專利名稱：一種地錢總黃酮的制備方法
技術領域：
本發明屬中藥制藥工程領域，涉及一種地錢總黃酮的制備方法，方法中包括堿水提取、調酸析出、醇溶精制等關鍵步驟。
背景技術：
在苔蘚植物世界中，地錢(Marchantia polymorpha L.)是分布最為廣泛的物種之一。地錢屬苔綱，地錢科，又名地浮萍、一團云，全年均可采收，以全草入藥，可用鮮品，亦可用干品。地錢的化學成分主要有揮發油、黃酮類、萜類、糖類、氨基酸等。從現有文獻分析，發明人所在的團隊研究最為活躍，對地錢總黃酮的提取、分離和含量測定撰寫了 I篇博士論文(拳卷地錢中黃酮類化合物的分離純化、結構表征及生物活性研究，中南大學,2004年)，以及5篇研究性論文(地錢總黃酮提取的研究，林產化學與工業，2004年第6期；拳卷地錢總黃酮的提 取與純化，食品科學，2005年第10期；拳卷地錢中黃酮類化合物的含量測定，中南藥學，2005年第2期；反相高效液相色譜法用于地錢中黃酮類化合物的分離與測定，分析試驗室，2005年第4期)。現有文獻中，從地錢中提取黃酮類物質的方法，無一例外地采用60 80%的乙醇回流提取，并且只達到實驗室規模，生產量很小。在中藥新產品研發過程中，藥理藥效研究、制劑試制、長期毒性研究等，需要大量的地錢總黃酮，現有方法顯然難以滿足。截至目前，與地錢有關發明專利共有10個，其中涉及化學成分提取(分離)的有3個:一種利用超高壓技術制備地錢中金魚草素的方法(201210595621.X)、地錢提取物的制備工藝及其在制備治療肝癌和乙型肝炎藥物中的應用(200610031324.7)、地錢揮發油及制劑的制法和在制備抗癌藥中的應用(200710035277.8)。與本專利申請相近的，為第二個專利(地錢提取物的制備工藝及其在制備治療肝癌和乙型肝炎藥物中的應用，200610031324.7)，但其提取物的制備方法并不明確，根據說明書的描述，可能是用70%的乙醇提取，所得成分主要為黃酮類。
發明內容
本發明的技術方案包括:藥材經堿提，酸沉，不溶物用稀醇精制。技術方案中的堿提-酸沉，是利用地錢黃酮類化合物可溶于稀堿水，但不溶于稀酸水的特點而設計的；同樣，用稀醇精制，也是利用地錢總黃酮不溶于水，但溶于熱稀醇的特點而設計的。本發明所述的用堿性水加熱提取，是指用NaOH、Ca (OH) 2或KOH將水調節至pH9 11，然后用于提取；提取溫度范圍為50 100°C，提取時間為I 2小時；如提取過程中進行攪動，提取效果更佳。優選用Ca(OH)2調節水的pH，煮沸I小時，提取2次。本發明所述的用酸調至酸性，是指趁熱用HCl或H2SO4將堿提液調節至pH3 5，靜置，使冷卻至室溫；靜置時間至少達48小時以上，否則難以過濾。優選用HCl調節pH，靜置96小時。
本發明所述的用醇溶液加熱溶解，是指用60 85% (v/v)的乙醇或甲醇水溶液，對堿提酸沉所得的不溶物進行加熱溶解，醇溶液的用量一般為不溶物的10 30倍(v/w)，加熱至沸，回流時間I 2小時。優選用20倍70%乙醇(v/w)回流溶解I小時。與現有技術相比，本發明突出的實質性特點和顯著性進步是:1.本發明用堿水替代現有技術中的稀醇，從地錢中提取黃酮類物質，安全、環保、成本低。2.本發明生產工藝及工藝操作簡單，易于放大，適于工業化生產。
具體實施例方式下列實施例子用于舉例說明本發明，并不是對本發明保護范圍的任何限制。實施例一先制備提取用的石灰堿性水:將石灰乳與水充分混合，靜置96小時，取上清液，然后不斷用水稀釋，使PH9.5，備用。取鮮地錢1000克，亂刀砍碎，置不銹鋼鍋中，加入10升PH9.5石灰水，煮沸I小時，趁熱倒出提取液，如此提取3次。合并提取液，2層普通濾紙過濾，取濾液，趁熱用HCl調pH3.5，靜置，同時使料液自然冷卻，96小時后過濾，取濾餅，濕重102克，置平底燒瓶中，加入2500毫升75%乙醇水溶液，加熱回流I小時，放置，冷至室溫后過濾，取濾餅，80°C烘干，得地錢總黃酮20.3克。按文獻方法(拳卷地錢中黃酮類化合物的含量測定，中南藥學，2005年第2期)，以蘆丁為對照，分光光度法測定地錢總黃酮中的黃酮含量為75.82%。實施例二
配制KaOH水溶液，使pHIO，備用。取鮮地錢1000克，亂刀砍碎，置不銹鋼鍋中，力口入10升PHlO堿性水，煮沸2小時，趁熱倒出提取液，如此提取2次。合并提取液，2層普通濾紙過濾，取濾液，趁熱用H2SO4調pH3，靜置，同時使料液自然冷卻，100小時后過濾，取濾餅，濕重114克，置平底燒瓶中，加入3000毫升80%乙醇水溶液，加熱回流2小時，放置，冷至室溫后過濾，取濾餅，80°C烘干，得地錢總黃酮16.8克。按文獻方法(拳卷地錢中黃酮類化合物的含量測定， 中南藥學，2005年第2期)，以蘆丁為對照，分光光度法測定地錢總黃酮中的黃酮含量為65.74%。實施例三配制NaOH水溶液，使pH9.0,備用。取地錢干品500克，打成最粗粉，置不銹鋼鍋中，加入15升pH9.0堿性水，煮沸2小時，趁熱倒出提取液，如此提取2次。合并提取液，2層普通濾紙過濾，取濾液，趁熱用HCl調pH4.5，靜置，同時使料液自然冷卻，80小時后過濾，取濾餅，濕重317克，置平底燒瓶中，加入5000毫升75%乙醇水溶液，加熱回流2小時，放置，冷至室溫后過濾，取濾餅，80°C烘干，得地錢總黃酮53.2克。按文獻方法(拳卷地錢中黃酮類化合物的含量測定，中南藥學，2005年第2期)，以蘆丁為對照，分光光度法測定地錢總黃酮中的黃酮含量為71.59%。
權利要求
1.一種地錢總黃酮的制備方法，其特征在于:工藝流程如下:地錢一用堿性水加熱提取一濾取濾液一用酸調至酸性一沉淀一濾取濾餅一用醇溶液加熱溶解一濾取濾液一回收溶劑一沉淀一濾取濾餅一烘干一地錢總黃酮。
2.根據權利要求1所述的堿性水，其特征在于:是指pH9 11的無機堿的水溶液，無機堿選用以下的任一種:NaOH、Ca (OH)2, Κ0Η。
3.根據權利要求1所述的酸性水，其特征在于:是指pH3 5的無機酸的水溶液，無機酸選用以下的任一種:HC1、H2S04。
4.根據權利要求1所述的醇溶液，其特征在于:醇的體積百分比為60 85%的水溶液，醇選用以下 的任一種:乙醇、甲醇。
全文摘要
本發明公開一種從地錢中提取總黃酮的方法，該方法以天然植物地錢為原料，用堿性水為溶劑，加熱提取，提取液用酸調節至pH3～5，析出總黃酮粗品，繼用60-85％乙醇溶解，回收乙醇后再次析出，得到地錢總黃酮，產品中黃酮類化合物的含量達60％以上。本發明工藝簡單，適于大量生產。
文檔編號A61K36/10GK103230420SQ20131015996
公開日2013年8月7日 申請日期2013年5月3日 優先權日2013年5月3日
發明者朱華, 周春山, 肖建波, 鐘世安, 黃海濱, 鄒登峰 申請人:廣西中醫藥大學