專利名稱：：免疫佐劑的制作方法
技術領域：
：本發明涉及一種免疫佐劑。
背景技術：
：以往，常用的大部分免疫佐劑在生物體中給藥的部位起兩種作用(l)抗原保持以不快速擴散的水性或油性乳劑的性狀，且抗原緩緩釋放，有效地供給免疫載體細胞，(2)引起炎癥反應，使集合于炎癥部位的免疫載體細胞活化。近年來，清楚了抗原提呈細胞在誘導產生抗體的液性免疫反應和誘導殺傷T細胞的細胞性免疫反應任意一種均起到免疫反應中心的作用，并且作為抗原提呈細胞，有樹突狀細胞、巨噬細胞和B細胞。其中，樹突狀細胞具有最強的抗原提呈能力(DendriticCells,secondedition,ed.Lotze，M.T.andThomson,A.W.,AcademicPress,SanDiego，2001)。將可有效活化抗原提呈細胞的物質與抗原一起施加給生物體，該物質作為免疫佐劑作用，在液性免疫反應和細胞性免疫反應任意一種均可以有效誘導增強針對抗原的免疫反應。盡管以往已經了解了很多種免疫佐劑，然而在人腫瘤的治療和以預防轉移和復發為目的的腫瘤免疫療法中可以使用的安全且價格低廉的免疫佐劑卻很少。例如，在利用培養樹突狀細胞的腫瘤免疫療法中，使用了鑰孔嘁血藍蛋白作為免疫佐劑(Geiger，J.D.，等人，CancerRes.,61，pp.8513-8519，2001)，但該物質價格很高。現在也提出了施以直接活化樹突狀細胞的粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(granulocyte-macrophagecolonystimulatingfactor:以下簡稱為"GM-CSF，，的情況)等細胞因子類作為免疫佐劑的方法，但是細胞因子類的價格更高。在用于針對傳染病的對抗措施的疫苗的制備中，作為安全且價格低廉的免疫佐劑，一直使用的是像氫氧化鋁(Alum)、弗氏不完全佐劑(Freund，simcompleteadjuvant,這種佐劑由于是油性，因此一直擔心毒性問題)，或Montanide等這樣的活性不充分的免疫佐劑。這些佐劑如果與動物實驗中使用的弗氏完全佐劑(Freund，scompleteadjuvant:以下將其簡稱為"FCA"的情況)和Ribi佐劑系統(RibiAdjuvantSystem)相比，毒性低的免疫佐劑活性也低。通過硫酸銨沉淀法純化結核菌感染例檢測用結核菌素，尤其是結核菌素中的蛋白成分獲得的純化結核菌素(以下存在簡稱為"PPD"的情況)，由于即使對人重復給藥也極為安全，而且便宜，因此在全世界普及。本發明人發現可以使用PPD作為免疫佐劑使用(PCT/JP00/00692)。而且，本發明人還通過將PPD制成經可溶性蛋白與粘多糖的凝聚獲得的沉淀物，在經物理手段使之變性的腫瘤組織內給藥，發現制成用于誘導抗腫瘤免疫反應的有效免疫佐劑(日本專利第3492671號)。該免疫佐劑具有比溶解狀態的PPD更高的免疫佐劑活性，與溶解狀態的PPD同樣具有極高的安全性。可是，若與FCA和內毒素的主要成分-脂多糖(以下存在將其簡稱為"LPS"的情況)相比，其免疫佐劑活性并不充分。可以吞噬微粒狀的抗原的未成熟的抗原提呈細胞在末梢血中流動。己知的是，如果在體外培養中的未成熟的抗原提呈細胞中添加LPS，則成熟增進，顯示出強力的抗原提呈能力。該過程中活化的抗原提呈細胞釋放出GM-CSF、白細胞介素(以下，存在簡稱為"IL"的情況)-12、干擾素Y(以下存在將其簡稱為"IFNg"的情況)等各種細胞因子。GM-CSF自身為樹突狀細胞的生存所必需的細胞生長因子，因此一旦活化的樹突狀細胞由于GM-CSF的自分泌機制，因此長期保持活化狀態而可繼續存活下去。樹突狀細胞以及巨噬細胞是由相同的造血干細胞分化的同一系統的抗原提呈細胞，一旦受到免疫刺激，則與樹突狀細胞一樣產生GM-CSF等細胞因子。實際上，通過以固體化微粒化的腫瘤組織作為抗原，與GM-CSF等細胞因子一起在體內給藥，可以有效誘導針對腫瘤細胞的抗腫瘤免疫反應(PCT/JP00/00692)。該事實表明，在GM-CSF自身形成免疫佐劑的同時，受到免疫佐劑的刺激的抗原提呈細胞所產生的GM-CSF的量可以作為表示原免疫佐劑的活性的指標。也就是說，通過定量人來源的抗原提呈細胞產生的GM-CSF，可以在不使用人個體的體外實驗系統中推定在人體中的免疫佐劑活性。本發明人公開了通過利用上述方法，使用含有人末梢血來源的抗原提呈細胞的末梢血附著性細胞，通過在免疫刺激物質載體的固體化組織中固定微來源于生物的可溶性成分[牛分枝桿菌BacillusCalmette-Guein(以下稱為"BCG菌")等有機溶劑提取可溶性成分]，可以獲得強免疫佐劑作用(W02003/074079)。可以在該免疫佐劑中作為免疫刺激物質載體使用的固體化組織是在包括抗原提呈細胞在內的吞噬細胞內被消化，不殘留于體內而消失的生物分解性材料。而且，在人個體中使用這種免疫佐劑時，如果不使用主要組織相容性抗原完全一致的本人或遺傳上一致的同卵雙胞胎的組織，則免疫刺激物質載體具有對該人個體具有抗原性，引起針對免疫刺激物質載體或其消化蛋白片段的抗原抗體反應。這一點，在使用上述免疫佐劑作為廣泛使用的免疫佐劑時(在免疫佐劑中添加理想的抗原誘導針對抗原的免疫反應時)，可引起對于免疫刺激物質載體自身的額外的抗原抗體反應，產生針對該抗原的免疫反應埋沒于整體的免疫反應中而難以顯現這樣的問題。另一方面，本發明人提出了承載了1種或2種以上的被承載分子的磷酸鈣微粒的制備方法(特幵2005-126335號公報)。這種磷酸f丐微粒是Ca/P摩爾比在1.3以上的羥基磷灰石。而且，還公開了由于非晶體磷酸鈣微粒和低結晶性磷灰石不僅可以承載親水性蛋白質分子，還可以承載疏水性低分子，因此可成為免疫刺激物質載體(特表2002-524491號公報)。然而，以往并不知道使1種或2種以上的免疫刺激物質承載于物理化學性質完全不同的兩種以上的免疫刺激物質載體之上，將其混合的免疫佐劑。
發明內容本發明的課題在于提供一種安全性優異且可以有效發揮強免疫佐劑活性的免疫佐劑。本發明人發現，通過以結核菌素作為緩釋性制劑，可以獲得高免疫佐劑活性，通過與白蛋白和肝素混合、凝聚形成沉淀時，預先混合結核菌素蛋白，結核菌素蛋白巻入于該沉淀中形成不溶性微粒，形成緩釋性制劑，以及如果將該不溶性微粒與可溶性的純化結核菌素一起作為免疫佐劑，以腫瘤細胞作為抗原在體內給藥，則顯示出強力的腫瘤防御效果，如果在熱變性的體內腫瘤組織中給藥可以誘導強力的抗腫瘤免疫反應(日本專利第3492671號)。另一方面，公開了磷酸鈣微粒可以作為免疫刺激物質載體(特表2002-524491號公報)，通過磷酸鈣微粒的制備方法(特開2005-126335號公報)生成的磷酸l丐微粒是Ca/P摩爾比在1.3以上的羥基磷灰石，含有大量最大直徑不到lum的納米尺寸的微粒，生物體適應性極高且安全。通過使PPD承載于其大小可以吞噬這種抗原提呈細胞的磷酸鈣微粒，因此可以制備免疫佐劑。本發明人為了解決上述問題，繼續進行研究，其結果發現，若使用結核菌素中所含的可溶性蛋白或來源于微生物的可溶性成分等作為免疫刺激物質，使該免疫剌激物質分別承載于微粒狀的免疫刺激物質(a)無機物，和(b)由可溶性蛋白和粘多糖的凝聚產生的沉淀物之上，使用這些載體的混合物作為免疫佐劑，則發現，與單獨使用一種免疫刺激物質載體時相比，可以獲得協同的極強的免疫作用。例如，若使用含有混合白蛋白和肝素，通過凝聚形成沉淀時通過混合結核菌素獲得的不溶性微粒，和在通過特開2005-126335號公報中記載的方法獲得的Ca/P摩爾比在1.3以上的羥基磷灰石-磷酸鈣微粒上承載有PPD的微粒的混合物作為免疫佐劑，則獲得了遠遠高于單獨使用各個成分時獲得的免疫佐劑活性的協同的高免疫佐劑作用。本發明基于以上認識而完成。也就是說，通過本發明，免疫佐劑含有在兩種以上的不同的微粒狀免疫刺激物載體上分別承載1種或2種以上的免疫刺激物質，其中免疫佐劑可以提供的作為該微粒狀免疫刺激物質載體至少包括(a)無機物和(b)由可溶性蛋白和粘多糖的凝聚產生的沉淀物的組合物。如果根據本發明的優選方式，可以提供上述免疫佐劑為兩種免疫刺激物質載體的組合為(a)可以被細胞吞噬的尺寸的微粒狀磷酸鈣和(b)由可溶性蛋白和粘多糖的凝聚產生的沉淀物。按照更為優選的方式，上述的免疫佐劑，其中上述(a)的微粒狀磷酸鈣的最大直徑在1um以下的磷酸鈣；提供的上述的免疫佐劑，其中上述(a)的微粒狀磷酸鈣如下Ca/P摩爾比在1.3以上，含有3-6重量％的碳酸根0)32-，其結晶性為通過CuKa射線產生的XRD光譜中，出現29值26°、32°和34°為中心的寬峰，33°中出現米勒指數300的肩峰為規定的結晶性以上，且不僅在以26°、28.1°、29°、32°、33°和34°為中心的峰或肩峰出現，而且米勒指數為211和112的峰分離為規定的結晶性以下的結晶性微粒狀磷酸鈣。如果按照其它的更為優選的方式提供，上述(b)的可溶性蛋白為白蛋白的上述免疫佐劑；上述(b)的粘多糖為肝素的上述免疫佐劑；上述(b)的不溶性物質的通過可溶性蛋白和粘多糖的凝聚產生的沉淀物是通過蛋白分子間交聯劑交聯的沉淀物的上述免疫佐劑。而且，還可以提供，免疫刺激物質為選自于細胞因子，趨化因子，細胞生長因子和激素的誘導劑中的1種或2種以上的免疫刺激物質的上述免疫佐劑；免疫刺激物質為選自于結核菌素，純化結核菌素(PPD)，源于微生物的可溶性成分，6，6-雙分枝菌酸藻糖(Trechalose-6,6，-dimycolate)，LPS，脂質A，寡核苷酸(oligodeoxyribonucleotide)，葡聚糖，鑰孔嘁血藍蛋白，胞壁酰基二肽，貝他定(bestatin)，左旋咪唑，細胞因子，趨化因子，細胞生長因子和激素中的1種或2種以上的免疫刺激物質的上述的免疫佐劑；源于微生物的可溶性成分為選自于微生物的醇提取物，丙酮提取物，吡啶提取物和熱水提取物中的1種或2種以上的提取物的上述的免疫佐劑。從其它方面來說，可以提供用于通過在包括人在內的哺乳動物體內與抗原一起給藥來誘導針對該抗原的全身性免疫反應的上述的免疫佐劑。根據本發明的優選方式，可以提供抗原為選自于真菌，放線菌，細菌，病毒，噬菌體，立克次氏體，原生動物，這些微生物的成分，腫瘤組織，腫瘤細胞，腫瘤細胞成分，腫瘤抗原蛋白和腫瘤抗原肽中的1種或2種以上的抗原的上述的免疫佐劑。而且，從其它方面來說，可以提供用于通過用物理方法使包括人在內的哺乳類動物的腫瘤組織變性后，在該腫瘤組織內給藥來誘導抗腫瘤免疫反應的上述免疫佐劑。根據本發明的優選方式，可以提供物理方法為選自于微波照射，射頻凝固法，冷凍凝固法，電刀加熱，熱水注入，醇注入，栓塞法、放射線照射，激光照射和超聲波破壞中的1種或2種以上的方法的上述免疫佐劑。從其它方面來說，可以提供用于通過在體外與免疫載體細胞混合后，給藥于包括人在內的哺乳動物，誘導全身性免疫反應的上述免疫佐劑。根據本發明的優選方式，可以提供免疫載體細胞為選自于樹突狀細胞，巨噬細胞，B淋巴細胞，T淋巴細胞，自然殺傷T細胞和造血干細胞中的l種或2種以上的細胞的上述免疫佐劑。而且，還可以提供含有上述免疫佐劑和抗原的疫苗。按照本發明的優選方式，可以提供抗原為選自于真菌，放線菌，細菌，病毒，噬菌體，立克次氏體，原生動物，這些微生物的成分中的1種或2種以上的抗原的用于預防和/或治療傳染病的上述疫苗；和抗原為選自于腫瘤組織，腫瘤細胞，腫瘤細胞成分，腫瘤抗原蛋白和腫瘤抗原肽中的1種或2種以上的抗原的用于預防和/或治療腫瘤的上述疫苗。而且，通過使用例如異種動物蛋白作為抗原，上述的免疫佐劑可以使在人以外的哺乳動物中有效產生針對該抗原的抗體。因此，本發明可以提供抗體產生動物和來源于該抗體產生動物的抗體產生細胞或抗體基因。進而，本發明還可以提供含有用于通過用物理方法使包括人在內的哺乳類動物的腫瘤變性后在該腫瘤組織中給藥來誘導抗腫瘤免疫反應的上述免疫佐劑的腫瘤疫苗；含有用于通過在體外與免疫載體細胞混合后，在包括人在內的哺乳類動物中給藥，在該動物的活體內誘導抗腫瘤免疫反應的上述免疫佐劑的腫瘤疫苗；含有用于通過在體外與免疫載體細胞和抗原混合后，在包括人在內的哺乳類動物給藥，在該動物的活體內誘導抗腫瘤免疫反應的上述免疫佐劑的腫瘤疫苗。從其它方面來說，本發明還可以提供全身性免疫反應的誘導方法，該方法包括在包括人在內的哺乳類動物中給藥上述免疫佐劑的步驟；誘導抗腫瘤免疫反應的方法，該方法包括用物理方法使包括人在內的哺乳類動物的腫瘤組織變性后，再將上述免疫佐劑給藥于該腫瘤組織內的步驟；和全身性免疫反應的誘導方法，該方法包括預先在體外混合上述免疫佐劑和免疫載體細胞，再給藥于包括人在內的哺乳類動物的生物體內的步驟。圖1:是表示使兩種免疫刺激物質分別承載于不同的兩種免疫刺激物質載體的本發明的免疫佐劑的抗原提呈細胞刺激效果圖。以磷酸鈣(以下存在簡稱為"CaP"的情況)作為載體，使之承載BCG菌提取物作為免疫刺激物質。而且，使用以凝聚沉淀微粒作為載體，使之承載PPD的TuMP。具體實施例方式本說明書中使用的術語的含義如下所示。"免疫刺激物質"是在包括人在內的哺乳類動物中給藥時引起和/或增強任意免疫反應的物質，在體外，向包括人在內的哺乳類動物的抗原提呈細胞中添加時引起和/或增強該細胞的任意活化的物質。因此，只要抗原自身具有任何的免疫刺激作用，就包含于免疫刺激物質。所謂"免疫刺激物質載體"是用于承載上述的免疫刺激物質的物質。免疫刺激物質載體自身完全沒有免疫刺激作用或大多具有極低免疫刺激作用，但也有載體自身具有免疫刺激作用的情況。"2種以上的不同的免疫刺激物質載體"或其同義詞中，除了由不同的化學物質或不同的組合物構成的2種以上的免疫刺激物質載體之外，還包括由同樣的化學物質或組合物構成的具有不同物理化學性狀的免疫刺激物質載體。例如，可以使用含有相同成分并且該成分的比率不同的兩種組合物作為兩種免疫刺激物質載體。或者，由相同化學物質或組合物構成的微粒，其粒子表面的物理化學性狀不同的情況等也包括于該術語中。本說明書中，該術語在任何一種意思中都沒有限定性解釋，需要以最廣義解釋。所謂"免疫佐劑"是可以引起和/或增強針對抗原的免疫反應的物質或組合物。也存在只將幾乎沒有免疫刺激作用的免疫刺激物質載體稱為免疫佐劑的情況，但通常情況下多指該載體和任意的免疫刺激物質的組合。而且，也存在即使只是免疫刺激物質也稱為免疫佐劑的情況。本發明的免疫佐劑是指在兩種以上的免疫刺激物質載體上分別承載1種或2種以上的免疫剌激物質，必然包括免疫物質載體和免疫刺激物質的組合。本發明的免疫佐劑的特征在于，包括在兩種以上的不同的微粒狀的免疫刺激物質載體上分別承載1種或2種以上的免疫刺激物質，該微粒狀免疫刺激物質載體中至少一種為無機物，其它一種為由可溶性蛋白和粘多糖的凝聚產生的沉淀物。本發明的免疫佐劑，作為微粒狀免疫刺激物質載體，含有(a)無機物和(b)由可溶性蛋白和粘多糖的凝聚產生的沉淀物的組合物，在上述(a)和(b)的各個微粒狀免疫刺激物質載體上承載同樣的或不同的免疫刺激物質。免疫刺激物質可以是l種，可以使用兩種以上。例如，典型的是，可以分別在上述(a)和(b)的各個微粒子狀免疫刺激物質載體上各承載1種不同的免疫刺激物質，或者也可以分別在上述(a)和(b)的微粒狀免疫刺激物質載體上分別承載相同的免疫刺激物質。或者，可以在上述(a)和(b)的微粒狀免疫刺激物質載體中的1種上承載兩種不同的免疫刺激物質，再在1種免疫刺激物質載體上承載這些免疫刺激物質中的1種或兩種免疫刺激物質。上述(a)和(b)的微粒狀免疫刺激物質載體可以含有由各個不同的化學物質或不同的組合物構成的兩種以上的微粒狀免疫刺激物質載體，或者可以是由各個相同的化學物質或組合物構成的具有不同的物理化學性質的免疫剌激物質載體的混合物。例如，作為上述(b)的沉淀物的微粒狀免疫刺激物質載體，可以使用由同一成分的組合構成的且該成分比率不同的兩種組合物的混合物。或者，作為上述(a)的無機物的微粒狀免疫刺激物質載體，可以使用微粒表面的物理化學的性狀不同的由相同的無機物構成的微粒的混合物。本發明的免疫佐劑含有承載了各個免疫刺激物質的上述(a)和(b)的微粒狀免疫刺激物質載體的組合，還可以進一步含有不承載免疫刺激物質的免疫刺激物質載體。這種情況，理想的是，作為免疫刺激物質載體，選擇其自身具有免疫刺激作用的免疫刺激物質載體。而且，本發明的免疫佐劑還可以再含有免疫刺激物質載體上所不承載的免疫刺激物質。在優選的方式中，作為兩種微粒狀免疫刺激物質載體的組合，包括(a)大小為可以被細胞吞噬的微粒狀磷酸鈣，和(b)由可溶性蛋白和粘多糖的凝聚產生的沉淀物。以下，對這種特定方式進行詳細說明，但本發明的免疫佐劑不限于該特定方式。上述的(a)大小為可以被細胞吞噬的微粒狀磷酸鈣，和(b)由可溶性蛋白和粘多糖的凝聚產生的沉淀物的組合沒有特別限定，它們的成分的種類，比率和制備方法等可以任意選擇。而且，上述的方式的免疫佐劑中還可以再混合第3成分。作為該第3成分，除了抗原之外，還可以使用與承載的免疫刺激物質不同的免疫刺激物質等。抗原可以在固體的載體上承載，也可以利用上述(a)或(b)的微粒狀免疫刺激物質載體作為載體。本發明的免疫佐劑還可以以不由載體承載的狀態含有與由成分(a)或成分(b)承載的免疫刺激物質相同的免疫刺激物質。大小為可以被細胞吞噬的微粒狀磷酸鈣，可以使用例如特開2005-126335號公報中記載的方法進行制備。作為微粒狀磷酸鈣，可以使用任意的微粒狀磷酸鈣。例如，可以使用由本領域技術人員按照公知的方法，精細地粉碎市售的磷酸鈣粉末，選擇出的大小為可以被細胞吞噬的微粒狀磷酸鈣，也可以使用從磷酸溶液和鈣溶液中制備的微粒狀磷酸鈣。而且，也可以使用使磷酸鈣在微粒狀的基材上沉淀或析出，在該基材表面上形成磷酸鈣微粒皮膜的微粒狀磷酸鈣。這種方式也包含于微粒狀磷酸鈣中。作為基材，如果是大小為可以被細胞吞噬的微粒狀，則沒有特別的限定。例如，在將中性范圍內不溶性蛋白質-纖維性蛋白質的膠原和水溶性糖鏈高分子-硫酸軟骨素與氫氧化鈣懸浮液和磷酸溶液混合的過程中，使之與低結晶性磷灰石共沉淀，可以制備含有納米大小的微小結晶的膠原/硫酸軟骨素-磷灰石復合粒子(Rhee，S.H.等，Biomaterials.，22(21)，pp.2843-2847,2001)，也可以使用該微粒作為基材。而且，用于制備微粒狀磷酸鈣的基材也不限于這些物質。磷酸^的種類沒有特別的限定，可以是無水物，無水鹽或含水鹽中的任意一種，可以是結晶體或非結晶體中的任意一種。而且，還可以用其它原子或原子團取代,丐的一部分或磷酸的一部分。作為這種磷酸鈣，具體而言，可以列舉，例如磷灰石(Can)(P04)6(0H)2)、缺少鈣的磷灰石、金屬離子取代了一部分Ca的磷灰石、硫酸離子取代磷酸離子的一部分的磷灰石，非結晶體磷酸鈣、金屬離子取代了一部分Ca的非結晶體磷酸鈣、磷酸八鈣(Ca8H2(P04)e5H20)和磷酸三鈣(Ca3(P04)2)、金屬離子取代了一部分Ca的磷酸三鈣等，但不限于這些物質。而且，優選也可以是含有1重量％-15重量％的碳酸根0)32—的含有碳酸的磷酸f5。含有碳酸的磷酸鈣的種類沒有特別的限定，可以是無水物，無水鹽或含水鹽中的任意一種，可以是結晶體或非結晶體中的任意一種。作為含有碳酸的磷酸鈣的例子，可以列舉含有碳酸的磷灰石和含有碳酸的非晶體磷酸鈣等。碳酸根的占有位點沒有特別的限定，例如，可以是磷酸位點、氫氧根位點，以及所有的非磷灰石位點和表面吸附位點。特別優選的是，可以列舉Ca/P摩爾比在1.3以上，含有3-6重量％的碳酸根C0/-,其結晶性為由在經CuKct射線產生的XRD光譜中29值中出現以26°，32°和34°為中心的寬峰，33°中出現300的米勒指數的肩為所規定的結晶性以上，而且在出現以26。，28.1°，29°，32°33°和34°為中心的峰或肩的基礎上，分離米勒指數為211和112的峰為所規定的結晶性以下的結晶性的微粒狀磷酸鈣。可以被細胞吞噬的微粒的大小，一般最大直徑在10um以下為優選，最大直徑在lum以下特別優選。人的細胞自身的尺寸，一般球形時的直徑在20nm左右，但附著的細胞和不長期分裂的巨大細胞中也存在長徑超過100um的情況。還存在吞噬能力高的巨噬細胞吞噬直徑在20ura以上的微粒的情況。因此，可以被細胞吞噬的微粒的大小沒有特別的限定。作為使用大小為可以被細胞吞噬的微粒的微粒狀磷酸鈣作為免疫剌激物質載體，使之承載免疫刺激物質的方法，可以使用例如特開2005-126335號公報中記載的方法，但不限于該方法。在磷酸鈣中，由于羥基磷灰石微粉末的比表面積大為100mVg，吸附能力優異，因此羥基磷灰石微粉末可以作為各種物質的吸附劑來使用。人們認為羥基磷灰石微粉末可以作為使用于各種化合物制備吸附型緩釋性藥物的基材，通過吸脫附來顯示隨著擴散模型的緩釋性(Burgos，A.E.等人，Biomaterials.，23，pp.2519-2526,2002)。此外還知道，由于低結晶型磷灰石和非晶體磷酸鈣等磷酸鈣原本就是生物體內的物質，因此可以形成蛋白等體內生理活性物質的安全緩釋性藥物的基材。還可以使用由這些磷灰石構成的微粒作為免疫刺激物質載體。使之承載于大小為可以被細胞吞噬的微粒的微粒狀磷酸鈣上的免疫刺激物質的種類沒有特別的限定。如上所述，由于羥基磷灰石微粉末吸附能力優異，因此可以使用多種物質作為承載的免疫刺激物質。作為免疫刺激物質，還可以使用例如選自于細胞因子，趨化因子，細胞生成因子和激素的誘導劑中的1種或2種以上的物質，例如，優選使用選自于結核菌素，PPD,源于微生物的可溶性成分，6,6-雙分枝菌酸藻糖(Trechalose-6，6'-dimycolate)，LPS，脂質A，寡核苷酸，P-葡聚糖，鑰孔嘁血藍蛋白(Keyholelimpethemocyanin)，胞壁酰基二肽，貝他定(bestatin)，左旋咪唑，細胞因子，趨化因子，細胞生長因子和激素中的1種或2種以上的免疫刺激物質。作為來源于微生物的可溶性成分，可以使用例如選自于微生物的乙醇提取物，丙酮提取物，吡啶提取物和熱水提取物中的1種或2種以上的提取物。而且，在細胞因子，趨化因子，細胞生長因子和激素誘導劑中還包括細菌的菌體或細菌的菌體成分。而且，由磷酸鈣微粒承載的免疫刺激物質并不限于這些物質。作為細胞因子，趨化因子，細胞生長因子或激素，還可以使用通過刺激抗原提呈細胞可以誘導其產生細胞因子的物質。例如，包括干擾素a，干擾素e，干擾素Y，白細胞介素(IU類(例如，IL-1、IL-2、IL-3、IL-4、IL-7、IL-ll、IL-12、IL-18、IL-27等)、集落刺激因子(CSF)(例如G-CSF、GM-CSF、M-CSF等)、上皮細胞生長因子(EGF)、成纖維細胞生長因子(FGF)(例如FGF-1、FGF-2、FGF-7等)、胰島素或人生長激素等。在制備來源于微生物的可溶性成分的工序中，用有機溶劑和/或熱水提取可溶性成分的方法沒有特別的限定，可以使用本領域技術人員公知的方法。例如，優選使用乙醇制備提取物。作為在制備來源于微生物的可溶性成分的工序中使用的微生物，可以列舉例如細菌，真菌或放線菌等，優選可以使用細菌。更優選的細菌的例子如下所示。這些細菌中，可以使用任意一種，或組合使用多種。白喉棒桿菌(Corynebacteriumdiphtheriae);假結核棒桿菌(Corynebacteriumpseudotuberculosis);干燥棒桿菌(Corynebacteriumxerosis);牛腎盂炎棒桿菌(Corynebacteriumrenale);庫氏棒桿菌(Corynebacteriumkutscheri);假白喉棒桿菌(Corynebacteriumpseudodiphtheriticum);馬棒桿菌(Corynebacteriumequi);牛棒桿菌(Corynebacteriumbovis);短小型棒桿菌(Corynebacteriumparvum);微代謝棒桿菌(Corynebacteriumpaurometabolum);化膿棒桿菌(Corynebacteriumpyogenes);產酶棒桿菌(Corynebacteriumenzymicum);霍克氏棒桿菌(Corynebacteriumhoagii);紋帶棒桿菌(Corynebacteriumstriatum);鼠敗血棒桿菌(Corynebacteriummurisepticum);腎棒桿菌(Corynebacteriumnephridii);海豚棒桿菌(Corynebacteriumphocae);陰道棒桿菌(Corynebacteriumvaginalis);黃小桿菌(microbacteriumflavum);纏繞幫桿菌(Corynebacteriumfascians);雷塞氏棒桿菌(Corynebacteriumrathayl);麥禾棒桿菌(Corynebacteriumagropyri);小麥蜜穗病棒桿菌(Corynebacteriumtritici);伊朗棍狀桿菌(Corynebacteriumiranicum);馬鈴薯環腐棒桿菌(Corynebacteriumsepedonicum);棲甜菜棒桿菌(Corynebacteriumbeticola);冬青節桿菌(Corynebacteri咖ilicis);土生棒桿菌(Corynebacteriumhumiferum);Corynebacteriumhumuli;增生棒桿菌(Corynebacteriumhypertrophicans);嗜乙酰乙酸棒桿菌(Corynebacteriumacetoacidophilum);嗜乙酰棒桿菌(Corynebacteriumacetophilura);桔色棒桿菌(Corynebacteriumaurantiacum);帚石南棒桿菌(Corynebacteriumcallunae);擰檬色運動棒桿菌(Corynebacteriumcitreum-mobilis);嗜乙醇胺棒桿菌(Corynebacteriumethanolaminophilum);菜豆萎蔫棒桿菌(Corynebacteriumflaccumfaciens);谷氨酸棒桿菌(Corynebacteriumglutamicura);力士棒桿菌(Corynebacteriumherculis);裂烴棒桿菌(Corynebacteriumhydrocarboclastus);百合棒桿菌(Corynebacteriumlilium);藤黃棒桿菌(Corynebacteriumluteum);中毛棒桿菌(Corynebacteriummediolanum);Corynebacteriummelassecola;類真菌棒桿菌(Corynebacteriummycetoides);黃色分枝桿菌甲焼變禾中(Corynebacteriumnubilum);玫瑰色棒桿菌(Corynebacteriumroseum);血球棒桿菌(Corynebacteriumsanguinis);球形節桿菌(Corynebacteriumglobiformis〉，'簡單節桿菌(Arthrobactersimplex);月中脹節桿菌(Arthrobactertumescenes);擰檬色節桿菌(Arthrobactercitreus);需土節桿菌(Arthrobacterterregens);淺黃色節桿菌(Arthrobacterflavescens);腸月中節桿菌(Arthrobacterduodecadis);藤黃節桿菌(Arthrobacterluteus);海節桿菌(Arthrobactermarinus);可變節桿菌(Arthrobactervariabilis);茅占節桿菌(Arthrobacterviscosus);多色節桿菌(Arthrobacterpolychromogenes);Arthrobacterconsociatus;噬尼古丁節桿菌(Arthrobacternicotinovorus);擴展短桿菌(Brevibacteriumlinens);乙酰短桿菌(Brevibacteriumacetylicum);產紅短桿菌(Brevibacteriumerythrogenes);希氏短桿菌(Brevibacteriumhealii);溶月旨短桿菌(Brevibacteriumlipolyticum);棕色短桿菌(Brevibacteriumbrunneum);fl音黃短桿菌(Brevibacteriumfulvum);暗褐短桿菌(Brevibacteriumfuscum);微黃短桿菌(Brevibacteriumhelvolum);靜止短桿菌(Brevibacteriumimmotum);海魚短桿菌(Brevibacteriummarinopiscum);伴生短桿菌(Brevibacteriumsociovivum);停滯短桿菌(Brevibacteriumstationis);海洋短桿菌(Brevibacteriummaris);蛾微桿菌(Brevibacteriumi即eriale);未定短桿菌(Brevibacteriumincertum);嗜蟲假單細胞菌(Brevibacteriuminsectiphilium);小桿短桿菌(Brevibacteriumminutiferula);何類矢豆桿菌(Brevibacteriumquale);臭蟲短桿菌(Brevibacteriumtegumenticola);嗜氨短桿菌(Brevibacteriumammoniagenes);硫磺節桿菌(Brevibacteriumsulfureum);原玻璃蠅短桿菌(Brevibacteriumprotophormiae);天牛金桿菌(Brevibacteriumsaperdae);黃色短桿菌(Brevibacteriumflavum);Brevibacteriumimmariophilum;谷氨酸棒桿菌(Brevibacteriumlactofermentum);玫瑰色短桿菌(Brevibacteriumrose咖)；解糖短桿菌(Brevibacteriumsaccharolyticum);谷氨酸棒桿菌(Brevibacteriumdivaricat咖)；噬亮氨酸短桿菌(Brevibacteriumleucinophagum);液化短桿菌(Brevibacteriumliquefaciens);戊糖丙氨酸短桿菌(Brevibacteriumpentoso-alanicum);戊糖氨基酸矢豆桿菌Brevibacteriumpentoso-aminoacidicum;溶解短桿菌(Brevibacteriumlyticum);白色短桿菌(Brevibacteriumalbidum);檸檬色短桿菌(Brevibacteriumcitreum);藤黃短桿菌(Brevibacteriumluteum);石專紅色短小桿菌(Brevibacteriumtestaceum);極小短小桿菌(Brevibacteriumpusillum);丙氨酸短桿菌(Brevibacteriumalanicum);產氨基短桿菌(Brevibacteriumaminogenes);產色短桿菌(Brevibacteriumchromogenes);而寸寒短桿菌(Brevibacteriumfrigoritolerans);而4鹽短桿菌(Brevibacteriumhalotolerans);發酵短桿菌(Brevibacteriumfermentans);氧化短桿菌(Brevibacteriumoxydans);孚L微桿菌(Microbacteriumlacticum);液化微桿菌(Microbacteriumliquefaciens);黃色微桿菌(Microbacteriumflavum);熱殺索絲菌(Microbacteriumthermosphactum);產黃纖維單胞菌(Cellulomonasflavigena);微酸假桿菌(Cellulomonasacidula);生金黃色纖維單胞菌(Cellulomonasaurogena);鮮黃纖維單胞菌(Cellulomonasgalba);極小纖維單胞菌(Cellulomonaspusilla);佐氏庫特氏菌(Kurthiazopfii);可變庫特氏菌(Kurthiavariabilis);貝氏庫特氏菌(Kurthiabessonii);費氏丙酸桿菌(Propionibacteriumfreudenreichii);特氏丙酸桿菌(Propionibacteriumthoenii);產丙酸丙酸桿菌(Propionibacteriumacidi-propionici);詹氏丙酸桿菌(Propionibacteriumjensenii);貪婪丙酸桿菌(Propionibacteriumavidum);疫皰丙酸桿菌(Propionibacteriumacnes);II型范皰丙酸桿菌(PropionibacteriumacnesTypeII);嗜淋巴丙酸桿菌(Propionibacteriumlymphophilum);顆粒丙酸桿菌(Propionibacteriumgranulosum);生污假桿菌(Eucobacteriumfeodans);不解孚L真桿菌(Eucobacteriumalactolyticum);直腸真桿菌(Eucobacteriumrectale);粘液真桿菌(Eucobacteriumlimosum);嚙齒真桿菌(Eucobacteriumruminantium);砂真桿菌(Eucobacteriumsaburreum);比氏真桿菌(Eucobacteriumbudayi);產亞石肖酸真桿菌(Eucobacteriumnitritogenes);凸腹真桿菌(Eucobacteriumventriosum);多形真桿菌(Eucobacteriummutiforme);柱狀真桿菌(Eucobacteriumcylindroids);念珠形真桿菌(Eucobacteriummoniliforme);黃色分枝桿菌多曲變禾中(Eucobacteriumtortuosum);溶纖維真桿菌(Eucobacteriumcellulosolvens);孑L氏真桿菌(Eucobacteriumcombesii);纖細真桿菌(Eucobacteriumtenue);斷鏈真桿菌(Eucobacteriumfissicatena);扭曲真桿菌(Eucobacteriumcontortum);產氣假桿菌(Eucobacteriumaerofaciens);遲緩真桿菌(Eucobacteriumlentum);心內膜炎真桿菌(Eucobacteriumendocarditidis);蠕蟲狀真桿菌(Eucobacteriumhelminthoides);假多曲真桿菌(Eucobacteriumpseudotortusum);奧氏假桿菌(Eucobacteriumobstii);乙基假桿菌(Eucobacteriumethylicum);赫氏真桿菌(Eucobacteriumhelwigiae);溶脲真桿菌(Eucobacteriumureolyticum);小型真桿菌(Eucobacteriumparvum);牛型放線菌(Actinomycesbovis);齒禹齒方夂線菌(Actinomycesodontolyticus);衣氏方夂線菌(Actinomycesisraelii);內氏方文線菌(Actinomycesnaeslundii);粘方文線菌(Actinomycesviscosus);埃氏放線菌(Actinomyceseriksonii);腐質生方文線菌(Actinomyceshumiferus);豬放線菌(Actinomycessuis);丙酸蛛菌(Arachniapropionica);雙歧雙歧桿菌(Bifidobacteriumbifidum);青春雙歧桿菌(Bifidobacteriumadolescentis);嬰兒雙歧桿菌(Bifidobacteriuminfantis);短雙歧桿菌(Bifidobacteriumbreve);長雙歧桿菌(Bifidobacteriumlong咖)；假長雙歧桿菌假長亞種(Bifidobacteriumpseudolongum);嗜熱雙歧桿菌(Bifidobacteriumthermophilum);豬雙歧桿菌(Bifidobacteriumsuis);星狀雙歧桿菌(Bifidobacteriumasteroids);蜜蜂雙歧桿菌(Bifidobacteriumindicum);棒狀雙歧桿菌(Bifidobacteriumcoryneforme);馬氏棒桿菌(Bacterionemamatruchotii);齲齒羅氏菌(Rothiadentocariose);結核分枝桿菌(Mycobacteriumtuberculosis);田鼠結核分枝桿菌(Mycobacteriummicroti);牛結核分枝桿菌(Mycobacteriumbovis);牛結核分枝桿菌BCG(MycobacteriumbovisBCG);非洲分枝桿菌(Mycobacteriumafricanum);堪薩斯分枝桿菌(Mycobacteriumkansasii);海魚分枝桿菌(Mycobacteriummarinum);猿分枝桿菌(Mycobacteriumsimiae);胃分枝桿菌(Mycobacteriumgastri);無色分枝桿菌(Mycobacteriumnonchromogenicum);土分枝桿菌(Mycobacteriumterrae);次要分枝桿菌(Mycobacteriumtriviale);戈登分枝桿菌(Mycobacteriumgordonae);瘰疬分枝桿菌(Mycobacteriumscrofulaceum);石蠟分枝桿菌(Mycobacteriumparaffinicum);胞內分枝桿菌(Mycobacteriumintracellulare);鳥分枝桿菌(Mycobacteriumavium));蟾分枝桿菌(Mycobacteriumxenopi);潰瘍分枝桿菌(Mycobacteriumulcerans);草分枝桿菌(Mycobacteriumphlei);母牛分枝桿菌(Mycobacteriumvacce);迪氏分枝桿菌(Mycobacteriumdiernhoferi);恥塘分枝桿菌(Mycobacteriumsmegmatis);蛇分枝桿菌(Mycobacteriumthamnopheos);微黃分枝桿菌(Mycobacteriumflavescens);偶發分枝桿菌(Mycobacteriumfortuitum);夕卜來分枝桿菌(Mycobacteriumperegrium);龜分枝桿菌(Mycobacteriumchelonei);爵J結核分枝桿菌(Mycobacteriumparatuberculosis);麻風分枝桿菌(Mycobacteriuml印rae);鼠麻風分枝桿菌(Mycobacteriumlepraemurium);榿木弗蘭克氏菌(Frankiaalni);古月頹子弗蘭克氏菌(Frankiaelaeagni);Frankiadiscariae;美洲茶弗蘭克氏菌(Frankiaceanothi);馬桑弗蘭克氏菌(Frankiacoriariae);仙女木弗蘭克氏菌(Frankiadryadis);羚羊木弗蘭克氏菌(Frankiapurshiae);臘果弗蘭克氏菌(Frankiacercocarpi);布氏弗蘭克氏菌(Frankiabrunchorstii);木麻黃弗蘭克氏菌(Frankiacasuarinae);菲律賓游動方夂線菌(Actinoplanesphilippinensis);阿美尼亞鏈霉菌(Actinoplanesarmeniacus);密蘇里游動方夂線菌(Acti,lanesmissouriensis);猶他游動方文線菌(Actinoplanesutahensis);微白螺孢菌(Spirillosoraalbida);玫瑰鏈孢囊菌(Streptosporangiumroseum);普通鏈孢囊菌(Streptosporangiuravulgare);產紫晶鏈孢囊菌(Streptosporangiumaraethystogenes);假普通鏈孢囊菌(Streptosporangiumpseudovulgare);無淀粉酶鏈孢囊菌(Streptosporangiumnondiastaticum);長孢鏈孢囊菌(Streptosporangiumlongisporum);灰綠庫茨涅爾氏菌(Streptosporangiumviridogriseum);白色鏈孢囊菌(Streptosporangiumalbum);白色庫茨涅爾氏菌(Streptosporangiumalbidum);綠白鏈孢囊菌(Streptosporangiumviridialbum);紅色鏈孢囊菌(Streptosporangiumrubrum);橙色無定形孢囊菌(Amorphosphorangiumauranticolor);規貝'J小并瓦菌(A即ullariellaregularis);鐘形小瓶菌(Ampullariellacampanulata);裂葉小并瓦菌(Ampullariellalobata);指狀小瓶菌(Ampullarielladigitata);陶器發仙菌(Pilimeliaterevasa);環狀列發仙菌(Pilimeliaanulata);排孢游動單胞菌(Pla議o謹poraparontospora);委內瑞拉游動單胞菌(Planomonosporavenezuelensis);長孢游動雙孢菌(Planobisporalongispora);玫瑰游動雙孢菌(Planobisporarosea)，桔橙指孢囊菌(Dactylosporangiumaurantiacum);泰國指孢囊菌(Dactylosporangiumthailandense);岡U果嗜皮菌(Dermatophiluscongolensis);昏暗地嗜皮菌(Geodermatophilusobscurus);皮諾卡氏菌(Nocardiafarcinica);豚鼠耳炎諾卡氏菌(Nocardiaotitidus-caviarum);巴西諾卡氏菌(Nocardiabrasilliensis);星狀諾卡氏菌(Nocardiaasteroids);南非諾卡氏菌(Nocardiatransvalensis);蟲馬蟻諾卡氏菌(Nocardiaformicae);空腔諾卡氏菌(Nocardiacoeliaca);多產色諾卡氏菌(Nocardiapolychromogenes);石蠟諾卡氏菌(Nocardiaparaffinae)',嗜石油諾卡氏菌(Nocardiapetroleophila);土星無枝酸菌(Nocardiasaturnea);黑石氏諾卡氏菌(Nocardiakuroishii);粗糙諾卡氏菌(Nocardiarugosa);椿象鏈霉菌(Nocardiarhodnii);越桔諾卡氏菌(Nocardiavaccinii);最小諾卡氏菌(Nocardiaminima);布氏鏈霉菌(Nocardiablackwellii);盤巻諾卡氏菌(Nocardiaconvoluta);纖維化纖維單胞菌(Nocardiacellulans);藤黃諾卡氏菌(Nocardialutea);小球諾卡氏菌(Nocardiagloberula);深紅紅球菌(Nocardiarubropertincta);珊瑚諾卡氏菌(Nocardiacorallina);鮭色諾卡氏菌(Nocardiasalmonicolor);紅色諾卡氏菌(Nocardiarubra);混濁紅球菌(Nocardiaopaca);灰暗諾卡氏菌(Nocardiacalcarea);局限諾卡氏菌(Nocardiarestricta);紅串紅球菌(Nocardiaerythropolis);海洋諾卡氏菌(Nocardiamarina);大西洋諾卡氏菌(Nocardiaatlantica);氣生菌落糖絲菌(Nocardiaaerocolonigenes);桔橙色鏈霉菌(Nocardiaaurantia);生丁基諾卡氏菌(Nocardiabutanica);達松維爾擬諾卡氏菌(Nocardiadassonvillei);組織諾卡氏菌(Nocardiahistidans);馬杜拉放線菌(Nocardiamadurae);未渾濁諾卡氏菌(Nocardianeoopaca);佩萊得諾卡氏菌(Nocardiapellegrino);白樂杰馬杜拉放線菌(Nocardiapelletieri);木材氣味諾卡氏菌(Nocardiasylvodorifera);渾濁諾卡氏菌(Nocardiaturbata);細小諾卡氏菌(Nocardiatenuis);變異諾卡氏菌(Nocardiavariabilis);嗜熱假諾卡氏菌(Pseudonocardiathermophila);刺假諾卡氏菌(Pseudonocardiaspinosa);白長鏈霉菌(Streptomycesalbolongus);微綠鏈霉菌(Streptomycesviridaris);白黑鏈霉菌(Streptomycesalbo-niger);白孢鏈霉菌(Streptomycesalbosporeus);白酒紅鏈霉菌(Str印tomycesalbovinaceus);金色輻旋鏈霉菌(Streptomycesaureocirculatus);巴恩鏈霉菌(Streptomycesbaarnensis);釘斑鏈霉菌(Streptomycescalvifer);力口爾杰鏈霉菌(Streptomycesgaltieri);包比鏈霉菌(Streptomycesbobili);長孢紅色鏈霉菌(Streptomyceslongispororuber);長孢鏈霉菌(Streptomyceslongisporus);草綠鏈霉菌(Streptomycesherbeus);生白鏈霉菌(Streptomycesalbofaciens);白色鏈霉菌(Streptomycesalbus);白色鏈霄菌掠霧素亞禾中(Streptomycesalbussubsp.bruneomycini);白色鏈霄菌怯病亞禾中(Streptomycesalbussubsp.pathocidicus);阿木吉氏鏈霉菌(Streptomycesalmquistii);嗜氨基鏈霉菌(Streptomycesaminophilus);可可鏈霉菌(Streptomycescacaoi);冠霉素鏈霉菌(Streptomyceschrestomyceticus);柔毛鏈霉菌(Streptomycesflocculus);吉布森鏈霉菌(Str印tomycesgibsonii);淺草綠鏈霉菌(Streptomycesherbescens);碘仿鏈霉菌(Streptomycesiodoformicus);赫黃菌核鏈霉菌(Streptomycesochraceiscleroticus);仰光鏈霉菌(Streptomycesrangoon);龜裂鏈霉菌(Str印tomycesrimosus);龜裂鏈霉菌巴龍霉素亞種(Streptomycesrimosussubsp.paromomycinus);Streptomycesrimosussubsp.pseudoverticillatus;螺旋輪絲鏈霉菌(Streptomycesspiroverticillatus);亞黃鏈霉菌(Str印tomycessubflavus);華沙鏈霉菌(Streptomycesvarsoviensis);黃石鏈霉菌(Streptomycesxantholiticus);白色鏈毒菌抗真菌亞禾中(Str印tomycesalbussubsp.fungatus);氧化鏈霄菌(Streptomyceshydrogenans);Streptomycesvendargus;不產色鏈霉菌(Streptomycesachroraogenes);抗生鏈霉菌(Streptomycesantibioticus);比鏈毒菌基尼(Streptomycesbikiniensis);可可鏈霧菌阿亞蘇亞禾中(Streptomycescacaoisubsp.asoensis);輝灰紅鏈霉菌(Streptomycescinereoruber);輝灰紅鏈霧菌發酵果糖亞禾中(Streptomycescinereorubersubsp.fructofermentans);Streptomycescylindrosporussubsp.piceus;埃德爾鏈霉菌(Streptomycesederensis);暗黃紫鏈霉菌(Str印tomycesfulvoviolaceus);暗黃綠鏈霉菌(Streptomycesfulvoviridis);力口德那,連霄菌(Streptomycesgardneri);渾圓鏈霉菌(Streptomycesglobosus);灰銹赤鏈霉菌(Str印tomycesgriseorubiginosus);草綠色鏈霉菌(Streptomycesherbaricolor);生靛鏈霉菌(Streptomycesindigoferus);石蔬殺菌素鏈霉菌(Streptomyceslitmocidini);夷卩波鏈霉菌(Streptomycesnarbo廳sis);納士維爾鏈霉菌(Str印tomycesnashvillensis);登戶鏈霉菌(Streptomycesnoboritoensis);日音絳紅鏈霉菌(Streptomycesphaeopurpureus);絳紅褐鏈霉菌(Streptomycespurpeofuscus);焦土鏈霉菌(Streptomycesshowdoensis);田無鏈霉菌(Streptomycestanashiensis);紫色直絲鏈霉菌(Str印tomycesviolaceorectus);沙阿霉素鏈霉菌(Streptomyceszaomyceticus);阿布拉鏈霉菌(Streptomycesaburaviensis);青藍鏈霉菌(Streptotnycescaeruleus);小串鏈霉菌(Streptomycescatenulae);金羊毛鏈霉菌煙熏亞種(Streptomyceschrysomallussubsp.fumigatus);殺黃胞菌素鏈霉菌(Streptomycesxanthocidicus);不產色鏈毒菌赤紅亞禾中(Streptomycesachromogenessubsp.rubradiris);阿南德氏鏈霉菌(Streptomycesanandii);橙灰鏈霉菌(Streptomycesaurantiogriseus);Streptomycesbobilisubsp.sporificans;輝灰產色鏈霉菌(Streptomycescinerochromogenes);巻須鏈霉菌(Streptomycescirratus);山丘鏈霉菌(Streptomycescollinus);泛溫鏈霉菌(Streptomyceseurythermus);綠黃鏈霉菌(Str印tomycesgalbus);力口禾U禾U鏈霉菌(Str印tomycesgalilaeus);灰紅鏈霉菌(Streptomycesgriseoruber);灰孢鏈霉菌(Streptomycesgriseosporeus);吸7JC鏈毒菌奧薩霧素亞禾中(Streptomycesgriseosporeussubsp.ossarayceticus);庫爾薩諾夫鏈霉菌(Streptomyceskurssanovii);藤黃灰鏈霉菌(Streptomycesluteogriseus);堆孢鏈霉菌(Streptomycesmassasporeus);奇異鏈霉菌(Streptomycesmirabilis);多旋鏈霉菌(Streptomycesmultispiralis)長西氏鏈霉菌(Streptomycesnaganishii);根矢鏈霉菌(Streptomycesneyagawaensis);野尻鏈霉菌(Streptomycesnojiriensis);橄欖產色鏈霉菌(Streptomycesolivochromogenes);生日音鏈霉菌(Streptomycesphaeofaciens);粉末鏈霉菌(Streptomycespulveraceus);枝鏈霄菌(Streptomycesrameus);拒霄素鏈毒菌(Streptomycesresistomycificus);禾廿尻鏈霉菌(Streptomycesrishiriensis);熱紫鏈霉菌(Streptomycesthermoviolaceus);紫產色鏈霉菌(Streptomycesviolaceochromogenes);阿富汗鏈霉菌(Str印tomycesafghaniensis);沙場鏈霉菌(Streptomycesarenae);日音黑藍鏈霉菌(Streptomycesattrocyaneus);色褐鏈霉菌(Streptomyceschromofuscus);達革力姆鏈霉菌(Streptomycesdurhamensis);多刺鏈霉菌(Streptomycesechinatus);菲律賓鏈霉菌(Streptomycesfilipinensis);鑲邊鏈霉菌(Streptomycesfimbriatus);灰產色鏈霉菌(Streptomycesgriseochromogenes);綠青鏈霉菌(Streptomycesiakyrus);魯薩鏈霉菌(Streptomyceslucensis);孑L雀石鏈霉菌(Streptomycesmalachitofuscus);孑L雀石直絲鏈霉菌(Streptomycesmalachitorectus);毛鏈霉菌(Streptomycespilosus);微白褐鏈霉菌(Streptomycesalbidofuscus);白淺黃鏈霉菌(Streptomycesalbogriseolus);產二素鏈霉菌(Streptomycesambofaciens);花青藍鏈霉菌(Streptomycesanthocyanicus);抗霉菌素鏈霉菌(Streptomycesantimycoticus);銀樣鏈霉菌(Streptomycesargenteolus);暗黑鏈霉菌(Streptomycesatratus);金霉素鏈霉菌(Streptomycesaureofaciens);榛色鏈霉菌(Streptomycesavellaneus);青灰鏈霉菌(Streptomycescaesius);肉質鏈霉菌(Streptomycescarnosus);千葉鏈霉菌(Streptomyceschibaensis);淺天青鏈霄菌(Streptomycescoelescens);天藍色鏈霄菌無色亞禾中(Streptomycescoelicolorsubsp.achrous);天藍色鏈霧菌生天藍亞禾中(Streptomycescoelicolorsubsp.coelicofers);天藍色鏈毒菌近天藍亞禾中(Streptomycescoelicolorsubsp.coelicolatus);天藍色鏈毒菌變色天藍亞禾中(Streptomycescoelicolorsubsp.coelicovarians)黃麻鏈霉菌(Streptomycescorchorusii)5產藍鏈霧菌(Streptomycescyanogeus);淀粉醇鏈霄菌石板灰亞禾中(Streptomycesdiastaticussubsp.ardesiacus);淀粉酷產色鏈霄菌短亞禾中(Streptomycesdiastatochromogenssubsp.bracus);內鏈霉菌(Streptomycesendus);突發鏈霉菌(Streptomyceserumpens);灰橙鏈霉菌(Streptomycesgriseoaurantiacus);灰褐鏈霉菌(Streptomycesgriseofuscus);淺灰B音鏈霉菌(Streptomycesgriseolosuffuscus);灰藤黃鏈霉菌(Streptomycesgriseoluteus);Streptomycesgrissussubsp.difficilis;濕鏈霉菌(Streptomyceshumidus);吸7jC鏈霉菌(Streptomyceshygroscopicus);吸7_K鏈霄菌狹霄素亞禾中(Streptomyceshygroscopicussubsp.angustmyceticus);吸水鏈霄菌德夸亞禾中(Streptomyceshygroscopicussubsp.decoyicus);吸zK鏈霄菌渾圓亞禾中(Streptomyceshygroscopicussubsp.glebosus);黎巴嫩鏈霉菌(Streptomyceslibani);黎巴嫩鏈霉菌紅黃亞種(Str印tomyceslibanisubsp.rufus);淺青紫鏈霉菌(Str印tomyceslividans);葡萄牙鏈霉菌(Streptomyceslusitanus);禾U迪鏈霉菌(Streptomyceslydicus);生黑孢鏈霉菌(Streptomycesmelanosporofaciens);米修鏈霉菌(Streptomycesmisionensis);鼠灰鏈霉菌(Streptomycesmurinus);易變鏈霉菌(Streptomycesmutabilis);變黑鏈霉菌(Streptomycesnigrescens);結節鏈霉菌(Streptomycesnodosus);黑胡桃鏈霉菌(Streptomycesnogalater);橄欖色硬膜鏈霉菌(Str印tomycesolvaceisceiscleroticus);橄欖綠鏈霉菌(Streptomycesolivaceoviridis);橄欖鏈霉菌(Streptomycesolivaceus);微小鏈霉菌(Streptomycesparvullus);普拉特鏈霉菌(Streptomycesplatensis);褶鏈霉菌(Streptomycesplicatus);普恩鏈霉菌(Streptomycespoonensis);沙鏈霉菌(Streptomycespsammoticus);成紫硬塊鏈霉菌(Streptomycespurpurogeneiscleroticus);累西飛鏈霉菌(Str印tomycesrecifenis);婁徹氏鏈霉菌(Streptomycesrochei);Streptomycesrokugoensis;玫瑰淀粉酶鏈霉菌(Streptomycesroseodiastaticus);魯地鏈霉菌卡斯泰拉亞種(Streptomycesrutgersensissubsp.castelarense);Streptomycessayamaensis;Streptomycessendaiensis;鹽屋鏈霉菌(Streptomycessioyaensis);唐德鹽屋鏈霉菌(Streptomycestendae);熱普通鹽屋鏈霉菌(Streptomycesthermovulgaris);三色鏈霉菌(Streptomycestricolor);殺結核鏈霉菌(Streptomycestubercidicus);解瘤鏈霉菌(Streptomycestumemacerans);廣闊鏈霉菌(Streptomycesvastus);紫闊鏈霉菌(Streptomycesvioaceolatus);紫黑鏈霉菌(Streptomycesviolaceus-niger):Streptomycesviolaceus-ruber，.生綠鏈霉菌(Str印tomycesviridifaciens);日音黑橄欖鏈霉菌(Streptomycesatroolivaceus);深藍色鏈霉菌(Streptomycescyanocolor);禾生鏈霉菌(Streptomycesgraminofaciens);灰平鏈霉菌(Streptomycesgriseoplanus);白丘鏈霉菌(Streptomycesalbaduncus);白刺鏈霉菌(Streptomycesalbospinus);小白鏈霉菌(Streptomycesalbulus);異硫鏈霉菌(Streptomycesalthioticus);阿拉伯鏈霉菌(Str印tomycesarabicus);暗黑橄欖鏈霉菌突變霉素亞禾中(Streptomycesatroolivaceussubsp.mutomycini);日音灰鏈霄菌(Streptomycescanus);恰塔努力口鏈霉菌(Streptomyceschattanoogensis);氯生鏈霉菌(Streptomyceschlorobiens);尖孢鏈霉菌(Streptomycescuspidosporus);滅癌素鏈霉菌(Str印tomycesgancidicus);灰黃鏈霉菌(Streptomycesgriseoflavus);灰肉紅鏈霉菌(Streptomycesgriseoincarnatus);灰略紅鏈霉菌(Streptomycesgriseorubens);大孢子鏈霉菌(Streptomycesmacrosporeus);孑L雀石鏈霉菌(Streptomycesmalachiticus);馬特鏈霉菌(Streptomycesmatensis);諾爾斯氏鏈霉菌(Streptomycesnoursei);橄欖綠鏈霉菌(Streptomycesolivoviridis);假淺灰鏈霉菌(Str印tomycespseudogriseolus);銹赤鏈霉菌(Str印tomycesrubiginosus);稀疏鏈霉菌(Streptomycessparsogenes);綠紫鏈霉菌(Streptomycesviridiviolaceus);綠淀粉酶鏈霉菌(Streptomycesvirido-diastaticus);禿裸鏈霉菌(Streptomycescalvus);藍白鏈霉菌(Streptomycescyanoalbus);芬萊鏈霉菌(Streptomycesfinlayi);淺黃鏈霉菌(Str印tomycesflaveolus);噴泉鏈霉菌(Str印tomycesgeysiriensis);生草綠鏈霉菌(Str印tomycesherbiferis);密旋鏈霉菌(Streptomycespactum);秋田鏈霉菌(Streptomycesakitaensis);秋吉鏈霉菌(Streptomycesakiyoshiensis);丙氨菌素鏈霉菌(Streptomycesalanosinicus);微白鏈霉菌轉化亞種(Streptomycesalbidussubsp.invertens);白色產色鏈霉菌(Streptomycesalbochromogenes);圈巻產色鏈霉菌(Streptomycesansochromogenes);圈巻產色鏈霄菌淺色亞禾中(Streptomycesansochromogenessubsp.pallens);阿維丁鏈霉菌(Streptomycesavidinii);(Str印tomycescarcinomycicus);栗色球孢鏈霉菌(Streptomycescastaneglobisporus);栗色鏈霉菌(Streptomycescastaneus);蘭黃鏈霉菌(Streptomycescyanoflavus);雅加達鏈霉菌(Str印tomycesdjakartensis);暗紅產色鏈霉菌成戶亞種(Streptomyceserythrochromogenessubsp.narutoensis)球團產色鏈霉菌(Streptomycesglomerochromogenes);灰菌素鏈霉菌(Streptomycesgrisinus);原田丁鏈霄菌(Streptomycesharanomachiensis);Streptomyceshygrostaticus;不尋常鏈霉菌(Streptomycesinsulatus);Streptomycesinversochromogenes;北澤鏈霉菌(Streptomyceskitazuwaensis);瑪里鏈霉菌(Streptomycesmariensis);微菌核鏈霉菌(Streptomycesminutiscleroticus);三鷹鏈霉菌(Streptomycesmitakaensis);黑淺灰鏈霉菌(Streptomycesnigrogriseolus);相賀鏈霉菌(Streptomycesogaensis);皮達德鏈霉菌(Str印tomycespiedadensis);雷格鏈霉菌(Str印tomycesregensis);略紅褐鏈霉菌(Str印tomycesrobefuscus);褐棕鏈霉菌(Str印tomycesrobeus);強壯鏈霉菌(Streptomycesrobustrus);玫瑰淺灰鏈霉菌(Streptomycesroseogriseolus);玫瑰灰鏈霉菌(Streptomycesroseogriseus);左八鄰鏈霉菌(Str印tomycessahachiroi);瀨野鏈霉菌(Str印tomycessenoensis);田無鏈霉菌抑腦炎霉素亞禾中(Streptomycestanashiensissubsp.cephalomyceicus);熱石肖化鏈霄菌(Str印tomycesthermonitrificans);熱紫鏈霉菌不滲透亞種(Streptomycesthermoviolaceussubsp.apingens);綠黑鏈霉菌(Streptomycesviridoniger);韋臘鏈霉菌(Streptomyceswerraensis);白黃鏈霉菌(Streptomycesalboflavus);桿菌狀鏈霉菌(Str印tomycesbacillaris);卡伍爾鏈霉菌(Streptomycescavourensis);藍微褐鏈霉菌(Streptomycescyaneofuscatus);極日音黃鏈霉菌(Streptomycesfulvissmus);灰棕褐鏈霉菌(Streptomycesgriseobrunneus);密執安鏈霉菌(Streptomycesmichiganensis);津島鏈霉菌(Streptomycestsusimaensis);黃質產色鏈霉菌(Streptomycesxanthochromogenus);微白黃鏈霉菌(Str印tomycesalbidoflavus);白綠鏈霉菌(Str印tomycesalboviridis);環圈鏈霉菌(Streptomycesanulatus);栗褐鏈霉菌(Streptomycesbadius);力口州鏈毒菌(Streptomycescalifornicus);淡灰鏈霉菌(Streptomycescanescens);纖維黃鏈霉菌(Streptomycescelluloflavus);纖維素鏈霉菌(Str印tomycescellulosae);昌巾白瓦特鏈霉菌(Str印tomyceschampavatii);金羊毛鏈霉菌(Streptomyceschrysomallus);檸檬熒光鏈霉菌(Streptomycescitreofluorescens);天藍色鏈霉菌(Streptomycescoelicolor);苦膽鏈霉菌(Streptomycesfelleus);糞生鏈霉菌(Streptomycesfimicarius);佛羅里達鏈霉菌(Streptomycesfloridae);熒光鏈霉菌(Streptomycesfl匿escens);球孢鏈霉菌(Str印tomycesglobisporus);球孢鏈霉菌高力口索亞種(Streptomycesglobisporussubsp.caucasicus);黃棕色鏈霉菌(Streptomycesglobisporussubsp.flavofuscus);球孢鏈霉菌普通亞禾中(Streptomycesglobisporussubsp.vulgaris);谷氏鏈霉菌(Streptomycesgougerotii);灰菌素鏈霉菌(Streptomycesgriseiuns);淺灰白鏈霉菌(Streptomycesgriseoloalbus)灰色鏈霉菌(Streptomycesgriseus);灰色鏈霉菌甲亞種(Streptomycesgriseussubsp.alpha);灰色鏈毒菌白聖亞禾中(Streptomycesgriseussubsp.cretosus);灰色鏈霉菌溶解亞種(Streptomycesgriseussubsp.solvifaciens);中間型鏈霉菌(Streptomycesintermedius);卡納霉素鏈霉菌(Streptomyceskanamyceticus);制酵母鏈霉菌(Streptomyceslevoris);游泥鏈霉菌(Streptomyceslimosus);禾U波曼鏈霉菌(Streptomyceslipmanii);細黃鏈霉菌(Streptomycesmicroflavus);土味鏈霉菌(Streptomycesodorifer);小鏈霉菌(Streptomycesparvus);淺多色鏈霉菌(Streptomycespluricolorescens);抗月市炎鏈霧菌(Streptomycespneumonicus);早期鏈霄菌(Streptomycespraecox);榴紅鏈霉菌(Streptomycespuniceus);棉子糖鏈霉菌(Streptomycesraffinosus);魯地鏈霉菌(Streptomycesrutgersensis);桑氏鏈霉菌(Streptomycessampsonii);西唐氏鏈霉菌(Streptomycessetonii);仙臺鏈霉菌(Streptomycessindenensis);硫磺鏈霉菌(Streptomycessulphureus);維摩氏鏈霉菌(Streptomyceswillmorei);夏威夷鏈霉菌(Str印tomyceshawaiiensis);白蠟黃鏈霉菌(Streptomycesalbohelvatus);微金鏈霉菌(Streptomycesaurigineus);黃雀鏈霉菌(Streptomycescanaries);淺金鏈霉菌(Streptomyceschryseus);微黃綠鏈霉菌(Streptomycesflavidovirens);淡蠟黃鏈霉菌(Streptomyceshelvaticus);長孢黃色鏈霉菌(Streptomyceslongisporoflavus)'，雪白鏈霉菌(Streptomycesniveus);寡淀粉酶鏈霉菌(Streptomycespaucidiastaticus);類球形鏈霉菌(Streptomycesspheroides);平普里鏈霉菌(Streptomycespimprina);上升島鏈霉菌(Streptomycescapoamus);朱紅鏈霉菌(Streptomycescinnabarinus);晶體鏈霉菌(Streptomycescrystallinus);黃三素鏈霉菌(Str印tomycesflavotricini);戈壁三素鏈霉菌(Streptomycesgobitricini);林肯鏈霉菌(Streptomyceslincolenensis);產黑鏈霉菌(Streptomycesmelanogenes);日音產色鏈霉菌(Streptomycesphaeochromogenes);暗產色鏈霉菌氯霉素亞禾中(Streptomycesphaeochromogenessubsp.chloromyceticus);假委內瑞拉鏈霉菌(Streptomycespseudovenezuelae);玫瑰綠鏈霉菌(Str印toraycesroseoviridis);壯觀鏈霉菌(Str印tomycesspectabillis);亞黃紅鏈霉菌(Str印tomycessubrutilus);赭褐鏈霉菌(Streptomycesumbrinus);委內瑞拉鏈霉菌(Streptomycesvenzuelae);黃暗色鏈霉菌(Streptomycesxanthophaeus);金單枝鏈霉菌(Streptomycesauremonopodiales);脫葉鏈霉菌(Streptomycesexfoliates);絲狀鏈霉菌(Streptomycesfilamentosus);李色鏈霉菌(Streptomycesprunicolor);玫瑰暗黃鏈霉菌(Streptomycesroseofulvus);淺玫瑰鏈霉菌(Streptomycesroseolus);玫瑰孢鏈霉菌(Str印tomycesroseoporus);銹赤蠟黃鏈霉菌(Streptomycesrubiginosohelvolus);白蟲義鏈霉菌(Streptomycestermitum);肉桂鏈霉菌(Streptomycescinnamonensis);哥倫比亞鏈霉菌(Streptomycescolombiensis);五色鏈霉菌(Streptomycesgoshikiensis);卡特拉鏈霉菌(Streptomyceskatrae);淡紫灰葉鏈霉菌(Streptomyceslavendofoliae);淡紫灰鏈毒菌(Streptomyceslavendulae);淡紫灰鏈霧菌不抗病亞禾中(Streptomyceslavendulaesubsp.avireus);淡紫灰鏈霄菌巴西亞禾中(Streptomyceslavendulaesubsp.brasilicus);淡紫灰鏈霧菌香膝亞禾中(Streptomyceslavendulaesubsp.grasserius);淡紫色鏈霉菌(Streptomyceslavendulcolor);蒼黃鏈霉菌(Streptomycesluridus);蘭花鏈霉菌(Streptomycesorchidaceus);穗產色鏈霉菌(Streptomycesracemochromogenes);丁香花鏈霉菌(Streptomycessyringae);毒三素鏈霉菌(Streptomycestoxytricini);保護鏈霉菌(Streptomycestuirus);酒紅鏈霉菌(Streptomycesvinaceus);弗吉尼亞鏈霉菌(Streptomycesvirginiae);石專紅鏈毒菌(Streptomyceslateritus);黃變異鏈霉菌(Streptomycesflavovariabilis);紫花鏈霉菌(Streptomycesjanthinus);淺絳紅鏈霉菌(Streptomycespurpurascens);玫瑰刺鏈霉菌(Streptomycesroseospinus);玫瑰紫鏈霉菌(Streptomycesroseoviolaceus);紫色鏈霧菌(Streptomycesviolaceus);紫色鏈霄菌關聯亞禾中(Streptomycesviolaceussubsp.cofinus);紫色鏈霄菌鄰近亞禾中(Streptomycesviolaceussubsp.vicinus);略紫鏈霉菌(Streptomycesviolarus);近紫鏈霉菌(Streptomycesviolatus);橫須賀鏈霉菌(Streptomycesyokosukanensis);白孢鏈霉菌(Streptomycesalbosporeus);桔橙鏈霉菌(Streptomycesaurantiacus);金黃垂直鏈霉菌(Streptomycesaureoverticillatus);金黃橙鏈毒菌(Streptomycesaurini);乳月旨鏈霄菌(Streptomycescremeus);達格斯坦鏈霉菌(Streptomycesdaghestanicus);弗氏鏈霉菌(Streptomycesfradiae);脆弱鏈霧菌(Streptomycesfragilis);煙熏鏈霄菌(Streptomycesfumanus);球團橙色鏈霉菌(Streptomycesglomeroaurantiacus);灰淺綠鏈霉菌(Streptomycesgriseoviridis);雪白紅鏈霉菌(Streptomycesniveoruber);波賽鏈霉菌(Streptomycespeucetius);暗綠鏈霉菌(Streptomycesphaeoviridis);玫瑰菌核鏈霉菌(Streptomycesroseiscleroticus).,玫瑰黃鏈霉菌(Streptomycesroseoflavus);玫瑰丁香鏈霉菌(Streptomycesroseolilacinus);紅藍鏈霉菌(Streptomycesrubo-cyaneus);公牛鏈霉菌(Streptomycestauricus);酒紅土褐鏈霉菌(Streptomycesvinaceus-drappus);殺病毒鏈霉菌(Streptomycesvirocidus);紅色糖多孢菌(Streptomyceserythraeus);藤黃熒光馬杜拉放線菌(Streptomycesluteofluorescens);日音紅灰鏈霉菌(Streptomyceserythrogriseus);亮矛鏈霉菌(Streptomycesgaryphalus);淡紫灰直絲鏈霉菌(Streptomyceslavendularectus);長崎鏈霉菌(Streptomycesnagasakiensis);紅淡紫灰鏈霉菌(Streptomycesrubrolavendulae);肉桂鏈霉菌(StreptomycescirmMiori6nsis);阿什哈巴德鏈霉菌(Streptomycesashchabadicus);多產色鏈霉菌(Streptomycespolychromogenes);天草鏈霉菌(Streptomycesamakusaensis);天青鏈霉菌(Streptomycescaelestis);遠青鏈'霉菌(Streptomycesazureus);美麗鏈霉菌(Streptomycesbellus);教酒鏈霉菌(Streptomyceschartreusis);擬天藍鏈霉菌(Streptomycescoeliatus);似天藍鏈霉菌(Streptomycescoerulatus);Streptomycescoerulatussubsp.amylolyticus;天藍褐鏈霉菌(Streptomycescoeruleofuscus);天藍微紅鏈霉菌(Streptomycescoeruleorubidus);淺天藍鏈霉菌(Streptomycescoemlescens);古臘禾斗鏈霉菌(Streptomycescuracoi);深藍鏈霉菌(Streptomycescyaneus);藍球團孢鏈霉菌(Streptomycescyanoglomerus);靛藍色鏈霉菌(Streptomycesindigocolor);羊毛鏈霉菌(Streptomyceslanatus);灰青鏈霉菌(Streptomyceslazureus);瓦藍鏈霉菌(Streptomycesvalynus);綠色產色鏈霉菌(Streptomycesviridochromogenes);淡青鏈霉菌(Streptomycesgalucescens);布魯鏈霉菌(Streptomycesblensis);(Streptomycescoerulatussubsp.anaseuli)5天藍玫瑰鏈霉菌(Streptomycescoeruleoroseus)5甘薯鏈霉菌(Streptomycesipomoesae);刺鏈霉菌(Streptomycesspinosus);灰色霉素鏈霉菌(Streptomycesgriseomycini);灰草黃鏈霉菌(Streptomycesgriseostramineus);蔥綠孢鏈霉菌(Streptomycesprasinosporus);力口納鏈霉菌(Streptomycesghanaensis);蓬刺鏈霉菌(Streptomyceshirsutus);蔥綠鏈霉菌(Streptomycesprasinus);綠孢鏈霉菌(Str印tomycesviridosporus);吖啶霉素鏈霉菌(Streptomycesacrimycini);班堡鏈霉菌(Streptomycesbambergiensis);蔥綠毛鏈霉菌(Streptomycesprasinopilosus);何爾塘鏈霉菌(Streptomyceshorton);直絲紫鏈霉菌(Streptomycesrectiviolaceus);丁香暗黃鏈霉菌(Streptomyceslilacinofulvus);苯胺紫鏈霉菌(Streptomycesmauvecolor);微紫鏈霉菌(Streptomycesviolans);淺紫鏈霉菌(Streptomycesviolascens);巴爾達氏鏈霉菌(Str印toverticilliumbaldaccii);熱誠鏈輪絲菌(Streptoverticilliumfervens);紅氯鏈輪絲菌(Str印toverticilliumrubrochlorinum);雙輪絲鏈輪絲菌(Streptoverticilliumbiverticillatum);金輪生鏈輪絲菌(Str印toverticilliumaureoversales);五霉素鏈輪絲菌(Streptoverticilliumpentaticum);玫瑰輪絲鏈霉菌(Streptoverticilliumroseoverticillatum);紅色輪生鏈輪絲菌(Streptoverticilliummbroverticillatum);廣島鏈輪絲菌(Streptoverticilliumhiroshimense);鮭色鏈輪絲菌(Str印toverticilliumsalmonis);藤黃輪絲鏈輪絲菌(Streptoverticilliumluteoverticillatum);橄欖網狀鏈輪絲菌(Streptoverticilliumolivoreticuli);瓦氏鏈輪絲菌(Streptoverticilliumwaksmanii);灰肉色鏈輪絲菌(Streptoverticilliumgriseocarneum);肉桂鏈輪絲菌(Streptoverticilliumcinnamoneum);八丈島鏈輪絲菌(Streptoverticilliumhachijoense);灰肉色鏈輪絲菌(Streptoverticilliumardum);阿孫鏈輪絲菌(Streptoverticilliumabikoense);白網鏈輪絲菌(Streptoverticilliumalbireticuli);優洛殺菌素鏈輪絲菌(Streptoverticilliumeurocidicum);岸禾口田鏈輪絲菌(Streptoverticilliumkishiwadense);馬術鏈輪絲菌(Str印toverticilliummash畫se);橄欖輪絲鏈輪絲菌(Str印toverticilliumoli麗erticillatum);奧里諾科鏈霉菌(Streptoverticilliumorinoci);少生孢鏈輪絲菌(Streptoverticilliumparvisporogenes);肯塔基鏈輪絲菌(Streptoverticilliumkentuckense);灰肉色鏈輪絲菌(Str印toverticilliumalbum);偏端鏈輪絲菌(Str印toverticilliumdistallicum);愛嬡鏈輪絲菌(Streptoverticilliumehi隱se);黃桃鏈輪絲菌(Streptoverticilliumflavopersicum);灰輪絲鏈輪絲菌(Streptoverticilliumgriseoverticillatum);紡錘鏈輪絲菌(Streptoverticilliumnetropsis);直輪絲鏈霉菌(Str印toverticilliumrectiverticillatum);橫月鬲鏈霉菌(Streptoverticilliumseptatum);茂原鏈輪絲菌(Streptoverticilliummobaraense);稻瘟霉素鏈輪絲菌(Streptoverticilliumblastmyceticum);熏衣草鏈輪絲菌(Streptoverticilliumlavenduligriseum);丁香鏈輪絲菌(StreptoverticiIliumlilacium);克什米爾鏈輪絲菌(Streptoverticilliumkashmirense);硫藤黃鏈輪絲菌(Str印toverticilliumthioluteum);多形魚孢菌(Sporichthyapolymorpha);變灰鏈霉菌(Microellobosporiacinerea);紫小莢孢囊菌(Microellobosporiaviolacea);黃色鏈霉菌(Microellobosporiaflavea);假刺孢鏈霉菌(Microellobosporiagrisea);Microellobosporiachalcea;鹽生植小單孢菌(micromonosporahalophytica);炭樣小單孢菌(micromonosporacarbonacea);酋志野小單抱菌(micromonosporanarashinoensis);黑孢小單孢菌(micromonosporamelanopra);棘孢小單孢菌(micromonosporaechinospora);絳紅小單孢菌(micromonosporapurpurea);絳紅產色小單孢菌(micromonosporapurpureochromogenes);二色小單孢菌(micromonosporabicolor);青藍小單孢菌(micromonosporacoerulea);渾圓小單孢菌(micromonosporaglobosa);長形小單孢菌(micromonosporaelongata);小小單孢菌(micromonosporaparva);高盧小單孢菌(micromonosporagallica);醋蟻酸小單孢菌(micromonosporaacetoformici);丙酸小單孢菌(micromonosporapropionici);普通高溫方文線菌(Thermoactinomycesvulgaris);糖高溫放線菌(Thermoacti賴ycessacchari);雙杈雙岐放線菌(Actinobifadaalba);產色雙岐方文線菌(Actinobifadachromogena);彎曲高溫單孢菌(Thermomonsporacurvata);綠色高溫單孢菌(Thermomonsporaviridis);玫瑰小雙孢菌(Microbisporarosea);青銅樣小雙孢菌(Microbisporaaerata);產紫晶小雙孢菌(Microbisporaamethystogenes);雙孢小雙孢菌(Microbisporabispora);產色小雙孢菌(Microbisporachromogenes);淀粉酶小雙孢菌(Microbisporadiastatica);弱小雙孢菌(Microbisporaparva);熱淀粉酶小雙孢菌(Microbisporathermodiastatica);熱玫瑰小雙孢菌(Microbisporathermorosea);短鏈諾卡氏菌(Micropolysporabrevicatena);被孢小多孢菌(Micropolysporaangiospora);青灰糖單孢菌(Micropolysporacaesia);直桿干草菌(Micropolysporafaeni);直逗號糖多孢菌(Micropolysporarectivirgula);紅棕褐小雙孢菌(Microbisporarubrobrunea);熱綠小雙孢菌(Microbisporathermovirida);禾口綠黑小雙孢菌(Microbisporaviridinigra)。而且，可以使抗原與免疫刺激物質一起，或與其分別承載于在大小為可以被細胞吞噬的微粒狀磷酸鈣上。以這種目的使用的抗原，如果是可以在微粒狀磷酸鈣上承載的抗體，則其種類沒有特別限定。例如，可以承載水溶性的溶解度極高的牛血清白蛋白作為抗原(特開2005-126335號公報)。而且，與上述來源于微生物的可溶性成分相同，還可以承載疏水性物質作為抗原。抗原，優選為選自于真菌，放線菌，細菌，病毒，噬菌體，立克次氏體，原生動物，這些微生物的成分，原生動物成分、腫瘤組織，腫瘤細胞，腫瘤細胞成分，腫瘤抗原蛋白和腫瘤抗原肽中的l種或2種以上的物質，但不僅限于這些物質。由可溶性蛋白和粘多糖的凝聚產生的微粒狀沉淀物的制備方法詳細記載于例如美國專利第5759582號說明書中，本領域技術人員可以容易地制備上述沉淀物。例如，對于使用(i)白蛋白作為可溶性蛋白，使用(ii)肝素作為粘多糖，使用(iii)PPD作為免疫刺激物質的方法，詳細記載于日本特許第3492671號說明書中，最優選使用該方法，但也不限于此。而且，可溶性蛋白和粘多糖的組合不限于上述組合。作為免疫刺激物質，還可以使用例如包含于結核菌素中的可溶性蛋白，或者還可以使用由本領域技術人員按公知的方法由結核菌素制備的可溶性蛋白的全部或一部分。通過攪拌上述的(i)(ii)和(iii)這3種成分，通過成分(i)和成分(ii)的凝聚生成沉淀，此時，上述成分(iii)埋入該沉淀后共沉淀，提供沉淀物。由可溶性蛋白和粘多糖的凝聚產生的沉淀物，從給藥的簡便性考慮，優選制成大小為可以通過注射針的微粒狀。該微粒的粒徑通常優選lym以下。將沉淀物制備成微粒狀的方法可以使用本領域技術人員公知的方法，并不限于特定的方法。免疫刺激物質中所含的可溶性蛋白和(i)的可溶性蛋白的比率沒有特別限定，如果是在(i)的可溶性蛋白和(ii)的粘多糖發生凝聚的范圍內，則可以是任何比率。如果舉例，使用pH2.5的2.5%人血清白蛋白溶液作為可溶性蛋白時，使用約5mg/ml的市售的肝素溶液作為粘多糖，對于600u1的粘多糖，溶解2.5ug的PPD后，一邊攪拌該混合物一邊滴下上述人血清白蛋白溶液，通過凝聚形成微粒。優選選擇，離心該懸浮液，定量該上清的蛋白質含量，混合的蛋白質大部分埋入微粒的容量比。而且，當然，成分(i)-(iii)的比率和凝聚條件等可以由本領域技術人員適當選擇。獲得的沉淀物中所含的微粒的粒徑通常為lum左右，但并不限定于特定大小。獲得的微粒狀沉淀，作為承載免疫刺激物質的載體，可以直接作為本發明的佐劑的1種成分來使用，根據需要，還可以用蒸餾水清洗沉淀。而且，為了穩定沉淀，可以通過使蛋白分子間交聯劑作用形成交聯從而形成微粒。蛋白分子間交聯劑的種類沒有特別的限定，本領域技術人員可以按公知的方法使用公知的交聯劑。例如，將1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳化二亞胺制成20mg/ni1的水溶液，用旋渦混合器一邊混合一邊加入使其最終濃度達0.81.5mg/ml，然后室溫下靜置15分鐘，這時沉淀中的蛋白質分子間就形成了十分穩定的交聯。當然交聯的形成并不僅限于上述特定條件或特定蛋白分子間交聯劑。按上述方法得到的微粒狀沉淀，它即使用水清洗也不溶解，可以適用作本發明的免疫佐劑的成分。如果按照優選的方式，還可以通過預先將具有抗原性的可溶性蛋白和具有免疫佐劑活性的結核菌素可溶性蛋白進行混合，用此混合物代替上述(iii)，采取與上述操作同樣的方法來得到沉淀物。這種沉淀物是承載免疫刺激物質和抗原的載體，還可以作為本發明的佐劑的l種成分來使用。可以使抗原與免疫刺激物質一起，或與其分別承載于在由可溶性蛋白和粘多糖的凝聚形成的沉淀物上。作為抗原，可以使用例如細胞因子，趨化因子，細胞生長因子或激素的誘導劑。而且，作為抗原，還可以使用選自于結核菌素，PPD,源于微生物的可溶性成分，6,6-雙分枝菌酸藻糖(Trechalose-6,6'-dimycolate),LPS,脂質A，寡核苷酸，3-葡聚糖，鑰孔嘁血藍蛋白(Keyholelimpethemocyanin),胞壁酰基二肽，貝他定(bestatin)，左旋咪唑，細胞因子，趨化因子，細胞生長因子和激素中的l種或2種以上的物質。而且，作為抗原，還可以使用選自于微生物的乙醇提取物，丙酮提取物，吡啶提取物和熱水提取物中的1種或2種以上的提取物。作為微生物，優選細菌，更優選該提取物結合于可溶性蛋白。作為微生物，優選使用上述例示的微生物。而且，可在由可溶性蛋白和粘多糖的凝聚形成的沉淀物上承載的抗原不限于上述的特定例子。另外，還可以通過由可溶性蛋白和粘多糖的凝聚形成的沉淀物與其它不溶性蛋白質分子或抗原經蛋白分子間交聯劑交聯，以不溶性微粒形態制備承載免疫刺激物質的載體。蛋白分子間交聯劑的種類沒有特別的限制，作為本領域技術人員可以按照常規的方法使用公知的交聯劑。例如，可以使用l-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺等。本發明的免疫佐劑的免疫佐劑活性，本領域技術人員可以通過本發明說明書中具體說明的方法和以下說明的方法容易地進行測定。己知THP-1細胞株是來源于人的巨噬細胞系統的建立的細胞株，一旦培養中使phorbol12-Myristate13-Acetate(以下也存在簡稱為"PMA"的情況)作用分化誘導，則顯示出吞噬能力(Kurosaka,K.，等，J.Immunol.,161,pp.6245-6249，1998)，成為抗原提呈細胞(Hu,P.Q.,等，J.Immunol.,172，pp.1595-1601,2004)。而且，若用IFNg前處理該細胞，貝U向T細胞的抗原提呈能力增強(Brett.S.J.，等，J.Immunol.,150,pp.2869-84,1993)。因此，使THP-l細胞株分化，通過定量產生的GM-CSF，不使用包括人抗原提呈細胞在內的末梢血來源的附著性細胞，就可以測定人抗原提呈細胞的活性化程度。由于是THP-1細胞建立的細胞株，因此可以與人個體差異無關地確保質量穩定的試驗材料。本發明的免疫佐劑，與抗原混合后，通過在包括人在內的哺乳動物的體內給藥，可以誘導針對該抗原的全身性的免疫反應，可以與通常使用的一般的免疫佐劑一樣使用。作為抗原，可以使用原本不存在于被給藥個體中的生物或物質，更具體的是，例如，可以使用為選自于真菌，放線菌，細菌，病毒，噬菌體，立克次氏體，原生動物，這些微生物的成分，腫瘤組織，腫瘤細胞，腫瘤細胞成分，腫瘤抗原蛋白和腫瘤抗原肽中的1種或2種以上的物質作為抗原，但不僅限于這些物質，只要是可以作為抗原作用的物質，則可以使用任意一種物質。而且，還可以將抗原作為獨立的制劑在包括人在的哺乳動物體內給藥，在該動物體內單獨給藥本發明的免疫佐劑，誘導針對該抗原的全身性免疫反應。或者，還可以，如前述說明，使抗原預先承載于本發明的免疫佐劑的成分-2種以上的免疫刺激物質載體中的任意一者或兩種以上，再在這種情況下單獨給藥抗原。抗原為真菌，放線菌，細菌，病毒，噬菌體，立克次氏體，原生動物，和/或這些微生物的成分時，通過將本發明的免疫佐劑和抗原一起給藥，可以進行用于預防和/或治療傳染病的疫苗療法。而且，抗原為腫瘤組織，腫瘤細胞，腫瘤細胞成分，腫瘤抗原蛋白和/或腫瘤抗原肽時，通過將本發明的免疫佐劑與上述抗原一起給藥，可以進行預防和/或治療腫瘤的疫苗療法。例如，通過將從患者中分離的非活化地腫瘤細胞與本發明的免疫佐劑混合，給藥給患者，可以在患者的活體內誘導針對該腫瘤細胞的抗腫瘤免疫反應。而且，本發明的混合免疫佐劑制劑的使用方法不限于上述方式，可以使用采用免疫佐劑的常規方式的任意一種方法。本發明的免疫佐劑的給藥量和給藥方法沒有特別的限定，但通常可以通過注射(皮下注射等)的非經口給藥來進行給藥以充分引起免疫反應。再者，通過物理方法使存在于患者體內的腫瘤組織變性后，通過在該組織內給藥本發明的免疫佐劑，可以在患者體內誘導針對腫瘤細胞的抗腫瘤免疫反應。腫瘤組織的物理變性的方法沒有特別的限定，可以采用例如微波照射、射頻凝固法、冷凍凝固法、電刀加熱、熱水注入、醇注入、栓塞法、放射線照射、激光照射、超聲波破壞等方法。當然物理的變性方法也并不僅限于這些方法，只要是可以誘導存在于腫瘤組織內的腫瘤細胞發生細胞凋亡，任何方法都可以。也可以將2種以上物理方法適當組合在一起使用。例如，若通過對腫瘤組織進行微波照射，使其加熱凝固，再將本發明的免疫佐劑對此凝固組織內給藥，就可以誘導針對該腫瘤組織內部或其周邊依然存活的腫瘤細胞的抗腫瘤免疫反應。同時也優選在本發明的免疫佐劑給藥的同時進行結核菌素溶液給藥。當然本發明的免疫佐劑的給藥方法并不僅限于上述方式，只要是可以使本發明的免疫佐劑與變性腫瘤組織中所含腫瘤抗原一起被攝取至聚集到該變性腫瘤組織中的抗原提呈細胞、或者形成本發明的免疫佐劑能夠直接刺激到抗原提呈細胞的環境，任何方法均可采用。另外，還可以事先將本發明的免疫佐劑與免疫載體細胞在體外混合后再對患者體內給藥，從而激發體內免疫反應。此免疫活性細胞可以優選使用樹突細胞、B淋巴細胞、T淋巴細胞、自然殺傷細胞和/或造血干細胞等，但并不僅限于這些。從其它方面來看，本發明還可以提供含有上述免疫佐劑和抗原作為有效成分的疫苗。此疫苗給藥的時候，本領域技術人員可以使用公知的方法，也可以同時與免疫活性細胞混合使用。通過使用例如病毒或病毒成分等引起傳染病的感染源來源的物質作為抗原，還可以不僅對未感染者進行感染預防，而且對于已經患有此癥的患者進行治療。而且，通過將含有選自于從患者分離的腫瘤組織，腫瘤細胞，腫瘤細胞成分，腫瘤抗原蛋白和/或腫瘤抗原肽中的1種或2種以上的生物體試樣和上述免疫佐劑的疫苗在此腫瘤來源的患者中給藥，還可以治療腫瘤。而且，抗原為例如一種動物蛋白時，通過在人以外的動物中與上述免疫佐劑一起給藥，可以使針對該抗原的抗體在宿主動物中優選產生。通過該方法可以容易地制備產生抗體動物，還可以容易地獲得來源于該產生抗體動物的抗體產生細胞和抗體基因。抗原只要是對于宿主具有抗原性的物質，則可以是任意物質，但并不僅限于這些物質。實施例以下，通過實施例對本發明進行更具體的說明，但本發明的范圍不限于下述實施例。例h1種免疫刺激物質承載于2種免疫刺激物質載體之上的免疫佐劑的抗原提呈細胞刺激效果以THP-1細胞株作為用PMA使之分化的抗原提呈細胞，使2種免疫刺激物質載體承載PPD，在培養條件下測定在抗原提呈細胞中添加時的GM-CSF的產生量。A.材料和方法1.磷酸鈣(以下簡稱為CaP)微粒核液的制備量取2mo1碳酸鈣CaC03(力A〉一卜"株式會社制，純度99.99%)，裝入高純度的鋁匣缽中，在箱式爐中IOOO'C，燒成3小時，進行脫碳酸，獲得高純度的氧化鈣CaO，將其裝入燒杯中。為了極力抑制空氣中的水分與CaO反應，再與二氧化碳反應，用蓋板蓋在燒杯上部，置于反應槽內容量為10L的聚乙烯容器中。使氮氣填充于容器中，然后除去蓋板，在燒杯中滴下超純水。此時，由于發熱而保護，所以在聚乙烯容器中充滿超純水。獲得反應熱時，將燒杯中的反應物用超純水全部流動洗滌，轉移到聚乙烯容器中。其中使用的超純水的總量，使根據CaO量計算的濃度調整為0.5mol/L。該階段中氫氧化鈣懸浮液。在攪拌機(EYELA社制，MAZELAZ-1000)中一邊以約500rpm攪拌該懸浮液，一邊以不超過25ml/min的速度在其中滴下2L的調制成0.6mol/L的磷酸H2P04(國產化學株式會社制，濃度85%)。滴下終止后直接攪拌24小時，制成CaP核液。2.CaP微粒液，CaP-PPD微粒液的制備2.1磷酸鈣過飽和溶液和CaP微粒液的制備按8.28mL的林格液(扶桑藥品工業株式會社制)，1.24mL的KlinisalzB液(小林制藥工業株式會社制)，0.48mL的bifil專用碳酸氫鈉補充液(清水制藥制)的比率進行混合，成為10mL。在9ml的這種磷酸鈣過飽和溶液中添加lml乙醇，對應于10mL混合液滴加1滴CaP微粒核液，放置一夜。離心懸浮液，獲得沉淀，將其用注射用生理鹽水充分進行清洗，懸浮于lml的注射用生理鹽水中。將其作為CaP微粒液。2.2CaP-PPD微粒液的制備按8.28mL的林格液，1.24mL的KlinisalzB液，0.48mL的bifil專用碳酸氫鈉補充液(清水制藥制)的比率進行混合，成為10mL。在9mL這種磷酸鈣過飽和溶液中溶解0.5ug-10ng結核菌素標準品(日本BCG制造株式會社，一般診斷用純化結核菌素(PPD))。在9mL這種溶液中添加lmL乙醇，對應于lOmL混合液滴加l滴CaP微粒核液，放置一夜。離心懸浮液，獲得沉淀，將其用注射用生理鹽水充分進行清洗，懸浮于lml的注射用生理鹽水中。這里獲得的CaP-PPD微粒懸浮液，根據制備中使用的PPD量，表述為CaP-PPD(O.5ug/mL)-CaP-PPD(10ug/mL)。而且，在培養液(含有10%胎兒牛血清的RPMI1640培養基)中添加這些物質時，最終濃度為其1/5時，表述為CaP-PPD(O.1"g/mL)-CaP-PPD(2.0ug/mL)。2.3PPD液的制備將0.25pg結核菌素標準品(日本e'—'〉一-一制造株式會社制，一般診斷用純化結核菌素(PPD))溶解于0.5mL的培養液中，制成PPD液。2.4承載PPD的凝聚沉淀微粒(以下，簡稱為TuMP)液的制備1)用滅菌水將25y。人血清白蛋白溶液(HAS，BaxterAlbumac，Baxter社制)稀釋成2.5%，用4NHCL調整成pH2.5。2)預先將該2.5%人血清白蛋白溶液和肝素溶液"'卞、肝素注1000，1000單位/mL，約7.69mg/ml以下，7《>亍<^77—7株式會社)，按各種比例進行混合，確定肝素溶液的最佳混合比。最佳混合比，按最初的適當混合比制成微粒，以2500rpm(1300g)離心15分鐘，用蛋白檢測試劑盒1(日本Bio-RadLaboratories，Inc.,東京)定量其上清的蛋白質含量，混合的蛋白質的99.9%以上形成埋入微粒的條件。3)將PPD懸浮于注射用肝素，在旋渦混合器中一邊混合，一邊以預先確定的比率滴下2.5%人血清白蛋白溶液。4)以4300rpm(1300g)離心15分鐘，用蒸餾水清洗2次，再懸浮于蒸餾水中。5)在旋渦混合器中一邊混合一邊加入1-乙基-3_(3-二甲基氨基丙基)碳化二亞胺溶液(EDC，SIGMA社制，溶解于水，制成20mg/mL的溶液)至終點濃度為0.8-1.5mg/mL，然后，室溫下靜置15分鐘。6)等量添加0.1M的甘氨酸水溶液，室溫下靜置15分鐘。7)以4300rpm(1300g)離心15分鐘，用蒸餾水清洗3次，再懸浮于生理鹽水，使PPD量達到0.5yg/mL的濃度。將其作為TuMP液。<table>tableseeoriginaldocumentpage36</column></row><table>例2:在另外的免疫刺激物質載體上分別承載2種免疫剌激物質的免疫佐劑的抗原提呈細胞刺激效果A.材料和方法試樣的制備，THP-1細胞株的分化誘導培養和GM-CSF產生試驗、GM-CSF的測定試樣和GM-CSF的定量按照例1進行。其它的藥劑制備如下所示。1.承載BCG菌提取物的磷酸鈣微粒(以下簡稱CaP-Bx)液的制備1)將一支干燥BCG疫苗安培(日本日本匕'一->一7'—制造株式會社，裝入12mg)置于高壓滅菌釜，于1(TC5分鐘，添加lml乙醇，攪拌6小時后，收集其懸浮液，添加到另外一支干燥BCG制劑種，再充分攪拌，然后，用Eppendorf型微量高速離心器于12000rpm離心5分鐘，回收其上清，制成來源于BCG菌體的乙醇可溶性成分溶液(以下稱為BCG提取液)。2)按8.28mL的林格液，1.24mL的KlinisalzB液，0.48mL的bifil專用碳酸氫鈉補充液的比率進行混合，形成10raL。在9ml的這種磷酸鈣過飽和溶液中添加lmlBCG提取液，對應于10mL混合液滴加1滴CaP微粒核液，放置一夜。離心懸浮液，獲得沉淀，將其用注射用生理鹽水充分進行清洗，懸浮于lml的注射用生理鹽水中。將其作為CaP-Bx微粒液。在GM-CSF產生試驗種添加1/5容量的刺激用培養液。B.結果結果示于圖1。No.10、11和12的條形圖上的垂直線表示標準偏差。圖中的簡略符號為CaP為磷酸鈣微粒；PPD為純化結核桿菌(終濃度為0.lyg/mL);TuMP為承載PPD的凝聚沉淀微粒(承載的PPD的終濃度為0.lug/mL);CaP-PPD為承載BCG菌提取物的磷酸鈣微粒(BCG菌提取物的制備方法和終濃度參照上述Al.1);LPS為脂多糖(終濃度記載于括號內)。圖中的試樣中的免疫刺激物質示于以下的表2。<table>tableseeoriginaldocumentpage37</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage38</column></row><table>在承載載體-CaP微粒中沒有發現抗原提呈細胞的刺激作用。TuMP、PPD,與例l的情況相同，只有極弱的刺激作用，即使在混合CaP、TuMP、PPD時，其刺激作用也很弱，最大時產生的GM-CSF量為12.4ng/mL(No.5)。CaP-Bx中為128.7ng/mL(No.9)，即使再添加PPD，也幾乎沒有變化，但再添加TuMP時，觀察到了明顯的協同效果(No.10和No.12)。例3:在1種免疫刺激物質載體上承載2種免疫刺激物質，在另外的免疫刺激物質載體上承載1種免疫刺激物質的免疫佐劑的抗原提呈細胞刺激效果B.材料和方法試樣的制備，THP-1細胞株的分化誘導培養和GM-CSF產生試驗、GM-CSF的測定試樣和GM-CSF的定量按照例1進行。其它的藥劑制備如下所示。1.承載PPD-BCG菌提取物的磷酸鈣微粒(以下簡稱CaP-PPD-Bx)液的制備1)按8.28mL的林格液，1.24mL的KlinisalzB液，0.48mL的bifil專用碳酸氫鈉補充液的比率進行混合，形成10mL。在9ml的這種磷酸鈣過飽和溶液中溶解5lig的PPD。在9mL該溶液中添加lmL的BCG提取液，對應于10mL混合液滴加l滴CaP微粒核液，放置一夜。離心懸浮液，獲得沉淀，將其用注射用生理鹽水充分進行清洗，懸浮于1ml的注射用生理鹽水中。將其作為CaP-PPD-Bx微粒液。在GM-CSF產生試驗種添加1/5容量的刺激用培養液。B.結果結果示于表3。表中的簡略符號為CaP為磷酸鈣微粒；PPD為純化結核桿菌(終濃度為0.1g/niL);TuMP為承載PPD的凝聚沉淀微粒(承載的PPD的終濃度為0.1yg/mL);CaP-PPD為承載BCG菌提取物的磷酸鈣微粒(承載的PPD的終濃度為1.0iig/mL);CaP-PPD-Bx為同時承載PPD和BCG菌提取物的磷酸鈣微粒(制備方法和終濃度參照Al.1);LPS為脂多糖(終濃度記載于括號內)。表3中，No.8確認了例1的結果的再現性，如果向CaP-PPD中添加PPD，TuMP，則比單純將單獨添加CaP-PPD，PPD，TuMP時產生的GM-CSF濃度相加時產生了更多的GM-CSF，由此判斷再現性良好。即使在從該試樣中除去PPD液的No.7中也發現了同樣的協同效果。而且，向CaP-PPD-Bx中添加TuMP時也相同，發現了極強的協同效果。<table>tableseeoriginaldocumentpage39</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage40</column></row><table>工業上應用的可能性如果使用本發明的免疫佐劑，可以從抗原提呈細胞中釋放出與用已知具有強免疫刺激作用的LPS刺激抗原提呈細胞時相同或超過其的大量的GM-CSF。因此，GM-CSF可以維持作為自分泌細胞生長因子作用的抗原提呈細胞的強力活化和其狀態。因此，本發明的免疫佐劑，通過與抗原一起給藥到包括人在內的哺乳類動物的活體內，可以誘導依賴于活化抗原提呈細胞的針對該抗原的液性免疫反應和/或細胞系免疫反應，可以有效進行針對傳染病和腫瘤的疫苗療法。權利要求1、一種免疫佐劑，其為含有在兩種以上的不同的微粒狀免疫刺激物載體上分別承載1種或2種以上的免疫刺激物質的免疫佐劑，其中作為該微粒狀免疫刺激物質載體至少包括(a)無機物和(b)由可溶性蛋白和粘多糖的凝聚產生的沉淀物的組合物。2、根據權利要求1中記載的免疫佐劑，所述兩種免疫刺激物質載體的組合物為(a)可以為被細胞吞噬的尺寸的微粒狀磷酸鈣和(b)由可溶性蛋白和粘多糖的凝聚產生的沉淀物。3、根據權利要求2中記載的免疫佐劑，上述(a)微粒狀磷酸鈣為最大直徑在1Jim以下的磷酸鈣。4、根據權利要求2或3中記載的免疫佐劑，上述(a)的微粒狀磷酸鈣為下述Ca/P摩爾比在1.3以上，且含有3-6重量％的碳酸根0)32-，其結晶性為在由CuKa射線產生的XRD光譜中，29值中出現以26。，32°和34°為中心的寬峰，33°中出現300的米勒指數的肩所規定的結晶性以上，且不僅以26。，28.1°,29°，32°33°和34°為中心出現峰或肩，而且以米勒指數為211和112的峰分離為規定的結晶性以下的結晶性的微粒狀磷酸鈣。5、根據權利要求2-4任意一項中記載的免疫佐劑，上述(b)的可溶性蛋白為白蛋白。6、根據權利要求2-5任意一項中記載的免疫佐劑，上述(b)的粘多糖為肝素。7、根據權利要求2-6任意一項中記載的免疫佐劑，上述(b)的不溶性物質的通過可溶性蛋白和粘多糖的凝聚產生的沉淀物是通過蛋白分子間交聯劑交聯的沉淀物。8、根據權利要求1-7任意一項中記載的免疫佐劑，上述免疫刺激物質為選自于細胞因子、趨化因子、細胞生長因子和激素中的l種或2種以上的誘導劑。9、根據權利要求1-8任意一項中記載的免疫佐劑，免疫刺激物質為選自于結核菌素、純化結核菌素(PPD)、源于微生物的可溶性成分、6，6-雙分枝菌酸藻糖、LPS，脂質A、寡核苷酸、葡聚糖、鑰孔嘁血藍蛋白、胞壁酰基二肽、貝他定(bestatin)、左旋咪唑、細胞因子、趨化因子，細胞生長因子和激素中的1種或2種以上的物質。10、根據權利要求9中記載的免疫佐劑，來源于微生物的可溶性成分為選自于微生物的醇提取物，丙酮提取物，吡啶提取物和熱水提取物中的l種或2種以上的提取物。11、根據權利要求9或10中記載的免疫佐劑，所述微生物是細菌。12、根據權利要求1-ll任意一項中記載的免疫佐劑，其用于通過在包括人在內的哺乳動物體內與抗原一起給藥來誘導針對該抗原的全身性免疫反應。13、根據權利要求12中記載的免疫佐劑，所述抗原為選自于真菌，放線菌、細菌、病毒、噬菌體、立克次氏體、原生動物、真菌成分、放線菌成分、細菌成分、病毒成分、噬菌體成分、立克次氏體成分、原生動物成分、腫瘤組織，腫瘤細胞，腫瘤細胞成分，腫瘤抗原蛋白和腫瘤抗原肽中的l種或2種以上的物質。14、根據權利要求1-11任意一項中記載的免疫佐劑，其用物理方法使包括人在內的哺乳類動物的腫瘤組織變性后，通過在該腫瘤組織內給藥來誘導抗腫瘤免疫反應。15、根據權利要求14中記載的免疫佐劑，物理方法為選自于微波照射，射頻凝固法，冷凍凝固法，電刀加熱，熱水注入，乙醇注入，栓塞法、放射線照射，激光照射和超聲波破壞中的1種或2種以上的方法。16、根據權利要求1-11任意一項中記載的免疫佐劑，其用于通過在體外與免疫載體細胞混合后，給藥于包括人在內的哺乳動物，在該動物的生物體內誘導全身性免疫反應。17、根據權利要求16中記載的免疫佐劑，所述免疫載體細胞為選自于樹突狀細胞、巨噬細胞、B淋巴細胞、T淋巴細胞、天然殺傷細胞、自然殺傷T細胞和造血干細胞中的1種或2種以上的細胞。18、一種疫苗，含有權利要求l-ll任意一項中記載的免疫佐劑和抗原。全文摘要一種可以發揮強免疫刺激作用的安全性高的免疫佐劑，其含有在兩種以上的不同的微粒狀免疫刺激物載體上分別承載1種或2種以上的免疫刺激物質，作為該微粒狀免疫刺激物質載體包括(a)可以被細胞吞噬的尺寸的微粒狀磷酸鈣等無機物和(b)由可溶性蛋白和粘多糖的凝聚產生的沉淀物的組合物。文檔編號A61K39/39GK101355964SQ20068005018公開日2009年1月28日申請日期2006年1月6日優先權日2006年1月6日發明者內村英次,大野忠夫申請人:細胞醫藥股份有限公司