專利名稱：從高良姜中提取二芳基庚烷類化合物的方法
技術領域：
本發明涉及一種從中藥中提取化合物的方法，特別是涉及一種從高良姜中提取二芳基庚烷類化合物的方法。
背景技術：
中藥高良姜是常用中藥之一，具有溫胃、祛風、散寒、行氣、止痛之功效。民間大量用于調味料。臨床常用于脘腹寒痛、胃寒嘔吐、消化不良、暖氣吞酸等病癥的治療。現代化學和藥理研究表明高良姜化學成分復雜，藥理活性強，有較強的抗潰瘍、抗腹瀉、利膽、鎮痛、消炎、抗缺氧、抗凝、抗血栓形成等作用。多年臨床證明，高良姜療效確切，應用廣泛，近年來開發出多種劑型應用于臨床并且收到了較好的療效。
目前尚未見到有關從高良姜中提取抗白色念珠菌有效化學成分的公開報道。
發明內容
本發明目的在于提供一種從高良姜中提取二芳基庚烷類化合物7-(4-羥苯基)-1-苯基-4-烯-3-庚酮的方法。
本發明的第二個目的是提供一種從高良姜中提取二芳基庚烷類化合物5-羥基-1-(4-羥苯基)-7-苯基-3-庚酮的方法。
本發明的第三個目的是提供一種從高良姜中提取二芳基庚烷類化合物1-(4-羥基-3-甲氧基苯基)-7-(4-羥苯基)-3，5-二羥基庚烷的方法。
本發明的技術方案概述如下從高良姜中提取二芳基庚烷類化合物7-(4-羥苯基)-1-苯基-4-烯-3-庚酮的方法，包括如下步驟(1)將高良姜藥材粉碎，每次加2-8質量倍的體積百分濃度為60％-98％的乙醇水溶液，加熱回流5-7小時，提取液濾過，提取1-3次，濾液減壓濃縮至50℃時相對密度為1.05-1.20的浸膏，加所述浸膏質量3-6倍的蒸餾水溶解，用三氯甲烷萃取2～4次，萃取液減壓濃縮，將濃縮后的萃取液經硅膠柱層析分離，用體積比為4∶1，3∶1，2∶1，1∶1，1∶2，1∶3的石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，得AO0101-AO0133共33個組分；(2)將所述AO0110和AO0111合并，硅膠柱層析，以體積比為98∶2的氯仿-甲醇洗脫，通過TLC合并類似流分后，得AO0501-AO0506共6組分，將所述AO0503進行Toyopearl HW-40C柱層析，得AO0507-AO0512共6組分，將所述AO0508以反相制備HPLC，體積比為95∶5的甲醇-水洗脫，分離得到AO2105-AO2104共2組分，所述AO2105為7-(4-羥苯基)-1-苯基4-烯-3-庚酮。
二芳基庚烷類化合物7-(4-羥苯基)-1-苯基-4-烯-3-庚酮步驟(1)優選的提取方法是將高良姜藥材粉碎，每次加4-6質量倍的體積百分濃度為75％的乙醇水溶液，加熱回流6小時，提取液濾過，提取2次，濾液減壓濃縮至50℃時相對密度為1.10的浸膏，加所述浸膏質量4倍的蒸餾水溶解，用三氯甲烷萃取3次，萃取液減壓濃縮，將濃縮后的萃取液經硅膠柱層析分離，用體積比為4∶1，3∶1，2∶1，1∶1，1∶2，1∶3的石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，得AO0101-AO0133共33個組分。
從高良姜中提取二芳基庚烷類化合物5-羥基-1-(4-羥苯基)-7-苯基-3-庚酮的方法，包括如下步驟(1)將高良姜藥材粉碎，每次加2-8質量倍的體積百分濃度為60％-98％的乙醇水溶液，加熱回流5-7小時，提取液濾過，提取1-3次，濾液減壓濃縮至50℃時相對密度為1.05-1.20的浸膏，加所述浸膏質量3-6倍的蒸餾水溶解，用三氯甲烷萃取2～4次，萃取液減壓濃縮，將濃縮后的萃取液經硅膠柱層析分離，用體積比為4∶1，3∶1，2∶1，1∶1，1∶2，1∶3的石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，得AO0101-AO0133共33個組分；(2)將所述AO0110和AO0111合并，硅膠柱層析，以體積比為98∶2的氯仿-甲醇洗脫，通過TLC合并類似流分后，得AO0501-AO0506共6組分，將所述AO0503進行Toyopearl HW-40C柱層析，得AO0507-AO0512共6組分，將所述AO0508以反相制備HPLC，體積比為95∶5的甲醇-水洗脫，分離得到AO2105-AO2104共2組分，所述AO2104以正相HPLC純化，用體積比為3∶2的石油醚-乙酸乙酯洗脫，得到化合物AO2210，所述AO2210為5-羥基-1-(4-羥苯基)-7-苯基-3-庚酮。
二芳基庚烷類化合物5-羥基-1-(4-羥苯基)-7-苯基-3-庚酮步驟(1)優選的提取方法是將高良姜藥材粉碎，每次加4-6質量倍的體積百分濃度為75％的乙醇水溶液，加熱回流6小時，提取液濾過，提取2次，濾液減壓濃縮至50℃時相對密度為1.10的浸膏，加所述浸膏質量4倍的蒸餾水溶解，用三氯甲烷萃取3次，萃取液減壓濃縮，將濃縮后的萃取液經硅膠柱層析分離，用體積比為4∶1，3∶1，2∶1，1∶1，1∶2，1∶3的石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，得AO0101-AO0133共33個組分。
從高良姜中提取二芳基庚烷類化合物1-(4-羥基-3-甲氧基苯基)-7-(4-羥苯基)-3，5-二羥基庚烷的方法，包括如下步驟(1)將高良姜藥材粉碎，每次加2-8質量倍的體積百分濃度為60％-98％的乙醇水溶液，加熱回流5-7小時，提取液濾過，提取1-3次，濾液減壓濃縮至50℃時相對密度為1.05-1.20的浸膏，加所述浸膏質量3-6倍的蒸餾水溶解，用三氯甲烷萃取2～4次，萃取液減壓濃縮，將濃縮后的萃取液經硅膠柱層析分離，用體積比為4∶1，3∶1，2∶1，1∶1，1∶2，1∶3的石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，得AO0101-AO0133共33個組分；(2)將所述AO0121和AO0122合并，進行硅膠柱層析，以體積比為96∶4，93∶7，9∶1氯仿-甲醇洗脫，得AO1401-AO1405共5組分，將所述AO1404以Toyopearl HW-40C分離，得AO1601-AO1605共5組分，將AO1605以反相制備HPLC，體積比為9∶1的甲醇-水洗脫，純化，得到化合物AO1703，所述AO1703為1-(4-羥基-3-甲氧基苯基)-7-(4-羥苯基)-3，5-二羥基庚烷。
二芳基庚烷類化合物1-(4-羥基-3-甲氧基苯基)-7-(4-羥苯基)-3，5-二羥基庚烷步驟(1)優選的提取方法是將高良姜藥材粉碎，每次加4-6質量倍的體積百分濃度為75％的乙醇水溶液，加熱回流6小時，提取液濾過，提取2次，濾液減壓濃縮至50℃時相對密度為1.10的浸膏，加所述浸膏質量4倍的蒸餾水溶解，用三氯甲烷萃取3次，萃取液減壓濃縮，將濃縮后的萃取液經硅膠柱層析分離，用體積比為4∶1，3∶1，2∶1，1∶1，1∶2，1∶3的石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，得AO0101-AO0133共33個組分。
本發明優點在于提取工藝簡單，活性成分損失較少，將傳統的高良姜飲片經現代分離方法，提取其抗白色念珠菌有效化學成分，為開發新型抗真菌藥物奠定了基礎。
具體實施例方式
下面結合具體實施例對發明作進一步的說明。
實施例1從高良姜中提取二芳基庚烷類化合物7-(4-羥苯基)-1-苯基4-烯-3-庚酮的方法，包括如下步驟(1)將1公斤高良姜藥材粉碎(于2004年3月購自天津中藥飲片廠，由天津醫科大學生藥學教研室鑒定)，加4公斤體積百分濃度為95％的乙醇水溶液，加熱回流6小時，提取液濾過，提取2次，濾液減壓濃縮至50℃時相對密度為1.10的浸膏，加所述浸膏質量4倍的蒸餾水溶解，用三氯甲烷萃取3次，萃取液減壓濃縮，將濃縮后的萃取液經硅膠柱層析分離，用體積比為4∶1，3∶1，2∶1，1∶1，1∶2，1∶3的石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，得AO0101-AO0133共33個組分；(2)將所述AO0110和AO0111合并，硅膠柱層析，以體積比為98∶2的氯仿-甲醇洗脫，通過TLC合并類似流分后，得AO0501-AO0506共6組分，將所述AO0503進行Toyopearl HW-40C柱層析，得AO0507-AO0512共6組分，將所述AO0508以反相制備HPLC，體積比為95∶5的甲醇-水洗脫，分離得到AO2105-AO2104共2組分，所述AO2105經各種有機波譜解析和文獻數據比較，鑒定化合物為7-(4-羥苯基)-1-苯基4-烯-3-庚酮。
AO2105實施例2從高良姜中提取二芳基庚烷類化合物7-(4-羥苯基)-1-苯基-4-烯-3-庚酮的方法，包括如下步驟(1)將1公斤高良姜藥材粉碎，加6公斤體積百分濃度為75％的乙醇水溶液，加熱回流5小時，提取液濾過，提取3次，濾液減壓濃縮至50℃時相對密度為1.05的浸膏，加所述浸膏質量5倍的蒸餾水溶解，用三氯甲烷萃取2次，萃取液減壓濃縮，將濃縮后的萃取液經硅膠柱層析分離，用體積比為4∶1，3∶1，2∶1，1∶1，1∶2，1∶3的石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，得AO0101-AO0133共33個組分；(2)將所述AO0110和AO0111合并，硅膠柱層析，以體積比為98∶2的氯仿-甲醇洗脫，通過TLC合并類似流分后，得AO0501-AO0506共6組分，將所述AO0503進行Toyopearl HW-40C柱層析，得AO0507-AO0512共6組分，將所述AO0508以反相制備HPLC，體積比為95∶5的甲醇-水洗脫，分離得到AO2105-AO2104共2組分，所述AO2105為7-(4-羥苯基)-1-苯基-4-烯-3-庚酮。
實施例3從高良姜中提取二芳基庚烷類化合物7-(4-羥苯基)-1-苯基4-烯-3-庚酮的方法，包括如下步驟(1)將1公斤高良姜藥材粉碎，加2公斤體積百分濃度為98％的乙醇水溶液，加熱回流7小時，提取液濾過，提取1次，濾液減壓濃縮至50℃時相對密度為1.20的浸膏，加所述浸膏質量3倍的蒸餾水溶解，用三氯甲烷萃取4次，萃取液減壓濃縮，將濃縮后的萃取液經硅膠柱層析分離，用體積比為4∶1，3∶1，2∶1，1∶1，1∶2，1∶3的石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，得AO0101-AO0133共33個組分；(2)將所述AO0110和AO0111合并，硅膠柱層析，以體積比為98∶2的氯仿-甲醇洗脫，通過TLC合并類似流分后，得AO0501-AO0506共6組分，將所述AO0503進行Toyopearl HW-40C柱層析，得AO0507-AO0512共6組分，將所述AO0508以反相制備HPLC，體積比為95∶5的甲醇-水洗脫，分離得到AO2105-AO2104共2組分，所述AO2105為7-(4-羥苯基)-1-苯基-4-烯-3-庚酮。
實施例4從高良姜中提取二芳基庚烷類化合物7-(4-羥苯基)-1-苯基-4-烯-3-庚酮的方法，包括如下步驟(1)將1公斤高良姜藥材粉碎，加8公斤體積百分濃度為60％的乙醇水溶液，加熱回流6小時，提取液濾過，提取2次，濾液減壓濃縮至50℃時相對密度為1.10的浸膏，加所述浸膏質量6倍的蒸餾水溶解，用三氯甲烷萃取3次，萃取液減壓濃縮，將濃縮后的萃取液經硅膠柱層析分離，用體積比為4∶1，3∶1，2∶1，1∶1，1∶2，1∶3的石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，得AO010l-AO0133共33個組分；(2)將所述AO0110和AO0111合并，硅膠柱層析，以體積比為98∶2的氯仿-甲醇洗脫，通過TLC合并類似流分后，得AO0501-AO0506共6組分，將所述AO0503進行Toyopearl HW-40C柱層析，得AO0507-AO0512共6組分，將所述AO0508以反相制備HPLC，體積比為95∶5的甲醇-水洗脫，分離得到AO2105-AO2104共2組分，所述AO2105為7-(4-羥苯基)-1-苯基-4-烯-3-庚酮。
實施例5從高良姜中提取二芳基庚烷類化合物5-羥基-1-(4-羥苯基)-7-苯基-3-庚酮的方法，包括如下步驟(1)將1公斤高良姜藥材粉碎，加4公斤的體積百分濃度為95％的乙醇水溶液，加熱回流6小時，提取液濾過，提取2次，濾液減壓濃縮至50℃時相對密度為1.10的浸膏，加所述浸膏質量4倍的蒸餾水溶解，用三氯甲烷萃取3次，萃取液減壓濃縮，將濃縮后的萃取液經硅膠柱層析分離，用體積比為4∶1，3∶1，2∶1，1∶1，1∶2，1∶3的石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，得AO0101-AO0133共33個組分；(2)將所述AO0110和AO0111合并，硅膠柱層析，以體積比為98∶2的氯仿-甲醇洗脫，通過TLC合并類似流分后，得AO0501-AO0506共6組分，將所述AO0503進行Toyopearl HW-40C柱層析，得AO0507-AO0512共6組分，將所述AO0508以反相制備HPLC，體積比為95∶5的甲醇-水洗脫，分離得到AO2105-AO2104共2組分，所述AO2104以正相HPLC純化，用體積比為3∶2的石油醚-乙酸乙酯洗脫，得到化合物AO2210，所述AO2210經各種有機波譜解析和文獻數據比較，鑒定化合物為5-羥基-1-(4-羥苯基)-7-苯基-3-庚酮。
AO2210實施例6從高良姜中提取二芳基庚烷類化合物5-羥基-1-(4-羥苯基)-7-苯基-3-庚酮的方法，包括如下步驟(1)將1公斤高良姜藥材粉碎，加6公斤的體積百分濃度為75％的乙醇水溶液，加熱回流7小時，提取液濾過，提取1次，濾液減壓濃縮至50℃時相對密度為1.05的浸膏，加所述浸膏質量5倍的蒸餾水溶解，用三氯甲烷萃取2次，萃取液減壓濃縮，將濃縮后的萃取液經硅膠柱層析分離，用體積比為4∶1，3∶1，2∶1，1∶1，1∶2，1∶3的石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，得AO0101-AO0133共33個組分；(2)將所述AO0110和AO0111合并，硅膠柱層析，以體積比為98∶2的氯仿-甲醇洗脫，通過TLC合并類似流分后，得AO0501-AO0506共6組分，將所述AO0503進行Toyopearl HW-40C柱層析，得AO0507-AO0512共6組分，將所述AO0508以反相制備HPLC，體積比為95∶5的甲醇-水洗脫，分離得到AO2105-AO2104共2組分，所述AO2104以正相HPLC純化，用體積比為3∶2的石油醚-乙酸乙酯洗脫，得到化合物AO2210，所述AO2210為5-羥基-1-(4-羥苯基)-7-苯基-3-庚酮。
實施例7從高良姜中提取二芳基庚烷類化合物5-羥基-1-(4-羥苯基)-7-苯基-3-庚酮的方法，包括如下步驟(1)將1公斤高良姜藥材粉碎，加2公斤的體積百分濃度為98％的乙醇水溶液，加熱回流5小時，提取液濾過，提取3次，濾液減壓濃縮至50℃時相對密度為1.20的浸膏，加所述浸膏質量6倍的蒸餾水溶解，用三氯甲烷萃取4次，萃取液減壓濃縮，將濃縮后的萃取液經硅膠柱層析分離，用體積比為4∶1，3∶1，2∶1，1∶1，1∶2，1∶3的石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，得AO0101-AO0133共33個組分；(2)將所述AO0110和AO0111合并，硅膠柱層析，以體積比為98∶2的氯仿-甲醇洗脫，通過TLC合并類似流分后，得AO0501-AO0506共6組分，將所述AO0503進行Toyopearl HW-40C柱層析，得AO0507-AO0512共6組分，將所述AO0508以反相制備HPLC，體積比為95∶5的甲醇-水洗脫，分離得到AO2105-AO2104共2組分，所述AO2104以正相HPLC純化，用體積比為3∶2的石油醚-乙酸乙酯洗脫，得到化合物AO2210，所述AO2210為5-羥基-1-(4-羥苯基)-7-苯基-3-庚酮。
實施例8從高良姜中提取二芳基庚烷類化合物5-羥基-1-(4-羥苯基)-7-苯基-3-庚酮的方法，包括如下步驟(1)將1公斤高良姜藥材粉碎，加8公斤的體積百分濃度為60％的乙醇水溶液，加熱回流6小時，提取液濾過，提取2次，濾液減壓濃縮至50℃時相對密度為1.10的浸膏，加所述浸膏質量3倍的蒸餾水溶解，用三氯甲烷萃取3次，萃取液減壓濃縮，將濃縮后的萃取液經硅膠柱層析分離，用體積比為4∶1，3∶1，2∶1，1∶1，1∶2，1∶3的石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，得AO0101-AO0133共33個組分；(2)將所述AO0110和AO0111合并，硅膠柱層析，以體積比為98∶2的氯仿-甲醇洗脫，通過TLC合并類似流分后，得AO0501-AO0506共6組分，將所述AO0503進行Toyopearl HW-40C柱層析，得AO0507-AO0512共6組分，將所述AO0508以反相制備HPLC，體積比為95∶5的甲醇-水洗脫，分離得到AO2105-AO2104共2組分，所述AO2104以正相HPLC純化，用體積比為3∶2的石油醚-乙酸乙酯洗脫，得到化合物AO2210，所述AO2210為5-羥基-1-(4-羥苯基)-7-苯基-3-庚酮。
實施例9從高良姜中提取二芳基庚烷類化合物1-(4-羥基-3-甲氧基苯基)-7-(4-羥苯基)-3，5-二羥基庚烷的方法，包括如下步驟(1)將1公斤高良姜藥材粉碎，加4公斤的體積百分濃度為95％的乙醇水溶液，加熱回流6小時，提取液濾過，提取2次，濾液減壓濃縮至50℃時相對密度為1.10的浸膏，加所述浸膏質量4倍的蒸餾水溶解，用三氯甲烷萃取2～4次，萃取液減壓濃縮，將濃縮后的萃取液經硅膠柱層析分離，用體積比為4∶1，3∶1，2∶1，1∶1，1∶2，1∶3的石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，得AO0101-AO0133共33個組分；
(2)將所述AO0121和AO0122合并，進行硅膠柱層析，以體積比為96∶4，93∶7，9∶1氯仿-甲醇洗脫，得AO1401-AO1405共5組分，將所述AO1404以Toyopearl HW-40C分離，得AO1601-AO1605共5組分，將AO1605以反相制備HPLC，體積比為9∶1的甲醇-水洗脫，純化，得到化合物AO1703，所述AO1703經各種有機波譜解析和文獻數據比較，鑒定化合物為1-(4-羥基-3-甲氧基苯基)-7-(4-羥苯基)-3，5-二羥基庚烷。
AO1703實施例10從高良姜中提取二芳基庚烷類化合物1-(4-羥基-3-甲氧基苯基)-7-(4-羥苯基)-3，5-二羥基庚烷的方法，包括如下步驟(1)將1公斤高良姜藥材粉碎，加6公斤的體積百分濃度為75％的乙醇水溶液，加熱回流6小時，提取液濾過，提取1次，濾液減壓濃縮至50℃時相對密度為1.20的浸膏，加所述浸膏質量5倍的蒸餾水溶解，用三氯甲烷萃取4次，萃取液減壓濃縮，將濃縮后的萃取液經硅膠柱層析分離，用體積比為4∶1，3∶1，2∶1，1∶1，1∶2，1∶3的石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，得AO0101-AO0133共33個組分；(2)將所述AO0121和AO0122合并，進行硅膠柱層析，以體積比為96∶4，93∶7，9∶1氯仿-甲醇洗脫，得AO1401-AO1405共5組分，將所述AO1404以Toyopearl HW-40C分離，得AO1601-AO1605共5組分，將AO1605以反相制備HPLC，體積比為9∶1的甲醇-水洗脫，純化，得到化合物AO1703，所述AO1703為1-(4-羥基-3-甲氧基苯基)-7-(4-羥苯基)-3，5-二羥基庚烷。
實施例11從高良姜中提取二芳基庚烷類化合物1-(4-羥基-3-甲氧基苯基)-7-(4-羥苯基)-3，5-二羥基庚烷的方法，包括如下步驟(1)將1公斤高良姜藥材粉碎，加2公斤的體積百分濃度為98％的乙醇水溶液，加熱回流7小時，提取液濾過，提取3次，濾液減壓濃縮至50℃時相對密度為1.05的浸膏，加所述浸膏質量3倍的蒸餾水溶解，用三氯甲烷萃取2次，萃取液減壓濃縮，將濃縮后的萃取液經硅膠柱層析分離，用體積比為4∶1，3∶1，2∶1，1∶1，1∶2，1∶3的石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，得AO0101-AO0133共33個組分；(2)將所述AO0121和AO0122合并，進行硅膠柱層析，以體積比為96∶4，93∶7，9∶1氯仿-甲醇洗脫，得AO1401-AO1405共5組分，將所述AO1404以Toyopearl HW-40C分離，得AO1601-AO1605共5組分，將AO1605以反相制備HPLC，體積比為9∶1的甲醇-水洗脫，純化，得到化合物AO1703，所述AO1703為1-(4-羥基-3-甲氧基苯基)-7-(4-羥苯基)-3，5-二羥基庚烷。
實施例12從高良姜中提取二芳基庚烷類化合物1-(4-羥基-3-甲氧基苯基)-7-(4-羥苯基)-3，5-二羥基庚烷的方法，包括如下步驟(1)將1公斤高良姜藥材粉碎，加8公斤的體積百分濃度為60％的乙醇水溶液，加熱回流5小時，提取液濾過，提取2次，濾液減壓濃縮至50℃時相對密度為1.10的浸膏，加所述浸膏質量6倍的蒸餾水溶解，用三氯甲烷萃取3次，萃取液減壓濃縮，將濃縮后的萃取液經硅膠柱層析分離，用體積比為4∶1，3∶1，2∶1，1∶1，1∶2，1∶3的石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，得AO0101-AO0133共33個組分；(2)將所述AO0121和AO0122合并，進行硅膠柱層析，以體積比為96∶4，93∶7，9∶1氯仿-甲醇洗脫，得AO1401-AO1405共5組分，將所述AO1404以Toyopearl HW-40C分離，得AO1601-AO1605共5組分，將AO1605以反相制備HPLC，體積比為9∶1的甲醇-水洗脫，純化，得到化合物AO1703，所述AO1703為1-(4-羥基-3-甲氧基苯基)-7-(4-羥苯基)-3，5-二羥基庚烷。
實施例13各化合物的抑菌活性以上各單體化合物經體外紙片法抑菌實驗研究表明，均具有抗白色念珠菌(Candidaalbicans)活性，其最低抑菌濃度(MIC)如下
參考文獻(1)Hideh Itokawa，Hiroshi Morita，Ikuko Midorikawa.Diarylheptanoids from the Rhizome ofAlpinia officinarum Hance.Chem.Pharm.Bull.，1985，33(11)4889～4893(2)Katharina Bratt，Kerstin Sunnerheim.Synthesis and digestibility inhibitin ofdiarylheptanoidsstructure-activity.J.Chem.Eco.，1999，25(12)2703～2713(3)Akihito Yokosuka，Yoshihiro Mimaki，Hiroshi Sakagami，et al.New diarylheptanoids anddiarylheptanoid glucosides from the Rhizomes of Tacca chantrieri and their cytotoxicactivity.J.Nat.Prod.，2002，65(3)283～289
權利要求
1.從高良姜中提取二芳基庚烷類化合物7-(4-羥苯基)-1-苯基-4-烯-3-庚酮的方法，其特征是包括如下步驟(1)將高良姜藥材粉碎，每次加2-8質量倍的體積百分濃度為60％-98％的乙醇水溶液，加熱回流5-7小時，提取液濾過，提取1-3次，濾液減壓濃縮至50℃時相對密度為1.05-1.20的浸膏，加所述浸膏質量3-6倍的蒸餾水溶解，用三氯甲烷萃取2～4次，萃取液減壓濃縮，將濃縮后的萃取液經硅膠柱層析分離，用體積比為4∶1，3∶1，2∶1，1∶1，1∶2，1∶3的石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，得AO0101-AO0133共33個組分；(2)將所述AO0110和AO0111合并，硅膠柱層析，以體積比為98∶2的氯仿-甲醇洗脫，通過TLC合并類似流分后，得AO0501-AO0506共6組分，將所述AO0503進行Toyopearl HW-40C柱層析，得AO0507-AO0512共6組分，將所述AO0508以反相制備HPLC，體積比為95∶5的甲醇-水洗脫，分離得到AO2105-AO2104共2組分，所述AO2105為7-(4-羥苯基)-1-苯基-4-烯-3-庚酮。
2.根據權利要求1所述的一種從高良姜中提取二芳基庚烷類化合物7-(4-羥苯基)-1-苯基-4-烯-3-庚酮的方法，其特征是所述步驟(1)為將高良姜藥材粉碎，每次加4-6質量倍的體積百分濃度為75％的乙醇水溶液，加熱回流6小時，提取液濾過，提取2次，濾液減壓濃縮至50℃時相對密度為1.10的浸膏，加所述浸膏質量4倍的蒸餾水溶解，用三氯甲烷萃取3次，萃取液減壓濃縮，將濃縮后的萃取液經硅膠柱層析分離，用體積比為4∶1，3∶1，2∶1，1∶1，1∶2，1∶3的石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，得AO0101-AO0133共33個組分。
3.從高良姜中提取二芳基庚烷類化合物5-羥基-1-(4-羥苯基)-7-苯基-3-庚酮的方法，其特征是包括如下步驟(1)將高良姜藥材粉碎，每次加2-8質量倍的體積百分濃度為60％-98％的乙醇水溶液，加熱回流5-7小時，提取液濾過，提取1-3次，濾液減壓濃縮至50℃時相對密度為1.05-1.20的浸膏，加所述浸膏質量3-6倍的蒸餾水溶解，用三氯甲烷萃取2～4次，萃取液減壓濃縮，將濃縮后的萃取液經硅膠柱層析分離，用體積比為4∶1，3∶1，2∶1，1∶1，1∶2，1∶3的石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，得AO0101-AO0133共33個組分；(2)將所述AO0110和AO0111合并，硅膠柱層析，以體積比為98∶2的氯仿-甲醇洗脫，通過TLC合并類似流分后，得AO0501-AO0506共6組分，將所述AO0503進行Toyopearl HW-40C柱層析，得AO0507-AO0512共6組分，將所述AO0508以反相制備HPLC，體積比為95∶5的甲醇-水洗脫，分離得到AO2105-AO2104共2組分，所述AO2104以正相HPLC純化，用體積比為3∶2的石油醚-乙酸乙酯洗脫，得到化合物AO2210，所述AO2210為5-羥基-1-(4-羥苯基)-7-苯基-3-庚酮。
4.根據權利要求3所述的一種從高良姜中提取二芳基庚烷類化合物5-羥基-1-(4-羥苯基)-7-苯基-3-庚酮的方法，其特征是所述步驟(1)為將高良姜藥材粉碎，每次加4-6質量倍的體積百分濃度為75％的乙醇水溶液，加熱回流6小時，提取液濾過，提取2次，濾液減壓濃縮至50℃時相對密度為1.10的浸膏，加所述浸膏質量4倍的蒸餾水溶解，用三氯甲烷萃取3次，萃取液減壓濃縮，將濃縮后的萃取液經硅膠柱層析分離，用體積比為4∶1，3∶1，2∶1，1∶1，1∶2，1∶3的石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，得AO0101-AO0133共33個組分。
5.從高良姜中提取二芳基庚烷類化合物1-(4-羥基-3-甲氧基苯基)-7-(4-羥苯基)-3，5-二羥基庚烷的方法，其特征是包括如下步驟(1)將高良姜藥材粉碎，每次加2-8質量倍的體積百分濃度為60％-98％的乙醇水溶液，加熱回流5-7小時，提取液濾過，提取1-3次，濾液減壓濃縮至50℃時相對密度為1.05-1.20的浸膏，加所述浸膏質量3-6倍的蒸餾水溶解，用三氯甲烷萃取2～4次，萃取液減壓濃縮，將濃縮后的萃取液經硅膠柱層析分離，用體積比為4∶1，3∶1，2∶1，1∶1，1∶2，1∶3的石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，得AO0101-AO0133共33個組分；(2)將所述AO0121和AO0122合并，進行硅膠柱層析，以體積比為96∶4，93∶7，9∶1氯仿-甲醇洗脫，得AO1401-AO1405共5組分，將所述AO1404以Toyopearl HW-40C分離，得AO1601-AO1605共5組分，將AO1605以反相制備HPLC，體積比為9∶1的甲醇-水洗脫，純化，得到化合物AO1703，所述AO1703為1-(4-羥基-3-甲氧基苯基)-7-(4-羥苯基)-3，5-二羥基庚烷。
6.根據權利要求5所述的一種從高良姜中提取二芳基庚烷類化合物1-(4-羥基-3-甲氧基苯基)-7-(4-羥苯基)-3，5-二羥基庚烷的方法，其特征是所述步驟(1)為將高良姜藥材粉碎，每次加4-6質量倍的體積百分濃度為75％的乙醇水溶液，加熱回流6小時，提取液濾過，提取2次，濾液減壓濃縮至50℃時相對密度為1.10的浸膏，加所述浸膏質量4倍的蒸餾水溶解，用三氯甲烷萃取3次，萃取液減壓濃縮，將濃縮后的萃取液經硅膠柱層析分離，用體積比為4∶1，3∶1，2∶1，1∶1，1∶2，1∶3的石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，得AO0101-AO0133共33個組分。
全文摘要
本發明公開了一種從高良姜中提取二芳基庚烷類化合物的方法，其步驟將高良姜粉碎用醇提取，濾液濃縮，浸膏用水溶解后用三氯甲烷萃取，將濃縮后的萃取液經硅膠柱層析分離，用石油醚－乙酸乙酯梯度洗脫，得33個組分；將第10、11組分合并，硅膠柱層析，氯仿－甲醇洗脫，通過TLC合并類似流分后，得6個組分，將第3組分進行Toyopearl HW－40C柱層析，得6組分，將第2個組分以反相制備HPLC，95∶5甲醇－水洗脫，分離得到2組分，其中之一為7－(4－羥苯基)－1－苯基－4－烯－3－庚酮，本發明工藝簡單，活性成分損失少，高良姜經現代分離方法提取其抗白色念珠菌有效化學成分，為開發新型抗真菌藥物奠定了基礎。
文檔編號A61K36/9062GK1884246SQ20061001448
公開日2006年12月27日 申請日期2006年6月29日 優先權日2006年6月29日
發明者蔣伶活, 段宏泉, 呂瑋 申請人:天津大學