專利名稱：：一類新型的鉑(Ⅱ)配合物及其抗腫瘤活性的制作方法
技術領域：
：本發明涉及一類以3-氮雜-1，l-環丁二酸根及其衍生物為配體的新型鉬(II)配合物及其制備方法，以及所述鉑(n)配合物中一些典型化合物的體外抗腫瘤活性。二-技術背景二順鉑是全球廣泛應用的抗腫瘤藥物之一，但是由于在臨床應用中存在著一些缺陷，例如較嚴重的毒副作用、抗腫瘤譜窄、水溶性較差和交叉耐藥性等，因而促使人們設計和研究新的具有更高活性和低毒性的鉑類抗癌藥物。最近十幾年來，基于對鉑抗腫瘤藥物耐藥機理的深入研究，人們合成了大量的新型鉑類配合物，如含有生物活性基團的鉬(n)配合物，具有空間位阻的鉑(n)配合物，含硫原子配位的鉑(n)配合物，多核鉑(n)配合物和具有口服活性的鉬(iv)類配合物等。這些具有新型結構的鉑類化合物突破了順鉑類經典構效關系的框架，為合成新的鉑類抗腫瘤藥物拓展了渠道。由于可能的抗腫瘤機理不同于經典的順鉑類藥物，對具有新型結構的抗腫瘤鉑化合物的研究可望得到高效、低毒、水溶性好、選擇性高、與順鉑無交叉耐藥的候選藥物。三.
發明內容本發明以兼具水溶性和脂溶性的3-氮雜-l,l-環丁二酸根及其衍生物作為配體與金屬鉑(II)離子配位，設計與合成了一系列具有新型結構的鉑(II)配合物，目的在于使其滿足抗腫瘤藥物所具有的低毒、水溶性好和有效的抗腫瘤活性，用于治療人體腫瘤。本發明披露了一類具有新型結構的鉑(n)配合物，其特征是以3-氮雜-i,i-環丁二酸根及其衍生物為配體，二價金屬鉑離子與3-氮雜-l，l-環丁二酸根配體中的叔胺氮原子和其中一個羧酸根中的氧原子配位成鍵，這類鉑(ii)配合物的結構用式a)表示，，其中R!和R2可以相同或不相同，分別是氫原子、C!-8鏈狀垸基或C3-6環狀垸基，或通過Cw垸基鏈連接起來構成的鏈狀二胺，或通過C3-6環狀烷基連接起來構成的1,2-位環狀二胺；當R!和R2通過Cw垸基鏈連接起來構成有立體異構的鏈狀二胺時，這些立體異構體可以是光學異構體的左旋體、右旋體或混旋體；當R4和R2通過C^環狀垸基連接起來構成有立體異構的1，2-位環狀二胺時，這些立體異構體可以是幾何異構的順式、反式或順反混合物，也可以是光學異構體的左旋體、右旋體或混旋體；R3可以是氫原子、烷基、環狀烷基、未取代的芳香基或取代的芳香基；當R3含有取代的芳香基時，取代基可以在任意位置，可以為單個或多個取代基團。作為進一步的說明當式(1)中R！和R2同時為氫原子時，式(1)所示的配合物可由式(la)表示，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>式(la)其中，R3同式(l)所定義；當式(l)中I^為氫原子或Ci-8鏈狀垸基，R2為C3-6環狀垸基時，式(l)所示的配合物可由式(lb)表示，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>式(lb)其中，Ri為氫原子或C^鏈狀烷基，m=2-5，R3同式(l)所定義；當式(l)中R,和R2通過CM烷基鏈連接起來構成鏈狀二胺時，式(l)所示的配合物可由式(lc)表示，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>其中，n=2-4，R3同式(l)所定義；當式(l)中R!和R2通過C3-6環狀烷基連接起來構成1,2-位環狀二胺時，式(l)所示的配合物可由式(ld)表示，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>式(ld)其中，p=l-4，R3同式(l)所定義。本發明的另一個目的是提供式(i)所示的鉑(n)配合物的制備方法。在這些鈾(n)配合物的合成中，它們首先是由二價鉑的四鹵合鉑酸鹽與相應的胺(氨)配位作用得到含胺(氨)配位和鹵素離子配位的鉑(II)配合物，由式(2)表示，'<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>式(2)Hal其中，Hal代表C1—、Br-或r鹵素離子，R！和R2同式(l)中對R！和R2的定義；然后在避光條件下，于水溶液中通過銀離子除去式(2)中的鹵素離子，再與式(3)所示的3-氮雜-1,1-環丁二酸或其衍生物的堿金屬鹽反應，生成式(l)所示結構的配合物；或者在避光條件下，于水溶液中通過式(4)所示的3-氮雜-l，l-環丁二酸或其衍生物的銀鹽除去式(2)中的鹵素離子，反應生成式(1)所示結構的配合物；<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>式(4)如Na+、K+等;R3同式(l)所定義；式(3)式(3)中，M為一價的堿金屬陽離子，式(4)中，R3同式(l)所定義。本發明的鉑(II)配合物除使用紅外光譜、核磁氫譜、質譜和元素分析證實外，一些典型化合物的結構還經X-射線單晶衍射技術確定。相關化合物的分子結構見說明書附圖1和圖2。本發明還有一個目的是公開式(1)所示鉑(II)配合物中一些典型化合物對人體肺癌細胞A549、人體肝癌細胞Bel7402和人體乳腺癌細胞MCF-7的體外抑制作用。相關化合物與陽性對照物對不同癌細胞的抑制作用見說明書附圖3、圖4和圖5。四.圖1是[N-(4-氟芐基)-3-氮雜-1，1-環丁二酸根]二氨合鉑(II)(化合物IO)的分子結構；圖2是(N-芐基-3-氮雜-1，l-環丁二酸根)(7尺2i-環己二胺)合鉑(II)(化合物13)的分子結構；圖3是化合物4、5、6、7、10、11和12對人肺癌細胞A549的生長抑制作用(細胞被化合物處理18小時后用流式細胞儀分析細胞凋亡數量)；圖4是化合物4、5、6、7、10、11和12對人肝癌細胞Bel-7402的生長抑制作用(細胞被化合物處理18小時后用流式細胞儀分析細胞凋亡數量)；圖5是化合物4、5、6、7、10、11和12對人乳腺癌細胞MCF-7的生長抑制作用(細胞被化合物處理18小時后用流式細胞儀分析細胞凋亡數量)。五.具體實施例本發明由下述實施例得到進一步的說明，但這些說明并不是限制本發明。實施例1.(N-異丙基-3-氮雜-1，1-環丁二酸根)二氨合鉑(II)的制備將二碘二氨合鈿(II)(0.97g，2.0mmo1)和硝酸銀(0.68g，4.0mmo1)混合，加入lOOmL水，在40'C避光下攪拌反應24h，過濾得澄清液。將配好的N-異丙基-3-氮雜-1，1-環丁二酸鈉(0.46g，2.0mmol)的水溶液(50mL)加入到上述澄清液中，在50'C下避光攪拌反應24h，過濾。然后將濾液旋轉蒸發濃縮，約剩5mL水時，有黃色固體出現，冷卻放置5h，過濾后固體真空干燥，用水重結晶得到淡黃色固體0.32g(產率38%)。IR(KBr):3407br，3245s,2979m，2640m,2473w,1615s,1385s,1082m,997m，862m，789m;iH-NMR(D20/TMS):S0.92-1.18(m,6H)，3.19-3.21(m，1H)，4.00-4.02(m，2H),4.19-4.28(m,2H);ESI-MSm/z:[M+H]+=415.3(100%)。實施例2.(N-正丁基-3-氮雜-1，l-環丁二酸根)二氨合鉑(II)的制備(2)使用N-正丁基-3-氮雜-1,1-環丁二酸鈉代替N-異丙基-3-氮雜-1,1-環丁二酸鈉，按實施例1所述方法得到淡黃色固體，產率29%。IR(KBr):3430s,3261s,2963m,2876m，1616s,1385s，839m;^-NMR(D20/TMS):S0.78-0.83(m,3H),U9-1.47(m,4H)，2.59-3.24(m,2H)，3.91-4.4(m,4H);ESI-MSm/z:〖M+H]+=429.3(100%)。實施例3.(N-芐基-3-氮雜-i，l-環丁二酸根)乙二胺合鉑(n)的制備(3)將二碘乙二胺合銷(II)(1.45g，3.0mmoL)和硝酸銀(1.02g，6.0mmo1)混合，加入100mL水，在40'C下避光攪拌反應24h，過濾得澄清液。將配好的N-芐基-3-氮雜-1，1-環丁二酸鈉(0.84g，3.0mmo1)的水溶液(100mL)加入到上述澄清液中，在50'C下避光攪拌反應24h，過濾。然后將濾液旋轉蒸發濃縮，約剩10mL水時，有白色固體出現，冷卻放置3h，過濾后固體真空干燥，用水重結晶得到白色微晶0.57g(產率39%)。IR(KBr):3372br,3169s，3075m,2967m,2884w,1646s,1578s，1456m，1409m，1361s，1289m,1187m，890w，850w,770m;iH隱NMR(D20/TMS):52.47-2.69(m,4H),3.80-4.15(m,4H)，4.21-4.41(m，2H)，7.41,7.60(m，5H);ESI-MSm/z:[M+H]+=486.3(100%)。實施例4.(N-芐基-3-氮雜-1,1-環丁酸根)，氨合鉑(II)的制備使用N-芐基-3-氮雜-1,1-環丁二酸鈉代替N-異丙基-3-氮雜-1,1-環丁二酸鈉，按實施例l所述方法得到白色固體，產率63%。IR(KBr):3411br，3226s,3103m,2886w,1650s,1453m,1407s，1357s,880w,774m,741m;!H隱NMR(D20/TMS):53.87-3.91(m,4H),4.35-4.37(m,2H)，7.11-7.14(m,1H),7.19-7.21(m,1H)，7.38.7.39(m，1H)，7.48-7.50(m,1H);ESI-MSm/z:[M+H]+=480.7(100%)。實施例5.[N-(2-氯芐基)-3-氮雜-l,l-環丁二酸根]*二氨合鉑(11)的制備將二碘二氨合鉬(II)(0.48g，l.OmmoL)和硝酸銀(0.34g,2.0mmoL)混合，加入100mL水，在35'C下避光攪拌反應24h，過濾得澄清液。將配好的N-(2-氯芐基)-3-氮雜-l,l-環丁二酸鈉(0.31g，l.Ommol)的水溶液U00mL)加入到上述澄清液中，在40。C下避光攪拌反應36h,過濾。然后將濾液旋轉蒸發濃縮，約剩10mL水時，有白色固體出現，冷卻放置3h，過濾后固體真空干燥，用水重結晶得到白色固體0.I5g(產率30%)。IR(KBr):3449br，3346m，3220m,3097m，2884m，1661s,1635m,1585m,1471s,1442m,1358s,884w,774m,750m;!H-NMR(D20/TMS):S3.96-4.01(m，4H),4.15-4.17(m，2H),7.35-7.45(m，3H),7.7,7.71(m,1H);ESI-MSm/z:[M-NH3+H]+=480.9(100%)，[M+H]+=497(30%)。實施例6.[N-(3-氯芐基)-3-氮雜-1,1-環丁二酸根]二氨合鉑(II)的制備<formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>(6)使用N-(3-氯芐基)-3-氮雜-l,l-環丁二酸鈉代替N-(2-氯芐基)-3-氮雜-l,l-環丁二酸鈉，按實施例5所述方法得到白色固體，產率56%。IR(KBr):3440br，3246m,3109m,1626m,1626m,1597s,1575s,1445m，1362s,883w,793m，735m;^隱NMR(D20/TMS):S3.95-4.00(m，4H)，4.46-4.64(m,2H)，7.35(m,3H)，7.45(m，1H);ESI隱MSm/z:[M+H〗+-496.9(100%),[M-NH3+H]+=480.6(60%)，[M+Na〗+=519.1(50%)。實施例7.[N_(4-氯芐基)-3-氮雜-1，1-環丁二酸根]二氨合鉑(II)的制備CI使用N-(4-氯芐基)-3-氮雜-1,l-環丁二酸鈉代替N-(2-氯芐基)-3-氮雜-l，l-環丁二酸鈉，按實施例5所述方法得到白色固體，產率56%。IR(KBr):3495br，3233m，3104m，1645s，1615s，1574w，1557m，1495m，1437w,1361s，880m,836m，777m;!H-NMR(D20/TMS):S3.92-3.98(m,4H),4.41-4.43(m，2H),7.25-7.38(m，2H)，7.93-7.94(m，2H);ESI陽MSm/z:[M-NH3+H]+=479.9(100%)。實施例8.〔N-(2-氟芐基)-3-氮雜-l，l-環丁二酸根]*二氨合鉑(11)的制備使用N-(2-氟芐基)-3-氮雜-1,卜環丁二酸鈉代替N-(2-氯芐基)-3-氮雜-l，l-環丁二酸鈉，按實施例5所述方法得到白色固體，產率52%。IR(KBr):3431br,3239s，3105m，2886w,1636s，1492m，1455s，1359s，854w,771m,744m;!H-NMR(D20/TMS):S3.87-3.91(m，4H),4.35-4.37(m，2H),7.11-7.14(m,1H),7.19-7.21(m,1H)，7.38陽7.39(m，1H),7.48-7.50(tn,1H);ESI-MSm/z:[M+H]+=480.7(100%),[M-NH3+H]+=463.8(55%)。實施例9.[N-(3-氟芐基)-3-氮雜-1,卜環丁二酸根]二氨合鉑(II)的制備(9)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>將二碘二氨合鉬(II)U.94g，4.0mmoD和硝酸銀(1.36g,8.0rnmo1)混合，加入100mL水，在30'C下避光攪拌反應30h，過濾得澄清液。將配好的N-(3-氟芐基)-3-氮雜-l,l-環丁二酸鈉(1.19g，4.0mmoD的水溶液(100mL)加入到上述澄清液中，在4(TC下避光攪拌反應24h，過濾。然后將濾液旋轉蒸發濃縮，約剩35mL水時，冷卻放置lh，有白色固體出現，過濾后固體真空干燥，用水重結晶得到白色固體0.58g(產率30%)。IR(KBr):3425br，3252s,3107m，2882w，1654s,1654s，1591s，1490m，1450w，1365s,864w，778w，742m;!H-NMR(D20/TMS):S3.95-3.99(m，4H)，4.45-4.46(m，2H)，7.05-7.08(m，1H)，7.17-7,22(m，2H),7.34-7.38(m，1H);ESI-MSm/z:[M+H]+=480.8(100°/。)，[M-NH3+H]+=463.3(60%)。實施例10.[N-(4-氟芐基)-3-氮雜-1,1-環丁二酸根]二氨合鉑(II)的制備<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula>使用N-(4-氟芐基)-3-氮雜-1，1-環丁二酸鈉代替N-(2-氯芐基)-3-氮雜-l，卜環丁二酸鈉，按實施例5所述方法得到白色固體，產率47%。IR(KBr):3516br，3208s,3104m，2884w,1648s，1618s,1598m，1566m,1512s,1365s，882m,779m:766m;!H-NMR(D20/TMS):S3.88-3.94(m，4H)，4.36-4.38(m,2H),7.08-7.11(m,2H),7.37-7.38(m:2H);ESI-MSm/z:[M-NH3+H]+=463.9(100%),[M+H]+=481.1(55%)。實施例11.[N-(4-甲基芐基)-3-氮雜-1，l-環丁二酸根]二氨合鉑(II)的制備<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula>(11)將二碘二氨合鉑(II)(0.97g,2.0mmol)和新制的N-(4-甲基芐基)-3-氮雜-1，1-環丁二酸銀(0.93g，2.0mmo1)混合，加水500mL，在50'C下避光攪拌反應24h，過濾得澄清液。然后旋轉蒸發濃縮，約剩10mL水時，有白色固體出現，冷卻放置3h，過濾后固體真空干燥，用水重結晶得到白色固體0.52g(產率55%)。IR(KBr):3444br，3210s,3099m，2885w,1653s,1585w，1567m，1515w,1450w，1359s,883w,810m:771m;^-NMR(D20/TMS):53.87-3.97(m，4H)，4.32-4.70(m，2H)，7.21-7.22(m,2H)，7.26-7.27(m，2H);ESI掘m/z:[M+H]+=477.0(100%)。實施例12.[N-(4-甲氧基芐基)-3-氮雜-1，l-環丁二酸根]二氨合鈾(ll)的制備(12)使用N-(4-甲氧基芐基)-3-氮雜-1,1-環丁二酸銀代替N-(4-甲基芐基)-3-氮雜-l，l-環丁二酸銀，按實施例ll所述方法得到白色固體，產率57%。IR(KBr):3420br,3254s,3106m,2882w,1659s，1611s,1558w，1516s，1364s,860m,770w,735m;!H-NMR(D20/TMS):S3.73-3.94(m,4H)，4.36陽4.39(m，2H),6.96-6.97(m，2H),7.30墨7.31(m,2H);ESI-MSm/z:[M-NH3+H]+=475.9(100%),[M+H]+=491.9(60%)。實施例13.(N-芐基-3-氮雜-1,l-環丁二酸根)(/尺M-環己二胺)合鉑(II)的制備H2(13)將二氯.(/尺2i-環己二胺)合鉑(n)(0.95g,2.5mmo1)和新制的N-芐基-3_氮雜-1，1-環丁二酸銀(1.12g，2.5mmo1)混合，加水600mL，在5(TC下避光攪拌反應24h，過濾得澄清液。然后旋轉蒸發濃縮,約剩5mL水時出現白色微晶，冷卻放置，過濾后得白色晶體0.56g(產率41%)。IR(KBr):3424br，3208m,3101m，2937m，2861w,1606s,1497w，1452m，1354s，848w，769w;iH-NMR(D20/TMS):S1.06-1.19(m，4H)，1.49(m,2H),1.87-189(m,1H),1.97-1.99(m,1H),2.33-2.35(m，2H)，3.90-4.05(m，4H)，4.32-4.34(m，2H)，7.35-7.44(m，4H);ESI-MSm/z:[M+H〗+=543.2(100%)。實施例14.[N-(3-氯芐基)-3-氮雜-1,1-環丁二酸根]OS,2S-環己二胺)合鈾(II)的制備Cl、H2(14)將二氯'Os;2S-環己二胺)合鉑(II)(l.OOg，2.6mmo1)和新制的N-(3-氯芐基)-3-氮雜-1,1-環丁二酸銀(1.27g，2.6mmo1)混合，加水600mL，在50。C下避光攪拌反應24h，過濾得澄清液。然后旋轉蒸發濃縮,約剩10mL水時出現白色固體。冷卻放置，過濾后固體真空干燥，用水重結晶得白色固體0.64g(產率42%)。IR(KBr):3421br,3194m，3053m，2839m，1634s，1596s，1492m,1447m,1356s，857m，812m;'H-NMR(D20/TMS):S0.99-1.13(m,4H),1.18-1.21(m,2H)，1.88-1.90(m,1H)，1.94-1.99(m,1H)，2.34-2.36(m，2H)，3.25-4.04(m，4H)，4.29-4.35(m,2H)，7.30-7.32(m,1H)，7.36陽7.44(m,3H);ESI-MSm/z:[M+H]+=577.2(100%),[M+Na]+=600.1(50%)。實施例15.[N-(4-氯芐基)-3-氮雜-l，l-環丁二酸根](反式-1，2-環己二胺)合鉑(II)的制備ClH2(15)將二氯*(反式-1,2-環己二胺)合鉑(II)(0.88g,2.3mmo1)和新制的N-(4-氯芐基)-3-氮雜-l,1-環丁二酸銀(1.12g,2.3mmo1)混合，加水600mL，在50'C下避光攪拌反應24h，過濾得澄清液。然后旋轉蒸發濃縮,約剩10mL水時出現白色固體。冷卻放置，過濾后固體真空干燥，用水重結晶得白色固體0.60g(產率45%)。IR(KBr):3424br，3196m，3063m，2839m，2862w,1638s，1598s，1492m,1446m，1355s，857m,812m,727w;'H-NMR(D20/TMS):S1.04-1.20(m，4H)，L49(m,2H),1.88-1.96(m,1H)，1.984國1.99(m，1H),2.34-2.36(m，2H)，3.25-4.02(m,4H)，4.29-4.31(m，2H),7.33-7.35(m，2H),7.43-7.44(m，2H);ESI-MSm/z:[M+H]+=578.1(100%)。實施例16.[N-(2-氟芐基)-3-氮雜-1,l-環丁二酸根]U凡2R-環己二肢)合鉑(II)的制備<formula>formulaseeoriginaldocumentpage15</formula>(16)將二氯*環己二胺)合鉑(II)(1.13g，3.0mmo1)和新制的N-(2-氟芐基)-3-氮雜-1,1-環丁二酸銀(1.39g,3.0mmo1)混合，加水600mL，在50'G下避光攪拌反應24h,過濾得澄清液。然后旋轉蒸發濃縮,約剩10mL水時出現白色固體，冷卻放置，過濾后固體真空干燥，用水重結晶得白色固體0.76g(產率56%)。IR(KBr):3400br,3170m，3066m，2951m，2868w,1636s,1586w,1489m,1451m，1391w,1356s,764m，743m,711m;'H-NMR(D20/TMS):S1.09-1.24(m，4H)，1.50-1.52(m，2H)，1.94-1.96(m,1H),1.98-2.01(m,1H),2.37-2.39(m,2H)，3.85-4.06(m，4H),4.29-4.30(m，2H)，7.18-7.26(m,2H),7.41-7.46(m,2H);ESI-MSm/z:[M+H]+=561.1(100%),[M+Na]+=583.0(95%)。實施例17.[N-(3-氟芐基)-3-氮雜-l,l-環丁二酸根]US,2S-環己二膨合鉑(II)的制備<formula>formulaseeoriginaldocumentpage15</formula>(17)將二氯.(仏2S-環己二胺)合鉑(n)(1.21g,3.2mmo1)和新制的N-(3-氟芐基)-3-氮雜-1,1-環丁二酸銀(1.49g，3.2mmo1)混合，加水600mL，在40'C下避光攪拌反應30h,過濾得澄清液。然后旋轉蒸發濃縮，約剩10mL水時出現白色微晶，冷卻放置，過濾后得白色微晶0.79g(產率44%)。IR(KBr):3417br，3178m,3058m,2941m,2864w,1636s，1590s，1490m，1448m，1406w，1365s，768m，732m;iH陽NMR(D20/TMS):51.04-1.20(m,4H),1.49(m,2H)，1.87-1.90(m，1H),1.96誦1.99(m,1H)2.34-2.36(m,2H)，3.25-4.06(m，4H)，4.34陽4.35(m,2H)，7.13-7.20(m，3H)，7.41-7.45(m,1H);ESI-MSm/z:[M+H]+=561.2(100%),[M+Na]+=583.1(35%)。實施例18.[N-(4-氟芐基)-3-氮雜-l,卜環丁二酸根](反式-1，2--環己二胺)合鉑(II)的制備<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>(18)將二氯(反式-l，2-環己二胺)合鉑(H)(1.90g，5.0mmo1)和新制的N-(4-氟芐基)-3-氮雜-1,1-環丁二酸銀(1.54g,5.0mmo1)混合，加水600mL，在50'C下避光攪拌反應36h，過濾得澄清液。然后旋轉蒸發濃縮，約剩10mL水時出現白色微晶,冷卻放置，過濾后得白色微晶0.82g(產率30%)。IR(KBr):3423br，3204m,3105m,2939m，2862w,1602s，1510s,1448m，1356s，864w，829w，706w;!H-NMR(D2。/TMS):S1.07-1.20(m，4H)，1.49(m,2H)，1.87-2.08(m，1H)，2.24-2.29(m,1H)2.35-2.37(m，2H),3.82-4.15(m，4H),4.22-4.33(m,2H)，7.11-7.17(m,2H),7.35-7.40(m,2H);ESI-MSm/z:[M+Na〗+=583.1(100%)。實施例19.[N-(4-甲基節基)-3-氮雜-l，l-環丁二酸根](iiUi-環己二胺)合鉑(II)的制備<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>(19)使用N-(4-甲基芐基)-3-氮雜-1,1-環丁二酸銀代替N-(2-氟芐基)_3-氮雜-1,1-環丁二酸銀，按實施例16方法得到白色固體，產率41%。IR(KBr):3423br,3202m,3066m，2940m，2863m，1646s,1591s，1516w，1447m,1407m，1371s,858m，817w，736w;^-麗R(D2。/TMS):51.06-1,19(m，4H)，1.49(m,2H)，1.87-1.90(m，1H),1.96-1.99(m,1H)，2.35-2.37(m,2H)，3.78-3.83(m,4H)，4.25誦4.26(m，2H),7.00-7.31(m,4H);ESI-MSm/z:[M+H]+=557.2(100%)，[M+Na]+=579.0(55%)實施例20.[N-(4-甲氧基芐基)-3-氮雜-1,1-環丁二酸根j環己二胺〗合鉑(II)的制備H2(20)將二氯U及,2及-環己二胺)合鉑(II)(1.52g，4.0mmoD和新制的N-(4-甲氧基芐基)-3-氮雜-1,1-環丁二酸銀(1.98g，4.0mmo1)混合，加水700mL，在40'C下避光攪拌反應24h，過濾得澄清液。然后旋轉蒸發除水，蒸干得白色固體，用水重結晶得到白色固體0.72g(產率31%)。IR(KBr):3365s，3125m，3058m，2940m，2863w，1637s,1609s,1514s，1456w,1409w，1374m,824m,708w;'H-NMR(D20/TMS):S1.08-1.21(m，4H),1.50(m，2H)，1.91-1.94(m，1H)，1.98-2.01(m,1H),2.35-2.37(m，2H),3.78-3.83(m，4H),4.25-4.26(m，2H),7.00陽7.02(m,2H),7.30-7.32(m,2H);ESI-MSm/z:[M+H]+=573.2(100%),[M+Na]+=595.1(35%)。實施例21.[N-(3-氟芐基)-3-氮雜-1,1-環丁二酸根]氨環己胺合鉑(II)的制備(21)將二氯一氨環己胺合鉑(II)U.08g，2.8mmo1)和新制的N-(3-氟芐基)-3-氮雜-1，1-環丁二酸銀(1.32g，2.8mmo1)混合，加水700mL，在50'C下避光攪拌反應24h,過濾得澄清液。然后旋轉蒸發除水，蒸干得淡黃色固體，用水重結晶得到淡黃色固體0.65g(產率41%)。IR(KBr):3424br,3196s,3062m，2932m，2856m,11615,1489m,1449m,1357s,1184m,1055m，790w，768w;iH隱NMR(D20/TMS):S1.08-1.26(m,5H)，1.54墨1.70(m，3H)，2.27(m，2H)，2.61(m，1H)，3,80-4.27(m,4H),4.32-4.52(m,2H)，7.15-7.24(m，3H)，7.28-7.30(m,1H);ESI墨MSm/z:[M+H]+=563.3(100%)。實施例22.典型化合物的晶體結構測定將化合物10和化合物13的飽和水溶液室溫放置數天，得到無色透明單晶體。使用Bruker公司SMART4KCCDX-射線衍射儀在293(2)K下進行結構測定。采用經石墨單色器單色化的MoKaa=0.71073A)射線，掃描方式co-2e。利用SAINT程序收集數據，晶胞和數據還原經SAINT軟件完成，采用直接法解出結構，利用SHELX-97程序包對全部非氫原子坐標用基于FS的全矩陣最小二乘法進行修正，氫原子經理論加氫完成。化合物10的分子結構示于說明書附圖1，晶體和結構修正數據見表la，主要鍵長和鍵角數據列于表lb。化合物13的分子結構示于說明書附圖2，晶體和結構修正數據見表2a，主要鍵長和鍵角數據列于表2b。表la.化合物10的晶體和結構修正數據<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>表lb.化合物10的主要鍵長和鍵角數據<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>表2b.化合物13的主要鍵長和鍵角數據<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>實施例23.典型化合物的體外抗腫瘤活性對--些典型化合物做了體外抗腫瘤活性測定，被篩選的癌細胞包括人體肺癌細胞A549、人體肝癌細胞Bel-7402和人體乳腺癌細胞MCF-7，所用的陽性對照物為順鉑、卡鉑和奧沙利鉑。具體的實驗方法如下實驗方法AnnexinV和PI法檢測早期凋亡1、養至對數生長期的細胞(A546、MCF-7)，接種于24孔板(Costar)，8XIOV孔,用含10%的小牛血清(PAA)和青霉素、鏈霉素(Amresco)的DMEM培養基(GibcoBRL),在37r5%C02細胞培養箱中培養至細胞貼壁；2、用不同濃度的不同鉑化合物處理；3、處理后繼續培養18h,以未處理的細胞作陰性對照；4、將上清轉移入離心管(其中含脫落的凋亡細胞)，與胰酶消化的細胞合并，離心收集細胞，2000rpm(約375g)，離心5min:5、用IOOuLbindingbuffer復懸細胞，加入2.5uLA騰xinV-FITC(晶美)；混勻，并且室溫避光作用IOmin;6、PBS洗細胞1次，4°C，2000rpm(約375g)，5min;7、用100uLbindingbuffer復懸細胞；加入5uL25ug/ml的PI(晶美)應用液(用PBS配制)，避光作用5min，加入400uLPBS;8、用流式細胞儀(美國BD公司FACSCalibur型)進行分析，激發波長為488nm,每個樣本均獲取10000個細胞。一些典型化合物和相應的陽性對照物對不同癌細胞的抑制作用見說明書附圖3、圖4和圖權利要求1、一類具有新型結構的鉑(II)配合物，其特征是以3-氮雜-1，1-環丁二酸根及其衍生物為配體，二價金屬鉑離子與3-氮雜-1，1-環丁二酸根配體中的叔胺氮原子和其中一個羧酸根中的氧原子配位成鍵，其結構用式(1)表示，式(1)其中，R1和R2可以相同或不相同，分別是氫原子、C1-8鏈狀烷基或C3-6環狀烷基，或通過C2-4烷基鏈連接起來構成的鏈狀二胺，或通過C3-6環狀烷基連接起來構成的1，2-位環狀二胺；當R1和R2通過C2-4烷基鏈連接起來構成有立體異構的鏈狀二胺時，這些立體異構體可以是光學異構體的左旋體、右旋體或混旋體；當R1和R2通過C3-6環狀烷基連接起來構成有立體異構的1，2-位環狀二胺時，這些立體異構體可以是幾何異構的順式、反式或順反混合物，也可以是光學異構體的左旋體、右旋體或混旋體；R3可以是氫原子、烷基、環狀烷基、未取代的芳香基或取代的芳香基；當R3為取代的芳香基時，取代基可以在任意位置，可以為單個或多個取代基團。2、根據權利要求1所述鉑(II)配合物的制備方法，其特征在于將式(2)代表的二鹵素離子二胺(氨)配位的鉑(II)配合物，在避光條件下，于水溶液中通過銀離子除去式(2)中的鹵素離子，再與式(3)所示的3-氮雜-l，l-環丁二酸或其衍生物的堿金屬鹽反應，生成式(l)所示結構的配合物；或者在避光條件下，于水溶液中通過式(4)所示的3-氮雜-l，l-環丁二酸或其衍生物的銀鹽除去式(2)中的鹵素離子，反應生成式(1)所示結構的配合物；<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>式(2)式(2)中，Hal代表Cr、Br—或r鹵素離子，R,和R2同權利要求1中式(l)所定義:COOMCOOAg<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>式(3)式(4)式(3)中，M為一價的堿金屬陽離子，如Na+、K+等；R3同權利要求l中式(l)所定義；式(4)中，R3同權利要求1中式(l)所定義。3、根據權利要求1所述的鉑(II)配合物和根據權利要求2所述制備方法獲得的鉑(II)配合物的抗腫瘤活性，其特征在于這一類鉑(II)配合物對人肺癌細胞、肝癌細胞和乳腺癌細胞的有效抑制作用。全文摘要本發明披露了一類3-氮雜-1，1-環丁二酸根及其衍生物為配體的新型鉑(II)配合物及其典型化合物的抗腫瘤活性。文檔編號A61K31/555GK101381380SQ20081015586公開日2009年3月11日申請日期2008年10月17日優先權日2008年10月17日發明者霞劉,茍少華申請人:東南大學