專利名稱：：一種用于視力保健的復方葉黃素微囊及其制備方法
技術領域：
：本發明涉及一種復方葉黃素微囊及其制備方法，其組成主要包括葉黃素和花色苷色素，它屬于藥品、保健品領域。
背景技術：
：葉黃素主要包括兩種化合物，一為葉黃素，二為玉米黃質。葉黃素廣泛存在于自然界中，是很多生物的顏色組成成分，近年研究發現，葉黃素對人體具有重要生理功能。葉黃素和玉米黃質在保護視力、預防心血管疾病和癌癥及增強免疫力方面具有獨特的生理功能。在阻止自由基對生物膜的侵害、淬滅單線態氧和捕獲活性氧自由基具有較強抗氧化作用。葉黃素和玉米黃質是人眼視網膜中一種必要成分，主要起過濾藍光的過濾器作用，抑制藍光產生的自由基，對老年型黃斑色素退化、白內障具有抑制作用，在保護眼睛方面具有獨到作用。花色苷類色素也是自然界中大量存在的一種水溶性的植物色素物質，化學結構為2—苯基苯丙吡喃多羥基或多甲氧基取代物的糖苷，通常包括天竺葵色素、矢車菊色素、飛燕草色素、芍藥色素、矮牽牛色素、錦葵色素化學成分，代表性成分為花青素一3—葡萄糖苷(C3G)，來源上花色苷色素包括越桔色素、葡萄皮色素、黑米色素等。花色苷色素具有較強的抗氧化和清除自由基作用，具有抗突變、抗炎作用，能夠減輕眼疲勞、提高黑暗中視力以及視覺瞬間改變適應能力，對人視覺具有保護作用，對近視、單純綠內障、視網膜炎色盲具有改善作用。葉黃素和花色苷都具有較強的抗氧化作用，以不同的生理機理保護眼睛，兩者共同使用，超過兩者單獨使用的效果。目前市場上已有同時含有越桔色素和葉黃素產品，如商品名為"Bilberrywkhlutein"等，文獻theJournalofNutrition(Vol132,April2003，pp,992)也報道了產品中含有越桔色素和葉黃素可以提高視網膜葉黃素含量，改善老年性黃斑退化癥，市場上此類產品一般是簡單加入兩種原料藥。日本專利JP2003238442也提及了越桔色素和葉黃素合用對眼睛的保護作用。葉黃素是一類脂溶性物質，難溶于水，化學、物理性質非常不穩定，對光、熱、空氣較為敏感，尤以光影響最大，極大限制了其應用。另外，由于其難溶于水，在水中很難分散，人體生物利用度較低。花色苷色素相對于葉黃素比較穩定，具有較高的水溶性。目前已有葉黃素穩定性及分散性研究文獻及專利報導，中國專利CN00806761.9，葉黃素的穩定水分散體和穩定的水可分散粉末及其制備和應用，未檢索到采用葉黃素與花色苷色素制備復方微囊報道或專利。以上專利不涉及本專利內容。
發明內容本發明就是為了解決上述技術問題，而提供了一種對光、熱、空氣穩定的可水分散的葉黃素和花色苷色素復方微囊及其制備方法，該微囊制劑可提高葉黃素生物利用度，對視力保護超過了單獨應用任何一種的效果。葉黃素是脂溶性物質，難溶于水，對光、熱、空氣穩定性較差，生物利用度低下。花色苷色素具有一定的水溶性，比葉黃素更為穩定，具有較強的遮光作用，因此本發明中利用兩者的這一理化性質，制備成具有水包油型的微囊或納米粒，將脂溶性的葉黃素單獨或同脂溶性物質熔融，作為油相，以花色苷色素和水溶性物質溶于水中，作為水相，在表面活性劑或乳化劑作用下，進行均質分散，形成納米分散液，噴霧干燥或冷凍干燥后，形成可水分散的葉黃素和花色苷色素復方微囊制劑。在本發明復方制劑中，花色苷色素同其他輔料成分共同包裹含有葉黃素脂質粒，提高了葉黃素的穩定性和溶解性，形成同時含有葉黃素和花色苷色素復方微囊制劑，并具有較高溶解度，大大提高了對視力保的效果。為了達到上述目的，本發明采用如下技術方案實現，一種用于視力保健的復方葉黃素微囊，它是由下述原料藥按所述的重量份數制備而成葉黃素110份、花色苷色素530份、油相物質530份、水相物質1060份、乳化劑520份。所述葉黃素為葉黃素、玉米黃質中的一種或它們的混合物。所述的花色苷色素是越桔色素、葡萄皮色素、黑加侖色素、黑米色素中的一種或它們的任意混合物。所述的輔料中油相物質可以采用植物油、脂肪酸甘油脂，固體脂肪酸任意一種或他們的混合物；植物油可以是大豆油、橄欖油、菜子油、棕櫚油、麻油、紅花油、玉米油或紫蘇油中的任意一種或它們的任意混合物；脂肪酸甘油脂可以是單甘脂、山崳酸甘油脂，棕櫚酸甘油脂、混合酸甘油脂或聚甘油脂肪酸脂中的一種或它們的任意混合物；固體脂肪酸可以是硬脂酸、棕櫚酸中的一種或他們的任意混合物。所述的水相物質可以采用明膠、魚膠、阿拉伯膠，糖、糖醇中的一種或他們的任意混合物；其中糖可以是乳糖、蔗糖、甘露糖、海藻糖、麥芽糖中的一種或它們的任意混合物；糖醇可以是甘露醇、山梨醇、木糖醇、麥芽糖醇的一種或它們的任意混合物。所述的乳化劑采用非離子表面活性劑吐溫20、40、60、80，去氧膽酸，伯洛沙姆、磷脂、蔗糖酯、脂肪酸聚甘油脂中的一種或它們的任意混合物。一種用于視力保健的復方葉黃素微囊的制備方法，按所述重量份數取葉黃素，同油相物質混合，加入5—50倍葉黃素和油相物質總重量的乙醇或異丙醇，得到油相溶劑混合物備用；按所述重量份數取水相物質原料和乳化劑溶于5-30倍水相物質和乳化劑總重量水中得水相，并將花色苷色素溶在水相中，升溫至70—80°C，得到水相溶劑混合物；將油相溶劑混合物加熱至170一23(TC，放入水相溶劑混合物中，在高剪切乳化機中剪切1_5分鐘，然后放入高壓均質機中均質，在30—100兆帕壓力下，循環3—6次，然后噴霧干燥，得到本發明復方制劑。所述的放入高壓均質機中均質的方法可以采用超聲粉碎方法替代。所述的噴霧干燥可以采用冷凍干燥法替代。本發明的優點和效果如下本發明提高了葉黃素對于眼保健使用的效果，提高了葉黃素生物利用度，在水中更容易分散或溶解，使葉黃素更為穩定，患者服用更為方便。本發明得到的微囊可以采用以下已知的方法進行檢測，采用光學顯微鏡觀察微囊大小，形態，或采用激光微粒測定儀測定其粒徑，采用飽和溶液測定溶解度，采用高效液相法測定其含量。高效液相法測定方法為，采用乙醇溶解，制備供試液，液相條件為流動相甲醇乙腈二氯甲烷=10:6:5，檢測波長472nm，流速1.0ml/min,柱溫，室溫，進樣量lOpl，外標法計算含量；溶解度試驗，取葉黃素約100mg，加入不同量純水溶解，形成飽和溶液，計算最大溶解度范圍。具體實施方式實施例1取葉黃素10g，大豆油20g，單甘脂80g，加入550g乙醇或異丙醇，做為油相混合備用；取海藻糖100g，明膠50g和蔗糖酯100g溶于2000g水中，并將黑米色素50g溶在水相中，升溫至70—8(TC;將油相同溶劑混合物通過已預升溫至17(TC以上管路，迅速加熱至170'C，并放入水相中，進行剪切1一3分鐘，然后放入高壓均質機中，在30兆帕壓力下，循環6次，然后噴霧干燥，得到本發明復方制劑。上述蔗糖酯可以由采用吐溫20、40、60、磷脂、伯洛沙姆、脂肪酸甘油脂或去氧膽酸中的一種或任意比例的混合物替換。其中硬脂酸甘油酯可以采用山崳酸甘油酯、棕櫚酸甘油酯或混合酸甘油脂替換。上述大豆油可以由玉米油、橄欖油、菜子油、紅花油、棕櫚油、麻油或紫蘇油中的一種或任意比例的混合物替換。上述海藻糖可以采用乳糖、蔗糖、麥芽糖、甘露糖、甘露醇、木糖醇替換，明膠可以采用魚膠、阿拉伯膠替換。實施例2取玉米黃質10g，加入500g異丙醇，做為油相混合備用；取蔗糖200g，明膠50g，和吐溫(80)50g溶于3000g水中，并將越桔色素100g溶在水相中，升溫至70—80。C;將油相同溶劑混合物通過已預升溫至20(TC以上管路，迅速加熱至20(TC，并放入水相中，進行高速剪切1—5分鐘，然后超聲粉碎10分鐘，然后冷凍干燥，得到本發明復方制劑。本實施例中所述的吐溫20可以由吐溫80、吐溫60或他們的任意混合物替代。實施例3取玉米黃質10g，硬脂酸20g、棕櫚酸60g，加入2000g乙醇，做為油相混合備用；取乳糖200g，魚膠50g，和吐溫(80)50g溶于5000g水中，并將越桔色素100g溶在水相中，升溫至70—8(TC;將油相同溶劑混合物通過已預升溫至20(TC以上管路，迅速加熱至23(TC，并放入水相中，進行高速剪切3分鐘，然后超聲粉碎20分鐘，然后冷凍干燥，得到本發明復方制劑。本實施例中所述的吐溫20可以由吐溫40、吐溫80、吐溫60或他們的任意比例混合物替代。實施例4取葉黃素10g，紫蘇油50g，山崳酸甘油酯250g，加入3100g乙醇或異丙醇，做為油相混合備用；取海藻糖400g，明膠50g，和磷脂100g和伯洛沙姆50g溶于9000g水中，并將黑加侖色素50g溶在水相中，升溫至70—8(TC;將油相同溶劑混合物通過已預升溫至17(TC以上管路，迅速加熱至17(TC，并放入水相中，進行高速剪切5分鐘，然后放入高壓均質機中，在30—80兆帕壓力下，循環4次，然后噴霧干燥，得到本發明復方制劑。本實施例中所述的黑家侖色素可以采用越桔色素、黑米色素、葡萄皮色素中的一種或任意比例的混合物替代。實施例5取葉黃素10g，玉米黃質10g，麻油10g、混合酸甘油脂5g、硬脂酸5g加入400g乙醇，做為油相混合備用；取麥芽糖50g、阿拉伯膠50g木糖醇50g，吐溫(80)200g溶于4000g水中，并將黑加侖色素30g，越桔色素30g，黑米色素30g溶在水相中，升溫至70—80。C;將油相同溶劑混合物通過已預升溫至18(TC以上管路，迅速加熱至180°C，并放入水相中，進行高速剪切l一5分鐘，然后放入高壓均質機中，在80兆帕壓力下，循環3-5次，然后噴霧干燥，得到本發明復方制劑。實施例6取葉黃素10g，玉米黃質10g，菜子油10g、加入900g乙醇，做為油相混合備用；取海藻糖200g，伯洛沙姆100g、磷脂100g溶于4000g水中，并將黑加侖色素30g，越桔色素30g，黑米色素30g溶在水相中，升溫至70—8(TC;將油相同溶劑混合物通過已預升溫至20(TC以上管路，迅速加熱至21(TC,并放入水相中，進行高速剪切1一5分鐘，然后放入高壓均質機中，在20-80兆帕壓力下，循環3-4次，然后噴霧干燥，得到本發明復方制劑。實施例7穩定性試驗取按實施1方法制得的葉黃素復方微囊100g，及同批次的葉黃素原料各100g，按照光照影響因素，高溫影響因素試驗做穩定性考察。光照影響因素試驗，取上述樣品各IOg分成若干份，置于4000LX燈箱中，分、別與0時，6時，12時，24時，3天，5天，IO天取樣測定吸光度下降率結果見表l。測定方法取樣品2mg，于10ml容量瓶中，加無水乙醇適量超聲20min過0.45mn微孔濾膜，取0.2ml-10ml定容，為供試液，在446nm波長，進行吸光度測定，并計算吸光度下降率，得出降解率。結果見表l。高熱影響試驗，取上述樣品各10g，分成若干份，置于4(TC恒溫箱中。分別于0時，6時，12時，24時，3天，5天，IO天取樣測定吸光度(448nm)下降率，結果見表2。表l光照(4500LX)對葉黃素微囊穩定性影響:時間樣品吸光度(448nm)降解率(％)o小時原料0微囊024小時原料15%微囊2%48小時原料40%微囊8%72小時原料56%微囊20%5天原料微囊95%32%10天原料100%微囊30%表2高溫(40°C)對葉黃素微囊穩定性影響時間樣品吸光度(448nm)降解率(％)O小時原料0微囊024小時原料9%微囊1%48小時原料20%微囊2%72小時原料25%11<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>由表2，葉黃素復方微囊對光照高溫穩定性比原料穩定。水分散試驗取實施例1葉黃素微囊與原料各100mg，各加入10ml雙蒸餾水，搖晃10鈔鐘,靜置觀察，結果，葉黃素復方微囊組完全分散為透明深黃溶液,而葉黃素原料漂浮在液面，溶液無色。實施例8通過視覺電生理檢查方法觀察復方葉黃素微囊對大鼠視網膜功能恢復作用的影響。實驗材料-藥物按實施例1方法制備的復方葉黃素微囊。動物SD大鼠，雄性，體重100g左右主要儀器羅蘭RetiScan視覺電生理檢査系統、照度計和自制動物暗適應箱、光照箱實驗方法實驗動物和方法SD大鼠60只，體重100g左右，全雄。隨機分為正常組、模型組、復方高劑量微囊組、中劑量組、低劑量組。每組12只動物。灌胃給藥高劑量組(117mg/kg)，中劑量組G9mg/kg)低劑量組(13mg/kg)。模型組(等容蒸餾水)，正常組(等容蒸餾水)。每日一次，連續給藥4周后造模，造模后繼續給藥3天到實驗結束。造模時，平均照度8700士300(Lux)，光照前大鼠暗適應24小時，然后逐只放入光照箱，接受30分鐘光照射。每組等量只數進行。大鼠未經散瞳及麻醉，可在光照箱內自由活動。光照后放入詞養房中繼續飼養。造模后3天進行各組間大鼠閃光視網膜電圖檢測。閃光視網膜電圖測試方法SD大鼠暗適應過夜后，用復方托品酰胺液散瞳，后用速眠新(846合劑)將大鼠麻醉(0.7ml/kg)，0.5%可卡因溶液作角膜表面麻醉。將大鼠固定在實驗臺上，安裝角膜接觸電極，參考電極接于同惻頰部。接地電極置于尾部皮下。以上過程全部在暗室紅燈光下進行。用Roland視覺電生理診斷系統進行F-ERG檢測。刺激及記錄條件單次刺激，間隔5分鐘。單通道采樣記錄。a、b波通頻帶為l一300Hz。刺激頻率0.5Hz。時程250ms。OPs(振蕩電位)的通頻帶為100—300Hz。刺激頻率為0.5Hz。時程250ms。對a、b波及OPs波進行統計分析。統計學處理-統計學處理采用SPSS14.0統計軟件，多組間兩兩比較One-WayANOAY方差分析(L-S-D法)。實驗結果分析-各組間大鼠閃光視網膜電圖中視桿反應的潛伏期及a、b波的振幅比較見表1，最大混和反應的潛伏期和a、b波的振幅比較比較見表2。振蕩電位的振幅比較比較見表3。(其中因個體差異，個別老鼠在數據處理時被剔除)表l、不同劑量中藥視網膜修復后與對照組視桿細胞反應的比較(x±s)組只a波b波別數潛伏期(ms)幅值(uV)潛伏期(ms)幅值(yV)N1123.27±6.6418.50±6.55b71.27±7.04194.64±23.57'cM1123.55±6.418.48±5.06""73.55±4.59128.25±15.A.1124.64±6.9217.21±10.06b73.18±8.68117.97±17.551*B1027.10±7.3116.66±8.57b77.20±8.23200.60±31.12tcC1025.20±3.2213.36±4.'9877.10±9.76189.1±27.96'c13a與正常組比較有顯著性差異(PO.05);b與模型組比較有顯著性差異(P<0.05);c與低劑量組比較有顯著性差異(PO.05);d與中劑量組比較有顯著性差異(PO.05);e與高劑量組比較有顯著性差異(PO.05)表2、不同劑量中藥視網膜修復后與對照組最大混合反應的比較(x±s)組別只數a波b波潛伏期(ms)幅值OV)潛伏期(ms)幅值(yv)N1112.55±1.81皿18±10.72"74.00±3.55313.91±42.74beM1113.36±3.6458.25±20.43^75.00±6.59186.73±25.94adeA.1113.82±4.3363.83±17.58"de73.82±6.82183.18±29.44adeB1012.60±1.1782.09±11.16"c75.80±7.05290.70±68.36beC1012.00±1.1588.55±21.87bc75.30±6.57285.30±38.a與正常組比較有顯著性差異(P<0.05);b與模型組比較有顯著性差異(PO.05);c與低劑量組比較有顯著性差異(P<0.05):d與中劑量組比較有顯著性差異(PO.05);e與高劑量組比較有顯著性差異(P<0.05)表3、不同劑量中藥視網膜修復后與對照組振蕩電位的比較(X±S)組別只數振蕩電位"v)N1178.99±15.72beM1161.29±11.88"A1144.79±11.22-"-B1070.56±15.39°C1069.04±7.84ca與正常組比較有顯著性差異(PO.05);b與模型組比較有顯著性差異(PO.05);c與低劑量組比較有顯著性差異(PO.05);d與中劑量組比較有顯著性差異(P<0.05);e與高劑量組比較有顯著性差異(PO.05)F-ERG是由閃光刺激器誘發的ERG，其a波和b波反映了神經節細胞以前的視網膜功能狀態。因此，a波和b波的波幅可反映視網膜光損傷的功能狀態，是評價視網膜光損傷的一個較客觀、準確的指標。本實驗結果顯示，光照后3天模型組大鼠視網膜電圖F-ERG的a波、b波振幅相對于正常組大鼠明顯低小。提示光照后3天實驗大鼠視網膜功能受損，各波波幅降低。中、高劑量的提取藥物對實驗大鼠視網膜光損傷后閃光視網膜電圖F-ERG中a、b波振幅的降低有明顯的保護作用；中、高劑量的復方葉黃素微囊可有效的保護光照后實驗大鼠視網膜電圖F-ERG中a、b波振幅的降低。中劑量的藥物即可起到很好的保護作用。對于潛伏期，模型組及各劑量組之間無差異。說明，造模對潛伏期無明顯影響，光損傷屬于機械性可恢復損傷，而不是永久性的病理性損傷。權利要求1、一種用于視力保健的復方葉黃素微囊，其特征在于它是由下述原料藥按所述的重量份數制備而成葉黃素1～10份、花色苷色素5～30份、油相物質5～30份、水相物質10～60份、乳化劑5～20份。2、根據權利要求1所述的用于視力保健的復方葉黃素微囊，其特征在于所述葉黃素為葉黃素、玉米黃質中的一種或它們的混合物。3、根據權利要求1所述的用于視力保健的復方葉黃素微囊，其特征在于所述的花色苷色素是越桔色素、葡萄皮色素、黑加侖色素、黑米色素中的一種或它們的任意混合物。4、根據權利要求1所述的用于視力保健的復方葉黃素微囊，其特征在于所述的油相物質為植物油、脂肪酸甘油脂、固體脂肪酸中的一種或他們的任意混合物；植物油是大豆油、橄欖油、菜子油、棕櫚油、麻油、紅花油、玉米油或紫蘇油中的一種或它們的任意混合物；脂肪酸甘油脂是單甘脂、山崳酸甘油脂，棕櫚酸甘油脂、混合酸甘油脂或聚甘油脂肪酸脂中的一種或它們的任意混合物；固體脂肪酸是硬脂酸、棕櫚酸中的一種或他們的任意混合物。5、根據權利要求1所述的用于視力保健的復方葉黃素微囊，其特征在于所述的水相物質是明膠、魚膠、阿拉伯膠、糖、糖醇中的一種或他們的任意混合物；其中糖是乳糖、蔗糖、甘露糖、海藻糖、麥芽糖中的一種或它們的任意混合物；糖醇是甘露醇、山梨醇、木糖醇、麥芽糖醇的一種或它們的任意混合物。6、根據權利要求1所述的用于視力保健的復方葉黃素微囊，其特征在于所述的乳化劑為非離子表面活性劑吐溫、去氧膽酸、伯洛沙姆、磷脂、蔗糖酯、脂肪酸聚甘油脂中的一種或它們的任意混合物。7、根據權利要求6所述的用于視力保健的復方葉黃素微囊，其特征在于所述的吐溫為吐溫20、40、60、80。8、一種權利要求1所述用于視力保健的復方葉黃素微囊的制備方法，按所述重量份數取葉黃素，同油相物質混合，加入5—50倍葉黃素和油相物質總重量的乙醇或異丙醇，得到油相溶劑混合物備用；按所述重量份數取水相物質原料和乳化劑溶于5-30倍水相物質和乳化劑總重量水中得水相，并將花色苷色素溶在水相中，升溫至70—80。C，得到水相溶劑混合物；將油相溶劑混合物加熱至170_230°C，放入水相溶劑混合物中，在高剪切乳化機中剪切l一5分鐘，然后放入高壓均質機中均質，在30—100兆帕壓力下，循環3—6次，然后噴霧干燥，得到本發明復方制劑。9、根據權利要求8所述的用于視力保健的復方葉黃素微囊的制備方法，其特征在于所述的放入高壓均質機中均質的方法可以采用超聲粉碎方法替代。10、根據權利要求8所述的用于視力保健的復方葉黃素微囊的制備方法，其特征在于所述的噴霧干燥可以采用冷凍干燥法替代。全文摘要本發明公開了一種復方葉黃素微囊及其制備方法，其組成主要包括葉黃素和花色苷類色素，它屬于藥品、保健品領域。用于視力保健的復方葉黃素微囊，它是由下述原料藥按所述重量份數制備而成葉黃素1～10份、花色苷色素5～30份、油相物質5～30份、水相物質10～60份、乳化劑5～20份。本發明提高了葉黃素對于眼保健使用的效果，提高了葉黃素生物利用度，在水中更容易分散或溶解，使葉黃素更為穩定，患者服用更為方便。文檔編號A61K47/42GK101496808SQ200810010278公開日2009年8月5日申請日期2008年1月29日優先權日2008年1月29日發明者莉艾,董英杰申請人:沈陽皓天萬嘉醫藥科技有限公司