專利名稱：治療上呼吸道感染等疾病的藥物制劑及制法和質控方法
技術領域：
本發明是一種治療上呼吸道感染等疾病的一清藥物制劑及制法和質控方法，屬于中藥的技術領域。
背景技術：
一清制劑是由黃連、黃芩、大黃等中藥組成的中藥復方制劑，具有清熱瀉火解毒、化瘀涼血、止血之功效，臨床上報道可用于治療急慢性上呼吸道感染、治療過敏性鼻炎、治療便秘和腸炎、治療癰腫瘡毒、口腔潰瘍、牙齦腫痛、水火燙傷、治療急性黃疸性肝炎、治療痔瘡出血、治療高脂血癥所致的高血壓、及輔助治療慢性腎臟病等。許多發明人及藥品企業對其做了大量的研究，也提供了一些治療的產品；如已上市的一清顆粒和一清膠囊，但是這些產品都存在一些問題，例如由于該方藥物味道極苦，顆粒劑加入了大量蔗糖矯味，不適合糖尿病患者長期服用；一清膠囊，崩解慢，生物利用度低、藥物穩定性不理想。黃芩苷是該制劑的主要成分，現代藥理研究表明黃芩苷具有較強的抗菌、消炎等作用。但黃芩苷水中溶解性小，吸收差，且性質不穩定，易氧化變質，因此使其制劑生物利用度差是現有產品的主要問題。而本申請人在對中國專利公報公開的專利申請號為“03124462.9”，名稱為“一清丸及制備方法”、專利申請號為“02113597.5”，名稱為“一種治療便秘的中藥膠囊的改進制備工藝”、專利申請號為“200410038829.7”，名稱為“一種中藥軟膠囊制劑的制備方法和質量控制方法”的專利申請進行研究過程中發現，丸劑保質期較短，不利于藥物的貯存與運輸；軟膠囊比普通膠囊的崩解度稍高，而且由于膠皮老化問題，經常出現崩解延遲現象，所以主要有效成分之一的黃芩苷在人體的吸收仍不是很理想；改進的膠囊技術通過噴霧干燥來改善崩解度，但是沒有噴霧干燥的工藝參數、具體工藝，根本無法實施。另外，現有的質量控制方法重復性、穩定性不好、指標單一，不能完全控制該制劑的質量，不能使消費者全面認識產品質地。鑒于這些情況，需要尋找一種治療效果理想，工藝先進，生物利用度高的新的藥物制劑以及這種制劑的制備方法、質量控制方法。
發明內容
本發明的目的在于提供一種治療上呼吸道感染等疾病的藥物制劑及制法和質控方法；制備成分散片、滴丸制劑；本發明提供的分散片，采用微丸制粒技術，產品崩解性好，提高了有效成分的生物利用度，特別適合于老年人及吞服藥片或膠囊有困難的患者服用；本發明提供的滴丸，提高藥物生物利用度，增加藥物溶解性、抗濕性；并且工藝成熟穩定，利于普及推廣。本發明的質量控制方法，向相關的生產、檢測機構提供了檢測的指標、檢測的手段、技術方法等等；能夠更好的控制該制劑的質量，保證用藥的安全性，更利于指導生產，使生產工藝控制更加嚴格合理，使消費者能全面認識產品質地。
本發明是這樣構成的它是用黃芩2425g加水煎煮二次，第一次加10倍水煎煮1.5小時，第二次加8倍水煎煮1小時，黃連1600g和大黃4850g分別加水煎煮二次，第一次加8倍水煎煮1.5小時，第二次加6倍水煎煮1小時，濾液減壓濃縮至70℃相對密度為1.25的清膏，減壓干燥成浸膏粉，將三種浸膏粉混勻制作成的注射液、粉針、凍干粉針、凝膠劑、分散片、膠囊劑、軟膠囊劑、微囊劑、顆粒劑、丸劑、微丸、散劑、滴丸劑、緩釋制劑、控釋制劑、凝膠劑、口服液體制劑、煎膏劑、浸膏劑或膜劑。準確的說所述制劑為滴丸劑、分散片劑或微丸劑。
所述制劑中的滴丸劑這樣制備它是用黃芩2425g加水煎煮二次，第一次加10倍水煎煮1.5小時，第二次加8倍水煎煮1小時，1600g黃連和4850g大黃分別加水煎煮二次，第一次加8倍水煎煮1.5小時，第二次加6倍水煎煮1小時，濾液減壓濃縮至70℃相對密度為1.25的清膏，減壓干燥成浸膏粉，將三種浸膏粉混勻，以聚乙二醇4000為基質，藥物與基質的配比為1∶1.5，混勻，滴入冷卻劑二甲硅油中，滴頭口徑為3.5/4.5、滴距為4～6cm、滴速30～40d/min、料溫70～80℃、冷卻液的溫度為10～20℃，即得。
分散片的制備是取黃芩加水煎煮二次，第一次加10倍水煎煮1.5小時，第二次加8倍水煎煮1小時，黃連和大黃分別加水煎煮二次，第一次加8倍水煎煮1.5小時，第二次加6倍水煎煮1小時，濾液減壓濃縮至70℃相對密度為1.25的清膏，減壓干燥成浸膏粉，將三種浸膏粉混勻，加入按藥物∶輔料比例為2∶1的低取代羥丙纖維素、按藥物輔料比例為1∶1的羧甲基淀粉鈉，混合均勻，過5號篩，用5％PVP醇溶液作潤濕劑制軟材，過2號篩制粒，60℃烘干，2號篩整粒，同時加入按藥物∶輔料比例為1∶2的低取代羥丙纖維素混勻后壓片，即得分散片。
所述的治療上呼吸道感染等疾病的一清藥物制劑的質量控制方法，它包括含量測定、鑒別等，該方法包括以下全部或部分內容(1)黃連藥材、大黃藥材、黃芩藥材、小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭、大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚、黃芩苷中全部或部分成分的鑒別測試方法；(2)小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭、大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚、黃芩苷中全部或部分成分的含量測試方法；(3)小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭、大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚、黃芩苷中全部或部分成分的溶出度測試方法。
所述藥物組合物的鑒別方法包括以下中的一種或幾種a、一清藥物制劑中黃連、小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭中一種或幾種的薄層色譜鑒別方法取待測藥物組合物適量，加醋酸乙酯或乙醇或甲醇或正丁醇提取，濾過，作為供試品溶液；另取黃連、小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭中的一種或幾種制備對照溶液；黃連對照藥材溶液的制備取黃連對照藥材適量，加醋酸乙酯或乙醇或甲醇或正丁醇提取，濾過，作為對照藥材溶液；對照品溶液的制備取鹽酸小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭中的一種或幾種對照品；分別加甲醇或乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；采用中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液和對照品溶液各1～30μl，分別點于同一硅膠G薄層板或硅膠H薄層板或硅膠GF254薄層板，以苯或甲苯或二甲苯-甲酸乙酯或醋酸乙酯或醋酸丁酯-甲醇或乙醇-異丙醇或丁酮-水或濃氨試液1～15∶0.5～10∶0.2～8∶0.2～5∶0.1～3或醋酸乙酯或甲酸乙酯-丁酮或異丙醇-甲酸或乙酸-水或濃氨試液2～30∶1～25∶0.2～5∶0.2～5或正丁醇-醋酸或甲酸-水或濃氨試液1～25∶0.1～5∶0.1～5為展開劑，展開或置氨蒸汽預飽和的展開缸內，展開，取出，晾干，置紫外燈365nm或254nm檢視或噴以2～20％變色酸-濃硫酸溶液或2～20％磷鉬酸乙醇溶液或茴香醛硫酸溶液，80℃～160℃烘至斑點顯色清晰或噴以碘化鉍鉀試液，供試品色譜中，在與對照藥材色譜或者對照品色譜相應的位置上，應顯相同顏色的斑點；b、一清藥物制劑中小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭中一種或幾種的液相色譜鑒別方法取待測藥物組合物適量，加甲醇或乙醇或流動相或水溶解或稀釋至合適濃度，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液；以鹽酸小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭中的一種或幾種對照品的甲醇或乙醇溶液為對照，采用液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠或八烷基硅烷鍵合硅膠或二烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇或乙腈-水或0.05％～10％冰醋酸水溶液或0.05％～10％甲酸水溶液或0.01％～5％磷酸水溶液或0.005mol/L～2mol/L磷酸二氫鈉溶液或0.005mol/L～2mol/L磷酸二氫鉀或0.005mol/L～2mol/L磷酸氫二鈉溶液或0.005mol/L～2mol/L磷酸氫二鉀溶液5％～95％∶95％～5％為流動相，檢測波長為200～410nm；供試品色譜中，應具與對照品色譜有保留時間一致的色譜峰；c、一清藥物制劑中大黃、大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚中一種或幾種的薄層色譜鑒別方法取待測藥物組合物適量，加甲醇或乙醇和鹽酸適量提取，提取液作為供試品溶液或取待測藥物組合物適量，加水溶解后再加鹽酸適量后回流提取，立即冷卻，用乙醚或三氯甲烷或石油醚提取，提取液揮干，殘渣用三氯甲烷溶解，作為供試品溶液；另取大黃對照藥材、大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚中的一種或幾種制備對照溶液；大黃對照藥材溶液的制備取大黃對照藥材適量，加甲醇或乙醇和鹽酸適量提取，提取液作為對照藥材溶液或取大黃對照藥材適量，加醋酸乙酯或乙醇或甲醇或正丁醇提取，濾過，濾液蒸干，殘渣加水溶解，再加鹽酸適量后回流提取，立即冷卻，用乙醚或三氯甲烷或石油醚提取，提取液揮干，殘渣用三氯甲烷溶解，作為對照藥材溶液；對照品溶液的制備取大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚中的一種或幾種對照品；分別加甲醇或乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；采用中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗，吸取上述溶液各1～30μl，分別點于同一硅膠G薄層板或硅膠H薄層板或硅膠GF254薄層板上，以30～60℃石油醚或60～90℃石油醚或乙醚或三氯甲烷-甲酸乙酯或醋酸乙酯或醋酸丁酯-甲酸或冰醋酸1～60∶1～20∶0.1～5的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈365nm或254nm下或氨蒸汽中熏后日光下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜、對照品色譜相應的位置上，應顯相同顏色斑點；d、一清藥物制劑中大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚中一種或幾種的液相色譜鑒別方法取待測藥物組合物適量，加甲醇和鹽酸適量提取，提取液作為供試品溶液或取待測藥物組合物適量，加3％～35％鹽酸適量溶解后加三氯甲烷或二氯甲烷適量，回流提取，放冷，分取三氯甲烷或二氯甲烷層，揮干溶劑，殘渣用甲醇或乙醇溶解，作為供試品溶液；以大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚中的一種或幾種對照品的甲醇或乙醇溶液為對照，采用液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠或八烷基硅烷鍵合硅膠或二烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇或乙腈-水或0.05％～5％冰醋酸水溶液或0.05％～5％甲酸水溶液或0.02％～5％磷酸水溶液5％～95％∶95％～5％為流動相，檢測波長為190～410nm，柱溫在20～60℃范圍內；供試品色譜中，應具與對照品色譜中的主峰有保留時間一致的色譜峰；e、一清藥物制劑中黃芩、黃芩苷中一種或幾種的薄層色譜鑒別方法取待測藥物組合物適量，加甲醇或乙醇和鹽酸適量提取，提取液作為供試品溶液；另取黃芩對照藥材、黃芩苷中的一種或幾種制備對照溶液；黃芩對照藥材溶液的制備取黃芩對照藥材適量，甲醇或乙醇和鹽酸適量提取，提取液作為對照藥材溶液；對照品溶液的制備取黃芩苷對照品；分別加甲醇或乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；采用中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗，吸取上述溶液各1～30μl，分別點于同一硅膠G薄層板或硅膠H薄層板或硅膠GF254薄層板或含1％～8％醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉溶液的硅膠G薄層板上，以甲酸乙酯或醋酸乙酯或醋酸丁酯-甲酸或冰醋酸-水1～30∶1～15∶0.1～10或甲酸乙酯或醋酸乙酯-丁酮-甲酸或冰醋酸-水1～30∶1～15∶0.1～5∶0.1～5為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈365nm或254nm下檢視或噴以0.2～10％三氯化鐵乙醇或甲醇溶液，供試品色譜中，在與對照藥材色譜、對照品色譜相應的位置上，應顯相同顏色斑點；f、一清藥物制劑中黃芩苷的液相色譜鑒別方法取待測藥物組合物適量，加甲醇或乙醇或流動相或水溶解或稀釋至合適濃度，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液；以黃芩苷對照品的甲醇或乙醇溶液為對照，采用液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠或八烷基硅烷鍵合硅膠或二烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇或乙腈-水或0.05％～10％冰醋酸水溶液或0.05％～10％甲酸水溶液或0.01％～5％磷酸水溶液或0.005mol/L～2mol/L并用磷酸調節pH2～5的磷酸二氫鈉溶液，或0.005mol/L～2mol/L并用磷酸調節pH2～5的磷酸二氫鉀溶液或0.005mol/L～2mol/L并用磷酸調節pH2～5的磷酸氫二鈉溶液或0.005mol/L～2mol/L并用磷酸調節pH2～5的磷酸氫二鉀溶液5％～95％∶95％～5％為流動相，檢測波長為200～410nm；供試品色譜中，應具與對照品色譜有保留時間一致的色譜峰。
準確的說所述藥物組合物的鑒別方法包括以下中的一種或幾種a、一清藥物制劑中黃連、小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭中一種或幾種的薄層色譜鑒別方法取待測藥物組合物適量，加甲醇提取，濾過，作為供試品溶液；另取黃連、小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭中的一種或幾種制備對照溶液；黃連對照藥材溶液的制備取黃連對照藥材適量，加甲醇提取，濾過，作為對照藥材溶液；對照品溶液的制備取鹽酸小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭中的一種或幾種對照品；分別加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；采用中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液和對照品溶液各2μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以苯-醋酸乙酯-甲醇-異丙醇-濃氨試液4∶3∶2∶1.5∶0.5為展開劑，置氨蒸汽預飽和的展開缸內，展開，取出，晾干，置紫外燈365nm檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜或者對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；b、一清藥物制劑中小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭中一種或幾種的液相色譜鑒別方法取待測藥物組合物適量，加甲醇稀釋至合適濃度，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液；以鹽酸小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭中的一種或幾種對照品的甲醇溶液為對照，采用液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，乙腈-0.05mol/L磷酸二氫鈉溶液30％∶70％為流動相，檢測波長為266nm；供試品色譜中，具與對照品色譜有保留時間一致的色譜峰；c、一清藥物制劑中大黃、大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚中一種或幾種的薄層色譜鑒別方法取待測藥物組合物適量，加甲醇和鹽酸適量提取，提取液作為供試品溶液；另取大黃對照藥材、大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚中的一種或幾種制備對照溶液；大黃對照藥材溶液的制備取大黃對照藥材適量，加甲醇和鹽酸適量提取，提取液作為對照藥材溶液；對照品溶液的制備取大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚中的一種或幾種對照品；分別加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；采用中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗，吸取上述溶液各2～5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以60～90℃的石油醚-甲酸乙酯-甲酸15∶5∶1的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置氨蒸汽中熏后日光下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜、對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色斑點；d、一清藥物制劑中大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚中一種或幾種的液相色譜鑒別方法取待測藥物組合物適量，加8％鹽酸適量溶解后加三氯甲烷適量，回流提取1小時，放冷，分取三氯甲烷層，揮干溶劑，殘渣用甲醇溶解，作為供試品溶液；以大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚中的一種或幾種對照品的甲醇溶液為對照，采用液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇-0.1％磷酸水溶液85％∶15％為流動相，檢測波長為254nm，柱溫30℃；供試品色譜中，具與對照品色譜中的主峰有保留時間一致的色譜峰；e、一清藥物制劑中黃芩、黃芩苷中一種或幾種的薄層色譜鑒別方法取待測藥物組合物適量，加甲醇和鹽酸適量提取，提取液作為供試品溶液；另取黃芩對照藥材、黃芩苷中的一種或幾種制備對照溶液；黃芩對照藥材溶液的制備取黃芩對照藥材適量，甲醇和鹽酸適量提取，提取液作為對照藥材溶液；對照品溶液的制備取黃芩苷對照品；分別加甲醇制成每lml含1mg的溶液，作為對照品溶液；采用中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗，吸取上述溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以醋酸丁酯-甲酸-水7∶4∶3的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2％三氯化鐵乙醇溶液，供試品色譜中，在與對照藥材色譜、對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色斑點；f、一清藥物制劑中黃芩苷的液相色譜鑒別方法取待測藥物組合物適量，加甲醇稀釋至合適濃度，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液；以黃芩苷對照品的甲醇溶液為對照，采用液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇-0.02mol/L并用磷酸調節pH2.7的磷酸二氫鈉溶液＝42∶58為流動相，檢測波長為275nm；供試品色譜中，具與對照品色譜有保留時間一致的色譜峰。
所述藥物組合物含量的測試方法應包括以下中的一種或幾種a、一清藥物制劑中小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭中一種或幾種的含量測定方法取待測藥物組合物適量，加甲醇或乙醇或流動相或水溶解或稀釋至合適濃度，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液；以鹽酸小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭中的一種或幾種對照品的甲醇或乙醇溶液為對照，采用液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠或八烷基硅烷鍵合硅膠或二烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇或乙腈-水或0.05％～10％冰醋酸水溶液或0.05％～10％甲酸水溶液或0.01％～5％磷酸水溶液或0.005mol/L～2mol/L磷酸二氫鈉溶液或0.005mol/L～2mol/L磷酸二氫鉀或0.005mol/L～2mol/L磷酸氫二鈉溶液或0.005mol/L～2mol/L磷酸氫二鉀溶液5％～95％∶95％～5％為流動相，檢測波長為200～410nm；以外標一點法或標準曲線法進行計算，各制劑以相當于每日用成品量為單位量，含量限度應為以下一項或幾項(1)每單位量含小檗堿的限度不得少于5mg；(2)每單位量含黃連堿的限度不得少于2.5mg；(3)每單位量含巴馬亭的限度不得少于2mg(4)每單位量含藥根堿的限度不得少于1.25mg；(5)每單位量含小檗堿、黃連堿、巴馬亭、藥根堿的總和的限度不得少于10.75mg；b、一清藥物制劑中大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚中一種或幾種的含量測定方法取待測藥物組合物適量，加8％鹽酸適量溶解后加三氯甲烷適量，回流提取1小時，放冷，分取三氯甲烷層，揮干溶劑，殘渣用甲醇溶解，作為供試品溶液；以大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚中的一種或幾種對照品的甲醇溶液為對照，采用液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇-0.1％磷酸水溶液85％∶15％為流動相，檢測波長為254nm，柱溫30℃；供試品色譜中，具與對照品色譜中的主峰有保留時間一致的色譜峰；以外標一點法或標準曲線法進行計算，各制劑以相當于每日用成品量為單位量，含量限度應為以下一項或幾項(1)每單位量含大黃酸的限度不得少于1.65mg.
(2)每單位量含大黃素的限度不得少于0.65mg；
(3)每單位量含大黃素甲醚的限度不得少于0.65mg；(4)每單位量含蘆薈大黃素的限度不得少于1mg；(5)每單位量含大黃酚的限度不得少于1mg；(6)每單位量含大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚的限度不得少于4.95mg；c、一清藥物制劑中黃芩苷的含量測定方法取待測藥物組合物適量，加甲醇超聲處理，定容至合適濃度，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液；以黃芩苷對照品的甲醇溶液為對照，采用液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠或八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇-水0.02mol/L并用磷酸調節pH2.7的磷酸二氫鈉溶液為流動相，檢測波長為275nm；以外標一點法或標準曲線法進行計算，各制劑以相當于每日用成品量為單位量，每單位量含的限度不得少于15mg。
準確的說所述藥物組合物含量的測試方法應包括以下中的一種或幾種a、一清藥物制劑中小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭中一種或幾種的液相色譜含量測定方法取待測藥物組合物適量，加甲醇稀釋至合適濃度，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液；以鹽酸小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭中的一種或幾種對照品的甲醇溶液為對照，采用液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，乙腈-0.05mol/L磷酸二氫鈉溶液30％∶70％為流動相，檢測波長為266nm；以外標一點法進行計算，各制劑以相當于每日用成品量為單位量，含量限度應為以下一項或幾項(1)每單位量含小檗堿的限度不得少于10mg；(2)每單位量含黃連堿的限度不得少于5mg；(3)每單位量含巴馬亭的限度不得少于4mg；(4)每單位量含藥根堿的限度不得少于2.5mg(5)每單位量含小檗堿、黃連堿、巴馬亭、藥根堿的總和的限度不得少于21.5mgb、一清藥物制劑中大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚中一種或幾種的液相色譜含量測定方法取待測藥物組合物適量，加8％鹽酸適量溶解后加三氯甲烷適量，回流提取1小時，放冷，分取三氯甲烷層，揮干溶劑，殘渣用甲醇溶解，作為供試品溶液；以大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚中的一種或幾種對照品的甲醇溶液為對照，采用液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇-0.1％磷酸水溶液85％∶15％為流動相，檢測波長為254nm，柱溫30℃；以外標一點法進行計算，各制劑以相當于每日用成品量為單位量，含量限度應為以下一項或幾項(1)每單位量含大黃酸的限度不得少于3.3mg；(2)每單位量含大黃素的限度不得少于1.3mg；(3)每單位量含大黃素甲醚的限度不得少于1.3mg；(4)每單位量含蘆薈大黃素的限度不得少于2mg；(5)每單位量含大黃酚的限度不得少于2mg；(6)每單位量含大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚的限度不得少于9.9mg；c、一清藥物制劑中黃芩苷的液相色譜含量測定方法取待測藥物組合物適量，加甲醇超聲處理，定容至合適濃度，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液；以黃芩苷對照品的甲醇溶液為對照，采用液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇-0.02mol/L并用磷酸調節pH2.7的磷酸二氫鈉溶液＝42∶58為流動相，檢測波長為275nm；以外標一點法進行計算，各制劑以相當于每日用成品量為單位量，每單位量含的限度不得少于30mg。
所述藥物組合物中小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭、大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚、黃芩苷的溶出度測試方法應為取重量差異項下本品，照溶出度測定法，以脫氣處理的水或稀鹽酸、緩沖液、人工胃液、人工腸液為溶出介質，轉速為每分鐘20～100轉，依法操作，經20～45分鐘時，取溶液1～20ml，立即用微孔濾膜濾過，取續濾液作為供試品溶液；按含量測定項下的色譜條件，精密吸取上述溶液5～10μl，注入液相色譜儀，照高效液相色譜法測定，計算每粒的溶出量，結果與相同成分的含量測定項下結果比較，溶出度應不少于50％。
準確的說所述藥物組合物中小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭、大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚、黃芩苷的溶出度測試方法應為取重量差異項下本品4粒，照溶出度測定法，以脫氣處理的水500ml為溶出介質，轉速為每分鐘50轉，依法操作，經30分鐘時，取溶液5ml，立即用微孔濾膜濾過，取續濾液作為供試品溶液；按含量測定項下的色譜條件，精密吸取上述溶液10μl，注入液相色譜儀，照高效液相色譜法測定，計算每粒的溶出量，結果與相同成分的含量測定項下結果比較，應不少于70％。
與現有技術相比，本發明克服了現有產品存在的問題，提供的分散片，崩解性好，溶出度佳；而提供的滴丸，可以掩蓋藥物的不良口味、氣味，并且起到增加穩定性、改善生物利用度的作用；得到的制劑產品具有清熱瀉火解毒、化瘀涼血、止血之功效，用于治療急慢性上呼吸道感染、治療過敏性鼻炎、治療便秘和腸炎、治療癰腫瘡毒、口腔潰瘍、牙齦腫痛、水火燙傷、治療急性黃疸性肝炎、治療痔瘡出血、治療高脂血癥所致的高血壓、及輔助治療慢性腎臟病等。利用本發明提供的制備方法能夠解決現有生產存在的缺點，比較經濟、合理的制備需要的制劑；利用本發明提供的質量控制方法能保證制備的制劑科學、有效；質量控制方法重復性、穩定性好、指標比較完善，可以完全的控制該制劑的質量；本發明達到了發明的目的。
在研制滴丸的過程中發現，本產品的圓整度差和吸濕性較強。經研究發現，由于冷凝柱上部溫度較低，會使液滴中帶入的一些氣泡在溢出時產生空洞或溢出氣泡時所帶藥液尚未縮回而形成尾巴，導致圓整度差，本申請人通過對其基質、冷卻劑、滴頭口徑等工藝進行詳細的考察，使得產品的成型性、圓整度得到了改善。
在研制分散片的過程中發現，分散均勻性是最大的難點。本申請人采用微丸制粒技術，加入按藥物∶輔料比例為3∶1的微晶纖維素，過60目篩充分混勻，加入濃度為50％的乙醇為潤濕劑制成軟材，采用擠出-滾圓造粒機，擠出轉速30r·min-1，，滾圓5min，滾圓轉速550r·min-1，，制得微丸，于50℃烘12小時，取出，加入按藥物∶輔料比例為2∶1的低取代羥丙纖維素、按藥物∶輔料比例為1∶1的羧甲基淀粉鈉，混合均勻，過5號篩，用5％PVP醇溶液作潤濕劑制軟材，過2號篩制粒，60℃烘干，2號篩整粒，同時加入按藥物∶輔料比例為1∶2的低取代羥丙纖維素混勻后壓片，制得的分散片質量良好；所以通過一系列實驗，以選擇本發明提供的藥物制劑的制備工藝、使用的輔料種類及用量、比例等；保證其科學、合理、可行；得到的制劑具有有效的治療效果。
實驗例1提取工藝研究(1)因素選擇中藥煎煮提取效果受到加水量、提取時間、提取次數等因素的影響。因現有技術提取工藝已對提取時間、提取次數進行了考察，但是對黃芩、黃連和大黃藥材加水量這一重要因素未做研究，本申請人重點考察因素的不同水平對煎煮提取效果的影響。結合生產成本、能源等方面進行綜合考慮，選擇因素水平。
(2)指標確定黃芩選擇浸膏收得率及黃芩苷含量作為評價指標，黃連和大黃選擇浸膏收得率為評價指標。浸膏是固體制劑發揮療效的物質基礎，其收率高低直接影響制劑工藝，故選擇為提取指標是合理、有效的控制手段。
(3)試驗分別稱取黃芩，黃連、大黃藥材200g，各6份，分別加水煎煮二次，第一次1.5小時，第二次1小時，合并煎液，濾過，濾液減壓濃縮，干燥，稱定膏重，并測定黃芩所得浸膏中黃芩苷的含量，試驗結果見下表。
黃芩加水量考察結果表
由上表可見加水量為10、10倍和8、8倍量時浸膏收得率和黃芩苷含量較高，而兩者之間沒有明顯的區別，在保證有效成分提取充分的前提下，為了節約成本和縮短工時，確定提取加水量第一次10倍量，第二次8倍量。
黃連加水量考察結果表
由上表可知，加水量為8、8倍與8、6倍時浸膏收得率較高，且差別不大，為了節約成本和縮短工時，同時為了減少提取時消耗過多的能源，確定提取加水量第一次8倍量，第二次6倍量。
大黃加水量考察結果表
由上表可知，加水量為8、8倍與8、6倍時浸膏收得率較高，且差別不大，說明加水量為，為了節約成本和縮短工時，確定提取加水量第一次8倍量，第二次6倍量。
實驗例2滴丸成型工藝研究2.1制劑處方設計和篩選滴丸水溶性基質有聚乙二醇4000和聚乙二醇6000，由于我們提取的藥膏大部分為水溶性成分，因此采用聚乙二醇為基質，并對這兩者進行比較試驗。將不同型號的聚乙二醇置小燒杯內，加熱至80-90℃，待全部熔融后，加入浸膏粉，考察基質與浸膏粉的的融合情況，選擇融合情況較好的處方進行滴制(滴制條件料溫75℃，冷卻劑為二甲基硅油，滴距3～7cm，滴速30～40滴/分)，結果見下表基質與主藥的融合情況比較
上述結果表明，處方2熔融藥液的流動性好，滴丸成型性好，光滑、圓潤，丸重差異小，溶散較快，故選2號處方。
2.2冷卻劑選擇取三種藥材的浸膏粉10g，聚乙二醇4000 15g，混合均勻，加熱至80-90℃，待全部熔融后，取適量，分別滴入二甲硅油和液體石蠟冷卻劑中，以滴丸的成型情況為指標，結果見下表。
冷卻劑選擇
上表表明，以二甲硅油為冷卻劑滴丸圓整度好，成型好。
2.3冷卻劑溫度選擇取三種藥材的浸膏粉10g，聚乙二醇4000 15g，混合均勻，加熱至80-90℃，待全部熔融后，取適量，分別滴入不同溫度的二甲硅油冷卻劑中，觀察滴丸成型情況，結果見下表。
冷卻劑溫度選擇
注梯度冷卻方法為上部30～40℃，中部為15～30℃，下部為5～15℃。
上表表明，在上述三種冷卻溫度下，本品的成型性均良好，為簡便操作，故選擇冷卻劑溫度為10～20℃。
2.4滴頭口徑選擇取三種藥材的浸膏粉10g，聚乙二醇4000 15g，按制法制得熔融藥液，分別選擇不同口徑的滴管，滴制成丸，以丸型圓整度，硬度、拖尾為指標，結果見下表。
滴頭口徑選擇
注+++示很好；++示較好；+示一般；-示差上述結果表明，滴頭口徑為3.5/4.5(內/外mm/mm)的滴頭所滴制的滴丸圓整度和硬度等外觀指標較好，故選擇滴頭口徑為3.5/4.5(內/外mm/mm)。
2.5滴距選擇取三種藥材的浸膏粉10g，聚乙二醇4000 15g，按制法制得熔融藥液，分別以不同的滴距滴制，考察所得滴丸的丸重差異和外觀形狀，結果見下表。
滴距選擇
上表表明，當滴距在4～6cm時，滴丸外觀圓整，表面光滑，重量差異小，故選擇滴距為4～6cm。
2.6熔融藥液溫度(料溫)、滴制速度選擇取三種藥材的浸膏粉10g，聚乙二醇4000 15g，按制法制得熔融藥液，按下表的料溫和滴制速度(其余條件按制法)進行滴制，結果見下表。
熔融藥液溫度(料溫)、滴制速度選擇
從上表可知，當選用滴速30～40d/min、料溫70～80℃時，所得丸重與目標丸重最接近，滴丸外觀圓整、美觀。故選擇滴速30～40d/min、料溫70～80℃。
2.7生物利用度比較SD大鼠，體重250～280g，雌雄各半，隔夜禁食(不禁水)，次日灌胃給藥，給藥劑量為3.8g/kg。于給藥前及給藥后15min，30min，50min，80min，2h，3h，4h及8h心臟采血，每個血樣點用6只大鼠。血樣置肝素抗凝管，3000r/min離心5min，分離血漿，置-30°保存至分析。高效液相色譜儀分析柱為μBondpakaC18(0.45mm×25cm)；流動相為甲醇∶水＝6∶4；流速0.8mL/min；檢測波長λ＝230nm。血漿中黃芩苷提取取0.5mL血漿，加入5mLCHCl3，內標50μL，試管作30°傾斜于水平方向振搖器，振搖提取15min，離心(3000r/min)10min，棄去水相，精密吸取4mL有機相于一潔凈試管，在37℃水浴，N2氣流下吹干，殘留物用200μL流動相重新溶解，進樣分析。
大鼠血漿黃芩苷濃度變化(N＝6)
結果表明，本發明產品的生物利用度大于軟膠囊劑。
實驗例3藥效學實驗3.1抗炎作用的研究采用二甲苯致炎法，觀察對二甲苯致小鼠右耳腫脹的影響，取健康小白鼠70只，體重20±2g，隨機分成7組，每組10只，雌雄各半，即空白對照組(生理鹽水組)、陽性對照組(阿司匹林組)、一清顆粒組、本發明滴丸組、本發明分散片組。按下表所列劑量分組灌胃給藥，每天1次，連續給藥3天，藥物組給藥容積量均為20ml/kg體重，陰性對照組給生理鹽水10ml/kg體重。末次灌胃30分鐘后，用二甲苯0.05ml只均勻涂抹于小鼠耳兩面致炎，左耳不涂二甲苯作為對照。45分鐘之后處死小鼠，沿基線剪下雙耳，用直徑為5mm的打孔器分別沖下兩邊耳片，用分析天平稱重對比。以左右兩耳片片重之差作為腫脹度，并計算腫脹抑制率對二甲苯致小鼠耳部炎癥的影響
結果表明，本發明滴丸、本發明分散片對小鼠二甲苯致耳部炎癥有明顯抑制作用，且效果優于市售的一清顆粒。
3.2對小腸推進作用的研究取昆明種小鼠60只，體重20±2g，雌雄各半，實驗前禁食12h。將小鼠隨機分為6組對照組、一清顆粒組、本發明滴丸組、本發明分散片。對照組給予0.5％羧甲基纖維素鈉，均按20ml/kg灌胃。藥后30min給各鼠5％碳末與10％阿拉伯膠制成的混懸液，按10ml/kg灌胃，30min后用頸椎脫臼法處死動物，立即刻腹，將幽門至直腸末端的消化道完整摘除，不加牽引，平鋪于玻璃板上。測量腸道全長及碳末前沿至幽門的距離，計算后者占腸道全長的百分率。計算公式為炭末推進(％)＝炭末前沿與幽門的距離(cm)×100％/小腸全長(幽門至回盲部)(cm)。具體結果見下表對小鼠小腸推進作用的影響
結果顯示，一清顆粒、本發明滴丸、本發明分散片給藥后30min可使小鼠腸道碳末推進速度顯著增高〔以碳末前沿占腸道百分比為指標〕；本發明制劑的效果優于市售一清顆粒。
3.3對止血作用的研究采用斷尾法進行止血試驗，取健康小鼠60只，體重20？g，隨機分成6組，每組10只，雌雄各半，即對照組(生理鹽水組)、一清膠囊組、本發明滴丸組、本發明分散片組。藥物組按20ml/kg體重的容積灌胃，生理鹽水組的灌胃容積為10ml/kg體重；每天給藥1次，連續給藥3天。在末次給藥后30分鐘將小鼠鼠尖約1cm處剪斷，記錄出血時間，每15秒用濾紙吸去血滴1次，直至出血停止。所得結果及數據見下表。
對小鼠的止血作用
實驗結果表明，與生理鹽水比較，一清顆粒、本發明滴丸、本發明分散片對小鼠鼠尖出血有很好的止血作用。
實驗例4質量控制方法的考察4.1藥物制劑中黃連、小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭的薄層色譜鑒別方法為了突出黃芪的特征，選擇了黃連對照藥材、小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭作為其特征斑點，但是由于藥物制劑中存在較多與小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭結構相近、極性相似的成分，普通條件難以達到質量控制的要求，因此我們篩選了以下薄層板和展開條件對黃芪對照藥材進行了展開
經過篩選，確定了以硅膠G薄層板為固定相，以苯-醋酸乙酯-甲醇-異丙醇-濃氨試液(4∶3∶2∶1.5∶0.5)為展開劑，在此條件下，黃連對照藥材、小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭特征斑點的Rf值適中，和其它斑點分離清晰，陰性無干擾。
4.2藥物制劑中檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭的液相色譜鑒別方法為了突出黃芪的特征，除了薄層鑒別方法以外，選擇了小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭作為其特征成分，但是由于藥物制劑中存在較多與檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭結構相近、極性相似的成分，普通條件難以達到質量控制的要求，因此我們篩選了以下色譜柱和流動相對小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭進行了分離
經過篩選，確定了以十八烷基硅烷鍵合硅膠為固定相，乙腈-0.05mol/L磷酸二氫鈉溶液(30∶70)為流動相，在此條件下，小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭保留時間適中，峰行尖銳，對稱，陰性無干擾。
4.3藥物制劑中大黃、大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚的薄層色譜鑒別方法為了突出大黃的特征，選擇了大黃對照藥材、大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚作為其特征斑點，但是由于藥物制劑中存在較多與大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚結構相近、極性相似的成分，普通條件難以達到質量控制的要求，因此我們篩選了以下薄層板和展開條件對大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚進行了展開
經過篩選，確定了以硅膠H薄層板為固定相，以石油醚(30～60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)為展開劑，在此條件下，大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚特征斑點的Rf值適中，和其它斑點分離清晰，陰性無干擾。
4.4藥物制劑中大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚的液相色譜鑒別方法為了突出大黃的特征，除了薄層鑒別方法以外，選擇了大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚作為其特征成分，但是由于藥物制劑中存在較多與大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚結構相近、極性相似的成分，普通條件難以達到質量控制的要求，因此我們篩選了以下色譜柱和流動相對大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚進行了分離
經過篩選，確定了以十八烷基硅烷鍵合硅膠為固定相，甲醇-0.1％磷酸(85∶15)為流動相，在此條件下，大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚保留時間適中，峰行尖銳，對稱，陰性無干擾。
4.5藥物制劑中黃芩、黃芩苷中一種或幾種的薄層色譜鑒別方法為了突出黃芩的特征，選擇了黃芩對照藥材、黃芩苷作為其特征斑點，但是由于藥物制劑中存在較多與黃芩苷結構相近、極性相似的成分，普通條件難以達到質量控制的要求，因此我們篩選了以下薄層板和展開條件對黃芩對照藥材、黃芩苷進行了展開
經過篩選，確定了以硅膠G薄層板為固定相，以石醋酸丁酯-甲酸-水(7∶4∶3)的上層溶液為展開劑，在此條件下，特征斑點的Rf值適中，和其它斑點分離清晰，陰性無干擾。
4.6藥物制劑中黃芩苷的液相色譜鑒別方法為了突出黃芩的特征，除了薄層鑒別方法以外，選擇了藥物制劑作為其特征成分，但是由于藥材中存在較多與藥物制劑結構相近、極性相似的成分，普通條件難以達到質量控制的要求，因此我們篩選了以下色譜柱和流動相對藥物制劑進行了分離
經過篩選，確定了以十八烷基硅烷鍵合硅膠為固定相，甲醇-0.02mol/L磷酸二氫鈉溶液(磷酸調節pH2.7)(42∶58)為流動相，在此條件下，黃芩苷保留時間適中，峰行尖銳，對稱，陰性無干擾。
4.7藥物制劑中黃芩苷的含量測定方法儀器與試藥主要儀器高效液相色譜儀 P426Alltech電子分析天平 BP211D SARTORIUS紫外/可見分光光度儀 TU-1810SPC 北京普析通用儀器有限責任公司超聲波清洗儀 KQ250DB 昆山超聲儀器有限公司試藥甲醇 分析純 北京市通廣精細化工公司磷酸 優級純 北京化工廠磷酸二氫鈉 分析純 上海市振欣試劑廠純凈水 娃哈哈黃芩苷 照高效液相色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VID)測定。
1檢測波長的選擇 精密稱取黃芩苷對照品適量，加甲醇制成每1ml含20μg的溶液，在200～400nm波長范圍內掃描。結果表明，黃芩苷在275nm處有最大吸收，因此選擇275nm作為測定一清滴丸中黃芩苷含量的檢測波長。
2提取時間的選擇 取重量差異項下本品，研細，從中取約0.2g(共4份)，精密稱定，分置100ml量瓶中，加甲醇10ml，分別超聲處理(功率250W，頻率33KHz)5、10、20、30分鐘，取出，放至室溫，加水稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，取續濾液，即得。
提取時間
結果表明，超聲處理10min即可提取完全，因此提取時間定為10分鐘。
3色譜條件色譜儀Alltech P426；色譜柱Diamonsil(鉆石)C18(250×4.6mm 5μm)；流動相甲醇-0.02mol/L磷酸二氫鈉緩沖液(磷酸調pH2.7)(42∶58)；檢測波長275nm；
柱溫30℃；流速1ml/min；進樣量10μl。
對照品溶液的制備 精密稱取黃芩苷對照品12.5mg，置250ml量瓶中，加甲醇10ml使溶解，加水稀釋至刻度，搖勻，即得。(每1ml含黃芩苷50μg)供試品溶液的制備取本品，研細，從中取約0.2g，精密稱定，置100ml量瓶中，加甲醇10ml，超聲處理(功率250W，頻率33KHz)10分鐘，取出，放至室溫，加水稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，取續濾液，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
根據上述條件得到黃芩苷、供試品色譜圖，其理論板數按黃芩苷峰計算大于5000。樣品中黃芩苷色譜峰與相近峰分離清晰完全，分離度均大于1.5。
4 陰性干擾排除試驗 為考察其它藥材和輔料是否干擾黃芩苷的測定，除黃芩外，按處方比例稱取其它藥材和輔料同法制成陰性對照品溶液并測定。結果表明，陰性樣品對黃芩苷的含量測定無干擾。
5線性關系的考察 精密稱取黃芪苷對照品12.56mg，置25ml量瓶中，加甲醇適量超聲處理使溶解，取出，放至室溫，加甲醇至刻度，搖勻，精密量取0.4ml、0.8m、1.2ml、1.6ml、2.0ml，分置10ml量瓶中，用水定至刻度，搖勻，配制成20.096μg/ml、40.192μg/ml、60.288μg/ml、80.384μg/ml、100.048μg/ml的對照品稀釋溶液，分別從中精密吸取10μl，注入液相色譜儀，照高效液相色譜法(中國藥典2000年版一部附錄ⅥD)測定。以黃芩苷的量(μg)為縱坐標，峰面積為橫坐標做圖，繪制標準曲線。
黃芩苷線性關系
回歸方程Y＝0.00000050X-0.00009585相關系數γ＝0.9999
結果表明，黃芩苷在0.2010μg～1.0005μg范圍之內線性關系良好。
經過計算，黃芩苷標準曲線為一過原點的直線，因此選擇外標一點法測定一清滴丸中黃芩苷的含量。
6精密度試驗 精密吸取黃芩苷對照品溶液(每1ml含黃芩苷50.24μg)10μl，注入液相色譜儀，重復測定5次，考察對照品溶液精密度。
精密度試驗
結果表明，對照品溶液精密度良好。
7穩定性試驗7.1對照品穩定性試驗 精密吸取黃芩苷對照品溶液(每1ml含黃芩苷50.24μg)10μ1，注入液相色譜儀，分別在0、2、6、10、24小時進樣測定。
對照品溶液穩定性試驗結果
結果表明，對照品溶液在24小時內穩定性良好。
7.2供試品溶液穩定性試驗 精密吸取供試品溶液(2.021mg/ml)10μl，注入液相色譜儀，分別在0、2、6、10、24小時進樣測定。
供試品溶液穩定性試驗結果
結果表明，供試品溶液在24小時內穩定性良好。
8重復性試驗 取本品，研細，從中取約0.2g(共5份)，精密稱定，按正文供試品溶液制備和測定項下進行操作。
重復性試驗
結果表明，重復性良好。
10加樣回收率試驗 采用加樣回收法，取本品，研細，從中取約0.1g(共6份)，精密稱定，分置100ml量瓶中；精密稱取黃芩苷25.42mg，置25ml量瓶中，加甲醇適量使溶解并定至刻度，搖勻，精密量取2.5ml、3.2ml、3.8ml(各2份)，共置上述100ml量瓶中，加甲醇至10ml，超聲處理(功率250W，頻率33KHz)10分鐘，取出，放至室溫，加水稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，取續濾液，即得。
一清滴丸中黃芩苷含量31.517mg/g黃芩苷加樣回收率試驗
黃芩苷平均回收率＝97.67％，RSD＝1.49％；10樣品含量測定 按正文供試品溶液的制備和測定法項下操作，測定三批樣品。
三批樣品含量測定結果
4.8大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚含量測定方法1儀器、試藥儀器SHIMADZU 2010AHT高效液相色譜儀鉆石C18色譜柱250×4.6mm 5um 迪馬公司SARTARIUS BP211D電子分析天平2方法與結果2.1色譜分析條件固定相十八烷基硅烷鍵合硅膠250×4.6mm 5um流動相甲醇-0.1％磷酸水溶液(85∶15)流速1ml/min
柱溫30℃進樣量10ul檢測波長254nm2.2系統適用性試驗 根據上述色譜條件得到大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚對照品、樣品色譜圖，大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚對照品色譜峰與相近峰分離清晰，完全，分離度均大于1.5，理論板數n均大于2000。
2.3測定波長的選擇 經紫外掃描，大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚均在254nm波長處有最大吸收，故選定254nm為測定波長。
2.4對照品溶液的制備取大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含大黃酸16μg，蘆薈大黃素、大黃酚10μg，大黃素、大黃素甲醚8μg的溶液。
2.5供試品溶液的制備 取重量差異項下本品，研細，從中取約1g，精密稱定，加8％鹽酸50ml溶解后加三氯甲烷20ml，回流提取1小時，放冷，分取三氯甲烷層，鹽酸層用三氯甲烷萃取2次，每次20ml，和并三氯甲烷層揮干溶劑，殘渣用甲醇適量使溶解并定量轉移至100ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45um)濾過，取續濾液，即得。
2.6陰性對照試驗 為考察其它輔料是否干擾大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚的測定，除大黃外，按處方比例稱取其它輔料與供試品溶液同法制成陰性對照溶液并測定。結果表明，陰性樣品對大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚的含量測定無干擾。
3線性關系的考察 精密稱取大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚對照品適量，共置25ml量瓶中，加甲醇適量超聲處理使溶解，取出，放至室溫，加甲醇至刻度，搖勻，制成每1ml分別含大黃酸0.3412mg/ml，大黃素0.3388mg/ml，大黃素甲醚0.1984mg/ml，蘆薈大黃素0.3444mg/ml，大黃酚0.3424mg/ml的對照品混合溶液，精密量取0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml，分置10ml量瓶重，加甲醇至刻度，搖勻，分別精密吸取10μl注入高效液相色譜儀，按上述色譜條件測定。以峰面積為縱坐標，對照品的量(ug)為橫坐標作圖，繪制標準曲線。
大黃酸標準曲線測定數據
回歸方程為Y＝3560652.68X+11472.02γ＝0.9999大黃酸在0.06428～0.34120ug范圍內線性良好。
大黃素標準曲線測定數據
回歸方程為Y＝2903505.02X-1448.10γ＝0.9999大黃素在0.06776～0.33880ug范圍內線性良好。
大黃素甲醚標準曲線測定數據
回歸方程為 Y＝2539410.28X-532.60γ＝0.9999大黃素甲醚在0.03968～0.19840ug范圍內線性良好。
蘆薈大黃素標準曲線測定數據
回歸方程為Y＝3704234.90X+324.30γ＝0.9999蘆薈大黃素在0.06888～0.34440ug范圍內線性良好。
大黃酚標準曲線測定數據
回歸方程為Y＝3016863.32X+1045.60 γ＝0.9999大黃酚在0.06848～0.34240ug范圍內線性良好。
4穩定性試驗 取重量差異項下本品，研細，從中取約1g，按正文供試品溶液的制備和測定法項下操作，每隔1小時重復測定1次，結果表明在4小時之內，供試品溶液穩定。
5精密度試驗 精密吸取對照品溶液(每1ml分別含大黃酸0.01706mg/ml，大黃素0.01694mg/ml，大黃素甲醚0.00992mg/ml，蘆薈大黃素0.01722mg/ml，大黃酚0.01712mg/ml)10μl，注入液相色譜儀，記錄峰面積，重復測5次，結果如下
6重復性試驗 取本品5份，精密稱定，按正文供試品溶液的制備和測定法項下操作，結果如下
7回收率試驗 采用加樣回收法，取重量差異項下本品，研細，從中取0.5g(共5份)，精密稱定，分置具塞錐形瓶中；精密量取對照品混合溶液(每1ml分別含大黃酸0.826mg，大黃素0.5744mg，大黃素甲醚0.4124mg，蘆薈大黃素0.4984mg，大黃酚0.4884mg)1ml(共5份)，分置上述具塞錐形瓶中，加8％鹽酸50ml溶解后加三氯甲烷20ml，回流提取1小時，放冷，分取三氯甲烷層，鹽酸層用三氯甲烷萃取2次，每次20ml，和并三氯甲烷層揮干溶劑，殘渣用甲醇適量使溶解并定量轉移至100ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45um)濾過，精密吸取續濾液10μl注入液相色譜儀，測定，即得。
藥物制劑中大黃酸含量為1.755mg/g；藥物制劑中大黃素含量為1.151mg/g；藥物制劑中大黃素甲醚含量為0.814mg/g；藥物制劑中蘆薈大黃素含量為1.071mg/g藥物制劑中大黃酚含量為1.070mg/g。
大黃酸回收率
平均回收率＝97.36％，RSD＝1.30％。
大黃素回收率
平均回收率＝99.78％，RSD＝0.85％。
大黃素甲醚回收率
平均回收率＝98.11％，RSD＝1.26％。
蘆薈大黃素回收率
平均回收率＝97.15％，RSD＝0.84％。
大黃酚回收率
平均回收率＝98.14％，RSD＝0.89％。
8樣品的測定 按正文供試品溶液的制備和測定法項下操作，測定三批樣品，結果如下
4.9小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭含量測定方法儀器，試藥儀器島津10A高效液相色譜儀試藥乙腈 色譜純Fisher公司磷酸二氫鈉 分析純北京化工廠雙蒸水 自制色譜分析條件固定相十八烷基硅烷鍵合硅膠柱250×4.6mm 5um流動相乙腈∶0.05mol/L磷酸二氫鈉30∶70流速1ml/min柱溫室溫檢測波長266nm對照品溶液的制備取鹽酸小檗堿對照品、黃連堿對照品、巴馬亭對照品、藥根堿對照品適量，加甲醇制成每1ml含鹽酸小檗堿0.05mg，黃連堿0.025mg、巴馬亭0.02mg、藥根堿0.0125mg的對照品混合溶液。
供試品溶液的制備取本品，研細，從中取約1g，精密稱定，置100ml量瓶中，加甲醇適量超聲處理(功率250W，頻率33KHz)使溶解，取出，放至室溫，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，取續濾液，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
根據上述條件得到鹽酸小檗堿對照品、黃連堿對照品、巴馬亭對照品、藥根堿對照品、供試品色譜圖，其理論板數按鹽酸小檗堿峰計算大于5000。樣品中鹽酸小檗堿對照品、黃連堿對照品、巴馬亭對照品、藥根堿對照品色譜峰與相近峰分離清晰完全，分離度均大于1.5。陰性無干擾。
測定波長的選擇經紫外掃描，鹽酸小檗堿甲醇溶液在266nm波長處有最大吸收，選定266nm為測定波長。
線性關系的考察精密量取對照品混合溶液(每1ml分別含鹽酸小檗堿0.8264mg、黃連堿0.4172mg、巴馬亭0.3024mg、藥根堿0.2072mg)0.2、0.6、1.0、1.4、1.8ml，分置10ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，分別從中精密吸取10ul，注入高效液相色譜儀，以進樣量(ug)為橫坐標，以峰面積為縱坐標，繪制標準曲線。
鹽酸小檗堿標準曲線
回歸方程Y＝3318757.87X+719.90 r＝0.9999鹽酸小檗堿在0.16528～1.48752ug范圍內線性良好。
黃連堿標準曲線
回歸方程Y＝2409186.84X-802.75 r＝0.9999黃連堿在0.08344～0.75096ug范圍內線性良好。
巴馬亭標準曲線
回歸方程Y＝4981848.54X+735.40 r＝0.9999巴馬亭在0.06048～0.54432ug范圍內線性良好。
藥根堿標準曲線
回歸方程Y＝753147442X+41.10 r＝0.9999藥根堿在0.04144～0.378296ug范圍內線性良好。
穩定性試驗取本品，研細，精密稱取1.01526g，按正文供試品溶液制備和測定法項下操作，每隔1小時重復測定，結果表明在4小時之內，供試品溶液穩定。
精密度試驗 精密吸取對照品混合溶液(每1ml分別含鹽酸小檗堿0.049584mg、黃連堿0.025032mg、巴馬亭0.018144mg、藥根堿0.012432mg)10ul，注入液相色譜儀，記錄峰面積，重復測定5次，結果如下。
重復性試驗取本品，研細，從中取約1g(5份)，精密稱定，按正文供試品溶液的制備和測定法項下操作，結果如下
回收率試驗采用加樣回收法，取本品，研細，從中取約0.5g(共5份)，精密稱定，分置100ml量瓶中，精密量取對照品混合溶液(每1ml分別含鹽酸小檗堿0.8264mg、黃連堿0.4172mg、巴馬亭0.3024mg、藥根堿0.2072mg)3ml(共5份)，分置上述100ml量瓶中，加甲醇適量超聲處理(功率250W，頻率33KHz)使溶解，取出，放至室溫，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，精密吸取續濾液10ul，注入高效液相色譜儀，測定，即得。
藥物制劑中鹽酸小檗堿含量為5.169mg/g；藥物制劑中黃連堿含量為2.475mg/g；藥物制劑中巴馬亭含量為2.468mg/g；藥物制劑中藥根堿含量為1.248mg/g；鹽酸小檗堿回收率
平均回收率＝97.60％，，RSD％＝0.84％。
黃連堿回收率
平均回收率＝97.46％，，RSD％＝0.55％。
巴馬亭回收率
平均回收率＝97.13％，，RSD％＝0.71％。
藥根堿回收率
平均回收率＝97.74％，，RSD％＝1.04％。
樣品測定結果按正文供試品溶液的制備和測定法項下操作，測定三批樣品，結果如下
4.10一清滴丸中黃芩苷溶出度測定方法研究檢測波長的選擇黃芩苷在275nm處有最大吸收，因此選用275nm作為溶出度測定的檢測波長。
線性關系考察 精密稱取黃芩苷對照品適量，加甲醇適量溶解后加水制成每1ml含0.0575mg的溶液，從中精密量取0.1、2.5、5.0、7.5、10.0ml，分置10ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，配制成0.575μg/ml、14.375μg/ml、28.75μg/ml、43.125μg/ml、57.50μg/ml的對照品稀釋溶液，搖勻，分別從中精密吸取10μl，注入液相色譜儀，照高效液相色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VID)測定。以野黃芩苷的量(μg)為縱坐標，峰面積為橫坐標做圖，繪制標準曲線。結果見下表黃芩苷線性關系
回歸方程Y＝0.000001X-0.000078相關系數γ＝0.9999黃芩苷在0.00575～0.57500μg范圍內線性關系良好。
根據計算，黃芩苷標準曲線為過原點的直線，因此選擇外標一點法測定一清滴丸中黃芩苷的含量。
陰性干擾排除實驗 精密稱取一清滴丸陰性樣品(缺黃芩)186.62mg，置500ml量瓶中，加水定至刻度，超聲處理(功率250W，頻率33KHz)10分鐘，取出，放至室溫，搖勻，用微孔濾膜(0.45μm，水系)濾過，精密吸取續濾液10μl，注入液相色譜儀，結果表明，陰性對液相色譜法測定一清滴丸的溶出度無干擾。
供試品溶液精密度考察 取重量差異項下本品4粒，置500ml量瓶中，加蒸餾水至刻度，超聲處理(功率250W，頻率33KHz)10分鐘，取出，放至室溫，搖勻，用微孔濾膜(0.45μm，水系)濾過，精密吸取續濾液10μ1，注入液相色譜儀，重復測定5次，結果見下表。
供試品溶液精密度考察結果
結果表明，供試品溶液精密度良好。
供試品溶液穩定性考察取重量差異項下本品4粒，置500ml量瓶中，加蒸餾水至刻度，超聲處理(功率250W，頻率33KHz)10分鐘，取出，放至室溫，搖勻，用微孔濾膜(0.45μm，水系)濾過，精密吸取續濾液10μl，注入液相色譜儀，分別在0、2、6、10、24小時重復測定一次，結果見下表。
供試品溶液穩定性考察結果
結果表明，供試品溶液在24小時內穩定性良好回收率考察采用加樣回收法，取重量差異項下本品，研細，從中取約110mg(共6份)，精密稱定，分置500ml量瓶中；精密稱取黃芩苷34.96mg，置10ml量瓶中，加少量甲醇超聲處理使溶解，取出，放至室溫，加水定至刻度，搖勻，精密量取1ml(共6份)，分置上述500ml量瓶中，加水定至刻度，超聲處理(功率250W，頻率33KHz)10分鐘，取出，放至室溫，搖勻，用微孔濾膜(0.45μm，水系)濾過，精密吸取續濾液10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。結果見下表。一清滴丸中黃芩苷含量31.197mg/g。
黃芩苷回收率考察結果
黃芩苷平均回收率＝99.96％，RSD＝0.69％。
一清滴丸溶出度測定精密量取經脫氣處理的水500ml，注入每個操作容器內，加溫使溶劑保持在37℃±0.5℃。轉速為50r/min，取重量差異項下本品4粒(共6份)，分別投/入6個操作容器內，立即啟動旋轉并開始計時，分別于1、3、5、10、15、20、30、45分鐘精密量取5ml(同時補加同溫新鮮水5ml)，立即用微孔濾膜(0.45μm，水系)濾過，精密吸取續濾液10μl，注入液相色譜儀，測定，計算其累計溶出百分率(一清滴丸中黃芩苷含量31.517mg/g)。結果見下表。
一清滴丸黃芩苷溶出度測定結果
一清滴丸黃芩苷溶出度測定累計溶出百分率-時間數據
由此擬定，一清滴丸中黃芩苷的溶出度在30min時不得少于70％。
具體的實施方式實施例1黃連1600g大黃4850g黃芩2425g取黃芩加水煎煮二次，第一次加10倍水煎煮1.5小時，第二次加8倍水煎煮1小時。黃連和大黃分別加水煎煮二次，第一次加8倍水煎煮1.5小時，第二次加6倍水煎煮1小時。濾液減壓濃縮至相對密度為1.25(70℃)的清膏，減壓干燥成浸膏粉，將三種浸膏粉混勻，加入聚乙二醇4000，混合均勻，加熱熔融，攪拌均勻，轉移至滴丸機，滴制，收集滴丸，除去表面的甲基硅油，制成1000g，包裝，即得，即得滴丸，本產品口服、一次15粒，一日3～4次。
實施例2黃連1600g大黃4850g黃芩2425g取黃芩加水煎煮二次，第一次加10倍水煎煮1.5小時，第二次加8倍水煎煮1小時，黃連和大黃分別加水煎煮二次，第一次加8倍水煎煮1.5小時，第二次加6倍水煎煮1小時，濾液減壓濃縮至70℃相對密度為1.25的清膏，減壓干燥成浸膏粉，將三種浸膏粉混勻，以聚乙二醇4000為基質，藥物與基質的配比為1∶1.5，混勻，滴入冷卻劑二甲硅油中，滴頭口徑為3.5/4.5，滴距為4～6cm，滴速30～40d/min、料溫70～80℃，冷卻液的溫度為10～20℃，即得。
實施例3黃連1600g大黃4850g黃芩2425g取黃芩加水煎煮二次，第一次加10倍水煎煮1.5小時，第二次加8倍水煎煮1小時，黃連和大黃分別加水煎煮二次，第一次加8倍水煎煮1.5小時，第二次加6倍水煎煮1小時，濾液減壓濃縮至70℃相對密度為1.25的清膏，減壓干燥成浸膏粉，將三種浸膏粉混勻，加入按藥物∶輔料比例為2∶1的低取代羥丙纖維素、按藥物∶輔料比例為1∶1的羧甲基淀粉鈉，混合均勻，過5號篩，用5％PVP醇溶液作潤濕劑制軟材，過2號篩制粒，60℃烘干，2號篩整粒，同時加入按藥物∶輔料比例為1∶2的低取代羥丙纖維素混勻后壓片，即得分散片。
實施例4黃連1600g大黃4850g黃芩2425g
取黃芩加水煎煮二次，第一次加10倍水煎煮1.5小時，第二次加8倍水煎煮1小時，黃連和大黃分別加水煎煮二次，第一次加8倍水煎煮1.5小時，第二次加6倍水煎煮1小時，濾液減壓濃縮至70℃相對密度為1.25的清膏，加入注射用水、糖漿，制成1000瓶，即得口服液。
實施例5黃連1600g大黃4850g黃芩2425g取黃芩加水煎煮二次，第一次加10倍水煎煮1.5小時，第二次加8倍水煎煮1小時，黃連和大黃分別加水煎煮二次，第一次加8倍水煎煮1.5小時，第二次加6倍水煎煮1小時，濾液減壓濃縮至70℃相對密度為1.25的清膏，加入卡波姆溶液、矯味劑，攪勻，制成1000瓶，即得凝膠劑。
實施例6治療上呼吸道感染等疾病的藥物制劑中黃連、小檗堿的薄層色譜鑒別方法取待測藥物組合物適量，加甲醇提取，濾過，作為供試品溶液；另取黃連、小檗堿制備對照溶液；黃連對照藥材溶液的制備取黃連對照藥材適量，加甲醇提取，濾過，作為對照藥材溶液；對照品溶液的制備取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；采用中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液和對照品溶液各2μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以苯-醋酸乙酯-甲醇-異丙醇-濃氨試液4∶3∶2∶1.5∶0.5為展開劑，置氨蒸汽預飽和的展開缸內，展開，取出，晾干，置紫外燈365nm檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜或者對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
實施例7治療上呼吸道感染等疾病的藥物制劑中小檗堿的液相色譜鑒別方法取待測藥物組合物適量，加甲醇稀釋至合適濃度，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液；以鹽酸小檗堿為對照，采用液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，乙腈-0.05mol/L磷酸二氫鈉溶液30％∶70％為流動相，檢測波長為266nm；供試品色譜中，具與對照品色譜有保留時間一致的色譜峰。
實施例8治療上呼吸道感染等疾病的藥物制劑中大黃、大黃酸、大黃素、的薄層色譜鑒別方法取待測藥物組合物適量，加甲醇和鹽酸適量提取，提取液作為供試品溶液；另取大黃對照藥材、大黃酸、大黃素制備對照溶液；大黃對照藥材溶液的制備取大黃對照藥材適量，加甲醇和鹽酸適量提取，提取液作為對照藥材溶液；對照品溶液的制備取大黃酸、大黃素對照品；分別加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；采用中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗，吸取上述溶液各2～5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(60～90℃)-甲酸乙酯-甲酸15∶5∶1的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置氨蒸汽中熏后日光下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜、對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色斑點。
實施例9治療上呼吸道感染等疾病的藥物制劑中大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚的液相色譜鑒別方法取待測藥物組合物適量，加8％鹽酸適量溶解后加三氯甲烷適量，回流提取1小時，放冷，分取三氯甲烷層，揮干溶劑，殘渣用甲醇溶解，作為供試品溶液；以大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚中的對照品的甲醇溶液為對照，采用液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇-0.1％磷酸水溶液85％∶15％為流動相，檢測波長為254nm，柱溫30℃；供試品色譜中，具與對照品色譜中的主峰有保留時間一致的色譜峰。
實施例10治療上呼吸道感染等疾病的藥物制劑中黃芩、黃芩苷的薄層色譜鑒別方法取待測藥物組合物適量，加甲醇和鹽酸適量提取，提取液作為供試品溶液；另取黃芩對照藥材、黃芩苷中的一種或幾種制備對照溶液；黃芩對照藥材溶液的制備取黃芩對照藥材適量，甲醇和鹽酸適量提取，提取液作為對照藥材溶液；對照品溶液的制備取黃芩苷對照品；分別加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；采用中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗，吸取上述溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以醋酸丁酯-甲酸-水7∶4∶3的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2％三氯化鐵乙醇溶液，供試品色譜中，在與對照藥材色譜、對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色斑點。
實施例11治療上呼吸道感染等疾病的藥物制劑中黃芩苷的液相色譜鑒別方法取待測藥物組合物適量，加甲醇稀釋至合適濃度，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液；以黃芩苷對照品的甲醇溶液為對照，采用液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠或八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇-0.02mol/L磷酸二氫鈉溶液(磷酸調節pH2.7)(42∶58)為流動相，檢測波長為275nm；供試品色譜中，具與對照品色譜有保留時間一致的色譜峰。
實施例12治療上呼吸道感染等疾病的藥物制劑中黃連、小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭的薄層色譜鑒別方法取待測藥物組合物適量，加乙醇提取，濾過，作為供試品溶液；另取黃連、鹽酸小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭制備對照溶液；黃連對照藥材溶液的制備取黃連對照藥材適量，加乙醇提取，濾過，作為對照藥材溶液；對照品溶液的制備取鹽酸小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭中的對照品；分別加乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；采用中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液和對照品溶液各2μl，分別點于同一硅膠H薄層板上，以甲苯-醋酸丁酯-甲醇-丁酮-濃氨試液8∶6∶3∶1∶1為展開劑，置氨蒸汽預飽和的展開缸內，展開，取出，晾干，置紫外燈365nm檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜或者對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
實施例13治療上呼吸道感染等疾病的藥物制劑中小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭的液相色譜鑒別方法取待測藥物組合物適量，加乙醇稀釋至合適濃度，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液；以鹽酸小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭中的對照品的甲醇溶液為對照，采用液相色譜法，色譜柱用八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇-0.05mol/L磷酸二氫鈉溶液45％∶55％為流動相，檢測波長為266nm；供試品色譜中，具與對照品色譜有保留時間一致的色譜峰。
實施例14治療上呼吸道感染等疾病的藥物制劑中大黃、大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚的薄層色譜鑒別方法取待測藥物組合物適量，加乙醇和鹽酸適量提取，提取液作為供試品溶液；另取大黃對照藥材、大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚制備對照溶液；大黃對照藥材溶液的制備取大黃對照藥材適量，加乙醇和鹽酸適量提取，提取液作為對照藥材溶液；對照品溶液的制備取大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚對照品；分別加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；采用中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗，吸取上述溶液各2～5μl，分別點于同一硅膠H薄層板上，以石油醚(30～60℃)-醋酸乙酯-冰醋酸1082的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置氨蒸汽中熏后日光下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜、對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色斑點。
實施例15治療上呼吸道感染等疾病的藥物制劑中大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚的液相色譜鑒別方法取待測藥物組合物適量，加10％鹽酸適量溶解后加二氯甲烷適量，回流提取1小時，放冷，分取二氯甲烷層，揮干溶劑，殘渣用甲醇溶解，作為供試品溶液；以大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚對照品的甲醇溶液為對照，采用液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，乙腈-0.1％磷酸水溶液70％∶30％為流動相，檢測波長為254nm，柱溫30℃；供試品色譜中，具與對照品色譜中的主峰有保留時間一致的色譜峰。
實施例16治療上呼吸道感染等疾病的藥物制劑中黃芩、黃芩苷薄層色譜鑒別方法取待測藥物組合物適量，加乙醇和鹽酸適量提取，提取液作為供試品溶液；另取黃芩對照藥材、黃芩苷制備對照溶液；黃芩對照藥材溶液的制備取黃芩對照藥材適量，乙醇和鹽酸適量提取，提取液作為對照藥材溶液；對照品溶液的制備取黃芩苷對照品；分別加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；采用中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗，吸取上述溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯-冰醋酸-水6∶4∶2的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2％三氯化鐵甲醇溶液，供試品色譜中，在與對照藥材色譜、對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色斑點。
實施例17治療上呼吸道感染等疾病的藥物制劑中黃芩苷的液相色譜鑒別方法取待測藥物組合物適量，加乙醇稀釋至合適濃度，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液；以黃芩苷對照品的乙醇溶液為對照，采用液相色譜法，色譜柱用八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，乙腈-0.02mol/L磷酸二氫鈉溶液(磷酸調節pH3.5)(30∶70)為流動相，檢測波長為275nm；供試品色譜中，具與對照品色譜有保留時間一致的色譜峰。
實施例18治療上呼吸道感染等疾病的藥物制劑中黃連、小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭的薄層色譜鑒別方法取待測藥物組合物適量，加醋酸乙酯提取，濾過，作為供試品溶液；另取黃連、小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭中制備對照溶液；黃連對照藥材溶液的制備取黃連對照藥材適量，加醋酸乙酯提取，濾過，作為對照藥材溶液；對照品溶液的制備取鹽酸小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭對照品，分別加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；采用中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液和對照品溶液各2μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇-冰醋酸-濃氨試液5∶2∶1為展開劑，置氨蒸汽預飽和的展開缸內，展開，取出，晾干，置紫外燈365nm檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜或者對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
實施例19治療上呼吸道感染等疾病的藥物制劑中小檗堿的液相色譜鑒別方法取待測藥物組合物適量，加水稀釋至合適濃度，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液；以鹽酸小檗堿對照品的甲醇溶液為對照，采用液相色譜法，色譜柱用二烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，乙腈-0.02mol/L磷酸二氫鉀溶液32％∶68％為流動相，檢測波長為266nm；供試品色譜中，具與對照品色譜有保留時間一致的色譜峰。
實施例20治療上呼吸道感染等疾病的藥物制劑中大黃素甲醚、大黃酚的薄層色譜鑒別方法取待測藥物組合物適量，加甲醇和鹽酸適量提取，提取液作為供試品溶液；另取大黃素甲醚、大黃酚對照品；分別加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；采用中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗，吸取上述溶液各2～5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以乙醚-醋酸丁酯-冰醋酸8∶6∶3的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置氨蒸汽中熏后日光下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色斑點。
實施例21治療上呼吸道感染等疾病的藥物制劑中大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚的液相色譜鑒別方法取待測藥物組合物適量，加3％鹽酸適量溶解后加三氯甲烷適量，回流提取1小時，放冷，分取三氯甲烷層，揮干溶劑，殘渣用乙醇溶解，作為供試品溶液；以大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚對照品的乙醇溶液為對照，采用液相色譜法，色譜柱用二烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，乙腈-0.5％冰醋酸水溶液68％∶32％為流動相，檢測波長為254nm，柱溫30℃；供試品色譜中，具與對照品色譜中的主峰有保留時間一致的色譜峰。
實施例22治療上呼吸道感染等疾病的藥物制劑中黃芩、黃芩苷的薄層色譜鑒別方法取待測藥物組合物適量，加甲醇和鹽酸適量提取，提取液作為供試品溶液；另取黃芩對照藥材、黃芩苷制備對照溶液；黃芩對照藥材溶液的制備取黃芩對照藥材適量，乙醇和鹽酸適量提取，提取液作為對照藥材溶液；對照品溶液的制備取黃芩苷對照品；分別加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；采用中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗，吸取上述溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯柖⊥？甲酸-水10∶5∶1∶1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以3％三氯化鐵乙醇溶液，供試品色譜中，在與對照藥材色譜、對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色斑點。
實施例23治療上呼吸道感染等疾病的藥物制劑中黃芩苷的液相色譜鑒別方法取待測藥物組合物適量，加甲醇稀釋至合適濃度，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液；以黃芩苷對照品的甲醇溶液為對照，采用液相色譜法，色譜柱用二烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，乙腈-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液(磷酸調節pH3.0)(30∶70)為流動相，檢測波長為275nm；供試品色譜中，具與對照品色譜有保留時間一致的色譜峰。
實施例24治療上呼吸道感染等疾病的滴丸制劑中小檗堿的薄層色譜鑒別方法取本品1g，加甲醇20ml，浸漬2小時，并時時振搖，濾過，濾液定至25ml，作為供試品溶液。另取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各2μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以苯-醋酸乙酯-甲醇-異丙醇-濃氨試液(4∶3∶2∶1.5∶0.5)為展開劑，置氨蒸汽飽和的展開缸內，展開，取出，晾干，置紫外燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
實施例25治療上呼吸道感染等疾病的滴丸制劑中黃芩苷的薄層色譜鑒別方法取本品1g，加甲醇20ml，滴加鹽酸4～6滴，振搖20分鐘，濾過，濾液定至25ml，作為供試品溶液。另取黃芩苷對照品，加甲醇制成每1ml含0.3mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以醋酸丁酯-甲酸-水(7∶4∶3)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2％三氯化鐵乙醇溶液，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
實施例26治療上呼吸道感染等疾病的滴丸制劑中大黃素的薄層色譜鑒別方法取本品1g，加甲醇20ml，滴加鹽酸4～6滴，振搖20分鐘，濾過，濾液定至25ml，作為供試品溶液。另取大黃素對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液5μl，對照品溶液2μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(60～90℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置氨蒸汽中熏至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
實施例27治療上呼吸道感染等疾病的藥物制劑中小檗堿的含量測定方法取待測藥物組合物適量，加甲醇稀釋至合適濃度，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液；以鹽酸小檗堿對照品的甲醇溶液為對照，采用液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，乙腈-0.05mol/L磷酸二氫鈉溶液30％∶70％為流動相，檢測波長為266nm；以外標一點法進行計算，各制劑以相當于每日用成品量為單位量，含量限度應為每單位量含小檗堿的限度不得少于10mg；實施例28治療上呼吸道感染等疾病的滴丸制劑中大黃酸、大黃素的含量測定方法取待測藥物組合物適量，加8％鹽酸適量溶解后加三氯甲烷適量，回流提取1小時，放冷，分取三氯甲烷層，揮干溶劑，殘渣用甲醇溶解，作為供試品溶液；以大黃酸、大黃素對照品的甲醇溶液為對照，采用液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇-0.1％磷酸水溶液85％∶15％為流動相，檢測波長為254nm，柱溫30℃；以外標一點法進行計算，各制劑以相當于每日用成品量為單位量，含量限度應為(1)每單位量含大黃酸的限度不得少于3.3mg；(2)每單位量含大黃素的限度不得少于1.3mg；實施例29治療上呼吸道感染等疾病的滴丸制劑中黃芩苷的含量測定方法取待測藥物組合物適量，加甲醇超聲處理，定容至合適濃度，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液；以黃芩苷對照品的甲醇溶液為對照，采用液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠或八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇-0.02mol/L磷酸二氫鈉溶液(磷酸調節pH2.7)(42∶58)為流動相，檢測波長為275nm；以外標一點法進行計算，各制劑以相當于每日用成品量為單位量，每單位量含的限度不得少于30mg。
實施例30治療上呼吸道感染等疾病的分散片制劑中巴馬亭的含量測定方法取待測藥物組合物適量，加乙醇稀釋至合適濃度，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液；以巴馬亭對照品的甲醇溶液為對照，采用液相色譜法，色譜柱用八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇-0.05mol/L磷酸二氫鈉溶液45％∶55％為流動相，檢測波長為266nm；以外標一點法進行計算，各制劑以相當于每日用成品量為單位量，含量限度應為每單位量含巴馬亭的限度不得少于4mg；實施例31治療上呼吸道感染等疾病的滴丸制劑中大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚的含量測定方法取待測藥物組合物適量，加10％鹽酸適量溶解后加二氯甲烷適量，回流提取1小時，放冷，分取二氯甲烷層，揮干溶劑，殘渣用甲醇溶解，作為供試品溶液；以大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚對照品的甲醇溶液為對照，采用液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，乙腈-0.1％磷酸水溶液70％∶30％為流動相，檢測波長為254nm，柱溫30℃；以外標一點法進行計算，各制劑以相當于每日用成品量為單位量，含量限度應為每單位量含大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚的限度不得少于9.9mg。
實施例32治療上呼吸道感染等疾病的滴丸制劑中黃芩苷的含量測定方法取待測藥物組合物適量，加70％乙醇加熱溶解，定容至合適濃度，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液；以黃芩苷對照品的乙醇溶液為對照，采用液相色譜法，色譜柱用八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，乙腈-0.02mol/L磷酸二氫鈉溶液(磷酸調節pH3.5)(30∶70)為流動相，檢測波長為275nm；以外標一點法進行計算，各制劑以相當于每日用成品量為單位量，每單位量含的限度不得少于30mg。
實施例33治療上呼吸道感染等疾病的滴丸制劑中小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭的含量測定方法取待測藥物組合物適量，加水稀釋至合適濃度，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液；以鹽酸小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭對照品的甲醇溶液為對照，采用液相色譜法，色譜柱用二烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，乙腈-0.02mol/L磷酸二氫鉀溶液32％∶68％為流動相，檢測波長為266nm；以標準曲線法進行計算，各制劑以相當于每日用成品量為單位量，含量限度應為(1)每單位量含小檗堿的限度不得少于5mg；(2)每單位量含小檗堿、黃連堿、巴馬亭、藥根堿的總和的限度不得少于10.75mg。
實施例34治療上呼吸道感染等疾病的分散片制劑中大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚的含量測定方法取待測藥物組合物適量，加3％鹽酸適量溶解后加三氯甲烷適量，回流提取1小時，放冷，分取三氯甲烷層，揮干溶劑，殘渣用乙醇溶解，作為供試品溶液；以大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚對照品的乙醇溶液為對照，采用液相色譜法，色譜柱用二烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，乙腈-0.5％冰醋酸水溶液68％∶32％為流動相，檢測波長為254nm，柱溫30℃；以標準曲線法進行計算，各制劑以相當于每日用成品量為單位量，含量限度應為以下幾項(1)每單位量含大黃酸的限度不得少于1.65mg；(2)每單位量含大黃素的限度不得少于0.65mg；(3)每單位量含大黃素甲醚的限度不得少于0.65mg；(4)每單位量含蘆薈大黃素的限度不得少于1mg；(5)每單位量含大黃酚的限度不得少于1mg；實施例35治療上呼吸道感染等疾病的分散片制劑中黃芩苷的含量測定方法取待測藥物組合物適量，加50％甲醇超聲處理，定容至合適濃度，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液；以黃芩苷對照品的甲醇溶液為對照，采用液相色譜法，色譜柱用二烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，乙腈-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液(磷酸調節pH3.0)(30∶70)為流動相，檢測波長為275nm；以標準曲線法進行計算，各制劑以相當于每日用成品量為單位量，每單位量含的限度不得少于15mg。
實施例36治療上呼吸道感染等疾病的滴丸制劑中黃芩苷的溶出度測定方法取重量差異項下本品4粒，照溶出度測定法，以脫氣處理的水500ml為溶出介質，轉速為每分鐘50轉，依法操作，經30分鐘時，取溶液5ml，立即用微孔濾膜濾過，取續濾液作為供試品溶液；按含量測定項下的色譜條件，精密吸取上述溶液10μl，注入液相色譜儀，照高效液相色譜法測定，計算每粒的溶出量，結果與相同成分的含量測定項下結果比較，應不少于70％。
權利要求
1.治療上呼吸道感染等疾病的一清藥物制劑，其特征在于它是用黃芩2425g加水煎煮二次，第一次加10倍水煎煮1.5小時，第二次加8倍水煎煮1小時，黃連1600g和大黃4850g分別加水煎煮二次，第一次加8倍水煎煮1.5小時，第二次加6倍水煎煮1小時，濾液減壓濃縮至70℃相對密度為1.25的清膏，減壓干燥成浸膏粉，將三種浸膏粉混勻制作成的注射液、粉針、凍干粉針、凝膠劑、分散片、膠囊劑、軟膠囊劑、微囊劑、顆粒劑、丸劑、微丸、散劑、滴丸劑、緩釋制劑、控釋制劑、凝膠劑、口服液體制劑、煎膏劑、浸膏劑或膜劑。
2.按照權利要求1所述的治療上呼吸道感染等疾病的一清藥物制劑，其特征在于所述制劑為滴丸劑、分散片劑或微丸劑。
3.按照權利要求1或2所述的治療上呼吸道感染等疾病的一清藥物制劑的制備方法，其特征在于所述制劑中的滴丸劑這樣制備它是用黃芩2425g加水煎煮二次，第一次加10倍水煎煮1.5小時，第二次加8倍水煎煮1小時，1600g黃連和4850g大黃分別加水煎煮二次，第一次加8倍水煎煮1.5小時，第二次加6倍水煎煮1小時，濾液減壓濃縮至70℃相對密度為1.25的清膏，減壓干燥成浸膏粉，將三種浸膏粉混勻，以聚乙二醇4000為基質，藥物與基質的配比為1∶1.5，混勻，滴入冷卻劑二甲硅油中，滴頭口徑為3.5/4.5、滴距為4～6cm、滴速30～40d/min、料溫70～80℃、冷卻液的溫度為10～20℃，即得
4.如權利要求1或2所述的治療上呼吸道感染等疾病的一清藥物制劑的質量控制方法，它包括含量測定、鑒別等，其特征在于該方法包括以下全部或部分內容(1)黃連藥材、大黃藥材、黃芩藥材、小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭、大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚、黃芩苷中全部或部分成分的鑒別測試方法；(2)小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭、大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚、黃芩苷中全部或部分成分的含量測試方法；(3)小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭、大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚、黃芩苷中全部或部分成分的溶出度測試方法。
5.按照權利要求4所述的治療上呼吸道感染等疾病的一清藥物制劑的質量控制方法，其特征在于所述藥物組合物的鑒別方法包括以下中的一種或幾種a、一清藥物制劑中黃連、小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭中一種或幾種的薄層色譜鑒別方法取待測藥物組合物適量，加醋酸乙酯或乙醇或甲醇或正丁醇提取，濾過，作為供試品溶液；另取黃連、小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭中的一種或幾種制備對照溶液；黃連對照藥材溶液的制備取黃連對照藥材適量，加醋酸乙酯或乙醇或甲醇或正丁醇提取，濾過，作為對照藥材溶液；對照品溶液的制備取鹽酸小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭中的一種或幾種對照品；分別加甲醇或乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；采用中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液和對照品溶液各1～30μl，分別點于同一硅膠G薄層板或硅膠H薄層板或硅膠GF254薄層板，以苯或甲苯或二甲苯-甲酸乙酯或醋酸乙酯或醋酸丁酯-甲醇或乙醇-異丙醇或丁酮-水或濃氨試液1～15∶0.5～10∶0.2～8∶0.2～5∶0.1～3或醋酸乙酯或甲酸乙酯-丁酮或異丙醇-甲酸或乙酸-水或濃氨試液2～30∶1～25∶0.2～5∶0.2～5或正丁醇-醋酸或甲酸-水或濃氨試液1～25∶0.1～5∶0.1～5為展開劑，展開或置氨蒸汽預飽和的展開缸內，展開，取出，晾干，置紫外燈365nm或254nm檢視或噴以2～20％變色酸-濃硫酸溶液或2～20％磷鉬酸乙醇溶液或茴香醛硫酸溶液，80℃～160℃烘至斑點顯色清晰或噴以碘化鉍鉀試液，供試品色譜中，在與對照藥材色譜或者對照品色譜相應的位置上，應顯相同顏色的斑點；b、一清藥物制劑中小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭中一種或幾種的液相色譜鑒別方法取待測藥物組合物適量，加甲醇或乙醇或流動相或水溶解或稀釋至合適濃度，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液；以鹽酸小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭中的一種或幾種對照品的甲醇或乙醇溶液為對照，采用液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠或八烷基硅烷鍵合硅膠或二烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇或乙腈-水或0.05％～10％冰醋酸水溶液或0.05％～10％甲酸水溶液或0.01％～5％磷酸水溶液或0.005mol/L～2mol/L磷酸二氫鈉溶液或0.005mol/L～2mol/L磷酸二氫鉀或0.005mol/L～2mol/L磷酸氫二鈉溶液或0.005mol/L～2mol/L磷酸氫二鉀溶液5％～95％∶95％～5％為流動相，檢測波長為200～410nm；供試品色譜中，應具與對照品色譜有保留時間一致的色譜峰；c、一清藥物制劑中大黃、大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚中一種或幾種的薄層色譜鑒別方法取待測藥物組合物適量，加甲醇或乙醇和鹽酸適量提取，提取液作為供試品溶液或取待測藥物組合物適量，加水溶解后再加鹽酸適量后回流提取，立即冷卻，用乙醚或三氯甲烷或石油醚提取，提取液揮干，殘渣用三氯甲烷溶解，作為供試品溶液；另取大黃對照藥材、大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚中的一種或幾種制備對照溶液；大黃對照藥材溶液的制備取大黃對照藥材適量，加甲醇或乙醇和鹽酸適量提取，提取液作為對照藥材溶液或取大黃對照藥材適量，加醋酸乙酯或乙醇或甲醇或正丁醇提取，濾過，濾液蒸干，殘渣加水溶解，再加鹽酸適量后回流提取，立即冷卻，用乙醚或三氯甲烷或石油醚提取，提取液揮干，殘渣用三氯甲烷溶解，作為對照藥材溶液；對照品溶液的制備取大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚中的一種或幾種對照品；分別加甲醇或乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；采用中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗，吸取上述溶液各1～30μl，分別點于同一硅膠G薄層板或硅膠H薄層板或硅膠GF254薄層板上，以30～60℃石油醚或60～90℃石油醚或乙醚或三氯甲烷-甲酸乙酯或醋酸乙酯或醋酸丁酯-甲酸或冰醋酸1～60∶1～20∶0.1～5的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈365nm或254nm下或氨蒸汽中熏后日光下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜、對照品色譜相應的位置上，應顯相同顏色斑點；d、一清藥物制劑中大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚中一種或幾種的液相色譜鑒別方法取待測藥物組合物適量，加甲醇和鹽酸適量提取，提取液作為供試品溶液或取待測藥物組合物適量，加3％～35％鹽酸適量溶解后加三氯甲烷或二氯甲烷適量，回流提取，放冷，分取三氯甲烷或二氯甲烷層，揮干溶劑，殘渣用甲醇或乙醇溶解，作為供試品溶液；以大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚中的一種或幾種對照品的甲醇或乙醇溶液為對照，采用液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠或八烷基硅烷鍵合硅膠或二烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇或乙腈-水或0.05％～5％冰醋酸水溶液或0.05％～5％甲酸水溶液或0.02％～5％磷酸水溶液5％～95％∶95％～5％為流動相，檢測波長為190～410nm，柱溫在20～60℃范圍內；供試品色譜中，應具與對照品色譜中的主峰有保留時間一致的色譜峰；e、一清藥物制劑中黃芩、黃芩苷中一種或幾種的薄層色譜鑒別方法取待測藥物組合物適量，加甲醇或乙醇和鹽酸適量提取，提取液作為供試品溶液；另取黃芩對照藥材、黃芩苷中的一種或幾種制備對照溶液；黃芩對照藥材溶液的制備取黃芩對照藥材適量，甲醇或乙醇和鹽酸適量提取，提取液作為對照藥材溶液；對照品溶液的制備取黃芩苷對照品；分別加甲醇或乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；采用中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗，吸取上述溶液各1～30μl，分別點于同一硅膠G薄層板或硅膠H薄層板或硅膠GF254薄層板或含1％～8％醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉溶液的硅膠G薄層板上，以甲酸乙酯或醋酸乙酯或醋酸丁酯-甲酸或冰醋酸-水1～30∶1～15∶0.1～10或甲酸乙酯或醋酸乙酯-丁酮-甲酸或冰醋酸-水1～30∶1～15∶0.1～5∶0.1～5為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈365nm或254nm下檢視或噴以0.2～10％三氯化鐵乙醇或甲醇溶液，供試品色譜中，在與對照藥材色譜、對照品色譜相應的位置上，應顯相同顏色斑點；f、一清藥物制劑中黃芩苷的液相色譜鑒別方法取待測藥物組合物適量，加甲醇或乙醇或流動相或水溶解或稀釋至合適濃度，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液；以黃芩苷對照品的甲醇或乙醇溶液為對照，采用液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠或八烷基硅烷鍵合硅膠或二烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇或乙腈-水或0.05％～10％冰醋酸水溶液或0.05％～10％甲酸水溶液或0.01％～5％磷酸水溶液或0.005mol/L～2mol/L并用磷酸調節pH2～5的磷酸二氫鈉溶液，或0.005mol/L～2mol/L并用磷酸調節pH2～5的磷酸二氫鉀溶液或0.005mol/L～2mol/L并用磷酸調節pH2～5的磷酸氫二鈉溶液或0.005mol/L～2mol/L并用磷酸調節pH2～5的磷酸氫二鉀溶液5％～95％∶95％～5％為流動相，檢測波長為200～410nm；供試品色譜中，應具與對照品色譜有保留時間一致的色譜峰。
6.按照權利要求5所述的治療上呼吸道感染等疾病的一清藥物制劑的質量控制方法，其特征在于所述藥物組合物的鑒別方法包括以下中的一種或幾種a、一清藥物制劑中黃連、小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭中一種或幾種的薄層色譜鑒別方法取待測藥物組合物適量，加甲醇提取，濾過，作為供試品溶液；另取黃連、小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭中的一種或幾種制備對照溶液；黃連對照藥材溶液的制備取黃連對照藥材適量，加甲醇提取，濾過，作為對照藥材溶液；對照品溶液的制備取鹽酸小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭中的一種或幾種對照品；分別加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；采用中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液和對照品溶液各2μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以苯-醋酸乙酯-甲醇-異丙醇-濃氨試液4∶3∶2∶1.5∶0.5為展開劑，置氨蒸汽預飽和的展開缸內，展開，取出，晾干，置紫外燈365nm檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜或者對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；b、一清藥物制劑中小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭中一種或幾種的液相色譜鑒別方法取待測藥物組合物適量，加甲醇稀釋至合適濃度，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液；以鹽酸小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭中的一種或幾種對照品的甲醇溶液為對照，采用液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，乙腈-0.05mol/L磷酸二氫鈉溶液30％∶70％為流動相，檢測波長為266nm；供試品色譜中，具與對照品色譜有保留時間一致的色譜峰；c、一清藥物制劑中大黃、大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚中一種或幾種的薄層色譜鑒別方法取待測藥物組合物適量，加甲醇和鹽酸適量提取，提取液作為供試品溶液；另取大黃對照藥材、大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚中的一種或幾種制備對照溶液；大黃對照藥材溶液的制備取大黃對照藥材適量，加甲醇和鹽酸適量提取，提取液作為對照藥材溶液；對照品溶液的制備取大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚中的一種或幾種對照品；分別加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；采用中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗，吸取上述溶液各2～5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以60～90℃的石油醚-甲酸乙酯-甲酸15∶5∶1的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置氨蒸汽中熏后日光下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜、對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色斑點；d、一清藥物制劑中大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚中一種或幾種的液相色譜鑒別方法取待測藥物組合物適量，加8％鹽酸適量溶解后加三氯甲烷適量，回流提取1小時，放冷，分取三氯甲烷層，揮干溶劑，殘渣用甲醇溶解，作為供試品溶液；以大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚中的一種或幾種對照品的甲醇溶液為對照，采用液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇-0.1％磷酸水溶液85％∶15％為流動相，檢測波長為254nm，柱溫30℃；供試品色譜中，具與對照品色譜中的主峰有保留時間一致的色譜峰；e、一清藥物制劑中黃芩、黃芩苷中一種或幾種的薄層色譜鑒別方法取待測藥物組合物適量，加甲醇和鹽酸適量提取，提取液作為供試品溶液；另取黃芩對照藥材、黃芩苷中的一種或幾種制備對照溶液；黃芩對照藥材溶液的制備取黃芩對照藥材適量，甲醇和鹽酸適量提取，提取液作為對照藥材溶液；對照品溶液的制備取黃芩苷對照品；分別加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；采用中國藥典附錄公開的薄層色譜法試驗，吸取上述溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以醋酸丁酯-甲酸-水7∶4∶3的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2％三氯化鐵乙醇溶液，供試品色譜中，在與對照藥材色譜、對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色斑點；f、一清藥物制劑中黃芩苷的液相色譜鑒別方法取待測藥物組合物適量，加甲醇稀釋至合適濃度，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液；以黃芩苷對照品的甲醇溶液為對照，采用液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇-0.02mol/L并用磷酸調節pH2.7的磷酸二氫鈉溶液＝42∶58為流動相，檢測波長為275nm；供試品色譜中，具與對照品色譜有保留時間一致的色譜峰。
7.按照權利要求4所述的治療上呼吸道感染等疾病的一清藥物制劑質量控制方法，其特征在于所述藥物組合物含量的測試方法應包括以下中的一種或幾種a、一清藥物制劑中小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭中一種或幾種的含量測定方法取待測藥物組合物適量，加甲醇或乙醇或流動相或水溶解或稀釋至合適濃度，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液；以鹽酸小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭中的一種或幾種對照品的甲醇或乙醇溶液為對照，采用液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠或八烷基硅烷鍵合硅膠或二烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇或乙腈-水或0.05％～10％冰醋酸水溶液或0.05％～10％甲酸水溶液或0.01％～5％磷酸水溶液或0.005mol/L～2mol/L磷酸二氫鈉溶液或0.005mol/L～2mol/L磷酸二氫鉀或0.005mol/L～2mol/L磷酸氫二鈉溶液或0.005mol/L～2mol/L磷酸氫二鉀溶液5％～95％∶95％～5％為流動相，檢測波長為200～410nm；以外標一點法或標準曲線法進行計算，各制劑以相當于每日用成品量為單位量，含量限度應為以下一項或幾項(1)每單位量含小檗堿的限度不得少于5mg；(2)每單位量含黃連堿的限度不得少于2.5mg；(3)每單位量含巴馬亭的限度不得少于2mg；(4)每單位量含藥根堿的限度不得少于1.25mg；(5)每單位量含小檗堿、黃連堿、巴馬亭、藥根堿的總和的限度不得少于10.75mg；b、一清藥物制劑中大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚中一種或幾種的含量測定方法取待測藥物組合物適量，加8％鹽酸適量溶解后加三氯甲烷適量，回流提取1小時，放冷，分取三氯甲烷層，揮干溶劑，殘渣用甲醇溶解，作為供試品溶液；以大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚中的一種或幾種對照品的甲醇溶液為對照，采用液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇-0.1％磷酸水溶液85％∶15％為流動相，檢測波長為254nm，柱溫30℃；供試品色譜中，具與對照品色譜中的主峰有保留時間一致的色譜峰；以外標一點法或標準曲線法進行計算，各制劑以相當于每日用成品量為單位量，含量限度應為以下一項或幾項(1)每單位量含大黃酸的限度不得少于1.65mg；(2)每單位量含大黃素的限度不得少于0.65mg；(3)每單位量含大黃素甲醚的限度不得少于0.65mg；(4)每單位量含蘆薈大黃素的限度不得少于1mg；(5)每單位量含大黃酚的限度不得少于1mg；(6)每單位量含大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚的限度不得少于4.95mg；c、一清藥物制劑中黃芩苷的含量測定方法取待測藥物組合物適量，加甲醇超聲處理，定容至合適濃度，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液；以黃芩苷對照品的甲醇溶液為對照，采用液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠或八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇-水0.02mol/L并用磷酸調節pH2.7的磷酸二氫鈉溶液為流動相，檢測波長為275nm；以外標一點法或標準曲線法進行計算，各制劑以相當于每日用成品量為單位量，每單位量含的限度不得少于15mg。
8.按照權利要求7所述的治療上呼吸道感染等疾病的一清藥物制劑質量控制方法，其特征在于所述藥物組合物含量的測試方法應包括以下中的一種或幾種a、一清藥物制劑中小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭中一種或幾種的液相色譜含量測定方法取待測藥物組合物適量，加甲醇稀釋至合適濃度，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液；以鹽酸小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭中的一種或幾種對照品的甲醇溶液為對照，采用液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，乙腈-0.05mol/L磷酸二氫鈉溶液30％∶70％為流動相，檢測波長為266nm；以外標一點法進行計算，各制劑以相當于每日用成品量為單位量，含量限度應為以下一項或幾項(1)每單位量含小檗堿的限度不得少于10mg；(2)每單位量含黃連堿的限度不得少于5mg；(3)每單位量含巴馬亭的限度不得少于4mg；(4)每單位量含藥根堿的限度不得少于2.5mg；(5)每單位量含小檗堿、黃連堿、巴馬亭、藥根堿的總和的限度不得少于21.5mg；b、一清藥物制劑中大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚中一種或幾種的液相色譜含量測定方法取待測藥物組合物適量，加8％鹽酸適量溶解后加三氯甲烷適量，回流提取1小時，放冷，分取三氯甲烷層，揮干溶劑，殘渣用甲醇溶解，作為供試品溶液；以大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚中的一種或幾種對照品的甲醇溶液為對照，采用液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇-0.1％磷酸水溶液85％∶15％為流動相，檢測波長為254nm，柱溫30℃；以外標一點法進行計算，各制劑以相當于每日用成品量為單位量，含量限度應為以下一項或幾項(1)每單位量含大黃酸的限度不得少于3.3mg；(2)每單位量含大黃素的限度不得少于1.3mg；(3)每單位量含大黃素甲醚的限度不得少于1.3mg；(4)每單位量含蘆薈大黃素的限度不得少于2mg；(5)每單位量含大黃酚的限度不得少于2mg；(6)每單位量含大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚的限度不得少于9.9mg；c、一清藥物制劑中黃芩苷的液相色譜含量測定方法取待測藥物組合物適量，加甲醇超聲處理，定容至合適濃度，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液；以黃芩苷對照品的甲醇溶液為對照，采用液相色譜法，色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇-0.02mol/L并用磷酸調節pH2.7的磷酸二氫鈉溶液＝42∶58為流動相，檢測波長為275nm；以外標一點法進行計算，各制劑以相當于每日用成品量為單位量，每單位量含的限度不得少于30mg。
9.按照權利要求4所述的治療上呼吸道感染等疾病的一清藥物制劑質量控制方法，其特征在于所述藥物組合物中小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭、大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚、黃芩苷的溶出度測試方法應為取重量差異項下本品，照溶出度測定法，以脫氣處理的水或稀鹽酸、緩沖液、人工胃液、人工腸液為溶出介質，轉速為每分鐘20～100轉，依法操作，經20～45分鐘時，取溶液1～20ml，立即用微孔濾膜濾過，取續濾液作為供試品溶液；按含量測定項下的色譜條件，精密吸取上述溶液5～10μl，注入液相色譜儀，照高效液相色譜法測定，計算每粒的溶出量，結果與相同成分的含量測定項下結果比較，溶出度應不少于50％。
10.按照權利要求9所述的治療上呼吸道感染等疾病的一清藥物制劑質量控制方法，其特征在于所述藥物組合物中小檗堿、藥根堿、黃連堿、巴馬亭、大黃酸、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酚、黃芩苷的溶出度測試方法應為取重量差異項下本品4粒，照溶出度測定法，以脫氣處理的水500ml為溶出介質，轉速為每分鐘50轉，依法操作，經30分鐘時，取溶液5ml，立即用微孔濾膜濾過，取續濾液作為供試品溶液；按含量測定項下的色譜條件，精密吸取上述溶液10μl，注入液相色譜儀，照高效液相色譜法測定，計算每粒的溶出量，結果與相同成分的含量測定項下結果比較，應不少于70％。
全文摘要
本發明是一種治療上呼吸道感染等疾病的藥物制劑及制法和質控方法，它是用黃連、大黃、黃芩與輔料制作成的藥物制劑；產品具有清熱瀉火解毒、化淤涼血、止血之功效，用于治療急慢性上呼吸道感染、過敏性鼻炎、便秘和腸炎、癰腫瘡毒、口腔潰瘍、牙齦腫痛、水火燙傷、急性黃疸性肝炎、痔瘡出血、高脂血癥所致的高血壓、及輔助治療慢性腎臟病等；利用本發明提供的制備方法比較經濟、合理，能夠解決現有生產存在的缺點，本發明提供的質量控制方法能保證制備的制劑科學、有效。
文檔編號A61K9/16GK1876039SQ200610200400
公開日2006年12月13日 申請日期2006年4月26日 優先權日2005年5月9日
發明者周霞 申請人:貴陽云巖西創藥物科技開發有限公司