專利名稱：用于分離原代脂肪干細胞的儲脂桶及其使用方法
技術領域：
本發明涉及一種儲脂桶及其使用方法，特別是涉及一種用于從脂肪組織分離原代脂肪干細胞的儲脂桶及其使用方法，本發明還涉及一種包括儲脂桶的吸脂機。
背景技術：
在整形外科醫學領域，吸脂術的出現為廣大患者和愛美人士帶來了健康和美麗。負壓吸脂機是該項手術的必備設備，術中脂肪被吸入到該設備的儲脂桶中，這些被吸出的脂肪中含有大量的原代脂肪干細胞，是研究原代脂肪干細胞的絕好細胞來源。目前常規的儲脂桶僅是一個普通的桶狀物，提取原代脂肪干細胞要經過多個洗滌、消化和分離步驟，轉移數個容器后才能實現，這導致原代脂肪干細胞的提取費時費力，而且可能存在潛在的污染。
發明內容
本發明正是基于上面的考慮而做出。根據本發明的一方面，用于從脂肪組織分離出原代脂肪干細胞的儲脂桶包括用于接收并容納脂肪組織的本體，該本體具有頂部、側壁和底部，其中，頂部具有頂部開口，脂肪組織和用于分離原代脂肪干細胞的試劑從該頂部開口注入到本體中，并且，底部具有至少一個底部開口，該至少一個底部開口是可閉合的，用于排出本體內的容納物。根據本發明的另一方面，提出一種包括上述儲脂桶的吸脂機。根據本發明的又 一方面，提出一種上述儲脂桶的使用方法，包括如下步驟:將脂肪組織通過儲脂桶的頂部開口收集到儲脂桶的本體中；通過儲脂桶的頂部開口向儲脂桶的本體中加入與脂肪組織等體積的磷酸鹽緩沖液，充分蕩洗，之后靜置；打開儲脂桶的至少一個底部開口，放出下層的磷酸鹽緩沖液；重復上述步驟，直到磷酸鹽緩沖液無明顯變色為止；通過儲脂桶的頂部開口向儲脂桶的本體中加入與脂肪組織等體積的I型膠原酶消化液，將儲脂桶置于恒溫搖床，進行消化，之后靜置；打開儲脂桶的至少一個底部開口，放出下層含細胞的I型膠原酶消化液至離心管中，然后離心分離人脂肪干細胞。根據本發明，利用脂肪組織密度小，總是浮在水溶液上層的特點，在儲脂桶的底部設置至少一個底部開口，就可以實現只使用一個容器，便捷地完成洗滌、消化和提取原代脂肪干細胞的操作。由于無需二次更換容器，這樣既方便了操作，又避免了更換容器可能造成的污染，提高了科學研究的準確性，同時還節省了科研成本，減少了醫療垃圾的產生，利于環保。
圖1是本發明的儲脂桶的第一實施例的示意圖。圖2是本發明的儲脂桶的第二實施例的示意圖。圖3是本發明的儲脂桶的第三實施例的示意圖。
圖4是本發明的儲脂桶的第四實施例的示意圖。
具體實施例方式下面參照附圖詳細描述本發明的用于從脂肪組織分離原代脂肪干細胞的儲脂桶。圖1是本發明的儲脂桶的第一實施例的示意圖。根據該實施例的儲脂桶10包括本體11，本體11用于接收并容納脂肪組織，例如在吸脂術中用負壓吸脂機吸出的脂肪組織。本體11可以是任何形狀，例如圓筒形、方形等。該本體11具有頂部、側壁和底部。本體11的頂部可以是開放的，也可以具有蓋12，用于覆蓋本體11的空腔，蓋12上設置有開口 13，脂肪組織和用于分離原代脂肪干細胞的試劑通過開放的頂部或蓋12上的開口 13注入到本體中。在該實施例中，本體11的側壁基本上平行于本體的縱向軸線，即，本體11具有恒定的橫向尺寸。本體11的底表面上設置有用于排出本體內的容納物的可閉合的底部開口 14。雖然該實施例示出了一個底部開口 14，但是也可以根據具體情況在適當的位置設置多個底部開口 14，以便順利且有效地排出位于本體11底部的容納物。圖2是本發明的儲脂桶的第二實施例的示意圖。根據該實施例的儲脂桶20包括本體21，與第一實施例的儲脂桶10不同的是，至少一個可閉合的底部開口 24設置在本體21的側壁與底表面接合的位置。圖3是本發明的儲脂桶的第三實施例的示意圖。根據該實施例的儲脂桶30包括本體31與第一實施例的儲脂桶10不同的是本體31的橫向尺寸(寬度)從頂部到底部逐漸減小。根據該實施例，儲脂桶30中的容納物能夠通過底部開口可控地、精確地排出。圖4是本發明的儲脂桶的第四實施例的示意圖。根據該實施例的儲脂桶40包括本體41，與第一實施例的儲脂桶10不同的是，本體41的橫向尺寸在頂部附近是恒定的，而在底部附近逐漸減小。根據該實施例，能夠在本體不占用過大空間的情況下，使儲脂桶40中的容納物通過底部 開口可控地、精確地排出。在上述各實施例中，可閉合的底部開口可通過各種方式實現，例如，操作旋轉開關或撥動開關使一擋片遮蔽/打開底部開口，又例如，將一閥門裝置連接于底部開口，通過閥門的操作實現底部開口的打開/閉合。在儲脂桶的底部設置有向下突出的開關或閥門的情況下，可以有選擇地用托架將儲脂桶支起或者使本體的側壁和底部圍成一凹部以容置所述開關或閥門。在上述各實施例中，本體可以由樹脂或金屬制成，可選擇的蓋也可以由樹脂或金屬制成。優選地，本體由透明/半透明的樹脂制成；優選地，在本體的側壁上設置有刻度布置。在本體由金屬制成時，可以在本體的側壁上設置觀察窗口和刻度布置。下面描述使用上述的儲脂桶分離出脂肪干細胞的方法。首先，將脂肪組織通過儲脂桶的頂部開口收集到儲脂桶的本體中。然后，通過儲脂桶的頂部開口向儲脂桶的本體中加入與脂肪組織等體積的磷酸鹽緩沖液(PBS)，并充分蕩洗。之后，靜置I分鐘，這時桶中溶液將分為兩層，下層為磷酸鹽緩沖液，上層為黃色脂肪組織，由于脂肪組織中含有紅細胞，磷酸鹽緩沖液洗滌后顏色變為淡紅色。然后，打開儲脂桶的底部開口，放出下層的磷酸鹽緩沖液。重復以上步驟，例如3-5次，直到磷酸鹽緩沖液無明顯變色為止。然后，通過儲脂桶的頂部開口向儲脂桶的本體中加入與脂肪組織等體積的I型膠原酶消化液，將儲脂桶置于37°C恒溫搖床，消化一段時間，例如30分鐘。之后，靜置I分鐘，這時桶中溶液將分為兩層，下層為I型膠原酶消化液，消化出的人脂肪干細胞即沉淀于其中，上層為黃色脂肪組織，可以看到部分脂肪組織被消化，脂肪層體積減小。隨后，打開儲脂桶的底部開口，放出下層含細胞的I型膠原酶消化液至離心管中，然后離心分離人脂肪干細胞。此后，再通過儲脂桶的頂部開口向儲脂桶中加入與脂肪組織等體積的I型膠原酶消化液，并重復以上消化步驟3-5次，直到脂肪組織消化殆盡。最后，收集離心得到的人脂肪干細胞，置于培養皿中培養、擴增，常規方法純化、鑒定后用于后續實驗等。磷酸鹽緩沖液(PBS)是由適量氯化鈉、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、氯化鉀配置成的平衡緩沖液，PH值為7.4，具體配方為NaCl:8克，KCl:0.20克，Na2HPO4:3.49克，KH2PO4:
0.20克，加入蒸餾水中，定容為I升，0.22微米濾膜過濾除菌。市售I型膠原酶(粉狀)以質量分數0.1%溶解于磷酸鹽緩沖液中，0.22微米濾膜過濾除菌，即成為I型膠原酶消化液，用于消化脂肪組織。常規酶消化法分離人脂肪干細胞的步驟復雜，每一次沖洗、消化脂肪組織后都要更換一次容器，既增加了操作步驟和污染的風險，還造成了不必要的浪費。采用本發明的儲脂桶可以極大地簡化分離原代人脂肪干細胞的步驟，并且節約實驗容器的用量，減少了實驗廢棄物的產生，有利于環保。雖然已經結合具體實施例詳細地描述了本發明，但是顯然地，在不偏離本發明的精神和范圍的條件下，本領 域技術人員可以做各種改變和變型。
權利要求
1.一種儲脂桶，用于從脂肪組織分離出原代脂肪干細胞，包括用于接收并容納脂肪組織的本體，該本體具有頂部、側壁和底部，其中，頂部具有頂部開口，脂肪組織和用于分離原代脂肪干細胞的試劑從該頂部開口注入到本體中，并且，底部具有至少一個底部開口，該至少一個底部開口是可閉合的，用于排出本體內的容納物。
2.根據權利要求1的儲脂桶，其中，儲脂桶還包括蓋，所述頂部開口設置在蓋上。
3.根據權利要求1的儲脂桶，其中，所述至少一個底部開口設置在本體的底表面上或者設置在本體的側壁與底表面接合的位置。
4.根據權利要求1-3中任一項的儲脂桶，其中，本體的側壁具有恒定的橫向尺寸或者具有從頂部到底部逐漸減小的橫向尺寸。
5.根據權利要求1-3中任一項的儲脂桶，其中，本體的側壁在頂部附近具有恒定的橫向尺寸，而在底部附近具有逐漸減小的橫向尺寸。
6.根據權利要求1-3中任一項的儲脂桶，其中，儲脂桶的本體由透明/半透明樹脂制成，并且其上設置有刻度布置。`
7.根據權利要求1-3中任一項的儲脂桶，其中，儲脂桶的本體由金屬制成，并且其上設置有觀察窗口和刻度布置。
8.根據權利要求1-3中任一項的儲脂桶，其中，所述至少一個底部開口通過可操縱的擋片打開/閉合。
9.根據權利要求1-3中任一項的儲脂桶，其中，所述至少一個底部開口連接到閥門。
10.一種吸脂機，包括根據權利要求1-9中任一項的儲脂桶。
11.權利要求ι- ο中任一項的儲脂桶的使用方法，包括如下步驟: 將脂肪組織通過儲脂桶的頂部開口收集到儲脂桶的本體中； 通過儲脂桶的頂部開口向儲脂桶的本體中加入與脂肪組織等體積的磷酸鹽緩沖液，充分蕩洗，之后靜置； 打開儲脂桶的至少一個底部開口，放出下層的磷酸鹽緩沖液； 重復上述步驟，直到磷酸鹽緩沖液無明顯變色為止； 通過儲脂桶的頂部開口向儲脂桶的本體中加入與脂肪組織等體積的I型膠原酶消化液，將儲脂桶置于37°c恒溫搖床，進行消化，之后靜置； 打開儲脂桶的至少一個底部開口，放出下層含細胞的I型膠原酶消化液至離心管中，然后離心分離人脂肪干細胞。
全文摘要
本發明公開了用于從脂肪組織分離出原代脂肪干細胞的儲脂桶及其使用方法以及吸脂機。儲脂桶包括用于接收并容納脂肪組織的本體，該本體具有頂部、側壁和底部，其中，頂部具有頂部開口，脂肪組織和用于分離原代脂肪干細胞的試劑從該頂部開口注入到本體中，并且，底部具有至少一個底部開口，該至少一個底部開口是可閉合的，用于排出本體內的容納物。使用該儲脂桶分離原代脂肪干細胞，無需二次更換容器，既方便了操作，又避免了中間環節可能造成的污染，提高了科學研究的準確性，還節省了科研成本，減少了實驗垃圾的產生，利于環保。
文檔編號A61M1/00GK103203043SQ20121000808
公開日2013年7月17日 申請日期2012年1月12日 優先權日2012年1月12日
發明者劉云松, 趙彥 申請人:劉云松, 趙彥