專利名稱：前列地爾制劑及其制備方法
技術領域：
本發明涉及一種制備前列地爾制劑的方法。
本發明還涉及一種用所述方法制備的前列地爾制劑。
背景技術：
超臨界流體對許多固體溶質具有溶解性以及這種溶解性可以隨溫度和壓力調節，構成了一種新的超細顆粒材料制備技術。其有兩種方式，即快速膨脹過程(RESS)和抗溶劑過程(GAS)。超臨界流體溶液快速膨脹過程(RapidExpansionfrom Supercritical Solution，RESS過程)是由兩個互為相反的步驟組成，首先由超臨界流體萃取目的固體物質形成超臨界溶液，含萃取固體組份的超臨界溶液再通過一個特制的噴嘴(孔徑幾十個μm)快速膨脹，由于在極短的時間里(小于10-5秒)組分在超臨界流體中過飽和度增加高達106倍，從而形成大量的晶核，該核化作用同時可控制超細顆粒的大小及粒度分布，如因高速噴出的流體的機械擾動可得到分布較窄的超細顆粒。
超臨界二氧化碳萃取安全、無毒、被提取物質不會產生反應改變活性，被稱為綠色生物分離技術，是當前世界上能夠用于規模生產的最先進的分離萃取技術。超臨界流體CO2具有極高的擴散系數和較強的溶解能力，有利于快速萃取和分離。二氧化碳氣體在特定超臨界狀態下與天然原料接觸，有關天然成分就會溶解于超臨界二氧化碳流體之中，達到了有效成分與原料的分離。然后通過減壓或升溫的方法，將超臨界流體中萃取的有效成分在分離器中分離出來，即得到高品質的指定有效成分，這就是超臨界二氧化碳萃取的簡單過程。
前列地爾(PGE1)是一種具有廣泛生物活性的內源性物質，是多不飽和脂肪酸二高-r-亞油脂酸(PGLA)的氧化產物。前列地爾具有抑制血小板聚集，減少血栓素A2(TXA2)合成的作用，能改善PGI2/TXA2的比值；又能激活血小板膜內腺苷酸環化酶(AC)，使血小板內cAMP含量升高，從而直接對抗因TXA2釋放所誘導的血管收縮與血栓形成。前列地爾經多年的臨床驗證，可用于多種臨床疾病的治療，主要用于治療冠心病、心力衰竭、腦梗死、糖尿病并發癥(糖尿病足、神經病變、腎臟病變)、功能性陽痿、肢體血管疾病、急性胰腺炎等疾病，并顯現出良好的療效。
中國專利申請200310102253.1公開了一種含有前列地爾的注射用制劑，由下列原料制成前列地爾、無水乙醇、聚乙二醇400、二甲基乙酰胺、2-羥丙基-β-環糊精、半胱氨酸、滅菌注射水。同時，本發明還公開了含有前列地爾注射用制劑的一種生產工藝。該發明的制備工藝比較復雜，并且所用的無水乙醇等會對血管產生刺激性。
前列地爾注射用制劑在臨床上的不良反應引起了醫患雙方的重視，不良反應主要表現為1、疼痛出現不同程度的局部血管脹痛，有的可見沿穿刺靜脈上行的充盈靜脈。大多數患者隨著輸入次數的增多疼痛逐漸減輕，一般至輸液結束后疼痛自行消失。
2、非感染性靜脈炎穿刺血管出現紅、腫、痛。輕者輸液結束后迅速消失，重者沿穿刺靜脈呈一紅線并向近心側蔓延，輸液結束后數小時逐漸自行消退。
上述不良反應除了與臨床輸液方法有關外，還與前列地爾制劑的內在質量有密切關系。主要原因如下1、采用有機溶劑見美國專利US3927197，使用一定濃度的叔丁醇為溶劑，殘留的叔丁醇及其他由叔丁醇帶來的物質，可能對人體造成損害。
2、采用酸、堿溶液制劑過程中，因前列地爾溶解緩慢，部分生產廠家采用稀酸或稀堿溶液來溶解前列地爾，而前列地爾在偏酸(pH＜4)和偏堿(pH＞8)溶液中不穩定，容易降解為其他物質。
3、氧氣氧化前列地爾化學性質比較活潑，易于被氧化，原有工藝中無除氧步驟。
發明內容
針對上述待解決的技術問題，本發明的一個目的在于提供了一種制備前列地爾制劑的方法，其包括采用超臨界二氧化碳技術制備前列地爾超細顆粒，粒度分布均勻，且有效提高了制劑過程中的溶解度和溶解速度，并且用該制劑制備的注射用制劑克服了現有技術中存在的問題。
本發明的另一個目的在于提供一種采用上述方法制備得到的前列地爾制劑，其包含前列地爾和藥學上可接受的載體和/或賦形劑。
本發明是基于以下原理將前列地爾溶于超臨界二氧化碳中，形成超臨界溶液后通過膨脹裝置(如特制的噴嘴，孔徑為幾十個微米)快速膨脹，使前列地爾在極短的時間里于超臨界溶液中達到較大的過飽和度，當溶液以單相噴霧到一個低壓容器中時，析出大量微核，并且在極短的時間內快速生長，形成超細顆粒，從而結晶析出。
根據本發明的一方面，本發明提供了一種制備前列地爾制劑的方法，其采用超臨界二氧化碳技術，包括下述步驟1)將前列地爾溶于超臨界二氧化碳中，得到超臨界溶液，所述超臨界溶液的溫度和壓力分別可為30～65℃和25～45MPa，CO2流量可為100～250L/min；2)使所述超臨界溶液通過膨脹裝置快速膨脹，得到前列地爾超細顆粒。
所述膨脹裝置可以為特制的孔徑為幾十個微米的噴嘴等。
噴嘴是關鍵部位，它是由長度很短(＜5mm)和內徑很小(6μm～100μm)的不銹鋼毛細管制成。超臨界溶液噴出時流速極大，膨脹時間極短，在此產生強烈的機械擾動和極大的過飽和度。前者形成均一的成核條件，從而形成很窄的粒徑分布；后者導致產生微細顆粒，從而獲得粒徑均勻的超細微粒(參見超臨界流體制備超細微粒技術研究，周圣，張景林，科技情報開發與經濟，2005，15(6)，133～135；超臨界溶液快速膨脹法制備灰黃霉素微粒，胡國勤，張從良等，中國醫藥工業雜志，2005，36(4)，211～213)。
在上述方法中，還進一步包括用前列地爾超細顆粒制備制劑的步驟，所述制劑可以含有藥學上可接受的載體和/或賦形劑。
對前列地爾在超臨界二氧化碳中溶解度的影響因素主要有溫度、壓力、操作時間和流速等，因此可以根據實際情況對上述影響因素進行調節。
綜合考慮各方面因素，本發明所確定的最佳溫度點為30～35℃，壓力為30～35MPa，CO2流量為150～200L/min。
所述前列地爾超細顆粒的平均粒徑通常為2～4μm。用該方法得到的前列地爾超細顆粒具有粒徑小、粒度均勻、顆粒成分不被破壞、溶解度高等諸多優點。
根據本發明的另一方面，本發明提供了一種前列地爾制劑，其是采用上述超臨界二氧化碳技術制備得到，包含前列地爾和藥學上可接受的載體和/或賦形劑。
所述制劑可以為現有技術中適于給藥的各種劑型，例如注射用制劑、口服制劑、粘膜給藥制劑、透皮給藥制劑等，具體地說，包括片劑、膠囊劑、粉劑、顆粒劑、錠劑、栓劑、可復制粉劑或液體制劑(如口服或無菌胃腸外溶液或懸浮液)等。
優選的，所述制劑為前列地爾注射用制劑。
所述前列地爾注射用制劑可以為注射用凍干粉針劑或注射液等，采用本發明提供的前列地爾超細顆粒作為主要原料，通過本領域的常規技術可以制備得到前列地爾注射用制劑。
當所述注射用制劑為注射液時，應當在制劑配方中加入抗氧劑，例如半胱氨酸、2-羥丙基-β-環糊精等，以增加前列地爾對光、熱、氧的穩定性。所述注射液可以為微球注射液或普通注射液等。
當所述注射用制劑為凍干粉針劑時，應當在制劑配方中加入凍干賦形劑等。
所述前列地爾注射用制劑可以制備為各種制劑規格，例如20μg、30μg、100μg等。
所述注射用前列地爾凍干粉針劑可通過下述方法制備得到1)將前列地爾溶于超臨界二氧化碳中，得到超臨界溶液，所述超臨界溶液的溫度和壓力分別為30～65℃和25～45MPa，CO2流量為100～250L/min；2)使所述超臨界溶液通過膨脹裝置快速膨脹，得到前列地爾超細顆粒；3)將所述前列地爾超細顆粒加入預先按比例混合好的注射用水、pH調節劑和凍干賦形劑中，攪拌均勻；4)進行過濾除菌，檢查澄明度合格后進行灌裝；5)以西林瓶分裝藥液，進行冷凍干燥，制備得到注射用前列地爾凍干粉針劑。
所述pH調節劑可為磷酸鹽等。
所述凍干賦形劑可以為氨基酸類，如甘氨酸、丙氨酸、組氨酸、精氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺等；也可以為甘露醇、山梨醇、乳糖、葡萄糖、蔗糖、右旋糖酐、多元醇肌醇、白蛋白、明膠、聚乙二醇等。
優選的，所述凍干賦形劑為選自甘露醇、右旋糖酐、甘氨酸等的一種或多種，最優選右旋糖酐。
優選的，在步驟1)中，所述超臨界溶液的溫度和壓力分別為30～35℃和30～35MPa，CO2流量為150～200L/min。
在本發明的具體實施方式
中，所述前列地爾凍干粉針劑的制備方法如下(1)將前列地爾裝入萃取器，溫度恒定在30～35℃，壓力為30～35MPa，CO2流量恒定在150～200L/min，保持90min；(2)前列地爾溶于超臨界二氧化碳中后，開啟萃取器出口調節閥，保持壓力30～35MPa，打開分離器底部噴嘴，使前列地爾以超細顆粒的形式噴到預先按比例混合好的注射用水、磷酸鹽緩沖液和輔料中，攪拌均勻；(3)以0.2μm孔徑濾膜進行過濾除菌，檢查澄明度合格后進行灌裝；(4)以西林瓶分裝藥液，進行冷凍干燥；(5)檢測包裝。
最優選的，所述注射用凍干粉針劑為采用下述原料制備得到組分前列地爾20～100mgpH6.0的磷酸鹽緩沖液 50ml10％右旋糖酐300ml注射用水至 1000ml制成1000支其中，磷酸鹽在制劑中的作用為pH值調整劑，10％右旋糖酐在制劑中的作用為賦形劑。
本發明與現有技術相比，具有以下優點1、超臨界二氧化碳具有和液體相近的密度，其粘度和氣體相近，擴散系數為液體的10～100倍，對前列地爾有較強的溶解度。
2、超臨界二氧化碳無毒，無溶劑殘留，完全符合國家衛生標準，且價廉易得，不燃燒，使用安全。
3、溶解溫度低，速度快，工藝簡單。所得前列地爾可形成超細顆粒，增加比表面積，有利于其與注射用水、磷酸鹽緩沖液和輔料之間均勻混合。
4、不需使用酸、堿溶液，并且避免出現氧化過程，提高了前列地爾注射用制劑的穩定性。
5、設備在穩定壓力下工作，沒有反復增壓減壓等操作，壽命大大提高。
為了更好地理解本發明的本質，下面結合附圖，通過對本發明較佳實施方式的描述，詳細說明但不限制本發明。
圖1為超臨界二氧化碳溶解前列地爾的流程圖，在圖中ACO2氣源；B過濾器；CCO2貯罐；D萃取器；E高壓計量泵；F冷卻器；G加熱器；H分離器；I流量計；J特制噴嘴；P壓力表；T測溫儀；_______冷卻水循環；_______熱水循環；＿＿＿CO2循環。
具體實施例方式
本發明所用試驗材料，如無特別說明，均為市售購買產品。
確定制備前列地爾超細顆粒的最佳工藝參數實施例1圖1為超臨界二氧化碳溶解前列地爾的流程圖(參考侯玉翠，孫軍紅，卵黃油在超臨界二氧化碳中的溶解度及其模擬，2000，14(3)，62～67)。
先把10g前列地爾(白求恩醫科大學制藥廠生化分廠)裝入萃取器，打開萃取器入口閥，通入CO2，使CO2壓力達到平衡，然后開啟CO2計量泵，當萃取器的壓力達到所需壓力時，打開萃取器出口調節閥，保持所需壓力，定期在分離器底部經特制噴嘴放出前列地爾，稱量計算。溫度由水浴控制，精度0.5℃；壓力由節流閥控制，精度0.5MPa；流量由CO2計量泵控制，最大流量250L/min。實驗條件為溫度30℃、35℃、40℃、45℃、50℃、55℃、65℃；壓力25Mpa、28Mpa、30Mpa、32Mpa、35Mpa、40Mpa、45Mpa；CO2流量100L/min、150L/min、200L/min、250L/min。
CO2從鋼瓶出來后，經低溫浴槽冷卻成液態，再由高壓計量泵壓縮后經預熱器進入萃取器，與萃取器內事先裝入的原料進行接觸和傳質，溶有溶質的CO2超臨界流體減壓后噴入分離器內。預熱器、萃取器、分離器分別由循環熱水槽經夾套換熱。由于溶質在分離器內溶解度降低，再經特制噴嘴減至常壓后收集。從分離器頂部出來的溶劑CO2經流量計計量后放空(也可循環使用)。
結果見表1～4。由試驗結果可知，對前列地爾在超臨界二氧化碳中溶解度的影響因素主要有溫度、壓力、操作時間和流速等。壓力一定時，溶解度隨溫度先增加，后減小，存在一個極值，因為溫度增加，加強了其擴散能力，使前列地爾在超臨界二氧化碳中溶解度增加，同時溫度增加，二氧化碳流體的密度降低，使得對前列地爾的溶解度降低，兩者共同作用的結果是溫度升高而溶解度出現極值；溫度一定時，前列地爾在超臨界二氧化碳中的溶解度增大。但過高的壓力會使生產成本明顯提高，而溶解度的增加有限；操作時間增加，有利于超臨界二氧化碳與前列地爾的溶解平衡。但是隨著前列地爾的減少再增加操作時間，能耗增加而收率增加緩慢。超臨界二氧化碳的流量和流速的增加也會增加前列地爾的溶解度。
綜合考慮各方面因素，確定最佳溫度點為30～35℃，壓力為30～35Mpa，CO2流量為150～200L/min。
表1 CO2流量100L/min時，前列地爾每5min的流出量(mg)
表2 CO2流量150L/min時，前列地爾每5min的流出量(mg)
表3 CO2流量200L/min時，前列地爾每5min的流出量(mg)
表4 CO2流量250L/min時，前列地爾每5min的流出量(mg)
本發明注射用前列地爾凍干粉針劑的配方及生產工藝實施例2一、配方
二、制備工藝將前列地爾500mg裝入萃取器，溫度恒定在30℃，壓力為30MPa，CO2流量恒定在150～200L/min，保持90min。前列地爾溶于超臨界二氧化碳中后，開啟萃取器出口調節閥，保持壓力為30MPa，打開分離器底部噴嘴，使前列地爾以超細顆粒的形式噴出，分別稱取20mg、30mg、100mg，各加入預先按比例混合好的注射用水1000ml、磷酸鹽緩沖液50ml和輔料10％右旋糖酐300ml中，攪拌均勻。以0.2μm孔徑濾膜進行過濾除菌，檢查澄明度合格后進行灌裝。以西林瓶分裝藥液各1000支，進行冷凍干燥。檢測包裝。
實施例31、配方
2、制備工藝將前列地爾500mg裝入萃取器，溫度恒定在35℃，壓力為30Mpa，CO2流量恒定在150～200L/min，保持90min。前列地爾溶于超臨界二氧化碳中后，開啟萃取器出口調節閥，保持壓力30MPa，打開分離器底部噴嘴，使前列地爾以超細顆粒的形式噴出，分別稱取20mg、30mg、100mg，各加入預先按比例混合好的注射用水1000ml、磷酸鹽緩沖液50ml和輔料10％右旋糖酐300ml中，攪拌均勻。以0.2μm孔徑濾膜進行過濾除菌，檢查澄明度合格后進行灌裝。以西林瓶分裝藥液各1000支，進行冷凍干燥。檢測包裝。
實施例4一、配方
二、制備工藝將前列地爾500mg裝入萃取器，溫度恒定在30℃，壓力為35MPa，CO2流量恒定在150～200L/min，保持90min。前列地爾溶于超臨界二氧化碳中后，開啟萃取器出口調節閥，保持壓力35MPa，打開分離器底部噴嘴，使前列地爾以超細顆粒的形式噴出，分別稱取20mg、30mg、100mg，各加入預先按比例混合好的注射用水1000ml、磷酸鹽緩沖液50ml和輔料10％右旋糖酐300ml中，攪拌均勻。以0.2μm孔徑濾膜進行過濾除菌，檢查澄明度合格后進行灌裝。以西林瓶分裝藥液各1000支，進行冷凍干燥。檢測包裝。
實施例5一、配方
二、制備工藝將前列地爾500mg裝入萃取器，溫度恒定在35℃，壓力為35MPa，CO2流量恒定在150～200L/min，保持90min。前列地爾溶于超臨界二氧化碳中后，開啟萃取器出口調節閥，保持壓力35MPa，打開分離器底部噴嘴，使前列地爾以超細顆粒的形式噴出，分別稱取20mg、30mg、100mg，各加入預先按比例混合好的注射用水1000ml、磷酸鹽緩沖液50ml和輔料10％右旋糖酐300ml中，攪拌均勻。以0.2μm孔徑濾膜進行過濾除菌，檢查澄明度合格后進行灌裝。以西林瓶分裝藥液各1000支，進行冷凍干燥。檢測包裝。
考察本發明制備樣品的穩定性實施例6分別將用上述實施例2、3、4、5工藝生產的100μg規格產品與兩種傳統工藝配方(如下所示)生產的相同規格的前列地爾凍干粉針劑進行穩定性比較。分別取三種產品各15支，置于40℃恒溫培養箱中，十天后取出，按中國藥典2005版注射用前列地爾凍干粉針劑質量標準檢查有關物質含量，結果分別見表5、6、7和8。結果表明，本發明工藝所得產品穩定性明顯強于以下兩種傳統工藝配方產品。
一、傳統工藝配方1前列地爾 100mg10％右旋糖酐 適量0.05mol/L磷酸鹽緩沖液(pH6.0) 適量注射用水 適量1000支制備工藝稱取前列地爾100mg，加入處方量的注射用水、磷酸鹽緩沖液和右旋糖酐，攪拌均勻。以0.2μm孔徑濾膜進行過濾除菌，檢查澄明度合格后進行灌裝。以西林瓶分裝藥液各1000支，進行冷凍干燥。檢測包裝。
二、傳統工藝配方2前列地爾 100mg10％右旋糖酐 適量乙醇 適量注射用水 適量1000支制備工藝稱取前列地爾100mg，加入處方量的注射用水、乙醇和右旋糖酐，攪拌均勻。以0.2μm孔徑濾膜進行過濾除菌，檢查澄明度合格后進行灌裝。以西林瓶分裝藥液各1000支，進行冷凍干燥。檢測包裝。
表5 注射用前列地爾凍干粉針劑的有關物質檢查結果(n＝15)
(規格100μg，實施例2)
表6 注射用前列地爾凍干粉針劑的有關物質檢查結果(n＝15)((規格100μg，實施例3)
表7 注射用前列地爾凍干粉針劑的有關物質檢查結果(n＝15)(規格100μg，實施例4)
表8 注射用前列地爾凍干粉針劑的有關物質檢查結果(n＝15)(規格100μg，實施例5)
以上對本發明較佳實施方式的描述并不限制本發明，本領域技術人員可以根據本發明作出各種改變或變形，只要不脫離本發明的精神，均應屬于本發明所附權利要求的范圍。
權利要求
1.一種制備前列地爾制劑的方法，其特征在于，包括下述步驟1)將前列地爾溶于超臨界二氧化碳中，得到超臨界溶液，所述超臨界溶液的溫度和壓力分別為30～65℃和25～45MPa，CO2流量為100～250L/min；2)使所述超臨界溶液通過膨脹裝置快速膨脹，得到前列地爾超細顆粒。
2.權利要求1所述的方法，其特征在于，在步驟1)中，所述超臨界溶液的溫度和壓力分別為30～35℃和30～35MPa，CO2流量為150～200L/min。
3.權利要求1所述的方法，其特征在于，所述前列地爾超細顆粒的平均粒徑為2～4μm。
4.按照權利要求1所述方法制備的前列地爾制劑，包含前列地爾和藥學上可接受的載體和/或賦形劑。
5.權利要求4所述的前列地爾制劑，其特征在于，所述前列地爾制劑為注射用制劑、口服制劑、粘膜給藥制劑或透皮給藥制劑。
6.權利要求5所述的前列地爾制劑，其特征在于，所述前列地爾制劑為注射用制劑。
7.權利要求6所述的前列地爾注射用制劑，其特征在于，所述注射用制劑為注射用凍干粉針劑。
8.權利要求7所述的前列地爾注射用制劑，其特征在于，可通過下述方法制備得到1)將前列地爾溶于超臨界二氧化碳中，得到超臨界溶液，所述超臨界溶液的溫度和壓力分別為30～65℃和25～45MPa，CO2流量為100～250L/min；2)使所述超臨界溶液通過膨脹裝置快速膨脹，得到前列地爾超細顆粒；3)將所述前列地爾超細顆粒加入預先按比例混合好的注射用水、pH調節劑和凍干賦形劑中，攪拌均勻；4)進行過濾除菌，檢查澄明度合格后進行灌裝；5)以西林瓶分裝藥液，進行冷凍干燥，制備得到注射用前列地爾凍干粉針劑。
9.權利要求8所述的前列地爾注射用制劑，其特征在于，在步驟1)中，所述超臨界溶液的溫度和壓力分別為30～35℃和30～35MPa，CO2流量為150～200L/min。
10.權利要求6所述的前列地爾注射用制劑，其特征在于，所述注射用凍干粉針劑為采用下述原料制備得到組分前列地爾20～100mgpH6.0的磷酸鹽緩沖液 50ml10％右旋糖酐300ml注射用水至 1000ml制成1000支
全文摘要
本發明提供了一種前列地爾制劑的制備方法以及一種穩定的前列地爾制劑，其采用超臨界二氧化碳技術，包括下述步驟1)將前列地爾溶于超臨界二氧化碳中，形成超臨界溶液；2)使所述超臨界溶液通過膨脹裝置快速膨脹，形成前列地爾超細顆粒。用此方法得到的前列地爾超細顆粒具有粒徑小、粒度均勻、顆粒成分不被破壞等諸多優點。所述前列地爾超細顆粒可用于制備穩定的前列地爾注射用制劑。
文檔編號A61P9/10GK1939309SQ20051008653
公開日2007年4月4日 申請日期2005年9月28日 優先權日2005年9月28日
發明者馬骉, 單連慧, 王天燕, 宋夢薇 申請人:北京賽生藥業有限公司