專利名稱：一種治療雞球蟲病中草藥制劑的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種獸用中草藥制劑，特別涉及一種治療雞球蟲病中草藥制劑，屬于獸藥技術領域。
背景技術：
雞球蟲病是養雞生產中較為常發的一種條件性疾病，其致病原主要為柔嫩艾美爾球蟲、毒害艾美爾球蟲卵感染，多發生在高溫高濕季節和圈舍潮濕、場地污染較重的雞場。 根據其寄生的部位不同，臨床上可分為小腸球蟲(毒害艾美爾球蟲)和盲腸球蟲(柔嫩艾美爾球蟲)感染，在發病過程中，往往與大腸桿菌、沙門氏菌等腸道致病菌繼發感染相并存，雞群在不同的日齡段，不同生產環境條件下其發生的頻率、時間以及臨床病癥表現均存在較大差異。盲腸球蟲發生時，主要表現為雞盲腸急性大量出血，拉鮮紅色或醬紅色稀便， 當繼發大腸桿菌、沙門氏菌混合感染時，拉紅黃或紅白相間的稀便，如處理不及時，易造成雞群急性大面積死亡；小腸球蟲發生時，主要表現為雞十二指腸、小腸發生急性、壞死性炎癥，雞群生長遲緩，出現漸進性消瘦和散發性死亡。長期以來，磺胺類、氨丙啉、馬杜拉霉素等抗生素及化藥是防治該病的常用藥品，具有較強的耐藥性和抗生素殘留，給食品安全生產帶來潛在的危害。近年來，我們運用中草藥篩選方法對雞球蟲感染的防治進行了相應的防治研究，擬尋求毒副作用小、殘毒低、不易產生耐藥、具有較好療效的獸用中草藥制劑。
發明內容
本發明的目的在于提供一種對雞大腸桿菌CVCC-245致病菌株有明顯的抑制作用；雞球蟲卵人工感染防治實驗有效率為94. 17 99. 17%，田間應用推廣試驗有效率為 95. 1%，其應用具有顯著的防治效果及使用安全性的治療雞球蟲病中草藥制劑。本發明是這樣實現的治療雞球蟲病中草藥制劑的配方組成青蒿40_80g、常山 30-70g、勾藤10-40g、使君子25-65g、仙鶴草30_70g、焦地榆30_70g、蒼術15_35g、黃連 15-35g、黃柏20-40g、焦桅子20-40g、穿心連20_40g、紫花地丁 15_35g、陳皮20_40g、甘草 10_30g。優選的，優選后的治療雞球蟲病中草藥制劑的配方組成青蒿60g、常山50g、 勾藤30g、使君子45g、仙鶴草50g、焦地榆50g、蒼術25g、黃連25g、黃柏30g、焦桅子30g、穿心連30g、紫花地丁 25g、陳皮30g、甘草20g。將以上原料藥粉粹、80目過篩、混合均勻，封裝密閉。用法及用量用法拌料自由采飼；治療量500g拌料250kg ;預防量減半使用。本發明制劑主要用于雞球蟲卵感染引起以雞盲腸急性大量出血，
拉鮮紅色、醬紅色或紅黃相間的血色稀便，以及以小腸充氣、腸壁變薄、拉西紅柿樣或食糜樣稀便為主要臨床病理特征的雞球蟲病。對同時繼發的大腸桿菌腸道混合感染也有較好的防治作用。本實驗研究經過雞柔嫩艾美爾球蟲卵感染發病治療、體外抑菌，實驗動物藥物急性及慢性毒理、理化測定、田間應用推廣防治試驗等一系列實驗研究表明對雞大腸桿菌CVCC-245菌株有明顯的抑制作用；雞球蟲卵人工感染防治實驗有效率為94. 17 99. 17%，田間應用推廣試驗有效率為95. 1%。其組方藥物篩選嚴格遵循中獸醫醫學“標本兼治”的防治理論，充分兼顧了養雞生產中雞球蟲病的臨床病理特性，其應用具有顯著的防治效果及使用安全性。具有殺蟲、止血、化濕健脾、澀腸止瀉之功效。、試驗材料
本發明制劑商品名稱“球蟲血痢散”。I. I實驗藥物及組方
“球蟲血痢散”組方主要藥物成分青蒿、常山、使君子、仙鶴草、焦地榆、蒼術、黃連、黃柏、焦桅子、穿心連、紫花地丁、陳皮、甘草等。I. 2實驗菌株雞大腸桿菌CVCC-245菌株購自中國獸醫藥品監察所；柔嫩艾美爾球蟲卵為貴州省畜牧獸醫研究所原寄生蟲研究室保存。I. 4實驗動物35日齡雜交肉雞480只，體重400g±25g
1.5急性、亞急性毒性實驗動物昆明小白鼠40只(公、母各20只)，SD大鼠32只(公、 母各16只)，由貴陽醫學院實驗動物室提供。I. 6實驗用培養基及試劑肉湯、伊紅美藍、麥康凱、飽和鹽水、2. 5%重鉻酸鉀液。、實驗內容及方法
2.I細菌培養用伊紅美藍、麥康凱選擇性培養基經37°C 24h將CVCC245菌株進行培養復壯，再接種于肉湯培養基中擴大培養。2. 2體外抑菌實驗將制劑煎熬濃縮成Ig生藥/ml的藥物濃度制劑作環形抑菌紙片(直徑3mm)，在普通平板上進行抑菌培養24h，觀察CVCC-245菌株的生長情況，如抑菌圈直徑大于5 6mm判為有效。2. 3實驗動物分組設實驗組4個，即方劑預防組I個、方劑治療組I個、化藥治療組I個、觀察對照組I個；每組實驗雞只數量為120只。2. 4感染發病實驗
2.4. I卵囊孵育取柔嫩艾美爾球蟲卵用2. 5%重鉻酸鉀液，28°C恒溫培養，每日攪拌 3 5次，當有80 85%以上的卵囊發育為孢子化卵囊時，收集卵囊保存備用。2. 4. 2溫濕度調控將實驗雞群舍內溫度控制保持在25-28. 5°C ;墊料人工噴濕， 將實驗雞群舍內濕度控制保持在75-80%。2. 4. 3感染發病判斷標準將孵育后的孢子化卵囊液500ml按I :30加入到各實驗組雞群飲水中2 3小時一次性飲用，經飼養觀察，待雞群出現拉鮮紅色或紅白色稀便，臨床發病率達12-15%時為實驗標準。2. 4. 4雞糞便球蟲卵檢測計數運用群體采樣法分別從各實驗組采集50-60只雞糞，將每組雞糞分別混合，置冰箱4°C保存備用。各組取15g雞糞，分別加入80 ml水攪拌均勻后60目銅篩過濾，移入IOml離心管，3000r/min離心沉淀；在沉淀物中加滿飽和鹽水， 在離心管口覆蓋蓋玻片，靜置漂浮20min后，取下蓋玻片放在載玻片上，置顯微鏡下100倍觀察蟲卵并計數。隨機計數各組糞樣的6個視野，取卵囊總數的平均值作為感染強度，無卵囊者為“ 一，，，I 3個卵囊者為“ +，，，4 6個卵囊者為“ + + ”，8 12個以上卵囊者為 “ + + + ”，13個以上卵囊者為“ + + + + ”。各實驗組分別在感染發病前、防治前、防治后檢測計數一次。
2. 5防治實驗
2.5. I治療用藥劑量及方法待實驗雞群發病后，對第一、第二實驗組用制備的“球蟲血痢散”中草藥粉劑(80目過篩)按每日每公斤體重2g拌料自由采飼，連續使用6d;對第三實驗組用10%磺胺喹噁啉鈉(河南安邦藥業有限公司生產)按每日IOOg兌水125 kg自由飲用，連用6d ;第四實驗組不用藥，為觀察對照組。2. 4急性、亞急性毒性藥理試驗根據國家《中藥天然藥物長期毒性研究指導原則》，用II級實驗動物昆明小白鼠、大鼠(SD品系)制定急性毒性試驗(MTD)和反復給藥毒性試驗，以最大程度暴露其藥物毒性，對其凝血系統指標、血液生化指標以及各主要器臟病理組織學變化等檢查。2. 5理化測定實驗將“球蟲血痢散”中草藥制劑委托貴州師范大學分析測試中心依據5337-2008\JY/T023-1996進行鉛、鎘、汞、砷、銅等主要重金屬元素的測定。2. 6田間應用推廣試驗在貴州省貴陽、遵義、黔南、黔東南、安順、六盤水等地區的部分養雞場進行雞大球蟲病的生產預防和臨床治療應用推廣試驗。、實驗結果
3.I抑菌實驗抑菌圈直徑均在4. 8 6. 6mm之間。3. 2藥物防治實驗結果見表I。附表I :
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注方劑預防組為先用實驗方劑預防處理7d后進行人工感染實驗。3. 3急性、亞急性毒性藥理試驗
3. 4理化測定分析見表2。附表2
權利要求
1.一種治療雞球蟲病中草藥制劑，其特征在于它是由以下原料藥組成的青蒿 40-80g、常山30-70g、勾藤10-40g、使君子25-65g、仙鶴草30-70g、焦地榆30-70g、蒼術 15-35g、黃連15-35g、黃柏20_40g、焦桅子20_40g、穿心連20_40g、紫花地丁 15_35g、陳皮 20-40g、甘草 10-30g。
2.根據權利要求I所述的一種治療雞球蟲病中草藥制劑，其特征在于它是由以下原料藥組成的青蒿60g、常山50g、勾藤30g、使君子45g、仙鶴草50g、焦地榆50g、蒼術25g、 黃連25g、黃柏30g、焦桅子30g、穿心連30g、紫花地丁 25g、陳皮30g、甘草20g。
全文摘要
本發明公開了一種治療雞球蟲病中草藥制劑，它是由青蒿、常山、勾藤、使君子、仙鶴草、焦地榆、蒼術、黃連、黃柏、焦梔子、穿心連、紫花地丁、陳皮、甘草配制而得，本發明制劑對雞大腸桿菌CVCC-245菌株有明顯的抑制作用；雞球蟲卵人工感染防治實驗有效率為94.17～99.17%，田間應用推廣試驗有效率為95.1%，其應用具有顯著的防治效果及使用安全性。具有殺蟲、止血、化濕健脾、澀腸止瀉之功效。
文檔編號A61P31/04GK102579697SQ20121008298
公開日2012年7月18日 申請日期2012年3月27日 優先權日2012年3月27日
發明者任榮清, 文正常, 楊粵黔, 潘淑惠, 高明琴 申請人:貴州省畜牧獸醫研究所