是提供上述Berkeleyones化合物的制備方法。
[0007]本發明還有一個目的是提供上述Berkeleyones化合物的應用。
[0008]本發明的上述目的通過如下技術方案予以實現:
一類Berkeleyones化合物,其結構式如式(I)所示:
【權利要求】
1.一種Berkeleyones化合物,其特征在于,其結構式如式(I)所示:
2.權利要求1所述Berkeleyones化合物的制備方法,其特征在于,包括如下步驟: 51.將海洋真菌菌核青霉scyeroiiorttT?.SJ 0167菌株接入種子培養基，搖床培養，得到種子培養液； 52.將種子培養液接入發酵培養基中，靜置培養得發酵物； 53.將發酵物用甲醇浸泡提取，甲醇提取液濃縮后經乙酸乙酯萃取、濃縮，得到浸膏，浸膏再經層析分離，得到式(I)所示的化合物I和化合物2 ； 所述菌核青霉sclerotiorum.SJ 0167菌株已在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC)保藏，保藏日期是2013年12月23日，保藏號是CGMCCNO: 8628。
3.根據權利要求2所述Berkeleyones化合物的制備方法,其特征在于,步驟SI所述種子培養基的組分為:葡萄糖18~23g，蛋白胨4~5g，酵母膏I~2g，海鹽55~65g，水1.5~2L。
4.根據權利要求2所述Berkeleyones化合物的制備方法,其特征在于,步驟SI所述搖床培養是室溫下，搖床轉速10(Tl50rpm，培養時間為5~7天。
5.根據權利要求2所述Berkeleyones化合物的制備方法,其特征在于,步驟S2所述發酵培養基的組分為:大米5(T70g，海鹽1.5~2g，水5(T70mL。
6.根據權利要求2所述Berkeleyones化合物的制備方法,其特征在于,步驟S2所述靜置培養的時間為廣2月，靜置培養的溫度為室溫。
7.根據權利要求2所述Berkeleyones化合物的制備方法,其特征在于,步驟S3所述甲醇的用量為與發酵物等體積；乙酸乙酯的用量為甲醇用量的1/3 ;所述浸膏用硅膠柱層析分離，硅膠柱進行層析分離時分別用10:0、9:1、8:2、7:3、6:4、5:5、4:6、3:7、2:8、1:9和O:10的石油醚-乙酸乙酯梯度淋洗。
8.根據權利要求7所述Berkeleyones化合物的制備方法,其特征在于,將7:3、6:4及5:5的石油醚-乙酸乙酯洗脫部分合并,經過葡聚糖凝膠Sephadex LH-20層析,用體積比為2:1:1的石油醚-二氯甲烷-甲醇為洗脫劑進一步洗脫，再經過HPLC，用體積比為6:4的甲醇-水為洗脫劑純化，即得式(I)所示的化合物I和化合物2。
9.權利要求1所述Berkeleyones化合物在制備抗癌藥物中的應用。
10.根據權利要求9所述Berkeleyones化合物在制備抗癌藥物中的應用,其特征在于，所述抗癌包 括抗乳腺癌、抗肝癌、抗結腸癌或抗肺腺癌。
【文檔編號】C12R1/80GK103910746SQ201410072112
【公開日】2014年7月9日 申請日期:2014年2月28日 優先權日:2014年2月28日
【發明者】劉嵐, 楊鑫, 李靜, 林永成, 岑穎洲, 陸勇軍, 何磊, 黎孟楓, 朱勛, 何建國 申請人:中山大學