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一種消滅核酸污染的方法

文檔序號:804491閱讀:4713來源:國知局
專利名稱:一種消滅核酸污染的方法
技術領域
本發明涉及分子生物學領域,具體是一種核酸污染的防范措施。
PCR(polymerase chain reaction,聚合酶鏈反應)及其衍生的RT-PCR(reverse transcription-PCR,逆轉錄聚合酶鏈反應)是極其靈敏的分子生物學實驗手段。理論上可以檢測到單個的核酸分子,而且成本低廉,其優越性不言而寓。但與此同時,儀器、器皿、耗材、實驗場地等存在的極微小的核酸污染都可能造成假陽性結果。而PCR、RT-PCR等本身又依賴于對目的核酸片段進行數十億倍擴增,這進一步增加了污染的可能性。
現有消除核酸污染的方法主要是紫外線照射法、酸浸泡法和大量清水無限稀釋法。紫外線照射法的缺點是紫外線直線傳播注定了會留下大量死角。酸浸泡法的缺點是對金屬腐蝕嚴重;結束時必須輔以水洗,而水洗可能帶來新的核酸污染;廢水排放后會污染環境;整個過程難以實現自動化。大量清水無限稀釋法的缺點是浪費水資源;且難以保證徹底清除核酸污染。目前,我國禁止將PCR方法用于臨床診斷,污染問題難以解決是主要原因之一。
本發明的目的在于有效消滅核酸污染,從而保證PCR、RT-PCR、原位雜交等分子生物學實驗方法的可靠性,為將來批準PCR的臨床應用打下基礎。
本發明的目的是采用下述技術方案來實現的首先,利用揮發性酸(鹽酸、硝酸、醋酸等)的蒸氣在常壓、室溫或稍加熱(≤100℃)條件下熏蒸實驗儀器、器皿、耗材、實驗場地等,徹底消滅污染的DNA和RNA。本人通過實驗發現常壓、室溫下37.5%鹽酸的飽合蒸氣作用15秒或65%硝酸的飽合蒸氣作用30秒或冰醋酸的飽和蒸氣作用4小時即可徹底消滅污染的DNA和RNA。
然后,吹入經紫外線照射并過濾獲得的潔凈空氣或氮氣徹底帶走酸熏蒸后實驗儀器、器皿、耗材、實驗場地殘留的揮發性酸及其蒸氣。本步驟亦可在常壓、室溫或稍加熱(≤100℃)條件下進行。
最后,利用水吸收法或堿吸收法(堿石灰等)處理帶酸的空氣,使其重復利用,或多次除酸,保證無酸后放空。
經以上處理后的實驗儀器、器皿、耗材、實驗場地等可直接投入使用,無須進一步水洗。如有必要水洗時,可先進行水洗然后利用本發明的步驟消滅核酸污染。
本發明的優點在于1.酸可以到達每一個角落,不留死角。
2.消滅核酸污染效率高。
3.適用范圍廣,對于被熏蒸的物品耐高溫性、耐腐蝕性等要求不高。
4.適用于大型儀器、器皿、耗材、房間等核酸污染的清除,也適用于微型的生物芯片。
5.步驟簡單、避免二次核酸污染。
6.易于實現自動化。
7.成本低廉。
權利要求
1.一種消滅核酸污染的方法其特征是利用揮發性酸(鹽酸、硝酸、醋酸等)熏蒸實驗儀器、器皿、耗材、實驗場地等,徹底消滅污染的DNA和RNA。
2.根據權利要求1所述熏蒸之后利用潔凈空氣或氮氣將揮發性酸帶走。
3.根據權利要求2所述的帶有揮發性酸的空氣或氮氣經除酸處理后循環使用或經徹底除酸后放空。
全文摘要
一種消滅核酸污染的方法利用揮發性酸的蒸氣熏蒸實驗儀器、器皿、耗材、實驗場地等,可以徹底消滅污染的DNA和RNA。然后利用潔凈空氣將揮發性酸帶走,酸吸收裝置將空氣凈化后循環使用。本方法可保證PCR、RT-PCR、原位雜交等不會因實驗儀器、器皿、耗材、實驗場地等存在核酸污染而出現假陽性結果,亦可使生物芯片的重復使用成為可能。
文檔編號A61L2/20GK1415381SQ0213304
公開日2003年5月7日 申請日期2002年9月26日 優先權日2002年9月26日
發明者陳 光 申請人:陳 光
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