一種防治水產動物水霉病的方法
【專利摘要】本發明涉及一種防治水產動物水霉病的方法，所述的方法主要應用于防治魚類、蝦類等受精卵和成魚的水霉病，其特征在于，所述的方法采用藥物治療水霉菌；所述的方法采用潑灑和浸泡兩種方式用藥分別在預防和治療草魚和鯽魚傷口處的水霉菌，所述的水霉菌為寄生水霉菌。本發明的優點：用藥簡單，預防和治療效果顯著。
【專利說明】一種防治水產動物水霉病的方法
[0001]【【技術領域】】
本發明涉及微生物【技術領域】，具體地說，是一種防治水產動物水霉病的方法。
[0002]【【背景技術】】 水霉菌廣存于世界各地的淡水或半咸水水域及潮濕土壤中，于死亡的有機物上腐生，為一種常在的霉菌，主要有水霉目(Saprolegniales)、霜霉目(peronosporales)及水節霉目(Leptomitales)等,又以水霉菌(Saprolegnia)最為常見，于15~25°C時最適合生長，25°C以上時各中的游孢子(zoospore)繁殖力減弱,較不易感染。
[0003]水霉病的發生主要因為緊迫造成的二次性感染，魚體因擁擠、移動或其他不良環境因素的影響，造成體表組織受傷，水中的水霉病游孢子即伺機附著，在壞死組織上開始發芽形成菌絲，菌絲除寄生于壞死組織外，尚可漫延侵入附近的正常組織，分泌消化酵素分解周圍組織，更而貫穿真皮深入肌肉，使皮膚與肌肉壞死崩解。表層的菌絲則向外延伸，形成如棉絮狀的覆蓋物，并于末端形成孢子囊，放出游孢子到水中，經由水而傳播各處。癥狀主要為感染部位形成灰白色棉絮狀覆蓋物；病變部位初期呈圓形，后期則呈不規則的斑塊，嚴重時皮膚破損肌肉裸露；鰓組織亦會被侵犯感染，造成死亡。
[0004]中國專利文獻CN10229383IA公開了一種防治水產動物水霉病的復方粉劑及制備方法，由五倍子、大黃、溴硝醇、分散劑一定重量百分比的原料制成。中國專利文獻CN101708187A公開了一種用于防治水產動物水霉病的干粉制劑及其制備方法，組分組成為:7廣79%生化黃腐酸、10-15%偏重亞硫酸鈉、10-15%溴硝醇。但是關于以“立達霉”為主要藥物防治水產動物水霉病的專利目前還未見報道。
[0005]【
【發明內容】
】
本發明的目的是針對現有技術中的不足，提供一種用藥簡單、治療效果明顯的防治水產動物水霉病的方法。
[0006]為實現上述目的，本發明采取的技術方案是:
一種防治水產動物水霉病的方法，所述的方法主要應用于防治魚類、蝦類等受精卵和成魚的水霉病，所述的方法采用藥物治療水霉菌；所述的方法采用潑灑和浸泡兩種方式用藥分別在預防和治療草魚和鯽魚傷口處的水霉菌，所述的水霉菌為寄生水霉菌。
[0007]所述的藥物為立達霉。
[0008]所述的藥物為立達霉加工后的復方立達霉粉。
[0009]所述的復方立達霉粉為固體顆粒藥物。
[0010]所述的復方立達霉粉由45%立達霉、10%的硅藻土、20%的無水硫酸鈉、24.5%的硫酸亞鐵和0.5%的抗結劑組成。
[0011]所述的藥物采用潑灑和浸泡方式預防和治療水霉菌效果的最佳濃度分別是8mg/L和 20mg/L。
[0012]本發明的優點:
用藥簡單，預防和治療效果顯著。
[0013]【【具體實施方式】】實施例1
復方立達霉粉藥物的制備
采用以下重量配比:取45%的立達霉(又名甲霜靈,英文通用名稱metalaxyl,分子式C15H21NO4, CAS號57837-19-1)、10%的硅藻土、20%的無水硫酸鈉、24.5%的硫酸亞鐵、0.5%的抗結劑(氣相白炭黑)混合后制成抗水霉制劑“復方立達霉粉”。
[0014]生產工藝如下:
1抗水霉制劑“復方立達霉粉”各組分常溫下混合:
1)先將娃藻土、硫酸亞鐵和抗結劑投入混勻機中預混10~15min,轉速50~60 r/
min ；
2)再將無水硫酸鈉投入混勻機與上述混合物一起混合10~15min，轉速50~60 r/
min ；
3)最后將立達霉投入混勻機與上述混合物一起混合30~40min。轉速50~60 r/
min。
[0015]2抗水霉制劑“復方立達霉粉”常溫下包裝:
I)將上述混合物進行分裝，準確稱取200 g每份，裝入可以封口的內包裝帶內，進行封
Π ；
2)然后將內包裝袋放入外包裝袋中，并打印生產日期；
3)將上述生產好的復方立達霉粉每50包裝成一箱。
[0016]實施例2 I材料與方法
1.1試驗藥物和試劑
“復方立達霉粉”，長沙拜特生物科技研究所有限公司
1.2菌株來源
水霉菌株ATCC200013為上海海洋大學國家水生動物病原庫提供。
[0017]1.3對水霉體外作用效果實驗
1.3.1水霉抱子懸液制備
挑取保藏于試管的水霉菌絲轉接于馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基(馬鈴薯塊200~300g、葡萄糖20g、瓊脂20g、水1000mL)平板上，在平板上滴加適量無菌水25°C培養48h，期間適量增添無菌水。待鋪滿整個培養皿后，倒出誘生有孢子的無菌水，再用無菌水輕輕沖洗平板I次合并，經8層紗布過濾，分別調整孢子濃度為IO2個/mL、IO3個/mL、IO4個/mL待實驗用。
[0018]1.3.2待試藥物母液配制及梯度稀釋
將抗水霉制劑“復方立達霉粉”用蒸餾水配制成1000mg/L的藥物母液。通過倍釋法將該母液依次稀釋十個梯度:1000、500、250、125、62、31、16、8、4mg/L。
[0019]1.3.3水霉孢子抑制實驗
以不同梯度濃度的藥物倍釋液2mL加至18mL經融化56°C的PDA (馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基:馬鈴薯塊200~300g、葡萄糖20g、瓊脂20g、水1000mL)使之均勻，迅速傾倒于培養皿中待凝固用于實驗，即藥物PDA平板濃度為原濃度的1/10。
[0020]取0.1mL水霉孢子菌懸液涂布于凝固的培養基上。設空白對照組，25°C培養5d。孵育期每24h觀察一次，肉眼判定無菌落生長的最低藥物培養皿的藥物濃度為MIC。每個濃度設兩個對照，同時設不加藥液的空白PDA培養基為對照。
[0021]1.3.4水霉菌絲殺滅實驗
將經馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基(馬鈴薯塊200~300g、葡萄糖20g、瓊脂20g、水1000mL)，25°C培養48h后，鋪滿平板的水霉用無菌刀片切成約1、2、3 cm2的小塊。將切好的水霉小塊放入盛有上述各濃度的藥物倍釋液的離心管中分別浸泡0.17,0.5、l、2h.用無菌鑷子取出浸泡過的水霉小塊置于馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基上，25°C培養觀察5d。孵育期每24h觀察一次，肉眼判定無水霉菌落生長的，表示此種藥物在該濃度該作用時間下對水霉菌絲具有殺滅作用。每個濃度設兩個對照，同時設經蒸餾水浸泡過的水霉塊空白對照。
[0022]2 結果
2.1抗水霉制劑“復方立達霉粉”對水霉孢子MIC影響(表1)
表1抗水霉制劑“復方立達霉粉”對水霉孢子的MIC
【權利要求】
1.一種防治水產動物水霉病的方法，所述的方法主要應用于防治魚類、蝦類等受精卵和成魚的水霉病，其特征在于，所述的方法采用藥物治療水霉菌；所述的方法采用潑灑和浸泡兩種方式用藥分別在預防和治療草魚和鯽魚傷口處的水霉菌；所述的水霉菌為寄生水霉菌。
2.根據權利要求1所述的防治水產動物水霉病的方法，其特征在于:所述的藥物為立達霉。
3.根據權利要求1所述的防治水產動物水霉病的方法，其特征在于:所述的藥物為立達霉加工后的復方立達霉粉。
4.根據權利要求1所述的防治水產動物水霉病的方法，其特征在于:所述的復方立達霉粉由45%的立達霉、10%的硅藻土、20%的無水硫酸鈉、24.5%的硫酸亞鐵、0.5%的抗結劑組成。
5.根據權利要求1所述的防治水產動物水霉病的方法，其特征在于:所述的復方立達霉粉為固體顆粒藥物。
6.根據權利要求1所述的防治水產動物水霉病的方法，其特征在于:所述的藥物采用潑灑和浸泡方式在預防和治 療草魚和鯽魚水霉菌效果 的最佳濃度分別是8mg/L和20mg/L。
【文檔編號】A61P31/10GK103536586SQ201310442736
【公開日】2014年1月29日 申請日期:2013年9月26日 優先權日:2013年9月26日
【發明者】李浩然, 楊先樂, 胡鯤 申請人:上海海洋大學