一種用于治療肝纖維化的中藥組合物及制備方法

專利名稱：一種用于治療肝纖維化的中藥組合物及制備方法
技術領域：
本發明涉及中藥組合物，特別是用于治療肝纖維化的中藥組合物。
背景技術：
在我國的許多慢性疾病中，由于病毒性、酗酒、藥物等原因導致的肝炎非常普遍， 從病毒感染和酗酒導致的慢性肝損傷經常會引起肝纖維化和肝硬化。考慮到肝組織的生理 特征和重要意義，以及治療和預防肝疾病的重要性，急需開發出治療和預防肝纖維化的藥 物。肝纖維化為前病理狀態，其中在諸如肝炎的慢性肝病中的損傷的肝組織不能修復 成正常組織，但是作為體內適應性反應的一部分其能轉化成纖維組織如膠原。血清透明質 酸(HA)、層粘蛋白(LN)、III型前膠原肽(plllnp)、I型膠原水平、肝組織中羥脯氨酸含量 等是肝纖維化的指標成分，這些成分多寡反映纖維化的輕重；在纖維化過程中，結締組織生 長因子(CTGF)、金屬基質蛋白酶組織抑制物-I(TIMP-I)等是肝纖維化的重要介質，CTGF升 高使纖維化程度加重，TIMP-I降低，可使形成的纖維降解，如能及時調節或阻斷之，則肝纖 維化可以逆轉；谷丙轉氨酶(GPT)活性反映肝損傷的程度。多種中藥包括單味藥在體內和體外表現出肝保護功能，比如紅花、三七、赤芍、 桃仁、丹參等。趕黃草、冬蟲夏草即為其中之一，趕黃草為虎耳草科扯根菜屬植物扯根菜 (Penthorumchinense Pursh)的干燥地上部分，為苗族民間的草藥，主要分布于四川、貴州、 湖南等地。趕黃草具有清熱利濕、活血散瘀、平肝健脾之功效，廣泛用于治療各型肝炎、膽囊 炎、脂肪肝等疾病。冬蟲夏草具有補虛損、益精氣，在動物實驗中顯示具有肝保護和治療肝 纖維化作用。但到目前為止，還沒有任何一個單味藥作為預防和治療肝纖維化的藥物上市，雖 然市場上有一些預防和治療肝纖維化的藥物中成藥，但大都是至少包含6味以上藥材的大 處方，比如復方鱉甲軟肝片含有11味藥材。大處方有諸多的弊端，比如藥味過多致所含化 學成分復雜，含量控制與藥效關聯度差，浪費資源等。在現有技術中，趕黃草與冬蟲夏草沒有合用的文獻報道，更沒有趕黃草提取物與 冬蟲夏草合用可以預防治療肝纖維化的報道。本發明是基于發現了趕黃草提取物和冬蟲夏 草合用具有協同效果而完成。

發明內容
本發明的目的在于提供一種用于治療肝纖維化的中藥組合物。本發明公開了 一種藥物組合物，含有趕黃草提取物、冬蟲夏草。中醫本無肝纖維化一病，根據其臨床表現，多歸屬于“脅痛” “積聚” “瘀血” “痞證” 范疇。中醫認為肝纖維化病因多因濕邪、疫毒等外邪侵襲，損傷肝臟，著而不去，其基本病機 為“血瘀阻絡、濕熱內蘊、肝腎不足”，因此補肝益腎，除濕化瘀即為肝纖維化的治療原則。 趕黃草清熱除濕化瘀，冬蟲夏草扶正益腎，二者合用體現了中醫治病必求于本的精神。
在本發明中，趕黃草采用其莖、葉的乙醇提取物。趕黃草提取物是將趕黃草莖切 段，與其葉，按質量體積比，加6-10倍濃度為20-95%的乙醇，提取2-3次，每次0. 5-2小時， 提取液濃縮，噴霧干燥所得。 在本發明中，應將冬蟲夏草干燥后經粉碎成粉末狀后使用；出于環保、降低成本及 工業化的角度出發，更適宜于選擇發酵冬蟲草夏菌絲體來代替天然冬蟲夏草，發酵冬蟲草 夏菌絲體為中國冬蟲夏草菌(拉丁學名為Cordyc印S sinensis (Berkeley) Sacc)的無性 型-中國被毛孢(拉丁學名為Hirsutella sinensis)采用工業化發酵生產的冬蟲夏草菌 絲體，比如杭州中美華東制藥有限公司生產的發酵冬蟲夏草菌絲體，為了方便于后續工藝， 可將菌絲體干燥后粉碎成粉末狀(以下簡稱蟲草粉)。為了提高藥效，可優選粉末粒徑分布在75 μ以下，平均粒徑15μ以下的發酵冬蟲 夏草菌絲體微粉(以下簡稱蟲草微粉)，微粉加工工藝可以通過常規微粉工藝微粉化而得 到，比如采用機械沖擊式超微粉碎機、氣流超碎機。本發明公開的藥物組合物中，所述的趕黃草提取物和冬蟲夏草的質量比為 1.2-1.7 1，以1.25 1為優。若采用發酵冬蟲夏草菌絲體代替冬蟲夏草，趕黃草提取物 與其的質量比為1.2-1.7 1，以1.25 1為優。本發明所公開的藥物組合物，還可以根據辯證施治增加其他中藥，如枸杞、丹參、 三七等，以添加枸杞和/或丹參為佳。本發明還公開了藥物組合物的制備方法，包括趕黃草提取物的制備趕黃草莖切 段，與其葉，按質量體積比，加6-10倍濃度為20-95%的乙醇，提取2-3次，每次0. 5-2小時， 提取液濃縮，噴霧干燥所得；若還含有其他中藥材，可與趕黃草的莖、葉一起進行提取后使 用；冬蟲草夏或發酵冬蟲草夏菌絲體可通過常規的生產設備和生產工藝粉碎成粉狀，兩者
混合ο本發明所公開的藥物組合物，與可藥用載體或賦形劑，制成片劑、膠囊劑或顆粒 劑。可以選擇常規輔料，以常規制劑方法制備成片劑、膠囊劑或顆粒劑。本發明還公開了這種藥物組合物在制備預防及治療肝纖維化藥物中的應用。經動物實驗證明，將趕黃草提取物與冬蟲夏草或其替代品發酵冬蟲夏草菌絲體配 伍用于二甲基亞硝胺(DMN)導致的肝纖維化動物，可顯著降低血中GPT、透明質酸、I型膠 原、層粘蛋白水平，降低肝臟羥脯氨酸含量。而且二者有協同作用。同樣，將趕黃草提取物 與冬蟲夏草或其替代品發酵冬蟲夏草菌絲體配伍用于酒精導致的肝纖維化動物，也可顯著 降低血中CTGF、TIMP-1、LN水平，降低肝臟羥脯氨酸含量，而且二者有協同作用。本發明基 于上述發現得以完成。為了證明將趕黃草提取物與冬蟲夏草或其替代品發酵冬蟲夏草菌絲體配伍合用 治療肝纖維化具有顯著的協用效果，本發明在兩種動物模型上進行藥效學研究，其中模型 一是利用二甲基亞硝胺(DMN)損傷肝臟形成纖維化，此模型病理特點相當于中醫主要證候 病機為濕熱、瘀熱內蘊，并兼氣虛型。模型二是利用酒精導致的肝纖維化。中醫認為酒毒傷 人，損傷人體正氣，形成濕熱內蘊，是導致臟腑虧虛之始因。故趕黃草提取物和發酵蟲草菌 絲體補虛損，清濕熱切合兩種動物模型病機，可較好反映藥物療效。本發明提供的中藥組合物，處方簡單，經藥效試驗，兩者配伍的協同效果確切，對 肝纖維化有很好的治療作用。
具體實施例方式下面的實施例用于進一步說明本發明，但不意味著對本發明的任何限制。實施例1膠囊劑制備1取60目以下杭州中美華東制藥有限公司生產的發酵冬蟲夏草菌絲體粉，用 QLM-150KA型流化床對撞式氣流粉碎機，調頻范圍為50HZ，頻率設為32HZ，將蟲草粉粉碎成 粒徑分布在75 μ以下，平均粒徑15 μ以下的微粉。將趕黃草的莖(切段)與葉，共lOOOg，加6000ml，濃度為80%的乙醇提取2次，每 次1小時，提取液濃縮，噴霧干燥。取按以上制得的蟲草微粉200克，趕黃草提取物250克，加入庶糖酯47克、硬酯酸 鎂3克混合、填充入硬膠囊、制成1000粒(0. 5g/粒)，即得。實施例2膠囊劑制備2以趕黃草和冬蟲夏草或發酵冬蟲夏草菌絲體為基本處方，在此基礎上可按中醫辨 證擴展組方，如對于血瘀癥明顯者，可加用丹參。趕黃草莖(切段)與葉共750g，丹參450g，加7500毫升，濃度為95%的乙醇提取 1次，每次1小時，提取液濃縮，噴霧干燥。取60目以下杭州中美華東制藥有限公司生產的發酵冬蟲夏草菌粉85克；趕黃草 丹參的提取物140克，混勻，加入25克微粉硅膠，填充入硬膠囊，制成1000粒(0. 25g/粒)， 即得。實施例3顆粒劑制備將趕黃草莖(切段)與其葉共1200g，加1200ml濃度為20%的乙醇提取3次，每 次2小時，提取液濃縮，噴霧干燥。天然冬蟲夏草，干燥后，打粉過60目篩。取趕黃草提取物IOOOg和天然冬蟲夏草粉800g，加入甜菊糖3g，膠體微晶纖維素 60g，玉米淀粉1137g混合均勻、制粒、干燥、分裝，制成1000袋，3g/袋，即得。實施例4片劑制備取60目以下杭州中美華東制藥有限公司生產的發酵冬蟲夏草菌絲體，用TC-30型 流化超音速氣流粉碎分級機，將蟲草粉粉碎成粒徑分布在75 μ以下，平均粒徑10 μ以下的 微粉。將趕黃草莖(切段)與其葉共1000g，W 8000ml，濃度為90%的乙醇提取2次，每 次0. 5小時，提取液濃縮，噴霧干燥。取趕黃草提取物270g和蟲草微粉180g，加入崩解劑交聯羧甲基纖維素25g、微晶 纖維素25g，混合均勻、制粒、壓片，制成1000片(0. 5g/片)，即得。協同作用的實施例以下的實施例5，實施例6是兩個有關與趕黃草提取物和發酵 冬蟲夏草菌絲體協同作用的動物試驗。
本發明采用CH0U-TALALAY聯合指數法(combination index，Cl)對藥物聯合應用 的效果進行判定，根據公式計算聯合用藥指數(Cl)，判定聯合用藥的交互作用,k ζ :CI = Dl combined/Dl alone+D2 combined/D2 alone+ (D1 combined)*(D2combined)/Dl alone氺D2 alone。公式中Dl combined是聯合用藥中藥物1的劑量；Dl alone是單一用藥中療效與 聯合用藥相當的藥物1的劑量；D2 combined是聯合用藥中藥物2的劑量；D2 alone是單一 用藥中療效與聯合用藥相當的藥物2的劑量。當CI < 1提示兩藥有協同作用，值越小協同作用越強；CI = 1提示兩藥有相加作 用；CI > 1則說明兩藥有拈抗作用，值越大拈抗作用越強。實施例5趕黃草提取物和蟲草微粉組合物對DMN導致的肝纖維化大鼠的治療作用。樣品取按實施例1所制備的趕黃草提取物和蟲草微粉，用蒸餾水為溶媒配制，各 組動物灌胃給予。空白對照組和模型組用蒸餾水給予。實驗動物浙江省醫學科學院實驗動物中心提供。實驗方法體重160-170g的大鼠，按0. 2mL/100g的劑量腹腔內注射0. 5% DMN，第 1、2、3周每天1次，連續3天，第4周隔日1次，連續3次。對照動物同法注射生理鹽水。于 第28天造模結束后，將大鼠隨機分組，設為對照組，模型組，模型+趕黃草組(給藥400mg/ kg趕黃草提取物)，模型+蟲草組(給藥蟲草微粉400mg/kg)，模型+趕黃草、蟲草組合組 (給藥趕黃草提取物、蟲草微粉各100mg/kg)；以上各組用藥均1次/d，口服連續用藥30d 后結束，以2%戊巴比妥鈉按2ml/kg體重腹腔注射麻醉，后腔靜脈采血，采用ELISA試劑盒 測試血清HA，LN, I型前膠原肽，血清GPT和肝組織羥脯氨酸含量測定采用南京建成生物工 程研究所試劑盒測定。結果見表1。表1不同藥物組合對DMN處理大鼠肝纖維化相關因子的影響
權利要求
一種藥物組合物，含有趕黃草提取物，冬蟲草夏，其中所述的趕黃草提取物為趕黃草莖切段，與其葉,按質量體積比，加6 10倍濃度為20 95%的乙醇，提取2 3次，每次0.5 2小時，提取液濃縮，噴霧干燥所得。
2.根據權利要求1所述的藥物組合物，其特征是所述的冬蟲草夏為發酵冬蟲草夏菌絲體。
3.根據權利要求2所述的藥物組合物，其特征是所述的發酵冬蟲草夏菌絲體為粉末狀。
4.根據權利要求3所述的藥物組合物，其特征是所述的發酵冬蟲草夏菌絲體粉，是粒 徑分布在75微米以下，平均粒徑15微米以下的微粉。
5.根據權利要求1-4任一權利要求所述的藥物組合物，所述的藥物組合物，其特征是 所述的趕黃草提取物與冬蟲草夏或發酵冬蟲草夏菌絲體的質量比為1. 2-1. 7 :1。
6.根據權利要求5所述的藥物組合物，其特征是所述的趕黃草提取物與冬蟲草夏或發 酵冬蟲草夏菌絲體的質量比為1. 25 :1。
7.根據權利要求1-4任一權利要求所述的藥物組合物，還含有枸杞或/和丹參。
8.制備如權利要求1-4任一權利要求所述的藥物組合物的方法，制備趕黃草提取物 趕黃草莖切段，與其葉，按質量體積比，加6-10倍濃度為20-95%的乙醇，提取2-3次，每次 0. 5-2小時，提取液濃縮，噴霧干燥所得；常規設備、工藝粉碎冬蟲草夏或發酵冬蟲草夏菌 絲體。
9.根據權利要求1-4任一權利要求所述的藥物組合物，與可藥用載體或賦形劑制成片 劑、膠囊劑或顆粒劑。
10.根據權利要求1-4任一權利要求所述的藥物組合物在制備預防及治療肝纖維化藥 物中的應用。
全文摘要
本發明公開了一種治療肝纖維化的中藥組合物及制備方法。本發明公開的中藥組合物是以趕黃草乙醇提取物、冬蟲夏草或發酵冬蟲夏草菌絲體為活性成份，添加藥用輔料可以制成各種口服制劑。經藥效學實驗證明，兩味藥材合用，對肝纖維化的治療有明顯的協同效果，可用于肝纖維化的預防與治療。
文檔編號A61K36/185GK101953861SQ20101051884
公開日2011年1月26日 申請日期2010年10月26日 優先權日2010年10月26日
發明者傅旭春, 扈榮, 楊建科, 潘福生, 白海波 申請人:杭州華東醫藥集團生物工程研究所有限公司;浙江大學城市學院