專利名稱：作為酪氨酸激酶抑制劑的咪唑衍生物的制作方法
背景技術：
本發明的目的是發現具有寶貴性質的新化合物，特別是能夠用于制備藥品的那些。
本發明涉及化合物和化合物的用途，其中激酶信號轉導、特別是酪氨酸激酶和/或絲氨酸/蘇氨酸激酶信號轉導的抑制、調節和/或調控在其中扮演角色，此外涉及包含這些化合物的藥物組合物，和這些化合物治療激酶-誘發的疾病的用途。
具體而言，本發明涉及抑制、調節和/或調控酪氨酸激酶信號轉導的式I化合物、包含這些化合物的組合物和使用它們治療哺乳動物酪氨酸激酶-誘發的疾病和病癥的方法，例如血管生成、癌癥、腫瘤形成、生長與繁殖、動脈硬化、眼部疾病(例如衰老-誘發的黃斑變性、脈絡膜新血管化和糖尿病性視網膜病)、炎性疾病、關節炎、血栓形成、纖維化、腎小球性腎炎、神經變性、銀屑病、再狹窄、傷口愈合、移植排斥、代謝性疾病和免疫系統疾病，以及自體免疫疾病、硬變(cirrhosis)、糖尿病和血管疾病，包括不穩定性和滲透性等。
酪氨酸激酶是一類具有至少400種成員的酶，它們催化蛋白質底物中腺苷三磷酸的末端磷酸(γ-磷酸)向酪氨酸殘基的轉移。酪氨酸激酶被認為通過底物磷酸化作用在各種細胞功能中的信號轉導中扮演關鍵角色。盡管信號轉導的確切機理尚不清楚，不過酪氨酸激酶已被顯示是細胞增殖、致癌作用和細胞分化中的重要因素。
酪氨酸激酶可以分為受體型酪氨酸激酶和非受體型酪氨酸激酶。受體型酪氨酸激酶具有細胞外部分、跨膜部分和細胞內部分，而非受體型酪氨酸激酶完全是細胞內的(參見Schlessinger and Ullrich，Neuron 9，383-391(1992)和1-20(1992)的評論)。
受體型酪氨酸激酶由大量具有不同生物活性的跨膜受體組成。因而，已經確認了約20種不同的受體型酪氨酸激酶子家族。一種酪氨酸激酶子家族被稱為HER子家族，由EGFR、HER2、HER3和HER4組成。來自這種受體子家族的配體包括表皮生長因子、TGF-α、雙調蛋白、HB-EGF、β動物纖維素和heregulin。這些受體型酪氨酸激酶的另一子家族是胰島素子家族，它包括INS-R、IGF-IR和IR-R。PDGF子家族包括PDGF-α與-β受體、CSFIR、c-kit和FLK-II。另外，還有FLK家族，它由激酶插入結構域受體(KDR)、胎肝激酶-1(FLK-1)、胎肝激酶-4(FLK-4)和fms酪氨酸激酶-1(flt-1)組成。由于兩組之間的相似性，PDGF和FLK家族通常是被一起討論的。關于受體性酪氨酸激酶的詳細討論，參見Plowman等人，DN& P 7(6)334-339，1994的文章，引用在此作為參考。
RTK(受體型酪氨酸激酶)也包括TIE2及其配體血管生成素(angiopoietin)1和2。現在已經發現越來越多的這些配體的同系物，它們的作用尚未得到清楚詳細的證明。TIE1已知是TIE2的同系物。TIE RTK在內皮細胞上被選擇性表達，參與血管生成和血管成熟的過程。所以，它們尤其可能是血管系統疾病和其中利用血管或者甚至重新生成血管的病變中的寶貴目標。除了新血管化和成熟的防止以外，新血管化的刺激也可能是活性成分的寶貴目標。參考下列關于血管生成、腫瘤發育和激酶信號轉導的文章G.Breier Placenta(2000)21，增刊A，Trophoblasr Res 14，S11-S15F.Bussolino等人，TIBS 22，251-256(1997)G.Bergers & L-E.Benjamin Nature Rev Cancer 3，401-410(2003)P.Blume-Jensen &.Hunter Nature 411，355-365(2001)M.Ramsauer & P.D’Amore J.Clin.Invest.110，1615-1617(2002)S.Tsogkos等人，Expert Opin.Investig.Drugs 12，933-941(2003)在L.K.Shawyer等人，Cancer Cell 1，117-123(2002)和D.Fabbro & C.Garcia-Echeverria Current Opin.Drug Discovery & Development 5.701-712(2002)中給出了已經試用于癌癥療法的激酶抑制劑的實例。
非受體型酪氨酸激酶同樣由大量子家族組成，包括Src、Frk、Btk、Csk、Abl、Zap70、Fes/Fps、Fak、Jak、Ack和LIMK。每一這些子家族進一步細分為不同的受體。例如，Src子家族是最大的子家族之一。它包括Src、Yes、Fyn、Lyn、Lck、Blk、Hck、Fgr和Yrk。Src子家族酶與瘤形成有聯系。關于非受體型酪氨酸激酶的更多詳細討論，參見BolenOncogene，82025-2031(1993)的文章，引用在此作為參考。
受體型酪氨酸激酶和非受體型酪氨酸激酶都參與引起各種病理條件的細胞信號轉導途徑，包括癌癥、銀屑病和免疫應答過高。
已經有人提出，各種受體型酪氨酸激酶和與它們結合的生長因子在血管生成中扮演角色，盡管可能有些間接促進血管生成(Mustonen和Alitalo，J.Cell Biol.129895-898，1995)。這些受體型酪氨酸激酶之一是胎肝激酶1，也稱為FLK-1。人FLK-1的類似物是含有激酶插入結構域的受體KDR，也稱為血管內皮細胞生長因子受體2或VEGFR-2，因為它以高親和性結合VEGF。最后，這種受體的鼠類版本也稱為NYK(Oelrichs等人，Oncogene 8(1)11-15，1993)。VEGF和KDR是一個配體-受體對，它在血管內皮細胞的增殖和血管的形成與萌芽中扮演重要角色，它們分別被稱為血管發生和血管生成。
血管生成以血管內皮生長因子(UEGF)的過度活性為特征。VEGF實際上由配體家族組成(Klagsburn和D’Amore，Cytokine & Growth FactorReviews 7259-270，1996)。VEGF結合高親和性跨膜酪氨酸激酶受體KDR和相關的fms酪氨酸激酶-1，也稱為Flt-1或血管內皮細胞生長因子受體1(VEGFR-1)。細胞培養和基因剔除實驗表明，每一受體對血管生成的不同方面有貢獻。KDR介導VEGF的致有絲分裂功能，而Flt-1似乎調控非致有絲分裂功能，例如與細胞粘連有關的那些。抑制KDR因而可調控致有絲分裂VEGF活性的水平。事實上，腫瘤生長已顯示敏感于VEGF受體拮抗劑的抗血管生成效應(Kim等人，Nature 362，841-844，1993)。
已經確認了VEGFR的三種PTK(蛋白酪氨酸激酶)受體VEGFR-1(Flt-1)、VEGFR-2(Flk-1或KDR)和VEGFR-3(Flt-4)。VEGFR-2是特別受關注的。
實體腫瘤因此可以用酪氨酸激酶抑制劑治療，因為這些腫瘤依賴于血管生成來生成支持它們生長所必需的血管。這些實體腫瘤包括單核細胞性白血病、腦、泌尿生殖、淋巴系統、胃、喉和肺癌，包括肺腺癌和小細胞性肺癌。進一步的實例包括其中觀察到Raf-激活性致癌基因(例如K-ras、erb-B)的過渡表達或活化的癌癥。這些癌癥包括胰腺和乳腺癌。這些酪氨酸激酶的抑制劑因此適合于預防和治療由這些酶導致的增殖性疾病。
VEGF的血管生成活性不局限于腫瘤。VEGF解釋了在糖尿病性視網膜病的視網膜之中或附近所產生的血管生成活動。視網膜中的這種血管生長引起視力退化，最終失明。靈長動物中如視網膜靜脈阻塞等病癥和小鼠pO2水平降低都升高眼部VEGF mRNA和蛋白質水平，引起新血管化。抗-VEGF單克隆抗體或VEGF受體免疫融合蛋白的眼內注射抑制靈長動物和嚙齒動物模型中的眼部新血管化。與人糖尿病性視網膜病中VEGF的誘導原因無關，眼部VEGF的抑制適合于治療這種疾病。
VEGF的表達在動物和人類腫瘤鄰近壞死區域的低氧區也顯著增加。另外，VEGF被ras、raf、src和p53突變型致癌基因(在對抗癌癥中都是很重要的)的表達增量調節。抗-VEGF單克隆抗體抑制裸鼠中的人腫瘤生長。盡管相同的腫瘤細胞在培養物中繼續表達VEGF，不過這些抗體沒有降低它們的有絲分裂比率。因而，從腫瘤衍生的VEGF不會充當自分泌致有絲分裂因子。VEGF因此通過它的旁分泌血管內皮細胞趨化性與致有絲分裂活性，通過促進血管生成而在體內對腫瘤生長有貢獻。這些單克隆抗體也抑制無胸腺小鼠中通常不太完全血管化的人結腸癌的生長，降低來自經接種細胞的腫瘤的數量。
Flk-1的VEGF-結合性構件Flt-1、即經截短以消除胞質酪氨酸激酶結構域但是保留膜錨的小鼠KDR受體同系物在病毒中的表達事實上終止了可移植成膠質細胞瘤在小鼠中的生長，可能是通過與跨膜內皮細胞VEGF受體生成雜二聚物的顯性失活機理。如果兩種VEGF等位基因都被剔除，在正常情況下隨著實體腫瘤一起在裸鼠中生長的胚胎干細胞沒有產生可檢測的腫瘤。總之，這些數據表明了VEGF在實體腫瘤生長中的角色。在病理性血管生成中牽涉有KDR或Flt-1的抑制，這些受體適合于治療其中血管生成是總病理學一部分的疾病，例如炎癥、糖尿病性視網膜血管化以及各種形式的癌癥，因為腫瘤生長已知依賴于血管生成(Weidner等人，N.Engl.J.Med.，324，1-8，1991)。
血管生成素1(Ang1)是內皮-特異性受體型酪氨酸激酶TIE-2的配體，是一種新的血管生成因子(Davis等人，Cell，1996，871161-1169；Partanen等人，Mol.Cell Biol.，121698-1707(1992)；美國專利No.5,521,073；5,879,672；5,877,020；6,030,831)。首字母縮寫TIE代表“具有Ig和EGF同源性結構域的酪氨酸激酶”。TIE用于確認一類受體型酪氨酸激酶，它們完全在血管內皮細胞和早期造血細胞中表達。TIE受體激酶通常以EGF樣結構域和免疫球蛋白(IG)樣結構域的存在為特征，后者結構域由被鏈之間二硫橋鍵所穩定的細胞外折疊單元組成(Partanen等人，Curr. TopicsMicrobiol.Immunol.，1999，237159-172)。與在血管發育的早期階段發揮其功能的VEGF相反，Ang1及其受體TIE-2在血管發育的晚期階段發揮作用，也就是在血管轉化(轉化涉及血管腔的生成)和成熟期間(Yancopoulos等人，Cell，1998，93661-664；Peters，K.G，Circ.Res.，1998，83(3)342-3；Suri等人，Cell 87，1171-1180(1996))。
因此，預期TIE-2的抑制應當干擾由血管生成引發的新血管系統的轉化和成熟，并且應當從而干擾血管生成過程。此外，VEGFR-2激酶結構域結合位點的抑制將阻滯酪氨酸殘基的磷酸化，起到干擾血管生成引發的作用。因此必須假定，TIE-2和/或VEGFR-2的抑制應當防止腫瘤的血管生成，并且起到延緩或者完全消除腫瘤生長的作用。因此，有可能提供對于癌癥和其他與不適當血管生成有關的疾病的治療。
本發明涉及調節、調控或抑制TIE-2的方法，用于預防和/或治療與不規則的或紊亂的TIE-2活性有關的疾病。確切而言，式I化合物也能夠用于治療某些形式的癌癥。此外，式I化合物能夠用于在某些現有癌癥化療中提供附加或協同效應，和/或能夠用于恢復某些現有癌癥化療和放療的功效。
式I化合物此外能夠用于分離和研究TIE-2的活性或表達。另外，它們特別適合用在與不規則的或紊亂的TIE-2活性有關的疾病的診斷方法中。
本發明此外涉及調節、調控或抑制VEGFR-2的方法，用于預防和/或治療與不規則的或紊亂的VEGFR-2活性有關的疾病。
本發明此外涉及作為Raf激酶抑制劑的式I化合物。
蛋白質磷酸化是細胞功能調節的基礎過程。蛋白激酶與磷酸酶的協調作用控制磷酸化的程度，因此控制特異性靶蛋白的活性。蛋白質磷酸化的主要角色之一是在信號轉導中，其中細胞外信號被蛋白質磷酸化和去磷酸化事件級聯所擴增和傳播，例如在p21ras/raf途徑中。
p21ras基因被發現是Harvey(H-Ras)和Kirsten(K-Ras)大鼠肉瘤病毒的致癌基因。在人類中，細胞Ras基因(c-Ras)的特征性突變已經與很多不同的癌癥類型有關。這些突變型等位基因賦予Ras組成活性，已經顯示可轉化培養物中的細胞，例如鼠細胞系NIH 3T3。
p21ras致癌基因是人實體癌發育和進展的主要貢獻者，在所有人類癌的30％中發生突變(Bolton等人(1994)Ann.Rep.Med.Chem.，29，165-74；Bos.(1989)Cancer Res.，49，4682-9)。在其正常的、未突變的形式中，Ras蛋白是幾乎所有組織中由生長因子受體引導的信號轉導級聯的關鍵要素(Avruch等人(1994)Trends Biochem.Sci.，19，279-83)。
在生物化學中，Ras是一種鳥嘌呤核苷酸結合蛋白，GTP-結合的活化形式與GDP-結合的靜息形式之間的循環受到Ras內源性GTP酶活性和其他調節性蛋白質的嚴格控制。Ras基因產物與鳥嘌呤三磷酸(GTP)和鳥嘌呤二磷酸(GDP)結合，并且水解GTP為GDP。Ras在GTP-結合的狀態下是有活性的。在癌癥細胞中的Ras突變體中，內源性GTP酶活性被降低，蛋白質因此傳送組成型生長信號至下游效應器，例如Raf激酶。這引起攜帶這些突變體的細胞的癌性生長(Magnuson等人，(1994)Semin.CancerBiol.，5，247-53)。Ras原致癌基因需要功能上完整的C-Raf-1原致癌基因，目的是轉導高級真核生物中由受體型和非受體型酪氨酸激酶引發的生長和分化信號。
活化的Ras是C-Raf-1原致癌基因的活化所必需的，但是Ras激活Raf-1蛋白(Ser/Thr)激酶的生物化學步驟現在已被充分鑒定。已經顯示，向Raf激酶給予失活性抗體或者共同表達顯性失活Raf激酶或顯性失活MEK(MAPKK)、即Raf激酶的底物，通過抑制Raf激酶信號發送途徑來抑制活性Ras的效應，引起已轉化細胞向正常生長表型的逆轉，參見Daum等人(1994)Trends Biochem.Sci.，19，474-80；Fridman等人(1994)J Biol.Chem.，269，30105-8；Kolch等人，(1991)Nature，349，426-28和Weinstein-Oppenheimer等人，Pharm.& Therap.(2000)，88，229-279。
與之相似，Raf激酶的抑制(借助反義寡脫氧核苷酸)已經在體外和體內與多種人腫瘤類型生長的抑制有關聯(Monia等人，Nat.Med.1996，2，668-75)。
Raf絲氨酸-與蘇氨酸-特異性蛋白激酶是胞質酶，它們刺激多種細胞系統中的細胞生長(Rapp，U.R.，等人(1988)，The Oncogene Handbook；T.Curran，E.P.Reddy and A.Skalka(eds.)Elsevier Science Publishers；TheNetherlands，213-253頁；Rapp，U.R.，等人(1988)Cold Spring Harbor Sym.Quant.Biol.53173-184；Rapp，U.R.，等人(1990)Inv.Curr.Top.Microbiol.lmmunol.Potter and Melchers(eds.)，Berlin，Springer-Verlag 166129-139)。
已經鑒定了三種同工酶C-Raf(Raf-1)(Bonner，T.I.，等人(1986)Nucleic Acids Res.141009-1015)、A-Raf(Beck，T.W.，等人(1987)NucleicAcids Res.15595-609)和B-Raf(Qkawa，S.，等人(1998)Mol.Cell.Biol.82651-2654；Sithan-andam，G等人(1990)Oncogene1775)。這些酶在它們在各種組織中的表達上有所不同。Raf-1在所有器官中和在所有已被檢查的細胞系中被表達，A-與B-Raf分別在泌尿生殖和腦組織中被表達(Storm，S.M.(1990)Oncogene 5345-351)。
Raf基因是原致癌基因當以特定改變的方式表達時，它們能夠引發細胞的惡性轉化。引起致癌性活化的基因改變通過除去或干擾蛋白質的N-末端負性調節結構域而生成組成活性蛋白激酶(Heidecker，G，等人(1990)Mol.Cell Biol.102503-2512；Rapp，U.R.等人(1987)Oncogenes andCancer；S.A.Aaronson，J.Bishop，T.Sugimura，M.Terada，K.Toyoshima和P.K.Vogt(eds.)Japan Scientific Press，Tokyo)。向NIH 3T3細胞微量注射致癌性活化的而非野生型版本的、用大腸桿菌表達載體制備的Raf蛋白，導致形態學轉化，并且刺激DNA合成(Rapp，U.R.，等人(1987)Oncogenesand Cancer；S.A.Aaronson，J.Bishop，T.Sugimura，M.Terada，K.Toyoshima和P.K.Vogt(eds.)Japan Scientific Press，Tokyo；Smith，M.R.，等人(1990)Mol.Cell Biol.103828-2833)。
所以，活化的Raf-1是細胞生長的細胞內激活物。Raf-1蛋白絲氨酸激酶是有絲分裂原信號轉導的下游效應器的候選，因為Raf致癌基因克服了由細胞突變(Ras回復細胞)或微量注射抗-Ras抗體所致細胞Ras活性阻滯所導致的生長抑制(Rapp，U.R.，等人(1988)，The Oncogene Hahdbook；T.Curran，E.P.Reddy and A.Skalka(eds.)Elsevier Science Publishers；TheNetherlands，213-253頁；Smith，M.R.，等人(1986)Nature(倫敦)320540-543)。
C-Raf功能是通過多種膜-結合性致癌基因的轉化和通過血清所含有絲分裂原的生長刺激所需要的(Smith，M.R.，等人(1986)Nature(倫敦)320540-543)。有絲分裂原經由磷酸化作用調節Raf-1蛋白絲氨酸激酶活性(Morrison，D.K.，等人(1989)Cell 58648-657)，這也影響亞細胞分步(Olah，Z.，等人(1991)Exp.Brain Res.84403；Rapp，U.R.等人(1988)Cold SpringHarbor Sym.Quant.Biol.53173-184)。Raf-1激活性生長因子包括血小板衍生生長因子(PDGF)(Morrison，D.K.，等人(1988)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 858855-8859)、集落刺激因子(Baccarini，M.，等人(1990)EMBO J.93649-3657)、胰島素(Blackshear，P.J.，等人(1990)J.Biol.Chem.26512115-12118)、表皮生長因子(EGF)(Morrison，R.K.，等人(1988)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 858855-8859)、白介素-2(Turner，B.C，等人(19911)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 881227)與白介素-3和粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(Carroll，M.P.，等人(1990)J.Biol.Chem.26519812-19817)。
用有絲分裂原處理細胞后，瞬時活化的Raf-1蛋白絲氨酸激酶易位于核周區和核(Olah，Z.，等人(1991)Exp.Brain Res.84403；Rapp，U.R.，等人(1988)Cold Spring Harbor Sym.Quant.Biol.53173-184)。含有活化Raf的細胞的基因表達模式被改變(Heidecker，G，等人(1989)Genes and signaltransduction in multistage carcinogenesis，N.Colburn(ed.)，Marcel Dekker，Inc.，New York，339-374頁)，Raf致癌基因在瞬時轉染測定法中激活來自Ap-I/PEA3-依賴性啟動子的轉錄(Jamal，S.等人(1990)Science 344463-466；Kaibuchi，K.，等人(1989)J.Biol.Chem.26420855-20858；Wasylyk，C.，等人(1989)Mol.Cell Biol.92247-2250)。
細胞外有絲分裂原激活Raf-1存在至少兩種獨立的途徑一種牽涉蛋白激酶C(KC)，第二種由蛋白酪氨酸激酶引發(Blackshear，P.J.，等人(1990)J.Biol.Chem.26512131-12134；Kovacina，K.S.，等人(1990)J.Biol.Chem.26512115-12118；Morrison，D.K.，等人(1988)Proc.Natl.Acad.Sci.USA858855-8859；Siegel，J.N.等人(1990)J.Biol.Chem.26518472-18480；Turner，B.C.，等人(1991)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 881227)。在每種情況下，活化都牽涉Raf-1蛋白質磷酸化。Raf-1磷酸化可以是由自主磷酸化擴增的激酶級聯的后果，或者可以完全是由自主磷酸化所導致，自主磷酸化是由公認的激活性配體與Raf-1調節結構域的結合所引發，與二酰基甘油激活PKC相類似(Nishizuka，Y.(1986)Science 233305-312)。
細胞調節的主要機制之一是通過細胞外信號跨越膜的轉導作用，這繼而調控細胞內的生物化學途徑。蛋白質磷酸化代表了細胞內信號從分子到分子傳播的一種過程，最終導致細胞應答。這些信號轉導級聯受到高度調節，并且經常是重疊的，這顯然是因為存在很多蛋白激酶以及磷酸酶。蛋白質的磷酸化主要發生在絲氨酸、蘇氨酸或酪氨酸殘上，蛋白激酶因此根據它們磷酸化位點的特異性加以分類，也就是絲氨酸/蘇氨酸激酶和酪氨酸激酶。由于磷酸化是細胞內無所不在的過程，并且由于細胞表型大大受到這些途徑活性的影響，目前相信大量疾病狀態和/或疾病可歸因于激酶級聯的分子組分中的異常活化或功能突變。所以，已經相當多地關注于這些蛋白質和能夠調控它們活性的化合物的鑒別。關于評論，參見Weinstein-Oppenheimer等人，Pharma.& Therap.，2000，88，229-279。
因此需要合成特異性抑制、調節和/或調控酪氨酸激酶和/或Raf激酶信號轉導的小化合物，這也是本發明的目標。
已經發現，根據本發明的化合物及其鹽具有非常寶貴的藥理性質，同時被良好耐受。
確切而言，它們表現酪氨酸激酶抑制性質。
此外已經發現，根據本發明的化合物是Raf激酶的抑制劑。由于該酶是p21ras的下游效應器，這些抑制劑證實適合于用在藥物組合物中，用于其中適用Raf激酶途徑抑制的人類或獸醫學，例如治療由Raf激酶介導的腫瘤和/或癌性細胞生長。確切而言，這些化合物適合于治療人和動物實體癌癥，例如鼠類癌癥，因為這些癌癥的進展依賴于Ras蛋白信號轉導級聯，因此敏感于通過中斷該級聯、即抑制Raf激酶的治療。因此，給予根據本發明的化合物或其藥學可接受鹽以治療由Raf激酶途徑介導的疾病，尤其癌癥，包括實體癌癥，例如癌(例如肺、胰腺、甲狀腺、膀胱或結腸)、骨髓疾病(例如髓性白血病)或腺瘤(例如絨毛狀結腸腺瘤)、病理性血管生成和轉移性細胞遷移。這些化合物此外適合于治療補體激活依賴性慢性炎癥(Niculescu等人，(2002)Immunol.Res.，24191-199)和HIV-1(人免疫缺陷病毒1型)誘發的免疫缺陷(Popik等人，(1998)J.Virol.726406-6413)。
已經驚人地發現，根據本發明的化合物能夠與信號發送途徑相互作用，尤其本文所述信號發送途徑，優選Raf激酶信號發送途徑。根據本發明的化合物優選地表現有利的生物活性，容易在酶類測定法中加以證明，例如本文所述測定法。在這樣的酶類測定法中，根據本發明的化合物優選地表現和導致抑制效應，這通常為合適范圍、優選微摩爾范圍、更優選納摩爾范圍的IC50值所證實。
正如本文所討論的，這些信號發送途徑與多種疾病相關。因此，根據本發明的化合物通過與一種或多種所述信號發送途徑相互作用而適合于預防和/或治療依賴于所述信號發送途徑的疾病。
本發明因此涉及作為本文所述信號發送途徑的促進劑或抑制劑、優選抑制劑的根據本發明的化合物。本發明因此優選地涉及作為Raf激酶途徑的促進劑或抑制劑、優選抑制劑的根據本發明的化合物。本發明因此優選地涉及作為Raf激酶的促進劑或抑制劑、優選抑制劑的根據本發明的化合物。本發明進而更優選地涉及作為一種或多種選自如下的Raf激酶的促進劑或抑制劑、優選抑制劑的根據本發明的化合物A-Raf、B-Raf和C-Raf-1。本發明特別優選地涉及作為C-Raf-1的促進劑或抑制劑、優選抑制劑的根據本發明的化合物。
本發明此外涉及一種或多種根據本發明的化合物的用途，用于治療和/或預防由Raf激酶所導致、介導和/或傳播的疾病，優選本文所述疾病，特別是由選自如下的Raf激酶所導致、介導和/或傳播的疾病A-Raf、B-Raf和C-Raf-1。本文所討論的疾病通常分為兩組，過度增殖性和非過度增殖性疾病。在這一點上，銀屑病、關節炎、炎癥、子宮內膜異位、瘢痕形成、良性前列腺增生、免疫學疾病、自體免疫疾病和免疫缺陷疾病被視為非癌性疾病，其中關節炎、炎癥、免疫學疾病、自體免疫疾病和免疫缺陷疾病通常被視為非過度增殖性疾病。在這一點上，腦癌、肺癌、鱗狀細胞癌、膀胱癌、胃癌、胰腺癌、肝癌、腎癌、結腸直腸癌、乳腺癌、頭癌、頸癌、食道癌、婦科癌癥、甲狀腺癌、淋巴瘤、慢性白血病和急性白血病被視為癌性疾病，所有它們通常被視為過度增殖性疾病。尤其是癌性細胞生長、尤其是由Raf激酶介導的癌性細胞生長是作為本發明目標的疾病。本發明因此涉及作為治療和/或預防所述疾病的藥品和/或藥品活性成分的根據本發明的化合物，涉及根據本發明的化合物在制備用于治療和/或預防所述疾病的藥物中的用途，以及涉及治療所述疾病的方法，包括將一種或多種根據本發明的化合物施用于需要這種施用的患者。
可以顯示，根據本發明的化合物在異種移植腫瘤模型中具有體內抗增殖作用。將根據本發明的化合物對患有過度增殖性疾病的患者給藥，例如以抑制腫瘤生長、減少與淋巴增殖性疾病有關的炎癥、抑制移植排斥或由組織修復引起的神經病學傷害等。本發明化合物適合于預防或治療目的。本文所用的術語“治療”用于表示疾病的預防和現有病癥的治療。通過在明顯的疾病形成之前給予根據本發明的化合物來實現對增殖的預防，例如預防腫瘤的生長、預防轉移生長、減少與心血管手術有關的再狹窄等。作為替代選擇，這些化合物通過穩定或改善患者的臨床癥狀，用于治療進行中的疾病。
宿主或患者可以屬于任何哺乳動物種類，例如靈長類，特別是人類；嚙齒動物，包括小鼠、大鼠和倉鼠；兔；馬、牛、狗、貓等。動物模型是實驗研究用的，提供治療人類疾病的模型。
特定細胞對用根據本發明的化合物治療的敏感性可以借助體外試驗加以測定。通常，將細胞的培養物與不同濃度根據本發明的化合物合并一段時間，足以允許活性成分誘導細胞死亡或者抑制遷移，通常在約一小時與一周之間。體外試驗可以使用來自活組織檢查樣品的培養細胞進行。然后統計處理后剩余的存活細胞。
劑量因所用具體化合物、具體疾病、患者狀態等而異。治療劑量通常足以減少靶組織中的不可取細胞群，同時維持患者的生存能力。治療一般持續直至已經發生相當程度的減少，例如細胞負載減少至少約50％，并且可以持續直至基本上在機體中不再檢測到不可取的細胞。
關于信號轉導途徑的確認和多種信號轉導途徑之間相互作用的檢測，多位科學家已經開發了適合的模型或模型系統，例如細胞培養物模型(例如Khwaja等人，EMBO，1997，16，2783-93)和轉基因動物模型(例如White等人，Oncogene，2001，20，7064-7072)。關于信號轉導級聯中某些階段的確定，可以利用相互作用的化合物來調控信號(例如Stephens等人，BiochemicalJ.，2000，351，95-105)。根據本發明的化合物也可以用作在動物和/或細胞培養物模型中或者在本申請提到的臨床疾病中測試激酶-依賴性信號轉導途徑的試劑。
激酶活性的測量是一項本領域技術人員熟知的技術。采用底物、例如組蛋白(例如Alessi等人，FEBS Lett.1996，399，3，33-338頁)或堿性髓磷脂蛋白的測定激酶活性的基因試驗系統如文獻所述(例如Campos-Gonzalez，R.和Glenney，Jr.，J.R.1992，J.Biol.Chem.267，14535頁)。
關于激酶抑制劑的確認，可用多種測定系統。在閃爍近似測定法中(Sorg等人，J.of Biomolecular Screening，2002，7，11-19)和快速平板測定法中，測量蛋白質或肽底物被γATP的放射性磷酸化。在抑制性化合物的存在下，可檢測到放射性信號降低或完全沒有。此外，均相時間-分辨熒光共振能量轉移(HTR-FRET)和熒光極化(FP)技術適合作為測定方法(Sills等人，J.of Biomolecular Screening，2002，191-214)。
其他非放射性ELISA測定方法使用特異性磷酸抗體(phospho-AB)。phospho-AB僅結合磷酸化的底物。這種結合可以借助化學發光檢測，使用二抗過氧化物酶-綴合的抗-綿羊抗體(Ross等人，2002，Biochem.J.，即將公布，原稿BJ20020786)。
有很多疾病都與細胞增殖和細胞死亡(細胞程序死亡)失調有關。有關病癥包括但不限于如下。根據本發明的化合物適合于治療多種病癥，其中存在平滑肌細胞和/或炎性細胞向血管內膜層的增殖和/或遷移，導致通過該血管的血流受限，例如在新生內膜阻塞性損傷的情況下。有關阻塞性移植物血管疾病包括動脈粥樣硬化、移植術后冠狀血管疾病、靜脈移植物狹窄、吻合修復術周再狹窄、血管成形術或支架(stent)放置之后的再狹窄等。
根據本發明的化合物也適合作為p38激酶抑制劑。
抑制p38激酶的雜芳基脲描述于WO 02/82859中。
現有技術在WO 2003032989中描述了治療Bechcet綜合征和葡萄膜炎的苯并稠合脲。在WO 200296876中公開了氨基甲酸酯和草酰胺化合物是腫瘤壞死因子抑制劑，用于治療哮喘、阿爾茨海默氏病和疼痛。WO 200104115公開了芳基-與雜芳基-取代的脲，它們可以用作細胞分裂素抑制劑，治療炎性和自體免疫疾病。在WO 200055139中描述了其他芳基-與雜芳基-取代的脲，它們可以用作細胞分裂素抑制劑，治療骨關節炎或潰瘍性結腸炎。在WO 00/43384中描述了治療炎性疾病的雜環-取代的脲。EP 0 286 979公開了芳基-與雜芳基-取代的脲，它們可以用作抗心律失常劑。WO200006550描述了苯基-取代的脲是脂質過氧化物酶抑制劑。Madsen等人在WO 03/000245中公開了取代的芳基與雜芳基化合物，尤其用于治療變應性鼻炎、動脈粥樣硬化、哮喘或癌癥。在WO 00/76515中描述了芳基-與雜芳基-取代的脲衍生物是IL-8受體拮抗劑。
發明概述本發明涉及式I化合物
其中R1、R2、R3R4、R5各自彼此獨立地表示H、A、OH、OA、鏈烯基、炔基、NO2、NH2、NHA、NA2、Hal、CN、COOH、COOA、-OHet、-O-亞烷基-Het、-O-亞烷基-NR10R11或CONR10R11，選自R1、R2、R3、R4、R5的兩個相鄰基團一起也表示-O-CH2-CH2-、-O-CH2-O-或-O-CH2-CH2-O-，R6、R7各自彼此獨立地表示H、A、Hal、OH、OA或CN，R8表示CN、COOH、COOA、CONH2、CONHA或CONA2，R9表示H或A，R10、R11各自彼此獨立地表示H或A，Het表示單環或二環的飽和、不飽和或芳族雜環，具有1至4個N、O和/或S原子，該環可以是未取代的或者被Hal、A、OA、COOA、CN和/或羰基氧(＝O)單-、二-或三-取代，A表示具有1至10個C原子的烷基，另外，其中1-7個H原子可以被F和/或氯代替，X、X’各自彼此獨立地表示NH或者不存在，Hal表示F、Cl、Br或I，及其藥學可用衍生物、溶劑合物、鹽和立體異構體，包括其任意比例的混合物。
本發明也涉及這些化合物的旋光活性形式(立體異構體)、對映體、外消旋物、非對映體、水合物和溶劑合物。術語化合物的溶劑合物用來表示惰性溶劑分子向化合物的加合，由于它們相互的吸引力而生成。溶劑合物例如是一或二水合物或醇化物。
術語“藥學可用衍生物”用來表示例如根據本發明的化合物的鹽和所謂的前體藥物化合物。
術語“前體藥物衍生物”用來表示這樣的式I化合物，它們已經借助例如烷基或酰基、糖或寡肽被修飾，并且在生物體內迅速裂解生成根據本發明的有效化合物。
它們也包括根據本發明的化合物的生物可降解的聚合物衍生物，例如Int.J.Pharm.115，61-67(1995)所述。
措辭“有效量”表示藥品或藥物活性成分在組織、系統、動物或人體中導致例如研究人員或醫師所尋求或需要的生物學或醫學反應的量。
另外，措辭“治療有效量”表示與沒有接受該量的相應受治療者相比，具有下列后果的量改善了的疾病、綜合征、病癥、主訴、障礙或副作用的治療、愈合、預防或消除，或者疾病、主訴或障礙的進展的減少。
措辭“治療有效量”也涵蓋有效增加正常生理功能的量。
本發明也涉及式I化合物的混合物、例如兩種非對映體的混合物的用途，例如比例為1∶1、1∶2、1∶3、1∶4、1∶5、1∶10、1∶100或1∶1000。它們特別優選地是立體異構化合物的混合物。
根據本發明的化合物也可以是各種多晶型，例如無定形和結晶性多晶型。根據本發明的化合物的所有多晶型都為本發明所覆蓋，是發明的另一方面。
本發明涉及式I化合物及其鹽和制備根據權利要求1-10的式I化合物及其藥學可用衍生物、鹽、溶劑合物和立體異構體的方法，其特征在于a)關于制備其中X、X’表示NH的式I化合物，使式II化合物 其中R6、R7、R8、R9、R10和R11具有如權利要求1所示含義，與式III化合物反應，
其中R1、R2、R3、R4和R5具有如權利要求1所示含義，或者b)關于制備其中X、X’表示NH的式I化合物，使式IV化合物 其中R1、R2、R3、R4和R5具有如權利要求1所示含義，與氯甲酸酯衍生物反應，得到中間體氨基甲酸酯衍生物，隨后使其與式II化合物反應，或者c)關于制備式I化合物，其中R8表示CN、COOA、CONH2、CONHA或CONA2，R10、R11表示H，使式V化合物 其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、X和X’具有如權利要求1所示含義，與式VI化合物反應，R8-CH(NH2)-CN VI其中R8表示CN、COOA、CONH2、CONHA或CONA2，并與式VII化合物反應，
CR9(OA’)3VII其中R9具有如權利要求1所示含義，A’表示具有1、2、3、4、5或6個C原子的烷基，或者d)關于制備其中X不存在、X’表示NH的式I化合物，使式II化合物與式VIII化合物反應， 其中R1、R2、R3、R4和R5具有如權利要求1所示含義，L表示Cl、Br、I或者游離或經過反應性官能修飾的OH基團，或者e)將其中R10、R11表示H的式I化合物通過烷基化轉化為其中R10、R11表示A的式I化合物，和/或將式I的堿或酸轉化為它的鹽之一。
上下文中的基團R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、X和X’具有如權利要求1所示含義，另有明確規定除外。
A表示烷基，它是未分支(線性)或分支的，具有1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個C原子。A優選地表示甲基，此外乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基或叔丁基，此外還有戊基、1-、2-或3-甲基丁基、1，1-、1，2-或2，2-二甲基丙基、1-乙基丙基、己基、1-、2-、3-或4-甲基戊基、1，1-、1，2-、1，3-、2，2-、2，3-或3，3-二甲基丁基、1-或2-乙基丁基、1-乙基-1-甲基丙基、1-乙基-2-甲基丙基、1，1，2-或1，2，2-三甲基丙基，此外例如優選三氟甲基。
A非常特別優選地表示具有1、2、3、4、5或6個C原子的烷基，優選甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、己基、三氟甲基、五氟乙基或1，1，1-三氟乙基。A也表示環烷基。環烷基優選地表示環丙基、環丁基、環戊基、環己基或環庚基。
A’優選地表示甲基、乙基、丙基或丁基。
亞烷基優選地是未分支的，優選地表示亞甲基、亞乙基、亞丙基、亞丁基或亞戊基。
在優選的實施方式中，R1、R2、R3、R4、R5在每種情況下彼此獨立地表示H、A、OH、OA、NO2、NH2、NHA、NA2、Hal、CN、-OHet、-O-亞烷基-Het或-O-亞烷基-NR8R9。
在特別優選的實施方式中，R1、R2、R3、R4、R5在每種情況下彼此獨立地表示H、A、OH、OA、Hal、-O-亞烷基-Het或-O-亞烷基-NR10R11。
R1、R2、R3、R4、R5優選地在每種情況下彼此獨立地表示例如H；A，例如甲基或乙基；OH；OA，例如甲氧基、乙氧基、丙氧基或三氟甲氧基；NO2；NH2；NHA，例如甲基氨基；NA2，例如二甲氨基或二乙氨基；Hal；CN；COOA，例如甲氧羰基或叔丁氧羰基；-OHet，例如1-(叔丁氧羰基)哌啶-4-基氧基或哌啶-4-基氧基；-O-亞烷基-Het，例如2-(哌啶-1-基)乙氧基或2-(嗎啉-4-基)乙氧基；-O-亞烷基-NR8R9，例如2-氨基乙氧基、2-(二甲氨基)乙氧基、2-(二乙氨基)乙氧基或2-(N，N-乙基，甲基氨基)乙氧基；或CONR8R9，例如氨基羰基。
R6和R7優選地表示H。
R8優選地表示CONH2或CN。
R10和R11優選地表示H。
Het優選地表示單環的飽和、不飽和或芳族雜環，具有1至4個N、O和/或S原子，該環可以是未取代的或者被Hal、A、OA、COOA、CN或羰基氧(＝O)單-、二-或三-取代。
與進一步的取代基無關，Het例如表示2-或3-呋喃基、2-或3-噻吩基，1-、2-或3-吡咯基，1-、2-、4-或5-咪唑基，1-、3-、4-或5-吡唑基，2-、4-或5-唑基，3-、4-或5-異唑基，2-、4-或5-噻唑基，3-、4-或5-異噻唑基，2-、3-或4-吡啶基，2-、4-、5-或6-嘧啶基，此外優選1，2，3-三唑-1-、-4-或-5-基，1，2，4-三唑-1-、-3-或-5-基，1-或5-四唑基，1，2，3-二唑-4-或-5-基，1，2，4-二唑-3-或-5-基，1，3，4-噻二唑-2-或-5-基，1，2，4-噻二唑-3-或-5-基，1，2，3-噻二唑-4-或-5-基，3-或4-噠嗪基，吡嗪基，1-、2-、3-、4-、5-、6-或7-吲哚基，4-或5-異吲哚基，1-、2-、4-或5-苯并咪唑基，1-、3-、4-、5-、6-或7-苯并吡唑基，2-、4-、5-、6-或7-苯并唑基，3-、4-、5-、6-或7-苯并異唑基，2-、4-、5-、6-或7-苯并噻唑基，2-、4-、5-、6-或7-苯并異噻唑基，4-、5-、6-或7-苯并-2，1，3-二唑基，2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-喹啉基，1-、3-、4-、5-、6-、7-或8-異喹啉基，3-、4-、5-、6-、7-或8-噌啉基，2-、4-、5-、6-、7-或8-喹唑啉基，5-或6-喹喔啉基，2-、3-、5-、6-、7-或8-2H-苯并[1，4]嗪基，此外優選1，3-苯并二氧雜環戊烯-5-基，1，4-苯并二烷-6-基，2，1，3-苯并噻二唑-4-或-5-基或2，1，3-苯并二唑-5-基。
雜環基團也可以是部分或完全氫化的。Het因而也可以表示例如2，3-二氫-2-、-3-、-4-或-5-呋喃基，2，5-二氫-2-、-3-、-4-或-5-呋喃基，四氫-2-或-3-呋喃基，1，3-二氧雜環戊烷-4-基，四氫-2-或-3-噻吩基，2，3-二氫-1-、-2-、-3-、-4-或-5-吡咯基，2，5-二氫-1-、-2-、-3-、-4-或-5-吡咯基，1-、2-或3-吡咯烷基，四氫-1-、-2-或-4-咪唑基，2，3-二氫-1-、-2-、-3-、-4-或-5-吡唑基，四氫-1-、-3-或-4-吡唑基，1，4-二氫-1-、-2-、-3-或-4-比啶基，1，2，3，4-四氫-1-、-2-、-3-、-4-、-5-或-6-吡啶基，1-、2-、3-或4-哌啶基，2-、3-或4-嗎啉基，四氫-2-、-3-或-4-吡喃基，1，4-二烷基，1，3-二烷-2-、-4-或-5-基，六氫-1-、-3-或-4噠嗪基，六氫-1-、-2-、-4-或-5-嘧啶基，1-、2-或3-哌嗪基，1，2，3，4-四氫-1-、-2-、-3-、-4-、-5-、-6-、-7-或-8-喹啉基，1，2，3，4-四氫-1-、-2-、-3-、-4-、-5-、-6-、-7-或-8-異喹啉基，2-、3-、5-、6-、7-或8-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]嗪基，此外優選2，3-亞甲二氧基苯基，3，4-亞甲二氧基苯基，2，3-亞乙二氧基苯基，3，4-亞乙二氧基苯基，3，4-(二氟亞甲二氧基)苯基，2，3-二氫苯并呋喃-5-或-6-基，2，3-(2-氧代亞甲二氧基)苯基或者3，4-二氫-2H-1，5-苯并二氧雜-6-或-7-基，此外優選2，3-二氫苯并呋喃基或者2，3-二氫-2-氧代呋喃基。
在進一步優選的實施方式中，Het表示單環的飽和雜環，具有1至3個N、O和/或S原子，它是未取代的或者可以被COOA單取代。本文的單環飽和雜環特別優選地表示哌啶基、吡咯烷基、嗎啉基或哌嗪基。
Het非常特別優選地表示1-、2-、3-或4-哌啶基或者2-、3-或4-嗎啉基，其中Het可以被COOA取代。
Hal優選地表示F、Cl或Br，以及I，特別優選F或Cl。
鏈烯基優選地代表乙烯基、1-或2-丙烯基、1-丁烯基、異丁烯基、仲丁烯基，此外優選1-戊烯基、異戊二烯基或1-己烯基。
炔基優選地代表乙炔基、丙炔-1-基，此外丁炔-1-基、丁炔-2-基、戊炔-1-基、戊炔-2-基或戊炔-3-基。
遍及本發明的所有出現一次以上的基團都可以是相同或不同的，也就是彼此獨立的。
式I化合物可能具有一個或多個手性中心，因此可以存在多種立體異構形式。式I涵蓋所有這些形式。
因此，本發明特別涉及這樣的式I化合物，其中至少一個所述基團具有如上所示優選的含義之一。一些優選的化合物組可以用下列子式Ia至Ih表示，它們符合式I，并且其中沒有詳細表征的基團具有如式I所示含義，但是其中在Ia中，X不存在或者表示NH，X’表示NH；在Ib中，R1、R2、R3、R4、R5各自彼此獨立地表示H、A、OH、OA、NO2、NH2、NHA、NA2、Hal、CN、-OHet、-O-亞烷基-Het或-O-亞烷基-NR8R9；在Ic中，Het表示單環的飽和雜環，具有1至3個N、O和/或S原子，該環是未取代的或者可以被COOA單取代；在Id中，R6、R7表示H；在Ie中，R8表示CONH2或CN；在If中，X不存在或者表示NH，X’表示NH，R1、R2、R3、R4、R5各自彼此獨立地表示H、A、OH、OA、NO2、NH2、NHA、NA2、Hal、CN、-OHet、-O-亞烷基-Het或-O-亞烷基-NR10R11，Het表示單環的飽和雜環，具有1至3個N、O和/或S原子，該環是未取代的或者可以被COOA單取代，R6、R7表示H，R8表示CONH2或CN；在Ig中，X不存在或者表示NH，X，表示NH，R1、R2、R3、R4、R5各自彼此獨立地表示H、A、OH、OA、NO2、NH2、NHA、NA2、Hal、CN、-OHet、-O-亞烷基-Het或-O-亞烷基-NR10R11，R6、R7表示H，R8表示CONH2或CN，Het表示哌啶基、吡咯烷基、嗎啉基或哌嗪基，它們各自是未取代的或者被COOA單取代；在Ih中，X、X’各自彼此獨立地表示NH或者不存在，R1、R2、R3、R4、R5各自彼此獨立地表示H、A、OH、OA、Hal、-O-亞烷基-Het或-O-亞烷基-NR10R11，R6、R7表示H，R8表示CONH2或CN，R9表示H或A，R10、R11各自彼此獨立地表示H或A，Het表示哌啶基、吡咯烷基、嗎啉基或哌嗪基，它們各自是未取代的或者被COOA單取代，A表示具有1至10個C原子的烷基，另外，其中1-7個H原子可以被F和/或氯代替，Hal表示F、Cl、Br或I，及其藥學可用衍生物、鹽、溶劑合物和立體異構體，包括其任意比例的混合物。
式I化合物以及它們的制備原料另外借助本身已知的方法制備，如文獻所述(例如標準著作，例如Houben-Weyl，Methoden der organischenChemie[Methods of Organic Chemistry]，Georg-Thieme-Verlag，Stuttgart)，確切而言在已知的和適合于所述反應的反應條件下。這里也可以使用本身已知的變通方式，這里沒有詳細描述。
如果需要的話，原料也可以就地生成，以便它們不從反應混合物中分離，而是立即進一步轉化為式I化合物。
其中X和X’表示NH的式I化合物可以優選地通過使式II化合物與式III化合物反應而得。
式II化合物和式III化合物是公知的。
反應一般在惰性溶劑中、在有機堿如三乙胺、二甲基苯胺、吡啶或喹啉的存在進行。依賴于所用條件，反應時間在幾分鐘與14天之間，反應溫度在約0℃與150℃之間，通常在15℃與90℃之間，特別優選在15℃與30℃之間。
適合的惰性溶劑例如是烴類，例如己烷、石油醚、苯、甲苯或二甲苯；氯代烴，例如三氯乙烯、1，2-二氯乙烷、四氯化碳、氯仿或二氯甲烷；醇類，例如甲醇、乙醇、異丙醇、正丙醇、正丁醇或叔丁醇；醚類，例如二乙醚、二異丙醚、四氫呋喃(THF)或二烷；二醇醚類，例如乙二醇一甲醚或一乙醚、乙二醇二甲醚(二甘醇二甲醚)；酮類，例如丙酮或丁酮；酰胺類，例如乙酰胺、二甲基乙酰胺或二甲基甲酰胺(DMF)；腈類，例如乙腈；亞砜類，例如二甲基亞砜(DMSO)；二硫化碳；羧酸類，例如甲酸或乙酸；硝基化合物，例如硝基甲烷或硝基苯；酯類，例如乙酸乙酯，或者所述溶劑的混合物。
其中X和X’表示NH的式I化合物此外可以優選地通過使式IV化合物與氯甲酸酯衍生物反應而得，例如氯甲酸4-硝基苯基酯，得到中間體氨基甲酸酯，隨后使其與式II化合物反應。
反應一般在惰性溶劑中，在酸結合劑的存在下進行，優選堿金屬或堿土金屬的氫氧化物、碳酸鹽或碳酸氫鹽，或者堿金屬或堿土金屬、優選鉀、鈉、鈣或銫的另一種弱酸鹽。有機堿的加入也是適合的，例如三乙胺、二甲基苯胺、N，N’-二亞甲基二胺、吡啶或喹啉。依賴于所用條件，反應時間在幾分鐘與14天之間，反應溫度在約0℃與150℃之間，通常在20℃與130℃之間，特別優選在60℃與90℃之間。
適合的惰性溶劑例如是烴類，例如己烷、石油醚、苯、甲苯或二甲苯；氯代烴，例如三氯乙烯、1，2-二氯乙烷、四氯化碳、氯仿或二氯甲烷；醇類，例如甲醇、乙醇、異丙醇、正丙醇、正丁醇或叔丁醇；醚類，例如二乙醚、二異丙醚、四氫呋喃(THF)或二烷；二醇醚，例如乙二醇一甲醚或一乙醚、乙二醇二甲醚(二甘醇二甲醚)；酮類，例如丙酮或丁酮；酰胺類，例如乙酰胺、二甲基乙酰胺或二甲基甲酰胺(DMF)；腈類，例如乙腈；亞砜類，例如二甲基亞砜(DMSO)；二硫化碳；羧酸類，例如甲酸或乙酸；硝基化合物，例如硝基甲烷或硝基苯；酯類，例如乙酸乙酯，或者所述溶劑的混合物。
式IV原料是公知的。
式I化合物，其中R8表示CN、COOA、CONH2、CONHA或CONA2，R10、R11表示H，可以優選地通過使式U化合物與式UI化合物和式VII化合物反應而得。
式V、VI和VII化合物是公知的。
反應一般在惰性溶劑中進行，如上所示。依賴于所用條件，反應時間在幾分鐘與14天之間，反應溫度在約0℃與150℃之間，通常在20℃與130℃之間，特別優選在60℃與90℃之間。
其中X不存在、X’表示NH的式I化合物此外可以優選地通過使式II化合物與式VIII化合物反應而得。
式VIII化合物是公知的。
在式VIII化合物中，L優選地表示Cl、Br、I或者游離或經過反應性修飾的OH基團，例如活化酯、咪唑酰胺(imidazolide)或具有1-6個C原子的烷基磺酰氧基(優選甲磺酰氧基或三氟甲磺酰氧基)或具有6-10個C原子的芳基磺酰氧基(優選苯磺酰氧基或對-甲苯磺酰氧基)。
這種在典型的酰化反應中活化羧基的基團類型如文獻所述(例如標準著作，例如Houben-Weyl，Methoden der organischen Chemie[Methods ofOrganic Chemistry]，Georg-Thieme-Verlag，Stuttgart)。
活化的酯有利地就地生成，例如加入HOBt或N-羥基琥珀酰亞胺。
優選使用其中L表示OH的式VIII化合物。
反應一般在惰性溶劑中、在以下物質存在下進行酸結合劑，優選有機堿，例如DIPEA、三乙胺、二甲基苯胺、吡啶或喹啉，或者過量的式VIII羧基組分。
堿金屬或堿土金屬的氫氧化物、碳酸鹽或碳酸氫鹽或者堿金屬或堿土金屬、優選鉀、鈉、鈣或銫的另一種弱酸鹽的加入也可能是可取的。
依賴于所用條件，反應時間在幾分鐘與14天之間，反應溫度在約-30℃與140℃之間，通常在-10℃與90℃之間，特別優選在約0℃與約70℃之間。
適合的惰性溶劑是上文提到的那些。
游離氨基的烷基化在有機化學的常規條件下進行的(例如標準著作所述，例如Houben-Weyl，Methoden der organischen Chemie [Methods ofOrganic Chemistry]，Georg-Thieme-Verlag，Stuttgart)。
藥用鹽和其他形式所述根據本發明的化合物可以使用它們最終的非鹽形式。另一方面，本發明也涵蓋以它們藥學可接受鹽形式使用這些化合物，這可以借助本領域已知的工藝從各種有機和無機酸和堿衍生而來。式I化合物的藥學可接受鹽形式大部分是借助常規方法制備的。如果式I化合物含有羧基，其適合的鹽之一可以通過使該化合物與適合的堿反應而成，得到相應的堿加成鹽。這類堿例如是堿金屬氫氧化物，包括氫氧化鉀、氫氧化鈉和氫氧化鋰；堿土金屬氫氧化物，例如氫氧化鋇和氫氧化鈣；堿金屬醇化物，例如乙醇鉀和丙醇鈉；和各種有機堿，例如哌啶、二乙醇胺和N-甲基葡糖胺。同樣包括式I化合物的鋁鹽。在某些式I化合物的情況下，酸加成鹽可以通過將這些化合物用藥學可接受有機與無機酸處理而成，例如鹵化氫，例如氯化氫、溴化氫或碘化氫；其他礦物酸及其相應的鹽，例如硫酸鹽、硝酸鹽或磷酸鹽等；和烷基-與單芳基-磺酸鹽，例如乙磺酸鹽、甲苯磺酸鹽和苯磺酸鹽；和其他有機酸及其相應的鹽，例如乙酸鹽、三氟乙酸鹽、酒石酸鹽、馬來酸鹽、琥珀酸鹽、檸檬酸鹽、苯甲酸鹽、水楊酸鹽、抗壞血酸鹽等。因此，式I化合物的藥學可接受酸加成鹽包括如下乙酸鹽、己二酸鹽、藻酸鹽、精氨酸鹽(arginate)、天冬氨酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、亞硫酸氫鹽、溴化物、丁酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、辛酸鹽、氯化物、氯苯甲酸鹽、檸檬酸鹽、環戊烷丙酸鹽、二葡糖酸鹽、磷酸二氫鹽、二硝基苯甲酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙磺酸鹽、富馬酸鹽、半乳糖酸鹽(來自粘酸)、半乳糖醛酸鹽、葡庚酸鹽、葡糖酸鹽、谷氨酸鹽、甘油磷酸鹽、半琥珀酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、馬尿酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、2-羥基乙磺酸鹽、碘化物、羥乙磺酸鹽、異丁酸鹽、乳酸鹽、乳糖酸鹽、蘋果酸鹽、馬來酸鹽、丙二酸鹽、扁桃酸鹽、偏磷酸鹽、甲磺酸鹽、甲基苯甲酸鹽、磷酸一氫鹽、2-萘磺酸鹽、煙酸鹽、硝酸鹽、草酸鹽、油酸鹽、棕櫚酸鹽、果膠酸鹽、過硫酸鹽、苯乙酸鹽、3-苯基丙酸鹽、磷酸鹽、膦酸鹽、鄰苯二甲酸鹽，但是這不代表限制。
此外，根據本發明的化合物的堿鹽包括鋁、銨、鈣、銅、鐵(III)、鐵(II)、鋰、鎂、錳(III)、錳(II)、鉀、鈉和鋅鹽，但是這不打算代表限制。上述鹽中，優選銨鹽；堿金屬鹽鈉和鉀鹽；和堿土金屬鹽鈣和鎂鹽。從藥學可接受有機無毒性堿衍生的式I化合物的鹽包括下列堿的鹽伯胺、仲胺與叔胺、取代的胺、也包括天然存在的取代的胺、環狀胺，和堿性離子交換樹脂，例如精氨酸、甜菜堿、咖啡因、氯普魯卡因、膽堿、N，N’-二芐基乙二胺(苯乍生)、二環己胺、二乙醇胺、二乙胺、2-二乙氨基乙醇、2-二甲氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基嗎啉、N-乙基哌啶、葡糖胺、氨基葡糖、組氨酸、hydrabamine、異丙胺、利多卡因、賴氨酸、葡甲胺、N-甲基-D-葡糖胺、嗎啉、哌嗪、哌啶、聚胺樹脂、普魯卡因、嘌呤類、可可堿、三乙醇胺、三乙胺、三甲胺、三丙胺和三(羥甲基)甲胺(氨丁三醇)，但是這不打算代表限制。
含有堿性含氮基團的本發明化合物可以用下列試劑季銨化，例如(C1-C4)烷基鹵化物，例如甲基、乙基、異丙基和叔丁基的氯化物、溴化物和碘化物；硫酸二(C1-C4)烷基酯，例如硫酸的二甲基、二乙基和二戊基酯；(C10-C18)烷基鹵化物，例如癸基、十二烷基、月桂基、肉豆蔻基和硬脂基的氯化物、溴化物和碘化物；和芳基(C1-C4)烷基鹵化物，例如芐基氯和苯乙基溴。使用這類鹽可以制備根據本發明的水溶性和油溶性化合物。
上述藥用鹽中優選的包括乙酸鹽、三氟乙酸鹽、苯磺酸鹽、檸檬酸鹽、富馬酸鹽、葡糖酸鹽、半琥珀酸鹽、馬尿酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、羥乙磺酸鹽、扁桃酸鹽、葡甲胺、硝酸鹽、油酸鹽、膦酸鹽、新戊酸鹽、磷酸鈉、硬脂酸鹽、硫酸鹽、磺基水楊酸鹽、酒石酸鹽、硫代蘋果酸鹽、甲苯磺酸鹽和氨丁三醇，但是這不打算代表限制。
堿性式I化合物的酸加成鹽如下制備使游離堿形式與足量所需的酸接觸，按照常規方式導致鹽的生成。游離堿可以再生，通過使鹽形式與堿接觸，按照常規方式分離游離堿。關于某些物理性質，例如在極性溶劑中的溶解性，游離堿形式在某些方面不同于其相應的鹽形式；不過出于本發明的目的，鹽相當于其各自的游離堿形式。
正如所提到的，式I化合物的藥學可接受堿加成鹽是與金屬或胺生成的，例如堿金屬和堿土金屬或有機胺。優選的金屬是鈉、鉀、鎂和鈣。優選的有機胺是N，N’-二芐基乙二胺、氯普魯卡因、膽堿、二乙醇胺、乙二胺、N-甲基-D-葡糖胺和普魯卡因。
根據本發明的酸性化合物的堿加成鹽如下制備使游離酸形式與足量的所需堿接觸，按照常規方式導致鹽的生成。游離酸可以再生，通過使鹽形式與酸接觸，按照常規方式分離游離酸。關于某些物理性質，例如在極性溶劑中的溶解性，游離酸形式在某些方面不同于其相應的鹽形式；不過出于本發明的目的，鹽相當于其各自的游離酸形式。
如果根據本發明的化合物含有一個以上能夠生成這種類型藥學可接受鹽的基團，本發明也涵蓋多元鹽。典型的多元鹽形式例如包括酒石酸氫鹽、二乙酸鹽、二富馬酸鹽、二葡甲胺、二磷酸鹽、二鈉鹽和三鹽酸鹽，但是這不打算代表限制。
關于上述，可以看到措辭“藥學可接受鹽”在這一點上用來表示包含式I化合物的一種鹽形式的活性成分，特別是如果這種鹽形式賦予該活性成分以優于活性成分游離形式或以前使用的任何其他活性成分鹽形式的藥動學性質。活性成分的藥學可接受鹽形式也能第一次為這種活性成分提供前所未有的所需藥動學性質，甚至就其在機體中的治療功效而言能夠對這種活性成分的藥效學具有積極的影響。
本發明此外涉及藥品，包含至少一種式I化合物和/或其藥學可用衍生物、溶劑合物和立體異構體，包括其任意比例的混合物，以及可選地賦形劑和/或助劑。
藥物制劑可以以劑量單元的形式給藥，每劑量單元包含預定量的活性成分。這樣一種單元例如可以包含0.5mg至1g、優選1mg至700mg、特別優選5mg至100mg根據本發明的化合物，這依賴于所治療的病癥、給藥的方法和患者的年齡、體重和條件，或者藥物制劑可以以劑量單元的形式給藥，每劑量單元包含預定量的活性成分。優選的劑量單元制劑包含如上所示的每日劑量或部分劑量或者其相應比例的活性成分。此外，這種類型的藥物制劑可以利用藥學領域公知的方法加以制備。
藥物制劑能夠適用于經由任何所需適合方法的給藥，例如口服(包括口腔或舌下)、直腸、鼻、局部(包括口腔、舌下或透皮)、陰道或腸胃外(包括皮下、肌內、靜脈內或真皮內)方法。這類制劑可以利用藥學領域已知的所有方法加以制備，例如合并活性成分與一種或多種賦形劑或一種或多種助劑。
適用于口服給藥的藥物制劑可以作為獨立的單元給藥，例如膠囊劑或片劑；粉劑或顆粒劑；在水性或非水性液體中的溶液或懸液；可食用泡沫或泡沫食品；或者水包油型液體乳劑或油包水型液體乳劑。
因而例如，在以片劑或膠囊劑形式口服給藥的情況下，可以將活性成分組分與口服無毒性和藥學可接受惰性賦形劑合并，例如乙醇、甘油、水等。粉劑如下制備將化合物粉碎成適合的微小尺寸，將其與以相似方式粉碎的藥物賦形劑混合，例如可食用碳水化合物，例如淀粉或甘露糖醇。同樣可以存在矯味劑、防腐劑、分散劑和染劑。
膠囊劑如下制備如上所述制備粉末混合物，再填充到成形明膠外殼中。在填充操作之前，可以向粉末混合物加入助流劑和潤滑劑，例如高分散性硅酸、滑石、硬脂酸鎂、硬脂酸鈣或聚乙二醇的固體形式。同樣可以加入崩解劑或增溶劑，例如瓊脂、碳酸鈣或碳酸鈉，目的是提高服用膠囊后藥品的可利用性。
另外，如果需要或必要的話，同樣可以向混合物摻入適合的粘合劑、潤滑劑和崩解劑以及染劑。適合的粘合劑包括淀粉、明膠、天然糖類(例如葡萄糖或β-乳糖)、從玉米制成的甜味劑、天然與合成橡膠(例如阿拉伯膠、黃蓍膠或藻酸鈉)、羧甲基纖維素、聚乙二醇、蠟類等。用在這些劑型中的潤滑劑包括油酸鈉、硬脂酸鈉、硬脂酸鎂、苯甲酸鈉、乙酸鈉、氯化鈉等。崩解劑不受限制地包括淀粉、甲基纖維素、瓊脂、膨潤土、黃原膠等。片劑如下配制例如制備粉末混合物，造粒或干法壓制該混合物，加入潤滑劑和崩解劑，壓制全部混合物得到片劑。粉末混合物如下制備將以適合方式粉碎的化合物與稀釋劑或基質混合，如上所述，可選地與粘合劑例如羧甲基纖維素、藻酸鹽、明膠或聚乙烯吡咯烷酮，溶解延遲劑例如石蠟，吸收加速劑例如季鹽，和/或吸收劑例如膨潤土、高嶺土或磷酸二鈣。粉末混合物可以如下造粒將其用粘合劑濕潤，例如糖漿、淀粉糊、acadiamucilage或者纖維素或聚合物材料的溶液，再壓制過篩。作為造粒的替代選擇，可以使粉末混合物通過壓片機，得到不均勻形狀的團決，打碎形成顆粒。加入硬脂酸、硬脂酸鹽、滑石或礦物油可以潤滑顆粒，目的是防止黏附于片劑沖模。然后壓制已潤滑的混合物得到片劑。也可以將根據本發明的化合物與自由流動性情性賦形劑合并，然后直接壓制得到片劑，不進行造粒或干法壓制步驟。可以存在透明或不透明的保護層，由蟲膠密封層、糖或聚合物材料層和蠟光層組成。可以向這些包衣加入染劑，目的是區分不同的劑量單元。
口服液、例如溶液、糖漿和酏劑可以被制成劑量單元的形式，以便給定量包含預定量的化合物。糖漿可以通過將化合物溶于含有適合矯味劑的水溶液而制備，而酏劑是使用無毒性醇性載體制備。懸液可以通過將化合物分散在無毒性載體中配制。同樣可以加入增溶劑和乳化劑例如乙氧基化異硬脂醇和聚氧乙烯山梨糖醇醚、防腐劑、口味添加劑例如薄荷油或天然甜味劑或糖精，或者其他人工甜味劑等。
如果需要的話，口服給藥用劑量單元制劑可以被包封在微囊中。制劑也可以以這樣一種方式制備，以便釋放被延長或延遲，例如將粒狀材料包裹或包埋在聚合物、蠟等中。
式I化合物及其鹽、溶劑合物和生理功能衍生物也可以以脂質體遞送系統的形式給藥，例如小型單層囊、大型單層囊和多層囊。脂質體可以從各種磷脂生成，例如膽固醇、硬脂胺或磷脂酰膽堿。
式I化合物及其鹽、溶劑合物和生理功能衍生物也可以使用化合物分子與之偶聯的作為個別載體的單克隆抗體而遞送。類胰蛋白酶抑制劑還可以與作為可定向藥物載體的可溶性聚合物偶聯。化合物也可以與作為靶向藥物載體的可溶性聚合物偶聯。這類聚合物可以包括聚乙烯吡咯烷酮、吡喃共聚物、聚羥丙基甲基丙烯酸酰胺苯酚、聚羥乙基天冬酰胺苯酚或聚氧乙烯-聚賴氨酸，被棕櫚酰殘基取代。此外，化合物可以與一類適合于實現藥物控制釋放的生物可降解聚合物偶聯，例如聚乳酸、聚ε已內酯、聚羥基丁酸、聚原酸酯、聚縮醛、聚二羥基吡喃、聚氰基丙烯酸酯和水凝膠的交聯或兩親嵌段共聚物。
適用于透皮給藥的藥物制劑可以作為獨立的硬膏劑給藥，用于與接受者表皮進行延長的、緊密接觸。因而例如，活性成分可以借助離子電滲作用從硬膏劑中遞送，離子電滲如Pharmaceutical Research，3(6)，318(1986)的一般術語所述。
適用于局部給藥的藥物化合物可以被配制成軟膏劑、霜劑、懸液、洗劑、粉劑、溶液、糊劑、凝膠、噴霧劑、氣霧劑或油劑。
關于眼睛或其他外部組織的治療，例如口腔和皮膚，制劑優選地作為局部軟膏劑或霜劑施用。在給予軟膏劑的制劑情況下，可以采用活性成分與石蠟類或水可混溶性霜劑基質。作為替代選擇，活性成分可以被配制成含有水包油型基質或油包水型基質的霜劑。
適用于局部施用于眼睛的藥物制劑包括滴眼劑，其中活性成分溶解或懸浮在適合的載體中，特別是水性溶劑。
適用于局部施用在口腔中的藥物制劑涵蓋錠劑、含片(pastille)和漱口劑。
適用于直腸給藥的藥物制劑可以以栓劑或灌腸劑的形式給藥。
其中載體物質是固體的適用于鼻給藥的藥物制劑包含粒徑例如在20-500微米范圍內的粗粉，以鼻嗅的方式給藥，也就是從靠近鼻放置的含粉末容器中經由鼻孔迅速吸入。適合于作為鼻噴霧劑或滴鼻劑給藥、以液體作為載體物質的制劑涵蓋活性成分在水或油中的溶液。
適用于吸入給藥的藥物制劑涵蓋微細的粒狀粉塵或煙霧，其可以借助各種類型的加壓氣霧劑分配器、噴霧器或吹入器生成。
適用于陰道給藥的藥物制劑可以作為陰道栓、棉塞、霜劑、凝膠、糊劑、泡沫或噴霧制劑給藥。
適用于腸胃外給藥的藥物制劑包括水性與非水性無菌注射溶液，包含抗氧化劑、緩沖劑、制菌劑和溶質，借此它們制劑被賦予與所治療接受者的血液等滲；和水性與非水性無菌懸液，可以包含懸浮介質和增稠劑。制劑可以在單劑量或多劑量容器中給藥，例如密封的安瓿和小瓶，并且貯存在冷凍干燥(凍干)狀態下，以便僅在使用前不久才有必要加入無菌載體液體，例如注射用水。按照處方制備的注射溶液和懸液可以從無菌粉劑、顆粒劑和片劑制備。
不言而喻，除了上述特別提到的成分以外，制劑還可以包含本領域關于特定制劑類型常用的其他成分；因而例如，適合于口服給藥的制劑可以包含矯味劑。
式I化合物的治療有效量依賴于大量因素，例如包括動物的年齡與體重、需要治療的確切病癥及其嚴重性、制劑的屬性和給藥的方法，最終取決于主治醫生或獸醫。不過，根據本發明的化合物就腫瘤生長、例如結腸或乳腺癌治療而言的有效量一般在0.1至100mg/kg接受者(哺乳動物)體重每天的范圍內，特別通常在1至10mg/kg體重每天的范圍內。因而，體重70kg的成年哺乳動物的實際每天用量通常在70與700mg之間，該量可以作為每天單一劑量給予，或者通常在每天一系列部分劑量中給予(例如兩次、三次、四次、五次或六次)，以便總的每日劑量是相同的。鹽或溶劑合物或者其生理功能衍生物的有效量可以隨根據本發明的化合物本身的有效量來確定。可以假定，相似的劑量適合于上述其他病癥的治療。
本發明此外涉及藥品，包含至少一種式I化合物和/或其藥學可用衍生物、溶劑合物和立體異構體，包括其任意比例的混合物，和至少一種另外的藥品活性成分。
本發明也涉及套件(藥盒)，由獨立包裝的(a)有效量的式I化合物和/或其藥學可用衍生物、溶劑合物和立體異構體，包括其任意比例的混合物，和(b)有效量的另外的藥品活性成分組成。
套件包含適合的容器，例如盒子、單個的瓶子、袋子或安瓿。套件例如可以包含獨立的安瓿，各自含有有效量的式I化合物和/或其藥學可用衍生物、溶劑合物和立體異構體，包括其任意比例的混合物，和有效量的另外的藥品活性成分的溶解或凍干形式。
用途本發明化合物適合作為哺乳動物、尤其人類的藥物活性成分，治療酪氨酸激酶-誘發的疾病。這些疾病包括腫瘤細胞的增殖、促進實體腫瘤生長的病理性新血管化(或血管生成)、眼部新血管化(糖尿病性視網膜病、衰老-誘發的黃斑變性等)和炎癥(銀屑病、類風濕性關節炎等)。
本發明涵蓋式I化合物和/或其生理學可接受鹽和溶劑合物的用途，用于制備治療或預防癌癥的藥品。優選治療的癌發源于腦癌、泌尿生殖道癌、淋巴系統癌、胃癌、喉癌和肺癌。另一組優選的癌癥形式是單核細胞性白血病、肺腺癌、小細胞性肺癌、胰腺癌、成膠質細胞瘤和乳腺癌(breastcarcinoma)。
本發明也涵蓋根據本發明權利要求1的化合物和/或其生理可接受鹽和溶劑合物的用途，用于制備治療或預防其中牽連有血管生成的疾病的藥品。
這樣一種其中牽連有血管生成的疾病是眼部疾病，例如視網膜血管化、糖尿病性視網膜病、衰老-誘發的黃斑變性等。
式I化合物和/或其生理學可接受鹽和溶劑合物在制備用于治療或預防炎性疾病的藥品中的用途也落入本發明的范圍。這類炎性疾病的實例包括類風濕性關節炎、銀屑病、接觸性皮炎、遲發型過敏反應等。
本發明也涵蓋式I化合物和/或其生理學可接受鹽和溶劑合物的用途，用于制備治療或預防哺乳動物酪氨酸激酶-誘發的疾病或酪氨酸激酶-誘發的病癥的藥品，其中關于這種方法，向需要這類治療的患病哺乳動物給予治療有效量的根據本發明的化合物。治療量因具體疾病而異，本領域技術人員無需額外努力即可確定。
本發明也涵蓋式I化合物和/或其生理學可接受鹽和溶劑合物的用途，用于制備治療或預防視網膜血管化的藥品。
治療或預防眼部疾病如糖尿病性視網膜病和衰老-誘發的黃斑變性的方法同樣是本發明的一部分。治療或預防炎性疾病如類風濕性關節炎、銀屑病、接觸性皮炎和遲發型過敏反應以及治療或預防選自骨肉瘤、骨關節炎和佝僂病的骨病變的用途同樣落入本發明的范圍。
措辭“酪氨酸激酶-誘發的疾病或病癥”表示依賴于一種或多種酪氨酸激酶活性的病理條件。酪氨酸激酶直接或間接參與多種細胞活動的信號轉導途徑，包括增殖、粘連、遷移和分化。與酪氨酸激酶活性有關的疾病包括腫瘤細胞的增殖、促進實體腫瘤生長的病理性新血管化、眼部新血管化(糖尿病性視網膜病、衰老-誘發的黃斑變性等)和炎癥(銀屑病、類風濕性關節炎等)。
可以將式I化合物對患者給藥以治療癌癥。本發明化合物抑制腫瘤血管生成，從而影響腫瘤的生長(J.Rak等人，Cancer Research，554575-4580，1995)。式I化合物的血管生成-抑制性質也適合于治療某些形式的涉及視網膜新血管化的失明。
式I化合物也適合于治療某些骨病變，例如骨肉瘤、骨關節炎和佝僂病，也稱為致癌性骨軟化(Hasegawa等人，Skeletal Radiol.28，41-45頁，1999；Gerber等人，Nature Medicine，Vol.5，No.6，623-628頁，1999年6月)。由于VEGF通過在成熟破骨細胞中表達的KDR/Flk-1直接促進破骨性骨吸收(FEBS Let.473161-164(2000)；Endocrinology，1411667(2000))，本發明化合物也適合于治療和預防涉及骨吸收的病癥，例如骨質疏松和佩吉特氏病。這些化合物也可以通過減少局部缺血后的腦水腫、組織傷害和再灌注損傷，用于減少或預防發生在腦缺血事件后的組織傷害，例如中風(Drug News Perspect 11265-270(1998)；J.Clin.Invest.1041613-1620(1999))。
本發明因而涉及式I化合物及其藥學可用衍生物、溶劑合物和立體異構體、包括其任意比例的混合物的用途，用于制備治療激酶信號轉導的抑制、調節和/或調控在其中扮演角色的疾病的藥品。
這里優選的激酶選自酪氨酸激酶和Raf激酶。
酪氨酸激酶優選地是TIE-2、VEGFR、PDGFR、FGFR和/或FLT/KDR。
優選式I化合物及其藥學可用衍生物、溶劑合物和立體異構體、包括其任意比例的混合物的用途，用于制備治療受到根據權利要求1的化合物抑制酪氨酸激酶的影響的疾病的藥品。
特別優選制備藥品的用途，所述藥品用于治療受到根據權利要求1的化合物抑制TIE-2、VEGFR、PDGFR、FGFR和/或FLT/KDR的影響的疾病。
尤其優選治療疾病的用途，其中該疾病是實體腫瘤。
實體腫瘤優選地選自鱗狀上皮、膀胱、胃、腎、頭頸、食道、子宮頸、甲狀腺、腸、肝、腦、前列腺、泌尿生殖道、淋巴系統、胃、喉和/或肺的腫瘤。
實體腫瘤此外優選地選自肺腺癌、小細胞性肺癌、胰腺癌、成膠質細胞瘤、結腸癌和乳腺癌。
此外優選治療血液和免疫系統腫瘤的用途，優選地治療選自如下的腫瘤急性髓性白血病、慢性髓性白血病、急性淋巴性白血病和/或慢性淋巴性白血病。
本發明此外涉及式I化合物治療其中牽連有血管生成的疾病的用途。
該疾病優選地是眼部疾病。
本發明此外涉及治療視網膜血管化、糖尿病性視網膜病、衰老-誘發的黃斑變性和/或炎性疾病的用途。
炎性疾病優選地選自類風濕性關節炎、銀屑病、接觸性皮炎和遲發型過敏反應。
本發明此外涉及根據本發明的化合物治療骨病變的用途，其中骨病變發源于骨肉瘤、骨關節炎和佝僂病。
式I化合物適合于制備治療由Raf激酶所導致、介導和/或傳播的疾病的藥品，其中該Raf激酶選自A-Raf、B-Raf和Raf-1。
優選治療疾病的用途，所述疾病優選選自過度增殖性和非過度增殖性。
它們是癌性疾病或非癌性疾病。
非癌性疾病選自銀屑病、關節炎、炎癥、子宮內膜異位、瘢痕形成、良性前列腺增生、免疫疾病、自體免疫疾病和免疫缺陷疾病。
癌性疾病選自腦癌、肺癌、鱗狀細胞癌、膀胱癌、胃癌、胰腺癌、肝癌、腎癌、結腸直腸癌、乳腺癌、頭癌、頸癌、食道癌、婦科癌癥、甲狀腺癌、淋巴瘤、慢性白血病和急性白血病。
式I化合物也可以與其他熟知的治療劑同時給藥，根據它們對抗所治療的病癥的特定有用性加以選擇。例如，在骨病癥的情況下，可取的組合包括抗吸收性雙膦酸類，例如阿侖膦酸和利塞膦酸；整聯蛋白阻滯劑(如下進一步所定義)，例如αvβ3拮抗劑；用在激素替代療法中的綴合雌激素，例如Prempro、Premarin和Endometrion；選擇性雌激素受體調控劑(SERM)，例如雷洛昔芬、屈洛昔芬、CP-336，156(Pfizer)和拉索昔芬；組織蛋白酶K抑制劑；和ATP質子泵抑制劑。
本發明化合物也適合于與已知的抗癌劑組合。這些已知的抗癌劑包括如下雌激素受體調控劑、雄激素受體調控劑、類視色素受體調控劑、細胞毒性劑、抗增殖劑、異戊二烯基-蛋白轉移酶抑制劑、HMG-CoA還原酶抑制劑、HIV蛋白酶抑制劑、逆轉錄酶抑制劑和另外的血管生成抑制劑。本發明化合物特別適合于與放療同時給藥。本領域已經描述過抑制VEGF與放療聯合的協同效應(WO 00/61186)。
“雌激素受體調控劑”表示干擾或抑制雌激素與受體結合的化合物，與機理無關。雌激素受體調控劑的實例包括但不限于他莫昔芬、雷洛昔芬、艾多昔芬、LY353381、LY117081、托瑞米芬、fulvestrant、2，2-二甲基-丙酸4-[7-(2，2-二甲基-1-氧代丙氧基-4-甲基-2-[4-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯基]-2H-1-苯并吡喃-3-基)苯基酯、4，4’-二羥基二苯酮-2，4-二硝基苯基腙和SH646。
“雄激素受體調控劑”表示干擾或抑制雄激素與受體結合的化合物，與機理無關。雄激素受體調控劑的實例包括非那雄胺與其他5α-還原酶抑制劑、尼魯米特、氟他胺、比卡魯胺、利阿唑和乙酸abiraterone。
“類視色素受體調控劑”表示干擾或抑制類視色素與受體結合的化合物，與機理無關。這類類視色素受體調控劑的實例包括bexarotene、維甲酸、13-順式-視黃酸、9-順式-視黃酸、α-二氟甲基鳥氨酸、ILX23-7553、反式-N-(4’-羥基苯基)視黃胺(retinamide)和N-4-羧基苯基視黃胺。
“細胞毒性劑”表示主要通過直接作用于細胞功能或者抑制或干擾細胞減數分裂而導致細胞死亡的化合物，包括烷基化劑、腫瘤壞死因子、插層劑、微管蛋白抑制劑和拓撲異構酶抑制劑。細胞毒性劑的實例包括但不限于tirapazimine、sertenef、腫瘤壞死因子、異環膦酰胺、tasonermin、氯尼達明、碳鉑、六甲密胺、松龍苯芥、二溴衛矛醇、雷諾氮芥、福泰氮芥、nedaplatin、奧沙利鉑、泰莫佐羅、heptaplatin、雌莫司汀、二丙胺磺酯、三芥環膦酰胺、尼莫司汀、螺溴丙酰胺、嘌米舌泊、洛巴鉑、satraplatin、profiromycin、順鉑、irofulven、dexifosfamide、順式-胺二氯(2-甲基吡啶)鉑、芐基胍、glufosfamide、GPX100、(反式，反式，反式)雙-μ-(己烷-1，6-二胺)-μ-[二胺-鉑(II)]雙[二胺(氯)鉑(II)]四氯化物、diarizidinyl-精胺、三氧化砷、1-(11-十二烷氨基-10-羥基十一烷基)-3，7-二甲基黃嘌呤、佐柔比星、伊達比星、柔紅霉素、必桑郡、米托蒽醌、吡柔比星、pinafide、戊柔比星、amrubicin、抗瘤酮、3’-去氨基-3’-嗎啉代-13-脫氧-10-羥基去甲柔紅霉素、安那霉素、galarubicin、elinafide、MEN10755和4-去甲氧基-3-去氨基-3-氮丙啶基-4-甲磺酰基柔紅霉素(參見WO 00/50032)。
微管蛋白抑制劑的實例包括紫杉醇、硫酸長春地辛、3’，4’-二脫氫-4’-脫氧-8’-降長春花堿、多西他賽、根霉素、dolastatin、mivobulin isethionate、auristatin、cemadotin、RPR109881、BMS184476、vinflunine、cryptophycin、2，3，4，5，6-五氟-N-(3-氟-4-甲氧基苯基)苯磺酰胺、脫水長春花堿、N，N-二甲基-L-纈氨酰-L-纈氨酰-N-甲基-L-纈氨酰-L-脯氨酰-L-脯氨酸叔丁基酰胺、TDX258和BMS188797。
拓撲異構酶抑制劑例如是拓撲替康、hycaptamine、伊立替康、rubitecan、6-乙氧基丙酰基-3’，4’-O-外亞芐基教酒菌素、9-甲氧基-N，N-二甲基-5-硝基吡唑并[3，4，5-kl]吖啶-2-(6H)丙胺、1-氨基-9-乙基-5-氟-2，3-二氫-9-羥基-4-甲基-1H，12H-苯并[de]吡喃并[3’，4’b，7]中氮茚并[1，2b]喹啉-10，13(9H，15H)-二酮、lurtotecan、7-[2-(N-異丙氨基)乙基]-(20S)喜樹堿、BNP1350、BNPI1100、BN80915、BN80942、磷酸依托泊苷、替尼泊苷、索布佐山、2’-二甲氨基-2’-脫氧依托泊苷、GL331、N-[2-(二甲氨基)乙基]-9-羥基-5，6-二甲基-6H-吡啶并[4，3-b]咔唑-1-酰胺、asulacrine、(5a，5aB，8aa，9b)-9-[2-[N-[2-(二甲氨基)乙基]-N-甲基氨基]乙基]-5-[4-羥基-3，5-二甲氧基苯基]-5，5a，6，8，8a，9-六氫呋喃并(3’，4’6，7)萘并(2，3-d)-1，3-二氧雜環戊二烯(dioxol)-6-酮、2，3-(亞甲二氧基)-5-甲基-7-羥基-8-甲氧基苯并[c]菲啶、6，9-雙[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]異喹啉-5，10-二酮、5-(3-氨基丙基氨基)-7，10-二羥基-2-(2-羥基乙氨基甲基)-6H-吡唑并[4，5，1-de]吖啶-6-酮、N-[1-[2-(二乙氨基)乙基氨基]-7-甲氧基-9-氧代-9H-噻噸-4-基甲基]甲酰胺、N-(2-(二甲氨基)乙基)吖啶-4-甲酰胺、6-[[2-(二甲氨基)乙基]氨基]-3-羥基-7H-茚并[2，1-c]喹啉-7-酮和地美司鈉。
“抗增殖劑”包括反義RNA和DNA寡核苷酸，例如G3139、ODN698、RVASKRAS、GEM231和INX3001，和抗代謝物，例如山萮阿糖啶、卡莫氟、呋氟啶、噴托他丁、多西氟尿啶、曲麥克特、氟達拉濱、卡培他濱、galocitabine、阿糖胞苷酯、fosteabine鈉水合物、雷替曲塞、paltitrexid、emitefur、噻唑呋林、脫氧氮雜胞苷、nolatrexed、pemetrexed、nelzarabine、2’-脫氧-2’-亞甲基胞苷、2’-氟亞甲基-2’-脫氧胞苷、N-[5-(2，3-二氫苯并呋喃基)磺酰基]-N’-(3，4-二氯苯基)脲、N6-[4-脫氧-4-[N2-[2(E)，4(E)-十四碳二烯酰基]甘氨酰氨基]-L-甘油-B-L-甘露吡喃庚糖基(mannoheptopyranosyl)]腺嘌呤、aplidine、ecteinascidin、troxacitabine、4-[2-氨基-4-氧代-4，6，7，8-四氫-3H-嘧啶并[5，4-b]-1，4-噻嗪-6-基-(S)-乙基]-2，5-噻吩酰基(thienoyl)-L-谷氨酸、氨嘌呤、5-氟尿嘧啶、丙胺菌素、11-乙酰基-8-(氨甲酰氧基甲基)-4-甲酰基-6-甲氧基-14-氧雜-1，11-二氮雜四環(7.4.1.0.0)十四碳-2，4，6-三烯-9-基乙酸酯、swainsonine、洛美曲索、右丙亞胺、methioninase、2’-氰基-2’-脫氧-N4-棕櫚酰基-1-B-D-呋喃阿拉伯糖基(arabinofuranosyl)胞嘧啶和3-氨基吡啶-2-甲醛縮氨基硫脲。“抗增殖劑”也包括除“血管生成抑制劑”下所列那些以外的生長因子單克隆抗體，例如司徒曼布，和腫瘤抑制基因，例如p53，它可以經由重組病毒-介導的基因轉移而遞送(參見例如美國專利No.6069134)。
本發明此外涉及式I化合物制備治療疾病的藥品的用途，其中該疾病是以紊亂的血管生成為特征。該疾病優選地是癌癥疾病。
紊亂的血管生成優選地由紊亂的VEGFR-1、VEGFR-2和/或VEGFR-3活性所導致。
因此也特別優選根據本發明的化合物制備用于抑制VEGFR-2活性的藥品的用途。
測定法借助下述測定法測試實施例所述式I化合物，發現具有激酶抑制活性。其他測定法可從文獻獲知，本領域技術人員能夠容易地實施(例如參見Dhanabal等人，Cancer Res.59189-197；Xin等人，J.Biol.Chem.2749116-9121；Sheu等人，Anticancer Res.184435-4441；Ausprunk等人，Dev.Biol.38237-248；Gimbrone等人，J.Natl.Cancer Inst.52413-427；Nicosia等人，In Vitro 18538-549)。
VEGF受體激酶測定法向4∶1聚谷氨酸/酪氨酸底物(pEY)摻入放射性標記的磷酸鹽，測量VEGF受體激酶活性。在濾膜上捕集磷酸化的pEY產物，借助閃爍計數法量化放射性標記磷酸鹽的摻入。
材料VEGF受體激酶將人KDR(Terman，B.I.等人，Oncogene(1991)Vol.6，1677-1683頁)和Flt-1(Shibuya，M.等人，Oncogene(1990)Vol.5，519-524頁)的細胞內酪氨酸激酶結構域作為谷胱甘肽S-轉移酶(GST)基因融合蛋白克隆。這通過將KDR激酶的胞質結構域以與GST基因羧基末端的框內融合方式克隆來實現。使用桿狀病毒表達載體(pAcG2T，Pharmingen)，在Spodopterafrugiperda(Sf21)昆蟲細胞(Invitrogen)中表達可溶性重組GST-激酶結構域融合蛋白。
溶解緩沖液50mM Tris pH7.4，0.5M NaCl，5mM DTT，1mM EDTA，0.5％ TritonX-100，10％甘油，各10mg/ml亮抑酶肽、抑胃酶肽與抑酶肽和1mM苯甲磺酰氟(均來自Sigma)。
洗滌緩沖液50mM Tris pH 7.4，0.5M NaCl，5mM DTT，1mM EDTA，0.05％ TritonX-100，10％甘油，各10mg/ml亮抑酶肽、抑胃酶肽與抑酶肽和1mM苯甲磺酰氟。
透析緩沖液50mM Tris pH7.4，0.5M NaCl，5mM DTT，1mM EDTA，0.05％ TritonX-100，50％甘油，各10mg/ml亮抑酶肽、抑胃酶肽與抑酶肽和1mM苯甲磺酰氟。
10x反應緩沖液200mM Tris pH7.4，1.0M NaCl，50mM MnCl2，10mM DTT和5mg/ml牛血清白蛋白[BSA](Sigma)。
酶稀釋緩沖液50mM Tris pH7.4，0.1M NaCl，1mM DTT，10％甘油，100mg/ml BSA。
10x底物750μg/ml聚(谷氨酸/酪氨酸4∶1)(Sigma)。
終止溶液30％三氯乙酸，0.2M焦磷酸鈉(均來自Fisher)。
洗滌溶液15％三氯乙酸，0.2M焦磷酸鈉。
過濾平板Millipore #MAFC NOB，GF/C玻璃纖維96孔平板。
方法A-蛋白質純化1、將Sf21細胞用重組病毒感染，感染復數為5個病毒顆粒/細胞，在27℃生長48小時。
2、所有步驟都在4℃進行。在1000xg離心收獲已感染的細胞，用1/10體積的溶解緩沖液在4℃溶解30分鐘，繼之以在100000xg離心1小時。然后使上清液通過用溶解緩沖液平衡過的谷胱甘肽瓊脂糖酸(Pharmacia)，用5體積的同一緩沖液繼之以5體積的洗滌緩沖液洗滌。將重組GST-KDR蛋白用洗滌緩沖液/10mM還原型谷胱甘肽(Sigma)洗脫，對透析緩沖液透析。
方法B-VEGF受體激酶測定1、在50％DMSO中的測定溶液中加入5μl抑制劑或對照。
2、加入35μl反應混合物，其中含有5μl 10x反應緩沖液、5μl 25mMATP/10μCi[33p]ATP(Amersham)和5μl 10x底物。
3、加入10μl KDR(25nM)的酶稀釋緩沖溶液開始反應。
4、在室溫混合并溫育15分鐘。
5、加入50μl終止溶液終止反應。
6、在4℃溫育15分鐘。
7、轉移90μl等分試樣至過濾平板。
8、抽吸，用洗滌溶液洗滌3次。
9、加入30μl閃爍合劑，密封平板，在Wallace Microbeta閃爍計數器中計數。
人臍靜脈內皮細胞致有絲分裂作用測定介導對生長因子的致有絲分裂反應的VEGF受體的表達在很大程度上受限于血管內皮細胞。人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)在培養物中響應于VEGF處理而增殖，可以用作測定系統以量化KDR激酶抑制劑對VEGF刺激的效應。在所述測定法中，將靜息HUVEC單層用載體或供試化合物處理，2小時后加入VEGF或堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)。通過測量[3H]胸苷向細胞DNA的摻入，測定對VEGF或bFGF的致有絲分裂反應。
材料HUVEC從Clonetics Corp.獲得作為原代培養分離株冷凍的HUVEC。在內皮生長培養基(EGM；Clonetics)中獲得細胞，第3-7代用于致有絲分裂測定。
培養平板NUNCLON 96-孔聚苯乙烯組織培養平板(NUNC #167008)。
測定培養基Dulbecco改性Eagle培養基，其中含有1g/ml葡萄糖(低葡萄糖DMEM；Mediatech)加10％(v/v)胎牛血清(Clonetics)。
供試化合物將供試化合物的儲備溶液系列稀釋在100％二甲基亞砜(DMSO)中，直到400倍于它們的所需最終濃度。在向細胞加入前不久，在測定培養基中進行最終稀釋至1x濃度。
10x生長因子在測定培養基中制備人VEGF 165溶液(500ng/ml；R & D Systems)和bFGF溶液(10ng/ml；R & D Systems)。
10x[3H]胸苷
將[甲基-3H]胸苷(20Ci/mmol；Dupont-NEN)在低葡萄糖DMEM培養基中稀釋至80μCi/ml。
細胞洗滌培養基Hank平衡鹽溶液(Mediatech)，其中含有1mg/ml牛血清白蛋白(Boehringer-Mannheim)。
細胞溶解溶液1N NaOH，2％(w/v)Na2CO3。
方法1通過胰蛋白酶化作用收獲在EGM中供養的HUVEC單層，平板接種在96-孔平板中，密度為4000細胞每100μl測定培養基每孔。在37℃和含有5％CO2的潮濕氣氛中，阻止細胞生長達24小時。
方法2將生長阻止培養基用100μl測定培養基代替，所述測定培養基含有載體(0.25％[v/v]DMSO)或所需最終濃度的供試化合物。所有測定都進行一式三份。然后將細胞在37℃/5％CO2下溫育2小時，以允許供試化合物進入細胞。
方法32小時預處理階段后，加入10μl/孔測定培養基、10x VEGF溶液或10xbFGF溶液刺激細胞。然后在37℃/5％ CO2下溫育細胞。
方法4在生長因子的存在下24小時后，加入10x[3H]胸苷(10μl/孔)。
方法5加入[3H]胸苷后三天，抽吸除去培養基，將細胞用細胞洗滌培養基洗滌兩次(400μl/孔繼之以200μl/孔)。然后加入細胞溶解溶液(100μl/孔)，在37℃加熱30分鐘，使經洗滌的粘附細胞增溶。將細胞溶解產物轉移至含有150μl水的7ml玻璃閃爍小瓶。加入閃爍合劑(5ml/瓶)，借助液體閃爍分光術測定與細胞締合的放射性。
根據這些測定法，式I化合物是VEGF的抑制劑，因而適合于抑制血管生成，例如治療眼部疾病，例如糖尿病性視網膜病，和用于治療癌，例如實體腫瘤。本發明化合物抑制培養物中VEGF-刺激的人血管內皮細胞致有絲分裂作用，IC50值為0.01-5.0μM。這些化合物也顯示相對于相關酪氨酸激酶的選擇性(例如FGFR1和Src家族；關于Src激酶與VEGFR激酶之間的關系，參見Eliceiri等人，Molecular Cell，Vol.4，915-924頁，1999年12月)。
TIE-2試驗例如可以類似于WO 02/44156所示方法進行。
該測定法測定在放射性33P-ATP的存在下，供試物質對底物聚(Glu，Tyr)被TIE-2激酶磷酸化的抑制活性。在溫育期間，磷酸化的底物與“快速平板(flashplate)”微量滴定平板的表面結合。除去反應混合物后，將微量滴定平板洗滌數次，隨后測量其表面上的放射性。供試物質的抑制效應導致放射性低于未受干擾的酶反應。
上下文中的所有溫度均以℃表示。下列實施例中，“常規操作”表示如果必要的話加入水，如果必要的話調節pH至2與10之間的數值，這依賴于終產物的構成，將混合物用乙酸乙酯或二氯甲烷萃取，分離各相，有機相經硫酸鈉干燥，蒸發，產物經過硅膠色譜和/或結晶純化。硅膠上的Rf值；洗脫劑乙酸乙酯/甲醇9∶1。
質譜(MS) EI(電子撞擊電離)M+FAB(快速原子轟擊)(M+H)+ESI(電子噴射電離)(M+H)+APCI-MS(大氣壓化學電離-質譜)(M+H)+實施例11-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(2-甲氧基-5-三氟甲基苯基)脲(A1)的制備類似于下列流程進行。
1.1 1-[4-(叔丁氧羰基氨基)苯基]-3-(2-甲氧基-5-三氟甲基苯基)脲的制備將0.597g 2-甲氧基-5-三氟甲基苯胺溶于10ml二氯甲烷，加入0.665g氯甲酸4-硝基苯基酯，然后滴加0.27ml吡啶。將全部混合物在室溫攪拌3.5h。然后加入0.625g N-Boc-苯二胺，將混合物用10ml二氯甲烷沖洗，滴加1.02ml N-乙基二異丙基胺。將澄清的暗色溶液在室溫攪拌2h。抽吸濾出所沉積的沉淀，用CH2Cl2然后用石油醚充分洗滌，得到610mg白色固體物質；HPLC-MS[M+H]+426。
1.2 1-(4-氨基苯基)-3-(2-甲氧基-5-三氟甲基苯基)脲的制備向0.61g上述化合物加入14ml 2M HCl的二烷溶液。生成實際上澄清的溶液。約20min后，生成沉淀。將混合物在室溫攪拌過夜。抽吸濾出固體，用石油醚沖洗，得到500mg所需化合物。
1.3 1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(2-甲氧基-5-三氟甲基苯基)脲的制備將0.139g 2-氨基氰基乙酰胺與20ml乙腈和0.25ml原甲酸三乙酯合并，使混合物回流2h。將澄清的溶液冷卻至室溫，加入在1.2下制備的0.571g化合物和0.21ml三乙胺。使混合物回流過夜。除去溶劑，得到0.91g粗產物。使殘余物從CH2Cl2和少量MeOH中結晶，再次用石油醚洗滌，最終得到510mg所需化合物“A1”；APCI-MS[M+H]+435。
類似合成所有下列化合物。
如果必要的話借助色譜或制備型HPLC進行純化，條件是色譜柱RP18(7μm)Lichrosorb 250x25洗脫劑A98H2O，2 CH3CN，0.1％TFAB10H2O，90CH3CN，0.1％TFAUV225nm流速 10ml/min經過制備型HPLC純化得到化合物，一般為TFA鹽。
實施例2類似地得到下列化合物1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲，APCI-MS(M+H)+423；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(4-氟-3-三氟甲基苯基)脲，APCI-MS(M+H)+423；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-甲基苯基)脲，APCI-MS(M+H)+369；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-2-甲基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲，APCI-MS(M+H)+436；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(4-氯-3-三氟甲基苯基)脲，APCI-MS(M+H)+439；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(3-三氟甲基苯基)脲，APCI-MS(M+H)+405；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(3-甲基苯基)脲，APCI-MS(M+H)+351；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(4-氯-6-甲氧基-3-甲基苯基)脲，APCI-MS(M+H)+415；
1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(5-氟-3-三氟甲基苯基)脲，APCI-MS(M+H)+423；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-2-乙基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-2-叔丁基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲；1-[4-(5-二甲氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲；1-[4-(5-氨基-4-氰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-[6-(2-二甲氨基乙氧基)-3-三氟甲基苯基]脲；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-{6-[2-(嗎啉-4-基)乙氧基]-3-三氟甲基苯基}脲；5-氨基-1-[4-(2-氟-5-三氟甲基苯甲酰氨基)苯基]-1H-咪唑-4-甲酰胺 5-氨基-1-[4-(2-氟-5-三氟甲基苯基氨甲酰基)苯基]-1H-咪唑-4-甲酰胺 實施例35-氨基-1-[4-(2-氟-5-三氟甲基苯甲酰氨基)苯基]-1H-咪唑-4-甲酰胺的制備類似于下列流程進行
1、將1.60g N-Boc-1，4-苯二胺與100ml DMF和1-97g 2-氯-1-甲基吡啶碘化物合并，在50℃加熱2h。生成澄清的黃-褐色溶液，向其中加入1.76g 2-氟-5-(三氟甲基)苯甲酸和13ml N-乙基二異丙基胺。將全部混合物在室溫攪拌過夜。在旋轉蒸發器中蒸發溶劑至干。向剩余的油加入70ml乙酸乙酯和70ml水。水相再次用50ml乙酸乙酯萃取。合并有機相，用100ml飽和NaCl溶液萃取。將溶液用Na2SO4干燥，隨后過濾，蒸發，得到2.64g[4-(2-氟-5-三氟甲基苯甲酰氨基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯。該物質經過快速色譜純化，用CH2Cl2/MeOH 97∶3洗脫(30ml級分)，得到0.54g純化產物。
2、將0.54g上述產物溶于25ml 2M HCl/二烷。將全部混合物在室溫攪拌過夜。抽吸濾出沉淀產物，用石油醚沖洗，風干，得到0.3g N-(4-氨基苯基)-2-氟-5-三氟甲基苯甲酰胺。
3、將0.089g 2-氨基氰基乙酰胺與20ml乙腈和0.18ml原甲酸三乙酯合并，回流2h。使澄清的溶液冷卻至室溫。加入0.3g上述苯甲酰胺和0.15ml三乙胺，使混合物回流過夜。將混合物冷卻至室溫，在旋轉蒸發器中蒸發至干，得到0.49g粗產物。該粗產物借助制備型HPLC純化
色譜柱RP18(7μm)Lichrosorb 250x25(Art.No.151494)洗脫劑A98H2O，2CH3CN，0.1％TFAB10H2O，90CH3CN，0.1％TFAUV225nm；1個量程流速 10ml/min(1個級分＝1分鐘)梯度 0min 25％ B5min 25％ B50min 90％ B70min 95％ B合并所需級分，蒸發，冷凍干燥，得到58mg所需化合物 APCI-MS[M+H]+408。
實施例4類似于實施例1，隨后使游離氨基咪唑化合物與當量的酸反應，得到下列鹽形式1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲對甲苯磺酸鹽，APCI-MS(M+H)+423；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(4-氟-3-三氟甲基苯基)脲對甲苯磺酸鹽，APCI-MS(M+H)+423；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-甲基苯基)脲對甲苯磺酸鹽，APCI-MS(M+H)+369；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(2-甲氧基-5-三氟甲基苯基)脲對甲苯磺酸鹽，APCI-MS(M+H)+435；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(3-三氟甲基苯基)脲對甲苯磺酸鹽，APCI-MS(M+H)+405；
1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲甲磺酸鹽，APCI-MS(M+H)+423；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲樟腦磺酸鹽，APCI-MS(M+H)+423；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲檸檬酸鹽，APCI-MS(M+H)+423；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲硫酸鹽，APCI-MS(M+H)+423；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(5-氟-3-三氟甲基苯基)脲對甲苯磺酸鹽，APCI-MS(M+H)+423；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-2-甲基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲對甲苯磺酸鹽，APCI-MS(M+H)+437；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(3-叔丁基苯基)脲對甲苯磺酸鹽，APCI-MS(M+H)+393；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(3-三氟甲氧基苯基)脲對甲苯磺酸鹽，APCI-MS(M+H)+421；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-2-甲基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(3-三氟甲氧基苯基)脲對甲苯磺酸鹽，APCI-MS(M+H)+435。
下列實施例涉及藥品實施例A注射小瓶將100g式I活性成分與5g磷酸氫二鈉的3L重蒸餾水溶液用2N鹽酸調至pH6.5，無菌過濾，轉移至注射小瓶，在無菌條件下凍干，在無菌條件下密封。每支注射小瓶含有5mg活性成分。
實施例B栓劑將20g式I活性成分與100g大豆卵磷脂和1400g可可脂的混合物熔化，倒入模具內，冷卻。每支栓劑含有20mg活性成分。
實施例C溶液制備1g式I活性成分、9.38g NaH2PO42H2O、28.48g Na2HPO412H2O與0.1g苯扎氯銨在940ml重蒸餾水中的溶液。調節pH至6.8，將溶液加至1L，照射滅菌。該溶液可以用作滴眼劑。
實施例D軟膏劑將500mg式I活性成分與99.5g凡士林在無菌條件下混合。
實施例E片劑將1kg式I活性成分、4kg乳糖、1.2kg馬鈴薯淀粉、0.2kg滑石與0.1kg硬脂酸鎂的混合物按常規方式壓制成片，以便每片含有10mg活性成分。
實施例F糖衣丸(dragee)類似于實施例E壓制片劑，隨后按常規方式用蔗糖、馬鈴薯淀粉、滑石、黃蓍膠與染劑的包衣料包衣。
實施例G膠囊劑將2kg式I活性成分按常規方式裝入硬明膠膠囊內，以便每粒膠囊含有20mg活性成分。
實施例H安瓿劑將1kg式I活性成分在60L重蒸餾水中的溶液無菌過濾，轉移至安瓿內，在無菌條件下冷凍干燥，在無菌條件下密封。每支安瓿含有10mg活性成分。
權利要求
1.式I化合物 其中R1、R2、R3、R4、R5各自彼此獨立地表示H、A、OH、OA、鏈烯基、炔基、NO2、NH2、NHA、NA2、Hal、CN、COOH、COOA、-OHet、-O-亞烷基-Het、-O-亞烷基-NR10R11或CONR10R11，選自R1、R2、R3、R4、R5的兩個相鄰基團一起也表示-O-CH2-CH2-、-O-CH2-O-或-O-CH2-CH2-O-，R6、R7各自彼此獨立地表示H、A、Hal、OH、OA或CN，R8表示CN、COOH、COOA、CONH2、CONHA或CONA2，R9表示H或A，R10、R11各自彼此獨立地表示H或A，Het表示單環或二環的飽和、不飽和或芳族雜環，具有1至4個N、O和/或S原子，該環可以是未取代的或者被Hal、A、OA、COOA、CN和/或羰基氧(＝O)單-、二-或三-取代，A表示具有1至10個C原子的烷基，另外，其中1-7個H原子可以被F和/或氯代替，X、X’各自彼此獨立地表示NH或者不存在，Hal表示F、Cl、Br或I，及其藥學可用衍生物、溶劑合物、鹽和立體異構體，包括其任意比例的混合物。
2.根據權利要求1的化合物，其中X不存在或者表示NH，X’表示NH，及其藥學可用衍生物、溶劑合物、鹽和立體異構體，包括其任意比例的混合物。
3.根據權利要求1或2的化合物，其中R1、R2、R3、R4、R5各自彼此獨立地表示H、A、OH、OA、NO2、NH2、NHA、NA2、Hal、CN、-OHet、-O-亞烷基-Het或-O-亞烷基-NR10R11，及其藥學可用衍生物、溶劑合物、鹽和立體異構體，包括其任意比例的混合物。
4.根據權利要求1-3一項或多項的化合物，其中Het表示單環的飽和雜環，具有1至3個N、O和/或S原子，該環是未取代的或者可以被COOA單取代，及其藥學可用衍生物、溶劑合物、鹽和立體異構體，包括其任意比例的混合物。
5.根據權利要求1-4一項或多項的化合物，其中R6、R7表示H，及其藥學可用衍生物、溶劑合物、鹽和立體異構體，包括其任意比例的混合物。
6.根據權利要求1-5一項或多項的化合物，其中R8表示CONH2或CN，及其藥學可用衍生物、溶劑合物、鹽和立體異構體，包括其任意比例的混合物。
7.根據權利要求1-6一項或多項的化合物，其中X不存在或者表示NH，X’表示NH，R1、R2、R3、R4、R5各自彼此獨立地表示H、A、OH、OA、NO2、NH2、NHA、NA2、Hal、CN、-OHet、-O-亞烷基-Het或-O-亞烷基-NR10R11，Het表示單環的飽和雜環，具有1至3個N、O和/或S原子，該環是未取代的或者可以被COOA單取代，R6、R7表示H，R8表示CONH2或CN，及其藥學可用衍生物、溶劑合物、鹽和立體異構體，包括其任意比例的混合物。
8.根據權利要求1-7一項或多項的化合物，其中X不存在或者表示NH，X’表示NH，R1、R2、R3、R4、R5各自彼此獨立地表示H、A、OH、OA、NO2、NH2、NHA、NA2、Hal、CN、-OHet、-O-亞烷基-Het或-O-亞烷基-NR10R11，R6、R7表示H，R8表示CONH2或CN，Het表示哌啶基、吡咯烷基、嗎啉基或哌嗪基，它們各自是未取代的或者被COOA單取代，及其藥學可用衍生物、溶劑合物、鹽和立體異構體，包括其任意比例的混合物。
9.根據權利要求1-8一項或多項的化合物，其中X、X’各自彼此獨立地表示NH或者不存在，R1、R2、R3、R4、R5各自彼此獨立地表示H、A、OH、OA、Hal、-O-亞烷基-Het或-O-亞烷基-NR10R11，R6、R7表示H，R8表示CONH2或CN，R9表示H或A，R10、R11各自彼此獨立地表示H或A，Het表示哌啶基、吡咯烷基、嗎啉基或哌嗪基，它們各自是未取代的或者被COOA單取代，A表示具有1至10個C原子的烷基，另外，其中1-7個H原子可以被F和/或氯代替，Hal表示F、Cl、Br或I，及其藥學可用衍生物、溶劑合物、鹽和立體異構體，包括其任意比例的混合物。
10.根據權利要求1的化合物，選自下組1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(2-甲氧基-5-三氟甲基苯基)脲；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(4-氟-3-三氟甲基苯基)脲；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-甲基苯基)脲；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-2-甲基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(4-氯-3-三氟甲基苯基)脲；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(3-三氟甲基苯基)脲；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(3-甲基苯基)脲；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(4-氯-6-甲氧基-3-甲基苯基)脲；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(5-氟-3-三氟甲基苯基)脲；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-2-乙基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-2-叔丁基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲；1-[4-(5-二甲氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲；1-[4-(5-氨基-4-氰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-[6-(2-二甲氨基乙氧基)-3-三氟甲基苯基]脲；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-{6-[2-(嗎啉-4-基)乙氧基]-3-三氟甲基苯基}脲；5-氨基-1-[4-(2-氟-5-三氟甲基苯甲酰氨基)苯基]-1H-咪唑-4-甲酰胺；5-氨基-1-[4-(2-氟-5-三氟甲基苯基氨甲酰基)苯基]-1H-咪唑-4-甲酰胺；5-氨基-1-[4-(2-氟-5-三氟甲基苯甲酰氨基)苯基]-1H-咪唑-4-酰胺，及其藥學可用衍生物、溶劑合物、鹽和立體異構體，包括其任意比例的混合物。
11.制備根據權利要求1-10的式I化合物及其藥學可用衍生物、鹽、溶劑合物和立體異構體的方法，其特征在于a)關于制備其中X、X’表示NH的式I化合物，使式II化合物 其中R6、R7、R8、R9、R10和R11具有如權利要求1所示含義，與式III化合物反應， 其中R1、R2、R3、R4和R5具有如權利要求1所示含義，或者b)關于制備其中X、X’表示NH的式I化合物，使式IV化合物 其中R1、R2、R3、R4和R5具有如權利要求1所示含義，與氯甲酸酯衍生物反應，得到中間體氨基甲酸酯衍生物，隨后使其與式II化合物反應，或者c)關于制備式I化合物，其中R8表示CN、COOA、CONH2、CONHA或CONA2，R10、R11表示H，使式V化合物 其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、X和X’具有如權利要求1所示含義，與式VI化合物反應，R8-CH(NH2)-CNVI其中R8表示CN、COOA、CONH2、CONHA或CONA2，并與式VII化合物反應，CR9(OA’)3VII其中R9具有如權利要求1所示含義，A’表示具有1、2、3、4、5或6個C原子的烷基，或者d)關于制備其中X不存在、X’表示NH的式I化合物，使式II化合物與式VIII化合物反應， 其中R1、R2、R3、R4和R5具有如權利要求1所示含義，L表示Cl、Br、I或者游離或經過反應性官能修飾的OH基團，或者e)將其中R10、R11表示H的式I化合物通過烷基化轉化為其中R10、R11表示A的式I化合物，和/或將式I的堿或酸轉化為它的鹽之一。
12.藥品，包含至少一種根據權利要求1的式I化合物和/或其藥學可用衍生物、鹽、溶劑合物和立體異構體、包括其任意比例的混合物，以及可選地賦形劑和/或助劑。
13.根據權利要求1的化合物及其藥學可用衍生物、鹽、溶劑合物和立體異構體、包括其任意比例的混合物的用途，用于制備治療激酶信號轉導的抑制、調節和/或調控在其中扮演角色的疾病的藥品。
14.根據權利要求13的用途，其中該激酶選自酪氨酸激酶和Raf激酶。
15.根據權利要求14的用途，其中該酪氨酸激酶是TIE-2、VEGFR、PDGFR、FGFR和/或FLT/KDR。
16.根據權利要求14的根據權利要求1的化合物及其藥學可用衍生物、鹽、溶劑合物和立體異構體、包括其任意比例的混合物的用途，用于制備治療受到根據權利要求1的化合物抑制酪氨酸激酶的影響的疾病的藥品。
17.根據權利要求16的用途，用于制備治療受到根據權利要求1的化合物抑制TIE-2、VEGFR、PDGFR、FGFR和/或FLT/KDR的影響的疾病的藥品。
18.根據權利要求16或17的用途，其中所要治療的疾病是實體腫瘤。
19.根據權利要求18的用途，其中該實體腫瘤發源于鱗狀上皮、膀胱、胃、腎、頭頸、食道、子宮頸、甲狀腺、腸、肝、腦、前列腺、泌尿生殖道、淋巴系統、胃、喉和/或肺的腫瘤。
20.根據權利要求18的用途，其中該實體腫瘤發源于單核細胞性白血病、肺腺癌、小細胞性肺癌、胰腺癌、成膠質細胞瘤和乳腺癌。
21.根據權利要求18的用途，其中該實體腫瘤發源于肺腺癌、小細胞性肺癌、胰腺癌、成膠質細胞瘤、結腸癌和乳腺癌。
22.根據權利要求16或17的用途，其中所要治療的疾病是血液和免疫系統的腫瘤。
23.根據權利要求22的用途，其中該腫瘤發源于急性髓性白血病、慢性髓性白血病、急性淋巴性白血病和/或慢性淋巴性白血病。
24.根據權利要求16或17的用途，用于治療其中牽連有血管生成的疾病。
25.根據權利要求24的用途，其中該疾病是眼部疾病。
26.根據權利要求16或17的用途，用于治療視網膜血管化、糖尿病性視網膜病、衰老-誘發的黃斑變性和/或炎性疾病。
27.根據權利要求26的用途，其中該炎性疾病發源于類風濕性關節炎、銀屑病、接觸性皮炎和遲發型過敏反應。
28.根據權利要求16或17的用途，用于治療骨病變，其中該骨病變發源于骨肉瘤、骨關節炎和佝僂病。
29.根據權利要求1的式I化合物和/或其生理學可接受鹽和溶劑合物的用途，用于制備治療實體腫瘤的藥品，其中治療有效量的式I化合物與選自如下的化合物聯合給予1)雌激素受體調控劑，2)雄激素受體調控劑，3)類視色素受體調控劑，4)細胞毒性劑，5)抗增殖劑，6)異戊二烯基-蛋白轉移酶抑制劑，7)HMG-CoA還原酶抑制劑，8)HIV蛋白酶抑制劑，9)逆轉錄酶抑制劑和10)另外的血管生成抑制劑。
30.根據權利要求1的式I化合物和/或其生理學可接受鹽和溶劑合物的用途，用于制備治療實體腫瘤的藥品，其中治療有效量的式I化合物與放療和選自如下的化合物聯合給予1)雌激素受體調控劑，2)雄激素受體調控劑，3)類視色素受體調控劑，4)細胞毒性劑，5)抗增殖劑，6)異戊二烯基-蛋白轉移酶抑制劑，7)HMG-CoA還原酶抑制劑，8)HIV蛋白酶抑制劑，9)逆轉錄酶抑制劑和10)另外的血管生成抑制劑。
31.根據權利要求16或17的用途，用于制備治療基于TIE-2活性紊亂的疾病的藥品，其中聯合給予治療有效量的根據權利要求1的化合物與生長因子受體抑制劑。
32.根據權利要求13或14的式I化合物的用途，用于制備治療由Raf激酶所導致、介導和/或傳播的疾病的藥品。
33.根據權利要求32的用途，其中該Raf激酶選自A-Raf、B-Raf和Raf-1。
34.根據權利要求32的用途，其中該疾病選自過度增殖性和非過度增殖性疾病。
35.根據權利要求32或34的用途，其中該疾病是癌癥。
36.根據權利要求32或34的用途，其中該疾病是非癌性的。
37.根據權利要求32、34或36的用途，其中該非癌性疾病選自銀屑病、關節炎、炎癥、子宮內膜異位、瘢痕形成、良性前列腺增生、免疫學疾病、自體免疫疾病和免疫缺陷疾病。
38.根據權利要求32、34或35的用途，其中該疾病選自腦癌、肺癌、鱗狀細胞癌、膀胱癌、胃癌、胰腺癌、肝癌、腎癌、結腸直腸癌、乳腺癌、頭癌、頸癌、食道癌、婦科癌癥、甲狀腺癌、淋巴瘤、慢性白血病和急性白血病。
全文摘要
本發明涉及式(I)化合物，其中R
文檔編號A61K31/4164GK1938282SQ200580010619
公開日2007年3月28日 申請日期2005年3月15日 優先權日2004年3月29日
發明者G·赫爾策曼, H·格拉西爾, A·約恩齊克, W·施特勒, A·蘇特, W·勞滕貝格, F·米蒂亞斯, E·羅澤爾－維韋斯, J·阿丹, M·索萊爾列拉 申請人:默克專利有限公司