改性黃腐植酸在制備抗腫瘤藥物中的應用的制作方法
【專利摘要】本發明公開了改性黃腐植酸在制備抗腫瘤藥物中的應用，所述的改性黃腐植酸的制備方法包括以下步驟：(1)將含黃腐植酸的原料或黃腐植酸，在水中經HNO3和H2SO4定向降解，制得黃腐植酸降解物；(2)微波條件下，將步驟(1)制得的黃腐植酸降解物，與曲酸或含曲酸的提取物反應，即得。本發明與現有的治療藥物相比，具有三個方面的優勢：1)可利用泥炭資源提取改性黃腐植酸，充分利用了資源，保護了環境；2)原料藥物資源豐富，與現有的治療藥物相比療效相同，但性價比更高；3)與其他西藥相比，療效好但不良反應少。本發明改性黃腐植酸制劑將具有良好的社會效益和經濟效益。
【專利說明】改性黃腐植酸在制備抗腫瘤藥物中的應用
【技術領域】
[0001]本發明屬于藥物領域，特別涉及泥炭提取物中的改性黃腐植酸的藥物用途。
【背景技術】
[0002]泥炭是一種經過幾千年所形成的天然沼澤地產物，是煤化程度最低的煤，也是腐殖煤系列最原始的狀態。泥炭是在泥炭沼澤中堆積形成的，以后在上覆沉積物的壓力及進一步菌解條件下，經過壓緊和脫水變得更加堅固，成為褐煤，再繼續受到地下溫度和壓力作用時，經煤化作用形成煙煤或無煙煤。泥炭中的有機質主要是纖維素、半纖維素、木質素、腐殖酸、浙青物質等。泥炭中腐殖酸含量常為10~30%，高者可達70%以上。泥炭用途廣泛，可用于農業，如作為有機肥料和育苗及花卉培植的土基，還可用于工業，如作為燃料發電、化工(從中提取多種原料)、釀酒、醫藥、制陶以及建筑材料等。泥炭及其主要有效成分腐植酸類物質，在醫藥領域有多種用途，有部分報道可以用于胃腸道疾病、關節炎等，具有收斂、消炎、止痛、去腐生肌作用，對皮膚病、濕疹等有一定療效。
[0003]中國專利(專利號200810205110.6) “一種黃腐植酸的改性方法及所得產品、及其在制備提高免疫力或防治HIV藥物中的應用”公開了一種黃腐植酸的改性方法，其包括如下步驟:(1)將含黃腐植酸的原料或黃腐植酸，在水中，在降解劑的作用下，經定向降解，制得黃腐植酸降解物；所述的降解劑為ΗΝ03、ΗΝ03和H2S04，或者醋酸和H202 ； (2)微波條件下，將步驟(1)制得的黃腐植酸降解物，與曲酸或含曲酸的提取物反應，即制得本發明的黃腐植酸改性物。該發明還涉及由上述方法制得的黃腐植酸改性物及其在制備提高免疫力的藥物或防治HIV的藥物中的應用。該發明的黃腐植酸改性物具有顯著的提高免疫力，尤其是提高HIV患者免疫力的效果，且毒副作用小，耐藥性小，靶向性明確，且制備方法簡單易行，成本低。
`[0004]腫瘤是危害人類健康最嚴重的一類常見病、多發病。由于環境污染加劇、營養失衡、人口老齡化以及激烈競爭下生活壓力增大等因素，目前全世界惡性腫瘤的發病率越來越高。目前，我國腫瘤發病率約為200 / 10萬，我國每年新發癌癥病例約220萬以上，每年在治患者600萬以上，醫療費用在1500億以上，每年死于癌癥人數超過160萬。
[0005]現代醫學對腫瘤的治療手段主要包括手術治療、放射治療、化學藥物治療等3大類。但是上述療法在治療腫瘤時不可避免地會給患者帶來不良反應，影響患者的生存質量。當今，臨床療效的評價理念正在從“以疾病為核心，最大限度的殺傷腫瘤”的治療模式向以“患者為核心，謀求最好生活質量的人性化“治療模式轉變。這種理念與中醫理論特色即“整體觀念，辨證論治，調和陰陽”，相符合。
[0006]中醫防治腫瘤有幾千年的歷史，腫瘤在中醫中屬“積聚”范疇，歷代諸家均有論述，如《難經.五十五難》中“故積者，五臟所生；聚者，六腑所成。也積者，陰氣也，其始發有常處，其病不離其部”，中醫認為，腫瘤是正氣虧虛、邪毒內侵凝聚而成早期以邪實為主，中晚期患者還存在著明顯的虛像。其病的發生多由情志郁結、飲食所傷，寒邪外襲以及病后體虛，或黃疸、瘧疾等經久不愈以致肝脾受損、臟腑失和、氣機阻滯、瘀血內停或兼痰濕凝滯而成積聚。
[0007]從20世紀50年代起，我國對腫瘤的病因病機、中醫治癌古代理論、古代秘方及民間驗方進行系統整理和研究，提出了中醫、中西醫結合治療腫瘸的基本方法與思路，且開始重視辨證論治規律等中醫理論指導下的抗癌研究。中醫學者從多層次、多角度驗證了中醫藥在腫瘤治療中的獨到作用，明確了中醫藥在腫瘤綜合治療中的作用，并結合現代醫學的最新進展，在采用中醫藥提高腫瘤患者生活質量、預防復發轉移、抗腫瘤多藥耐藥、中藥對腫瘤新生血管的干預及對放、化療減毒增敏等方面進行了一系列研究。研究發現中藥治療腫瘤在穩定瘤體，調節機體功能，增加免疫能力，改善臨床癥狀，減輕放化療毒副作用，延長帶瘤生存時間方面有獨特療效。從天然產物中發現新的抗腫瘤中藥具有良好的經濟效益及社會效益。
【發明內容】
[0008]本發明的目的是提供改性黃腐植酸在制備抗腫瘤藥物中的應用。
[0009]本發明的技術方案是這樣實現的:改性黃腐植酸在制備抗腫瘤藥物中的應用，所述的改性黃腐植酸的制備方法包括以下步驟:(1)將含黃腐植酸的原料或黃腐植酸，在水中經HN0jPH2S04S向降解，制得黃腐植酸降解物；(2)微波條件下，將步驟⑴制得的黃腐植酸降解物，與曲酸或含曲酸的提取物反應，即得。
[0010]所述的改性黃腐植酸在制備抗腫瘤且減輕環磷酰胺損傷免疫器官的藥物中的應用。
[0011]所述的藥劑的劑型為口服劑型。
[0012]所述的步驟(1)中，含黃腐植酸的原料為含黃腐殖酸的泥炭、褐煤或風化煤。
[0013]所述的步驟(1)中，HN0jPH2S04的質量比為5:1~3:1。
[0014]所述的步驟(1)中，降解劑ΗΝ03和H2S04的用量為20~30%，百分比為降解劑在水中的質量濃度百分比。
[0015]所述的步驟(1)中，定向降解在超聲波條件下進行，超聲波頻率為100~200KHZ，溫度為90-120。。，時間100~140分鐘。
[0016]所述步驟(2)中，所述的微波條件為微波頻率2450Hz，微波功率450~550W下，反應 25 ~35min。
[0017]所述的步驟(2)中，黃腐植酸降解物與曲酸或含曲酸的提取物的摩爾比為1:1~1:2。
[0018]本發明與現有的治療藥物相比，具有三個方面的優勢:1)可利用泥炭資源提取改性黃腐植酸，充分利用了資源，保護了環境；2)原料藥物資源豐富，與現有的治療藥物相比療效相同，但性價比更高；3)與其他西藥相比，療效好但不良反應少。本發明改性黃腐植酸制劑將具有良好的社會效益和經濟效益。
【具體實施方式】
[0019]本發明是改性黃腐植酸在制備抗腫瘤藥物中的應用，所述的改性黃腐植酸為中國專利200810205110.6公開制備方法制得的產物，具體制備方法為:(1)將含黃腐植酸的原料或黃腐植酸，在水中經!^03和仏504定向降解，制得黃腐植酸降解物；(2)微波條件下，將步驟(1)制得的黃腐植酸降解物，與曲酸或含曲酸的提取物反應，即得。優選的，步驟(1)中，含黃腐植酸的原料為含黃腐殖酸的泥炭、褐煤或風化煤。^^03和&504的質量比為5:1~3:1。降解劑ΗΝ03和H2S04的用量為20~30%，百分比為降解劑在水中的質量濃度百分比。定向降解在超聲波條件下進行，超聲波頻率為100~200KHz，溫度為90-120°C，時間100~140分鐘。步驟(2)中，所述的微波條件為微波頻率2450Hz，微波功率450~550W下，反應25~35min。黃腐植酸降解物與曲酸或含曲酸的提取物的摩爾比為1:1~1:2。
[0020]本發明的改性黃腐植酸是泥炭的活性成分，按照常規的制劑工藝，可以以改性黃腐植酸為主要活性成分，加入常規的賦形劑、調味劑、防腐劑、潤滑劑、濕潤劑、黏合劑、增稠劑、增溶劑等藥物輔料，制成任何一種適于臨床上使用的口服劑型，如膠囊劑、片劑、沖劑等。一般的，制劑的口服改性黃腐植酸劑量為每日4.5克，日服3次，每次服用1.5克。
[0021 ]由于本發明首次公開了改性黃腐植酸在制備抗腫瘤藥物中的應用，尤其是改性黃腐植酸在制備抗腫瘤且減輕環磷酰胺損傷免疫器官的藥物中的應用。將改性黃腐植酸單獨或與其它活性組份或輔料配合制成藥劑，只要該藥劑用于治療腫瘤，無論以何種給藥方式，均屬于本發明的保護范圍。
[0022]本發明首次證實了改性黃腐植酸具有抑瘤、與環磷酰胺合用可以增效及減毒(減輕其對免疫器官的損傷)、增加小鼠外周血白細胞數，對小鼠60Co射線輻照致骨髓損傷模型有較好的放療保護作用。以下結合具體的實施例對本發明做進一步的說明，但本發明并不限于此特定例子。
[0023]實施例1
[0024]將100g天然泥炭黃腐植酸，在含降解劑ΗΝ03和H2S04的水溶液(100ml，降解劑總濃度25被%，!1勵3和4504的質量比為4:1)中，溫度110°C下，150KHz的超聲波下，定向降解反應120min，得到平均分子量為140的黃腐植酸降解物。將lmol黃腐植酸降解物與曲酸提取物(含1.5mol曲酸)在微波頻率2450Hz，微波功率500W下，反應30min，再經醫用活性炭吸附去雜，即制得本實施例的黃腐植酸改性物粉末。
[0025]實施例2改性黃腐植酸膠囊的制備
[0026]
K方實1所得的改性黃腐植酸450 g
淀粉10 g
羥丙基纖維素(L-HPC)30 g
微粉硅膠5 g
硬撒酸錢5 g
[0027]制備方法:將改性黃腐植酸、淀粉、和L-HPC混合，混合均勻；加入淀粉漿適量制軟材，用16目制粒、干燥并整粒，加入微粉硅膠、硬脂酸鎂混合均勻，制成1000粒。
[0028]口服劑量為日服3次，每次服用3粒。
[0029]實施例3改性黃腐植酸片劑的制備
`[0030]配方:實施例1所得的改性黃腐植酸450g
[0031]硬脂酸鎂5g
[0032]糊精40g[0033]制備方法:取主藥改性黃腐植酸與糊精充分混勻后過60目篩，制成軟材，24目篩制粒，干燥，整粒，壓片前加入硬脂酸鎂充分混勻，測定顆粒含量合格后，壓片即得，制成1000 粒。
[0034]口服劑量為日服3次，每次服用3粒。
[0035]實驗例1改性黃腐植酸的抗腫瘤作用研究
[0036]1.實驗材料
[0037]1.1實驗動物SPF級KM小鼠，雄性，體重18~22 g，72只，小鼠肉瘤細胞株S180。
[0038]1.2實驗藥物改性黃腐植酸(FA)。分別精密稱取實施例1所得的改性黃腐植酸粉末2.32g，4.64g，9.28g，溶解，定容至100ml，分別作為FA低、中、高濃度藥液，冷凍備用。
[0039]1.3試劑注射用環磷酰胺(CTX)，產品批號:12040925，江蘇恒瑞醫藥股份有限公司。
[0040]1.4儀器分析天平；電子天平。
[0041]2.實驗方法
[0042]2.1腫瘤動物模型的建立
[0043]取已接種7d的荷瘤S180腹水瘤小鼠，脫白處死。在無菌條件下抽取腹腔內瘤細胞，并以生理鹽水洗滌3次，2500r / min離心3min，棄上清液，用無菌生理鹽水調整瘤細胞濃度為1.0X107 / mL，接種于每只小鼠右前肢腋部皮下，接種量為0.2ml/只。
[0044]2.2FA與CTX合用對小鼠腫瘤生長的影響
[0045]將小鼠隨機分成6組。即模型組、環磷酰胺(CTX)組、口服改性黃腐植酸(FA)中劑量組、CTX+FA低劑量組、CTX+FA中劑量組、CTX+FA高劑量組。模型組以蒸餾水灌胃，給藥劑量為25ml/kg ;環磷酰胺(CTX)組以CTX生理鹽水溶液腹腔注射，給藥劑量為20mg/kg ； 口服FA中劑量組以FA中濃度藥液灌胃，給藥劑量為1.lg/kg ;CTX+FA低劑量組、CTX+FA中劑量組、CTX+FA高劑量組皆以20mg/kg腹腔注射環磷酰胺的同時，分別以FA低、中、高濃度藥液進行灌胃，給藥劑量分別為0.55g/kg，1.lg/kg, 2.2g/kg。連續給藥7天，末次給藥后24h脫臼處死荷瘤小鼠，取瘤并稱質量，比較單純用CTX治療組與加用FA組，單服FA間抑瘤作用的差異，觀察FA對CTX抑瘤的增效作用，并計算各組的抑瘤率，計算公式如下:
[0046]
【權利要求】
1.改性黃腐植酸在制備抗腫瘤藥物中的應用，所述的改性黃腐植酸的制備方法包括以下步驟:(1)將含黃腐植酸的原料或黃腐植酸，在水中經HN0jPH2S04S向降解，制得黃腐植酸降解物；(2)微波條件下，將步驟(1)制得的黃腐植酸降解物，與曲酸或含曲酸的提取物反應，即得。
2.權利要求1所述的改性黃腐植酸在制備抗腫瘤且減輕環磷酰胺損傷免疫器官的藥物中的應用。
3.根據權利要求1或2所述的改性黃腐植酸在制備抗腫瘤藥物中的應用，其特征在于:所述的藥劑的劑型為口服劑型。
4.根據權利要求1或2所述的改性黃腐植酸在制備抗腫瘤藥物中的應用，其特征在于:所述的步驟(1)中，含黃腐植酸的原料為含黃腐殖酸的泥炭、褐煤或風化煤。
5.根據權利要求1或2所述的改性黃腐植酸在制備抗腫瘤藥物中的應用，其特征在于:所述的步驟(1)中，ΗΝ03和H2S04的質量比為5:1~3:1。
6.根據權利要求1或2所述的改性黃腐植酸在制備抗腫瘤藥物中的應用，其特征在于:所述的步驟(1)中，降解劑ΗΝ03和H2S04的用量為20~30%，百分比為降解劑在水中的質量濃度百分比。
7.根據權利要求1或2所述的改性黃腐植酸在制備抗腫瘤藥物中的應用，其特征在于:所述的步驟(1)中，定向降解在超聲波條件下進行，超聲波頻率為100~200KHZ，溫度為90-120。。，時間 100 ~140 分鐘。
8.根據權利要求1或2所述的改性黃腐植酸在制備抗腫瘤藥物中的應用，其特征在于:所述步驟(2)中，所述的微波條件為微波頻率2450Hz，微波功率450~550W下，反應25~35min。`
9.根據權利要求1或2所述的改性黃腐植酸在制備抗腫瘤藥物中的應用，其特征在于:所述的步驟(2)中，黃腐植酸降解物與曲酸或含曲酸的提取物的摩爾比為1:1~1:2。
【文檔編號】A61K35/10GK103720716SQ201310711250
【公開日】2014年4月16日 申請日期:2013年12月20日 優先權日:2013年12月20日
【發明者】呂偉東, 陳為, 劉強 申請人:廣州東送能源集團有限責任公司