專利名稱：：雪松醇的醫藥新用途的制作方法
技術領域：
：本發明屬于醫藥
技術領域：
，涉及雪松醇(CE)的醫藥新用途，具體涉及其在鎮痛和治療關節炎藥物中的新用途。
背景技術：
：關節炎是一種常見的慢性疾病，是指由炎癥、感染、創傷或其他因素引起的關節炎性病變，屬風濕學科疾病。它的主要特征是關節紅腫、熱、痛和功能障礙。我國目前關節炎患者估計有1億以上，且人數還在不斷增加，最常見的是骨關節炎和類風濕關節炎兩種。另據統計，我國50歲以上人群中半數患骨關節炎；65歲以上人群中90%的女性和80%的男性患骨關節炎。類風濕關節炎在我國的患病率為0.34%~0.36%，據介紹，類風濕關節炎病情嚴重者壽命約縮短10~15年。關節炎根據病因可分為風濕性、類風濕性、外傷性、骨性關節炎及化膿性關節炎等。風濕性關節炎屬變態反應性疾病，是風濕熱的主要表現之一。多以急性發熱及關節疼痛起病，典型表現是輕度或中度發熱，游走性多關節炎，受累關節多為膝、踝、肩、肘、腕等大關節，常見由一個關節轉移至另一個關節，病變局部呈現紅、腫、灼熱、劇痛，部分病人也有幾個關節同時發病，不典型的病人僅有關節疼痛而無其他炎癥表現，急性炎癥一般于2-4周消退，不留后遺癥，但常反復發作。若風濕活動影響心臟，則可發生心肌炎，甚至遺留心臟瓣膜病變。類風濕性關節炎(rheumatoidarthritis)是一種以關節滑膜炎為特征的慢性全身性自身免疫性自身免疫性疾病。滑膜炎持久反復發作，可導致關節內軟骨和骨的破壞，關節功能障礙，甚至殘廢。血管炎病變累及全身各個器官，故本病又稱為類風濕病。類風濕性關節炎又稱類風濕(RA),是一種病因尚未明了的慢性全身性炎癥性疾病，以慢性、對稱性、多滑膜關節炎和關節外病變為主要臨床表現，屬于自身免疫炎性疾病。該病好發于手、腕、足等小關節，反復發作，呈對稱分布。早期有關節紅腫熱痛和功能障礙，晚期關節可出現不同程度的僵硬畸形，并伴有骨和骨骼肌的萎縮，極易致殘。從病理改變的角度來看，類風濕性關節炎是一種主要累及關節滑膜(以后可波及到關節軟骨、骨組織、關節韌帶和肌鍵)，其次為漿膜、心、肺及眼等結締組織的廣泛性炎癥性疾病。類風濕性關節炎的全身性表現除關節病變外，還有發熱、疲乏無力、心包炎、皮下結節、胸膜炎、動脈炎、周圍神經病變等。廣義的類風濕性關節炎除關節部位的炎癥病變外，還包括全身的廣泛性病變。外傷性關節炎多因外傷或持續慢性勞損引起關節軟骨發生退行性變或形成骨刺，表現為患病關節腫、痛及運動障礙，易發生在持重關節、如肩、膝、踝等關節，運動員及青壯年中多見。骨性關節炎是一種最常見的關節病變，骨關節炎的名稱極多，如肥大性骨關節炎、退行性關節炎、變性性關節炎、增生性骨關節炎或骨關節病，均指一種病，國內統一使用骨關節炎。其患病率隨著年齡而增加，女性比男性多發。骨關節炎以手的遠端和近端指間關節，膝、肘和肩關節以及脊柱關節容易受累，而腕、踝關節則較少發病。骨性關節炎由組織變性及積累性勞損引起，多見于肥胖超重的中老年人，最常發病的部位是膝、手指、頸、腰推等處，癥狀主要為關節疼痛、僵硬(經輕微活動后會覺疼痛減輕)，重者可出現關節腫脹、肌肉萎縮等。化膿性關節炎往往由細菌侵入關節腔引起，多見于少年兒童，常發生于髖關節，主要癥狀為局部紅、腫、痛、熱和功能障礙，以及高熱等全身中毒癥狀。無論何種原因引起的關節炎或何種類型的關節炎，均應及早診治，以免導致永久性關節功能障礙甚至致殘。用于治療各類關節炎有多種藥物，西藥有青霉胺、水楊酸制劑、消炎痛、丙酸鹽生物、免疫抑制劑、左旋咪唑等。但西藥的副作用日益被國際所關注和評價，同時患者的疾病治療自我保護意識在不斷增強，使得許多制藥企業加大投資力度和速度研發有效安全的天然藥物。綜上所述，本發明實現了天然植物中提取分離所得化學成分的醫療用途新穎化，滿足了關節炎患者需求量大、巿場前景好的需求。CE是一種倍半萜醇，可從多種天然植物中提取得到。現在的用途是一種天然香料，廣泛用于木香、辛香和東方型香精中，也大量用作消毒劑和衛生用品的增香劑。有時也少量應用與醫藥行業作為一種藥物。有實驗表明，吸入雪松醇對大鼠和小鼠有鎮靜作用；有抗人肺癌細胞NCI-H460作用。其結構式如下所示。CE的結構式
發明內容本發明的目的在于提供CE的新用途，即在制藥中的新應用。本發明涉及CE作為制備治療關節炎藥物中的應用。本發明涉及CE作為制備治療鎮痛藥物中的應用。本發明涉及CE用于制備關節炎和鎮痛藥物時以常規藥用制劑的形式來使用；所述的常規藥用制劑含在制劑中與藥學上可以接受的載體如適宜于胃腸內和胃腸外給藥的有機或無機的固體或液體賦形劑混合，該藥用制劑科技是固體形式如片劑、膠囊劑、散劑、丸劑、顆粒劑，也可以是液體形式如注射劑、乳劑等。上述制劑中可含有輔助物質、穩定劑、濕潤劑和其他常用的添加劑，如乳糖、檸檬酸、酒石酸、硬脂酸鎂、石膏粉、蔗糖、玉米淀粉、滑石粉、明膠、瓊脂、果膠、花生油、橄欖油、可可脂、抗壞血酸、甘露醇等。本發明還涉及以CE作為活性成分的藥物組合在抗炎和鎮痛藥物中的應用。該藥物組合可根據本領域公知的方法制備。可通過經本發明化合物與一種或多種藥學上可接受的固體或液體賦形劑和/或輔劑結合，制成適用于人或動物使用的任何劑型。本發明化合物在其藥物組合中的含量(重量)通常為0.195%。本發明所述的CE為ot-CE和(3-CE及它們任何比例的混合體(外消旋體)。解決本技術問題釆用的技術方案是，從天然植物中制備分離出CE,再精制使其純度達到95%以上，用于鎮痛和抗炎作用，可用于制備治療關節炎和鎮痛類藥物。上述的制劑可按照各種制劑常規的制備工藝制成。本發明的CE具有較好的鎮痛和抗炎作用，總有效劑量為l-100mg/kg/d。具體實施例方式以下經通過實施例進一步描述本發明，但這些實施例僅是說明本發明，而不應理解為對本發明范圍的任何限制。實施例l:對角叉菜膠致大鼠足跖浮腫炎癥的影響方法SD大鼠60只，體重？140176g,dl50180g,6^各半，分6組，每組10只。模型組用P/。TW-80灌胃給藥，受試藥物a-CE分別設100mg/kg、50mg/kg、25mg/kg和10mg/kg4個劑量組，每天灌胃給藥(ig)—次，共計給藥4d。陽性對照藥為阿司匹林0.5g/kg只在試驗前灌胃給藥(ig)—次。d4iglh后，大鼠右后足掌sc0.5。/。角叉菜膠0.1ml。在sc后lh、2h、4h、6h用毛細管法測量足爪體積變化。結果用微機SigmaStat軟件統計處理，比較阿司匹林與模型組(l%TW-80)之間的顯著性差異。結果a-CE25mg/kg、50mg/kg、100mg/kg和阿司匹林0.5g/kg對角叉菜膠致炎后大鼠足跖腫脹有顯著的抑制作用，見表l,表明a-CE有很強的抗急性炎癥作用。表1.a-CE對角叉菜膠引起的大鼠足爪腫脹的抑制作用(^tSD，統計方法Mann-WhitneyRankSumTest:與對照組比較'P<0.05,"P<0.01,*"P<0.001)<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>100100.043±0.030.096±0.060.113±0.060.091±0.07實施例2:對大鼠佐劑性關節炎的影響方法取SD大鼠60只，按體重平均分成5組(1)l°/。TW-80(溶媒)；(2)陽性對照藥地塞米松磷酸鹽注射液2.5mg/kg;(3)a-CE25mg/kg;(4)a-CE50mg/kg;(5)a-CE100mg/kg。均釆用灌胃給藥(ig)方式。以Freund，s完全佐劑O.lml(含卡介苗0.5mg)注射于右后足掌內。注射佐劑前30min灌胃給藥一次。于注射佐劑后18h測定一次右后足跖腫脹情況，觀察CE對早期急性炎癥的預防作用，然后停藥；一周后開始灌胃給藥，每曰l次，連續7天，于d15測定一次左后足跖腫脹情況，觀察CE對繼發病變的預防作用，然后停藥；從dl9開始進行治療性給藥，每日l次，直到d28實驗結東，重點觀察CE對繼發病變的治療作用，從d21到d28，每日測定一次左后足跖腫脹情況，從d22到d28,每曰按《中藥新藥研究指南》有關佐劑性關節炎繼發性病變評分法，觀察足爪腫脹度、前肢和尾部病變的發生率、結節數或嚴重度，按5級評分法0:無紅腫；1:小趾關節稍腫；2:趾關節和足跖腫脹；3:踝關節以下足腫脹；4:包括踝關節在內的全部足爪腫脹。實驗結束后處死大鼠，解剖取出免疫器官胸腺和脾臟稱重，計算臟器系數；并且將大鼠的左右后足齊膝關節切斷，稱重。結果oc-CE100mg/kg和地塞米松2.5mg/kg組治療后d3就起效，從d21到d28每日測定1次左后足跖腫脹結果和從d22到d28繼發性病變評分結果分析，與對照組比較均有顯著性差異(P<0.050.001),a-CE50mg/kg組在多數天數中也有明顯差異(P<0.05~0.01),見表2和表3。在d28實驗結束后處死大鼠，將大鼠的左右后足齊膝關節切斷稱重，結果與d28測定的足跖腫脹情況相吻合，見表4。a-CE25mg/kg組和地塞米松磷酸鹽2.5mg/kg組于注射佐劑前30min灌胃給藥能明顯抑制佐劑注射后引起足跖早期急性炎癥性腫脹(PO.05);a陽CE100mg/kg、50mg/kg和地塞米松2.5mg/kg組連續7天給藥明顯預防佐劑注射后引起足跖繼發性腫脹反應，詳見表5。取胸腺和脾臟稱重，結果顯示a-CE對免疫器官呈劑量依賴抑制作用。表明(x-CE的抗炎作用與免疫抑制作用相關，見表6。表2、a-CE對大鼠佐劑性關節炎的治療作用<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>50120.920.930.900.890.930.930.930.95±0.07'±0.08±0.11'±0.09"±0.08'±0.07"±0.07"±0.0610080.890.900.890.900.930.910.910.91±0.05"±0.07'±0.06"±0.07"±0.07'±0.05*'±0.06"±0.07'一表3、a-CE對大鼠佐劑性關節炎繼發性病變評分的影響(hSD,統計方法Mann-WhitneyRankSumTest;與對照組比較*P<0.05,**P<0.01，"*P<0.001)~""iiii大鼠佐劑性關節炎繼發性病變評分mg/kgd22d23d24c!25d26d27d28造型對照組121.751.751.751.832.082.001.92±0.45±0.45±0.45±0.72±0.52±0.60±0.52地塞米松2.5100.300.500.300.500.300.300.33±0.48"'±0.07*"±0.483***±0.53*"±0.48"沖±0.48"*"沖±0.50a-CE2521,281.351.601.681.551.331.33±0.67±0.65±0.65±0.52±0.46'±0.58'±0.49*50121.081.331.501.581.251.171.33±0.67'±0.65±0.52±0.52±0.62**±0.72*±0.49*10080.880.880.750.880.750.881.13±0.35*'±0.35"±0.46"±0.64"±0.46*"'±0.35"±0.35"表4、a-CE治療第10天(注射佐劑后第28天)兩后足的重量比較(X±SD，統計方法T-test或Mann-WhitneyRankSumTest;與對照組比較*P<0.05，**P<0.01)組別劑』tCmg/kg)ii左足重量(g)右足重量(g)造型對照組121.73±0.242.20±0.29地塞米松2.591,52±0.11*1.82±0.19**a-CE25121.68±0,152.10±0.2050121.72±0.192.15±0.26廳81.52±0.19*1.88±0.19*表5、a-CE對大鼠佐劑性關節炎早期炎癥和繼發病變的預防作用(5btSD，統計方法Mann-WhitneyRankSumTest:與對照組比較*P<0.05)早期炎癥的預防觀察繼發病變的預防作用劑量右后足跖腫脹值(ml)左后足跖腫脹值(ml)組別mg/kgn注射佐劑前注射后18hn注射佐劑前注射Cdl5造型對照組120.840.08i.oi土o.n12O.75±0.110.99±0.07地塞米松12O.83±0.100.83±0.07*110.72±0.070.90±0.06*a-CE2512O.88±0,100.96±0.09120.74±0,080.93±0.0850120.90±0.100.96±0.09120.72±0.100.92±0.09100120.87±0.050.90±0.04*80.70±0.080.91±0.07*表6、a-CE治療第10天(注射佐劑后第28天)對大鼠胸腺和脾臟系數的影響(^±SD，統計方法:Mann-WhitneyRankSumTest;與對照組比較P<0.05,**P<0.01，***P<0.001)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>實施例3:對光熱刺激引起的大鼠甩尾(光熱鎮痛模型)的影響方法l)劑量選擇與分組以1。/。TW-80為陰性對照，吲哚美辛10mg/kg為陽性對照。a-CE和p-CE混合體設12.5mg/kg，25mg/kg,50mg/kg三個劑量組。每組10只大鼠，？c^各半，分籠飼養。2)給藥灌胃給藥(ig)l次，灌胃容積為lml/100g。3)觀察ig后lh,光熱刺激大鼠尾部，記錄大鼠出現甩尾的時間。結果用微機SigmaStat軟件統計處理，比較吲哚美辛、CE與1。/。TW-80組的顯著性差異。結果CE12.5mg/kg，25mg/kg，50mg/kg和吲哚美辛10mg/kg對大鼠光熱刺激尾部有顯著的鎮痛作用，大鼠出現甩尾的時間分別推遲107.8%(p<0.05)、239.2%(p<0.01)、243.1%(p<0,01)和274.5(p<0.001),見表8。表7.a-CE和p-CE混合體對光熱剌激大鼠尾部引起甩尾反應的影響(;土SD，統計方法t-test，與r/oTW-80組比較六P《0.05,**P<0.01,***P<0.001)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>以上試驗結果說明本發明中的有效成分a-CE和(3-CE混合體具有抗炎和鎮痛作用，可于關節炎和鎮痛藥物中應用。權利要求1.雪松醇在制備治療關節炎藥物中的用途。2.雪松醇在制備鎮痛藥物中的用途。3.根據權利要求1或2所述的用途，其特征在于所述的雪松醇為a-雪松醇、(3-CE或它們任何比例的外消旋體，其總有效劑量為l-100mg/kg/d。4.根據權利要求1或2所述的用途，其特征在于所述的雪松醇是從側柏、卷柏、龍柏、雪松、伸筋草、蔓荊子、定心藤、黑骨藤、姜、毛喉鞘蕊花、揚子毛茛、木棉花、紅心大白菊、土茯苓中制備得到的。5.根據權利要求1所述的用途，其特征在于所述的關節炎包括風濕性、類風濕性、外傷性、骨性關節炎及化膿性關節炎。6.根據權利要求1或2所述的用途，其特征在于所述的雪松醇可以和藥學上可接受的一種或多種載體或賦形劑結合制成雪松醇藥物組合物，其在組合物中的含量為0.1~95%。7.根據權利要求1或2所述的用途，其特征在于所述的雪松醇可以制備成片劑、膠囊劑、散劑、丸劑、顆粒劑、注射劑、乳劑、膏藥、搽劑、酊劑、油劑、熨劑、涂膜劑、膜劑、凝膠劑、巴布劑及穴位貼敷劑。全文摘要本發明涉及雪松醇(CE)的醫藥新用途，具體涉及其在制備鎮痛和治療關節炎藥物中的新用途。所述的雪松醇為α-雪松醇、β-CE或它們任何比例的外消旋體，其總有效劑量為1-100mg/kg/d。CE從來源廣泛的天然植物中提取。本發明采用大鼠足跖角叉菜致炎法和佐劑性關節炎觀察CE的抗炎作用，結果可見CE對角叉菜膠引起的非特異性炎癥反應具有明顯抑制作用，同時也對佐劑性關節炎有顯著的治療和預防作用。本發明采用甩尾法觀察CE的鎮痛作用，結果可見CE對大鼠光熱刺激尾部有顯著的鎮痛作用。本發明提供了一種療效確切、安全方便、來源廣泛的抗炎和鎮痛藥物的原料，其可以和藥學上可接受的一種或多種載體結合制成雪松醇藥物組合物或制劑。文檔編號A61P29/00GK101518521SQ20091001090公開日2009年9月2日申請日期2009年3月27日優先權日2009年3月27日發明者健關,孫寶山,趙余慶申請人:遼寧新中現代醫藥有限公司