原花青素a2及其制備方法和應用的制作方法
【專利摘要】本發明公開了原花青素A2及其制備方法和應用。原花青素A2，其結構式如式（Ⅰ）所示。本發明從荔枝液中制備分離得到一個原花青素類化合物原花青素A2，其產率可高達1.26～5.26g/kg（純度為80～90%）。活性實驗表明，該化合物具有良好的抗氧化活性，其抗氧化活性顯著強于食品行業常用的合成抗氧化劑BHT，可用于制備抗氧化劑或自由基清除劑；且該化合物具有較好的抗腫瘤活性，可有效地抑制人肝癌Hep-G2細胞和人宮頸癌Hela細胞的增殖，可用于制備抗腫瘤藥物，具有廣泛的應用前景。本發明對于推動荔枝的深加工利用，提升荔枝產品附加值，促進該行業的可持續發展具有重要的意義。
【專利說明】原花青素A2及其制備方法和應用
【技術領域】:
[0001]本發明屬于天然產物領域，具體涉及一種從荔枝葉中制備分離得到的具有強抗氧化活性和抗腫瘤活性的原花青素A2及其制備方法和應用。
【背景技術】:
[0002]原花青素(Procyanidin)是植物王國中廣泛存在的一類黃酮化合物的總稱,是黃燒-3-醇或黃燒-3，4-二醇的聚合物。在可食用植物中，原花青素是以(+)_兒茶素、(-)-表兒茶素為組成單元，主要通過B型鍵合(C4-C8或C4-C6)和A型鍵合(C4-C8和C2-0-C7)等方式連接聚合而成，聚合度范圍在2~10之間。另外，按聚合度大小，通常將二、三和四聚體稱為低聚體原花青素。將五聚體以上的稱為高聚體。相關研究表明，原花青素具有多種生物學功能，如抗氧化、防衰老、預防心血管疾病、抗腫瘤等活性，可廣泛應用于食品、化妝品等行業，具有廣闊的應用前景。
[0003]荔枝屬于無患子科，素有“嶺南果王”之稱，香甜可口，營養價值和保健價值都非常高，是國內外公認的滋補水果，深受廣大消費者的喜愛。我國是世界上最早栽培荔枝的國家，也是世界上荔枝產量最大的國家。荔枝葉為荔枝果樹的枝葉，全年可采，資源豐富，具有良好的藥用功效，但其活性物質鑒定與利用研究仍十分有限。
【發明內容】
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[0004]本發明的第一個目的是提供一種具有抗氧化和抗腫瘤活性的原花青素A2。
[0005]本發明的原 花青素A2，其結構式如式(I )所示:
[0006]
【權利要求】
1.原花青素A2，其結構式如式(I)所示:
2.—種權利要求1所述的如式(I )所示的原花青素A2的制備方法，其特征在于，包括以下步驟:用體積分數40~100%甲醇或乙醇水溶液浸提荔枝葉粉末，將浸提液濃縮去除甲醇或乙醇，用水溶解后，再先后用石油醚、乙酸乙酯萃取，將乙酸乙酯相濃縮得浸膏，浸膏經硅膠柱層析，以氯仿/甲醇為洗脫劑，從體積比100/0~60/40梯度洗脫，收集氯仿/甲醇體積比為80/20洗脫的餾分，該餾分再經硅膠柱層析，以氯仿/甲醇為洗脫劑，從體積比90/10~60/40梯度洗脫，收集氯仿/甲醇體積比為75/25洗脫的餾分，該餾分再經C18反相柱層析，以甲醇/水作為洗脫劑，從體積比10/90~100/0梯度洗脫，收集甲醇/水體積比25/75梯度洗脫的餾分，即得到原花青素A2。
3.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述的荔枝葉粉末是將新鮮的荔枝葉干燥后，粉碎成粉末，過20~120目篩,過篩后的粉末即為荔枝葉粉末；所述的用體積分數40~100%甲醇或乙醇水溶液浸提荔枝葉粉末，甲醇或乙醇水溶液的用量是5~20mL/g荔枝葉粉末，浸提的溫度為25~60°C，浸提時間為4~30小時；所述的將浸提液濃縮去除甲醇或乙醇，再加入水溶解是將浸提液在40~80°C下濃縮除去甲醇或乙醇，再加入I~3倍體積的水溶解；所述的先后用石油醚、乙酸乙酯萃取，是先用石油醚萃取3~12次，再用乙酸乙酯萃取3~12次。
4.荔枝葉在制備權利要求1所述的如式(I)所示的原花青素A2中的應用。
5.權利要求1所述的如式(I)所示的原花青素A2在制備抗氧化劑或自由基清除劑中的應用。
6.一種抗氧化劑或自由基清除劑，其特征在于，含有有效劑量的權利要求1所述的如式(I )所示的原花青素A2作為活性成份。
7.權利要求1所述的如式(I)所示的原花青素A2在制備抗腫瘤藥物中的應用。
8.根據權利要求7所述的應用，其特征在于，所述的抗腫瘤藥物為抗人肝癌或人宮頸癌的藥物。
9.一種抗腫瘤藥物，其特征在于，含有有效劑量的權利要求1所述的如式(I )所示的原花青素A2作為活性成份。
10.根據權利要求9所述的抗腫瘤藥物，其特征在于，所述的抗腫瘤藥物為抗人肝癌或人宮 頸癌的藥物。
【文檔編號】A61P15/00GK103467477SQ201310314385
【公開日】2013年12月25日 申請日期:2013年7月24日 優先權日:2013年7月24日
【發明者】楊寶, 蔣躍明, 溫玲蓉 申請人:中國科學院華南植物園