明黨參多糖硫酸酯化物和制備方法及其應用的制作方法

專利名稱：明黨參多糖硫酸酯化物和制備方法及其應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種天然多糖硫酸酯化物，具體地說是涉及一種從明黨參中提取的多糖，經硫酸酯化而制成的明黨參多糖硫酸酯化物及其制備方法和應用。
背景技術：
明黨參為傘形科單種屬植物明黨參Changium smyrnioides Wolff的干燥根。入藥始于明、清，用于“補肺氣通下行”(《本草從新》)；“治頭暈泛惡，中風昏仆”(《飲片新參》)；《中國藥典》收載，謂″潤肺化痰，養陰和胃，平肝，解毒″。明黨參為《中國藥典》收載常用中藥，特產江蘇，為地道藥材產區，有“獨峰明黨”的美譽，50～60年代大量出口越南等國，其強壯滋補作用已在東南亞一帶享有盛名。
天然多糖及其硫酸酯化物的概況隨著分子生物學的飛速發展，糖的生物功能已被逐步揭示和認識。多糖的糖鏈能控制細胞的分裂與分化，調節細胞的生長與衰老，能增強機體的免疫功能等。20世紀70年代，對多糖生物活性的研究領域日趨廣泛，相繼發現糖類物質具有抗炎、抗病毒、抗輻射、降血脂、抗水腫、抗消化性潰瘍、誘導干擾素產生、促進蛋白質、核酸生物合成等功能。80年代后，發現一些天然的或人工合成的多糖硫酸酯對艾滋病病毒有明顯的抑制作用，這引起了人們極大的關注與興趣。目前，全世界對糖類藥物的研制與開發空前活躍，有些藥物已投放市場，已從天然產物中分離出300種以上糖類化合物，并進行了生物功能的檢測。已有數種多糖類藥物用于臨床。
多糖是一類非特異性免疫增強化合物，能提高機體的免疫功能，增強抗病能力，有防老、防衰、防癌、抗癌、抗肝炎等作用，受到人們的普遍重視，得到了相應的研究和開發。含硫多糖，如硫酸軟骨素、肝素等還有抗凝血、抗病毒等其它生理功能。通過化學改造能使這些多糖硫酸酯化合物的毒性更低，活性更高。20世紀60年代以來陸續發現，一些半合成硫酸化多糖，如香菇多糖、右旋糖酐、牛膝多糖的硫酸化衍生物，是多種胞膜病毒的強大抑制劑，尤其是具有抗HIV-1的活性，還有葡聚糖經硫酸化也得到與肝素相同的抗凝血活性結果，引起更廣泛的重視。近幾年，還通過一些天然多糖的硫酸化得到了用途更為廣泛的多糖衍生物。在體內、外實驗中，硫酸化多糖均表現出良好的抗病毒作用，然而硫酸化多糖的免疫促進活性被認為是整體情況下抗病毒、抗腫瘤作用的重要機制之一，所以，日本學者研究了海藻中的天然硫酸化多糖，發現其在體內具有抗腫瘤作用，而體外無效(田庚元，李壽桐，宋麥麗，等.牛膝多糖硫酸酯的合成及其抗病毒活性[J].藥學學報，1995，30(2)107-111)。
天然肝素有抗HIV-1活性，但活性很低，通過化學結構修飾雖能除去其抗凝血活性，但卻無助于抗/01活性的提高，這是因為SO42-含量不足，通常認為每個單糖單位需要2~3個SO42-，才能有好的抗HIV-1活性，引起了藥物學家和微生物學家的極大興趣。同樣，只要有足夠的SO42-，葡聚糖也會具有抑制/01活性的作用。除了從已知的天然含硫多糖中篩選出抗HIV-1活性的藥物外，還由某些天然多糖如香菇多糖、右旋糖酐、牛膝多糖、地衣多糖、褐藻淀粉等制備硫酸化多糖，而且也還在不斷地尋找和開發新的含硫多糖，如從蘭藻中提取得到的含硫酸脂體等等。同時，除了多糖硫酸酯的抗病毒應用外，在治療心血管病上也得到了相應的開發。因此，采用適當的多糖母體(克服大多數多糖分子量大，難溶于水，難以通過血腦屏障等缺陷)制備高取代度的多糖硫酸酯并對其生物活性進行研究是一項有重要意義的工作。
硫酸化多糖的藥理活性 現今，多糖經硫酸化后的產物具有更多更好的藥理活性，一直受到人們的關注，下列幾種硫酸化多糖的藥理活性為其代表。香菇多糖硫酸酯具有良好的抗HIV活性。濃度為100mg/L、10mg/L時，其對鳥類成髓細胞性白血病病毒的逆錄酶的抑制率分別大于90％和70％。牛膝多糖硫酸酯(田庚元，李壽桐，宋麥麗，等.牛膝多糖硫酸酯的合成及其抗病毒活性[J].藥學學報，1995，30(2)107-111)在抗病毒實驗中表現出良好的抑制HBsAg、HBeAg病毒作用。當歸多糖硫酸酯對脾細胞增殖有較好的促進作用，促進作用與劑量成良好的正相關性(楊鐵虹.當歸多糖硫酸酯的合成及其對脾細胞增殖的作用[J].第四軍醫大學學報，2001，22(5)432-434)。虎奶多糖硫酸酯化修飾后水溶性得到很好的改善，對Fe2+引起的鼠肝線粒體脂質過氧化有較強的抑制作用，對O2-具有高效的清除作用，同時對OH引起的DNA損傷具有一定的保護作用，表明其有較好的抗氧化作用，也就是有可能在抗腫瘤、防衰老、抗炎癥、降血脂等方面發揮作用(鄧成華，等.硫酸酯化虎奶多糖的制備及其抗氧化作用研究[J].中國生化藥物雜志，2001，22(1)1-3)。鯊魚軟骨多糖硫酸酯化修飾后水溶性得到很好改善，并具有較強抗癌活性。褐藻淀粉硫酸酯[5]能增加小鼠腹腔巨噬細胞的吞噬功能；能增加小鼠血清中溶血素含量，具有增加體液免疫的功能；有一定促進淋巴細胞轉化的作用；對環磷酰胺引起的白細胞減少有明顯的對抗作用；能明顯延長凝血時間和凝血酶原時間；能明顯縮短優球蛋白溶解時間，表明能增強纖溶酶活性；有明顯降低血清膽固醇的作用，總之，其具有機體免疫功能促進作用及機體損傷保護作用，還對防治動脈粥樣硬化和血栓形成有著重要的意義(李東霞，等.SCAMP(鯊魚軟骨多糖)硫酸酯化多糖的制備及其光譜鑒定[J].光譜學與光譜分析，2002，22(1)59-62)。黃芪多糖硫酸酯通過對BHK細胞毒性作用實驗以及對HSV-1生物合成抑制作用的研究表明，體外抗HSV-1的作用優于阿昔洛韋且毒性更低，也表明其對病毒感染的臨床治療具有應用前景(馮秀梅，陳邦銀，張漢萍.黃芪多糖硫酸酯的合成及其抗病毒活性研究[J].中國藥科大學學報，2002，33(2)146-148)。
硫酸酯化多糖臨床應用前景 硫酸酯化多糖是一類化學結構復雜、生物活性多樣、療效關系明確的生物活性物質，其中抗凝血、抗血栓、降血脂活性研究較多，相關的藥物有的已經或即將進入臨床應用，而其抗病毒、抗腫瘤活性的研究相對較少，有的才剛剛開始，相信它將有很好的臨床應用前景(魏經建，等.硫酸酯化多糖化學及臨床應用研究進展[J].中國生化藥物雜志，1999，20(5)260-262.；董群，方積年.多糖在醫藥領域中的應用[J].中國藥學雜志，2001，36(10)649-651.)。
多糖硫酸酯化的方法 多糖硫酸酯化的方法很多，一般吡喃型多糖采用Wolfrom(Ueno Y，et al.An antitumor activity of the Sclertia of Griforaum bellate(Fr.)PILAT[J].Carbohydr Res，1982，101106-107.)方法，呋喃型采用Nagasawa(Adachi Y，et al.Physicochemical properties and antitumoractivities of chemical modified derivatives antitumor glucan“GriforaLE”from grifola frondasa[J].Chem Pharm Bull，1989，371838-1843.)方法。常用方法包括濃硫酸法、三氧化硫-吡啶法、氯磺酸-吡啶法[1]、三氧化硫-二甲基甲酰胺法等。最常用的方法有三種，其中第三種方法產物回收方便，收率較高，故很多研究中采用第三種方法。(1)濃硫酸法量取濃硫酸7.5ml，正丁醇2.5ml，置帶干燥管和攪拌裝置的三頸瓶中，再加入濃硫酸0.125g，攪拌，冰浴冷卻至0℃，徐徐加入多糖粉末0.5g，于0℃反應30分鐘左右。反應液經中和、離心后，用蒸餾水透析24h，減壓濃縮至20ml左右，加入乙醇，靜置后離心，收集沉淀物，將沉淀物溶解于水，再透析24h，透析液經冷凍干燥后得到硫酸化產物。(2)三氧化硫-吡啶法將吡啶30ml加入附有冷凝管和攪拌裝置的100ml三頸瓶中，邊攪拌邊加入三氧化硫-吡啶2.5～3.0g加畢，在熱水浴加熱至90℃，再加入多糖粉末0.5g，恒溫攪拌，冷至室溫，反應液用3mol/l的NaOH溶液調至中性，加入乙醇，析出多糖硫酸酯，離心，收集沉淀，將沉淀溶于水，透析72h，過濾，冷凍干燥得多糖硫酸化產物。(3)氯磺酸-吡啶法將附有冷凝管和攪拌裝置的三頸瓶置鹽水-冰浴中，加入吡啶，攪拌，使之充分冷卻，用滴液漏斗慢慢加入氯磺酸2～4ml，約30～40min滴加完畢，燒瓶中出現大量淡黃色固體，然后加入多糖粉末0.9g，迅速將三頸瓶移入沸水浴中，恒溫攪拌1h左右，冷至室溫，將反應液傾入冰水中，中和后加入乙醇，析出沉淀，將沉淀溶于水，透析72h，過濾，濾液經冷凍干燥后得多糖硫酸化產物。Jianhong Yang等報道的生漆多糖的硫酸酯化條件為162mg多糖懸浮于16.2mL二甲亞砜中，60℃或70℃下反應1～5小時，在較高溫度下降解較劇烈(Jianhong Yang etal.Biological Macromolecules，2002，3155-62)。

發明內容
1、發明目的本發明的目的在于提供一種明黨參多糖硫酸酯化物和制備方法及其在制備治療抗腫瘤和活血化瘀藥物中的應用。
2、技術方案本發明從明黨參(Changium smyrnioides Wolff)根部分離得明黨參粗多糖A、B、C，經進一步純化首次得到六個均一多糖I、II、III、IV、V、VI，經硫酸酯化得硫酸多糖A、B、C、A1、B1、C1，并從對A1部分進行了分離純化，得多糖VII。血液流變學試驗表明，各多糖都有活血化瘀功效；其中酯化多糖A1、B1比未酯化的多糖A、B作用強；而酯化多糖中B1比A1作用強。移植性腫瘤試驗表明，多糖A、B、A1、B1均有顯著的抗腫瘤作用，其中以B1抑瘤作用最強。
本發明的明黨參多糖硫酸酯化物，包括A1、B1、C1，其硫酸基含量分別為A152.62％，B162.35％，C140.16％，A1平均每個單糖上連接了兩個硫酸基，B1平均每個單糖上連接了三個硫酸基，C1平均每個單糖上連接了三個硫酸基，多糖硫酸酯化物A1的分子量超過200萬，由硫酸基葡萄糖組成，該糖的苷鍵構型為α構型。
本發明的明黨參多糖硫酸酯化物的制備方法步驟如下(1)明黨參多糖的提取取明黨參藥材，敲成小段，稱取475-525g置于燒瓶中，加入3800-4300ml 95％的乙 醇浸泡1-2h，然后于水浴鍋上回流2-4h，過濾，濾渣同上操作1次，再過濾，濾渣晾干，加入3800-4300ml蒸餾水煮沸1-2h，傾出提取液，離心；濾渣再加入2000ml蒸餾水煮沸2h，傾出提取液，離心(3000r·min-1)20min，棄去沉淀物，合并上清液，放于冰箱中過夜；將冰箱中的提取液抽濾，將濾液分置于兩個5000ml大燒杯中，于水浴上加熱，濃縮，至即將出現固體時停止加熱，加入濃縮液量的0.5-0.8倍的95％乙醇溶液，靜置過夜，離心，取離心沉淀物先后用無水乙醇、丙酮、乙醚洗滌，再于40℃真空干燥箱中干燥，即得30％醇沉多糖A粉末，同法操作將上清液分別調至50％、70％濃度的乙醇溶液，然后按上述方法即可分別得到50％、70％醇沉多糖B粉末和C粉末；(2)在三個500ml帶干燥管和攪拌裝置的三頸瓶中，各分別加入65-80ml濃硫酸，正丁醇20-28ml，再加入1.10-1.30g硫酸銨，攪拌，冰浴冷卻至0℃，徐徐各分別加入明黨參多糖A、B、C、粉末各9-11g；(3)各分別于0℃反應120min，分別得反應液，然后將各反應液分別用堿中和至PH值為7，分別離心后用蒸餾水透析24小時；(4)分別減壓濃縮，醇沉，靜置離心收集沉淀物，分別得到為硫酸酯化物A1、B1、C1。
上述步驟(3)中所述的堿為NaOH或KOH。
上述的明黨參多糖硫酸酯化物，在制備治療抗腫瘤藥物中的應用。
上述的明黨參多糖硫酸酯化物，在制備治療活血化瘀藥物中的應用。
3、有益效果本發明從明黨參(Changium smyrnioides Wolff)根部分離得明黨參多糖A、B、C，經進一步純化首次得到六個均一多糖I、II、III、IV、V、VI，經硫酸酯化得硫酸多糖A1、B1、C1，其硫酸基含量分別為A152.62％，B162.35％，C140.16％，A1平均每個單糖上連接了兩個硫酸基，B1平均每個單糖上連接了三個硫酸基，C1平均每個單糖上連接了三個硫酸基，多糖硫酸酯化物的分子量超過200萬，它由硫酸基葡萄糖組成，該糖的苷鍵構型為α構型。
明黨參多糖硫酸酯化物的制備方法是首先從明黨參藥材中提限多糖，然后將多糖硫酸酯化而制成。該制備工藝新穎簡單、成本低，經藥理活性試驗結果表明，明黨參多糖硫酸酯化物能顯著降低急性血瘀大鼠的血小板聚集率和全血黏度以及最大聚集指數，凝血時間明顯下降，血漿纖維蛋白明顯升高，對小鼠移植腫瘤(S-180)的抑制作用顯著，明黨參多糖硫酸酯化物A1、B1對腫瘤的抑制率分別為52.89％和56.25％。
具體實施例方式
實施例1明黨參多糖硫酸酯化物的制備方法，其制備方法的步驟如下(1)明黨參多糖的提取取明黨參藥材，敲成小段，稱取500g置于燒瓶中，加入4000ml 95％的乙醇浸泡1.5h，然后于水浴鍋上回流3h，過濾，濾渣同上操作1次，再過濾，濾渣晾干，加入4000ml蒸餾水煮沸2h，傾出提取液，離心；濾渣再加入2000ml蒸餾水煮沸2h，傾出提取液，離心(3000r·min-1)20min，棄去沉淀物，合并上清液，放于冰箱中過夜；將冰箱中的提取液抽濾，將濾液分置于兩個5000ml大燒杯中，于水浴上加熱，濃縮，至即將出現固體時停止加熱，加入濃縮液量的0.6倍的95％乙醇溶液，靜置過夜，離心，取離心沉淀物先后用無水乙醇、丙酮、乙醚洗滌，再于40℃真空干燥箱中干燥，即得30％醇沉多糖A粉末，同法操作將上清液分別調至50％、70％濃度的乙醇溶液，然后按上述方法即可分別得到50％、70％醇沉多糖B粉末和C粉末；(2)多糖的硫酸酯化量取75ml濃硫酸，正丁醇25ml，置于500ml帶干燥管和攪拌裝置的三頸瓶中，再加入1.25g硫酸銨，攪拌，冰浴冷卻至0℃，徐徐加入30％醇沉多糖(A)粉末10g，于0℃反應120分鐘，反應液用NaOH中和至PH7、離心后用蒸餾水透析24小時，減壓濃縮，醇沉，靜置離心收集沉淀物即為多糖硫酸酯化物(A1)；經硫酸基含量的測定為52.62％；實施例2明黨參多糖硫酸酯化物的制備方法，其制備方法的步驟如下(1)明黨參多糖的提取，同實施例1；(2)多糖的硫酸酯化量取75ml濃硫酸，正丁醇25ml，置于500ml帶干燥管和攪拌裝置的三頸瓶中，再加入1.25g硫酸銨，攪拌，冰浴冷卻至0℃，徐徐加入50％醇沉多糖(B)粉末10g，于0℃反應120分鐘，反應液用NaOH中和至PH7、離心后用蒸餾水透析24小時，減壓濃縮，醇沉，靜置離心收集沉淀物即為硫酸化產物(B1)，經硫酸基含量的測定為62.35％。
實施例3明黨參多糖硫酸酯化物的制備方法，其制備方法的步驟如下(1)明黨參多糖的提取，同實施例1；(2)多糖的硫酸酯化量取75ml濃硫酸，正丁醇25ml，置于500ml帶干燥管和攪拌裝置的三頸瓶中，再加入1.25g硫酸銨，攪拌，冰浴冷卻至0℃，徐徐加入70％醇沉多糖(C)粉末10g，于0℃反應120分鐘，反應液經中和、離心后用蒸餾水透析24小時，減壓濃縮，醇沉，靜置離心收集沉淀物即為硫酸化產物(C1)，經硫酸基含量的測定為40.16％。
實施例4明黨參多糖硫酸酯化物的藥理活性方法1各組連續灌胃7天，每日1次，在第7天灌胃30分鐘后，除空白組外，其余各組動物皮下注射鹽酸腎上腺素，4小時后再次皮下注射鹽酸腎上腺素，其間將動物置于冰水中5分鐘，復制急性血瘀模型大鼠。大鼠造模16小時后，以10％水合氯醛(300mg/kg，ip)，仰位固定，頸動脈插管放血，用3.8％的枸櫞酸鈉溶液以19抗凝，檢測血液流變血的各項指標。
對大鼠血小板聚集性的影響(1)將3.8％的枸櫞酸鈉抗凝的血液以800r/min離心10min，取富血小板血漿(RPP)，剩余部分以3000/min離心10min，取貧血小板血漿(PPP)，利用LG-PABER型血小板聚集及凝血因子分析儀記錄最大聚集率并按下列公式計算抑制率。
聚集抑制率(％)＝{(模型組最大聚集率-給藥組最大聚集率)/模型組最大聚集率}×100％表1明黨參多糖及其硫酸酯化物對急性血瘀模型大鼠血小板聚集率的影響

注與陰性對照組比較*P＜0.05。
與陽性對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01。
結果表明模型組大鼠的血小板聚集率明顯升高(與生理鹽水組比較，P＜0.05)。各明黨參多糖均能顯著降低急性血淤大鼠的血小板聚集率，A1作用稍弱(與模型組比較，P＜0.01)(2)血液粘度檢測a全血粘度將肝素抗凝的血液采用LG-R-80系列血液粘度儀測定。
表2明黨參多糖及其硫酸酯化物對急性血瘀模型大鼠全血黏度的影響

注與陰性對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01。
與陽性對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01。
結果表明急性血瘀模型大鼠的全血黏度明顯升高(與生理鹽水組比較P＜0.01)；明黨參多糖A，B能降低急性血瘀模型大鼠的全血黏度(200l/s)(與模型組比較，P＜0.05)；A1，B1均能顯著降低急性血瘀模型大鼠的全血黏度(5，30，or 200l/s)(與模型組比較，P＜0.05 or 0.01)。
(3)紅細胞變性能力、紅細胞聚集能力檢測將肝素抗凝的血液采用LG-R-190型紅細胞變形/聚集能力測定儀測定。
表3明黨參多糖及其硫酸酯化物對急性血瘀模型大鼠紅細胞變形及聚集能力的影響

注與陰性對照組比較**P＜0.01。
與陽性對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01。
實驗結果表明急性血瘀模型大鼠的紅細胞最大變形指數明顯下降(與生理鹽水組比較P＜0.05)，最大聚集指數明顯升高(與生理鹽水組比較P＜0.05)；明黨參多糖B，A1，B1均能顯著降低急性血瘀模型大鼠最大聚集指數(與模型組比較，P＜0.01)，多糖A則作用稍弱(P＜0.05)；而各多糖對急性血瘀模型大鼠的紅細胞最大變形指數無顯著作用。
(4)凝血系統的檢測將3.8％的枸櫞酸鈉抗凝的血液以3000r/min離心10min，分離貧血小板血漿，采用LG-PAPER型血小板聚集及凝血因子分析儀測定活化部分凝血酶原時間(PT)、血漿纖維蛋白原(FIB)。
表4明黨參多糖及其硫酸酯化物對急性血瘀模型大鼠凝血系統的影響

注與陰性對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01。
與陽性對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01。
實驗結果表明急性血瘀模型大鼠的PT明顯下降，FIB明顯升高(與生理鹽水組比較P＜0.05)；明黨參多糖A，B，A1，B1均能增加急性血瘀模型大鼠的PT(與模型組比較，P＜0.05)，B，B1能降低FIB(與模型組比較，分別為P＜0.05，0.01)；以B1作用好。
方法2取ICR小鼠72只，雄性，隨機分成6組。取生長良好的S-180肉瘤株的荷瘤小鼠(腹水型)在無菌條件下抽取腹水，以1∶3(V/V)生理鹽水稀釋，收取0.2ml(約107個)接種于每只小鼠右側腋窩皮下處，放在層流架中飼養。按下表劑量每日灌胃給藥一次，每日觀察小鼠腋下腫瘤生長情況，連續給藥八天后，頸椎脫臼處死，小心剝離瘤組織并稱重，按下計算。
抑瘤率＝(1-給藥組瘤重/模型組瘤重)×100％
表5明黨參多糖及其硫酸酯化物對小鼠移植性腫瘤(S-180)抑制作用

注與陽性對照組比較**P＜0.001。
表5明黨參硫酸酯化多糖對小鼠移植性腫瘤抑制作用(X±S，n＝10)

權利要求
1.一種明黨參多糖硫酸酯化物，其特征在于它包括A1、B1、C1，其硫酸基含量分別為A152.62％，B162.35％，C140.16％，A1平均每個單糖上連接了兩個硫酸基，B1平均每個單糖上連接了三個硫酸基，C1平均每個單糖上連接了三個硫酸基，多糖硫酸酯化物的分子量超過200萬，由硫酸基葡萄糖組成，該糖的苷鍵構型為α構型。
2.根據權利要求1所述的明黨參多糖硫酸酯化物的制備方法，其特征在于該方法的步驟如下(1)明黨參多糖的提取取明黨參藥材，敲成小段，稱取475-525g置于燒瓶中，加入3800-4300ml 95％的乙醇浸泡1-2h，然后于水浴鍋上回流2-4h，過濾，濾渣同上操作1次，再過濾，濾渣晾干，加入3800-4300ml蒸餾水煮沸1-2h，傾出提取液，離心；濾渣再加入2000ml蒸餾水煮沸2h，傾出提取液，離心(3000r·min-1)20min，棄去沉淀物，合并上清液，放于冰箱中過夜；將冰箱中的提取液抽濾，將濾液分置于兩個5000ml大燒杯中，于水浴上加熱，濃縮，至即將出現固體時停止加熱，加入濃縮液量的0.5-0.8倍的95％乙醇溶液，靜置過夜，離心，取離心沉淀物先后用無水乙醇、丙酮、乙醚洗滌，再于40℃真空干燥箱中干燥，即得30％醇沉多糖A粉末，同法操作將上清液分別調至50％、70％濃度的乙醇溶液，然后按上述方法即可分別得到50％、70％醇沉多糖B粉末和C粉末；(2)在三個500ml帶干燥管和攪拌裝置的三頸瓶中，各分別加入65-80ml濃硫酸，正丁醇20-28ml，再加入1.10-1.30g硫酸銨，攪拌，冰浴冷卻至0℃，徐徐各分別加入明黨參多糖A、B、C、粉末各9-11g；(3)各分別于0℃反應120min，分別得反應液，然后將各反應液分別用堿中和至PH值為7，分別離心后用蒸餾水透析24小時；(4)分別減壓濃縮，醇沉，靜置離心收集沉淀物，分別得到明黨參多糖硫酸酯化物A1、B1、C1。
3.根據權利要求2所述的明黨參多糖硫酸酯化物的制備方法，其特征在于在步驟(3)中所述的堿為NaOH或KOH。
4.權利要求1所述的明黨參多糖硫酸酯化物，在制備治療抗腫瘤藥物中的應用。
5.權利要求1所述的明黨參多糖硫酸酯化物，在制備治療活血化瘀藥物中的應用。
全文摘要
本發明從明黨參中提取分離出粗多糖A、B、C，經純化首次得到六個均一多糖I、II、III、IV、V、VI，再經硫酸酯化反應得明黨參多糖硫酸酯化物A
文檔編號A61K31/715GK1844160SQ20061003886
公開日2006年10月11日 申請日期2006年3月15日 優先權日2006年3月15日
發明者李祥, 陳建偉 申請人:南京中醫藥大學