用于抑制或治療多重耐藥細菌的富里酸與抗生素組合物的制作方法
【專利摘要】富里酸作為有效成分用于治療或抑制多重耐藥細菌，特別是產生碳青霉烯酶的NDM-1細菌或超廣譜β內酰胺酶(ESBL)耐藥細菌。多重耐藥細菌可以是革蘭氏陰性菌，包括但不限于肺炎克雷伯菌或大腸桿菌。富里酸可以與碳青霉烯類或多粘菌素抗生素類中的一種或多種抗生素組合使用。
【專利說明】用于抑制或治療多重耐藥細菌的富里酸與抗生素組合物
[0001] 發明背景
[0002] 本發明涉及富里酸作為有效成分用于治療或抑制多重耐藥細菌，特別是產生碳青 霉烯酶的NDM-1細菌或超廣譜β內酰胺酶（ESBL)耐藥細菌。本發明還涉及富里酸作為有 效成分與碳青霉烯類或多粘菌素抗生素類中的一種或多種抗生素組合用于治療多重耐藥 細菌，特別是產生碳青霉烯酶的NDM-1細菌。
[0003] 富里酸是環境中植物和動物殘體在腐爛的過程中所形成的腐殖質的一部分 (MacCarthy et al.，1985)，并且它在所有pH值條件下都溶于水。與同樣在腐殖質中發現 的腐殖酸相比，它通常具有較低的分子大小和分子量，以及較低的色度。
[0004] 通常，使用可控濕式氧化工藝由煙煤生產富里酸（Bergh et al.，1997)。這些富 里酸通常被稱為氧化富里酸。美國專利第4, 912, 256號描述了由煤炭生產富里酸的這類方 法。
[0005] 國際專利公開第W000/19999號已經公開了使用富里酸治療炎癥、痤瘡、濕疹以及 細菌、真菌和病毒感染。另外，美國專利號第4, 999, 202號和第5, 204, 368號公開了包含富 里酸、其鹽或衍生物的組合物，其具有抑菌或殺菌特性，且可用作消毒劑。
[0006] 但是，源自煤的氧化的富里酸含有高濃度的重金屬，包括鋁、汞、鎘、鉻和鉛，現已 知這些重金屬對人體有害，且應該在藥物制劑中避免。國際專利公開第W02007/125492號 公開了通過濕式氧化法得到源自碳水化合物的富里酸組合物和生產這種組合物的方法。由 于碳水化合物為原材料，因此通過這種方法生產的富里酸含有低量的這些有害元素。已描 述這種組合物可用于藥物應用。
【發明內容】
[0007] 根據本發明的一個方面，提供了富里酸或其鹽、酯或衍生物作為有效成分用于治 療或抑制多重耐藥細菌。
[0008] 特別是，多重耐藥細菌是產生碳青霉烯酶的NDM-1陽性細菌或超廣譜β內酰胺酶 (ESBL)耐藥細菌。例如，多重耐藥細菌可以是革蘭氏陰性菌，包括但不限于肺炎克雷伯菌 (Klebsiella pneumoniae)或大腸桿菌（Escherichia coli) 〇
[0009] 根據本發明的另一方面，提供了包含富里酸或其鹽、酯或衍生物作為有效成分與 碳青霉烯類或多粘菌素抗生素類中的一種或多種抗生素的組合物，用于治療多重耐藥細 菌。
[0010] 特別是，多重耐藥細菌是產生碳青霉烯酶的NDM-1陽性細菌。例如，多重耐藥細菌 可以是革蘭氏陰性菌，包括但不限于肺炎克雷伯菌。
[0011] 優選地，所述碳青霉烯選自美羅培南、厄他培南、多尼培南、帕尼培南/倍他米隆 和比阿培南。
[0012] 優選地，所述多粘菌素抗生素選自硫酸粘菌素和多粘菌素 E甲磺酸鈉 (colistimethate sodium)(粘桿菌素甲基橫酸鈉 （colistin methanesulfonate sodium)、 粘桿菌素甲基橫酸鈉 （colistin sulfomethate sodium))。
[0013] 富里酸或其鹽、酯或衍生物的pH值可以為從酸性到堿性的任何pH值，盡管其pH 值通常是從酸性到中性。富里酸可以是緩沖至適當的pH值的溶液的形式。優選地，富里酸 是酸或鹽的形式，例如鉀鹽。
[0014] 優選的富里酸是如W02007/125492中描述的碳水化合物衍生的富里酸（CHD-FA)。 在本公開中描述的富里酸的分子量不超過20, 000道爾頓，且低含量的元素鋁、汞、鎘、鉻和 鉛對于在人類和動物中的藥物用途是安全的。優選地，這些元素的含量都不超過20ppm。所 述富里酸可源自碳水化合物如糖類。優選的糖類為蔗糖、葡萄糖或果糖。
[0015] 可以將富里酸或其鹽、酯或衍生物或組合物配制成藥物劑型，尤其是液體、片劑、 膠囊、乳劑、凝膠或本領域技術人員已知的其它藥物劑型。
[0016] 根據本發明的另一個方面，提供了本發明的富里酸或其鹽、酯或衍生物或組合物 在制造用于治療或抑制個體中多重耐藥細菌的方法的藥物組合物中的用途，所述方法包括 對個體施用富里酸或其鹽、酯或衍生物或組合物。
[0017] 根據本發明的另一方面，提供了通過使用本發明的富里酸、或鹽、酯或其衍生物或 組合物而治療、殺死或抑制多重耐藥細菌生長的方法。
[0018] 特別是，治療、殺死或抑制多重耐藥細菌生長的方法可以通過對個體施用有效量 的本發明的富里酸或其鹽、酯或衍生物或組合物而在所述個體內進行。
[0019] 所述個體可以是人或非人類動物。
[0020] 特別是，多重耐藥細菌是產生碳青霉烯酶的NDM-1陽性細菌或超廣譜β內酰胺酶 (ESBL)耐藥細菌。例如，多重耐藥細菌可以是革蘭氏陰性菌，包括但不限于肺炎克雷伯菌或 大腸桿菌。
[0021] 施用可以是口服、靜脈注射、外用或任何其它合適的施用形式。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0022] 圖1顯示了在所有治療組中感染肺炎克雷伯菌（ATCC BAA2146，NDM-1+)后的平均 大腿荷載（thigh burden)。
[0023] 圖2顯示了在所有治療組中感染肺炎克雷伯菌（ATCC BAA2146，NDM-1+)后的大腿 荷載散點圖。
[0024] 發明詳述
[0025] 本文描述了富里酸作為有效成分用于治療多重耐藥細菌，特別是產生碳青霉烯酶 的NDM-1細菌或超廣譜β內酰胺酶（ESBL)耐藥細菌。此外，描述了富里酸作為有效成分 與碳青霉烯類或多粘菌素抗生素類中的一種或多種抗生素組合用于治療多重耐藥細菌，特 別是產生碳青霉烯酶的NDM-1細菌。
[0026] 2008年在肺炎克雷伯菌分離物中首次檢測到新德里金屬β-內酰胺酶-1(或 NDM-1)。然而，它后來在世界各地的細菌中被檢測出來，包括印度、巴基斯坦、英國、北美、日 本和巴西。通常，上述酶是由革蘭氏陰性菌如大腸桿菌、不動桿菌（Acinetobacter)和克雷 伯菌（Klebsiella)產生，但是，NDM-1基因可以通過基因水平轉移在不同的細菌菌株間傳 播，從而擴大了抗藥感染的發病率。尤其是革蘭氏陰性菌，它們的DNA片段的交換混雜，因 此抗性例如NDM-1抗性可以通過革蘭氏陰性菌群廣泛傳播。
[0027] 超廣譜β內酰胺酶（ESBL)是能水解廣譜頭孢菌素的β -內酰胺酶，廣譜頭孢菌素 為例如頭孢噻廂、頭孢曲松、頭孢他陡和氧亞氨基-內酰胺氨曲南（oxyimino-monobactam aztreonan)，它們都具有氧亞氨基側鏈（oxyimino side chain)。
[0028] NDM-1是使細菌對廣泛的β -內酰胺類抗生素如碳青霉烯家族的抗生素產生抗性 的酶。例如，碳青霉烯包括美羅培南、厄他培南、多尼培南、帕尼培南/倍他米隆和比阿培 南。不幸的是，這些抗生素目前是用于治療抗生素耐藥細菌感染的中流砥柱，因此這種抗性 基因是受到高度關注的原因。NDM-1蛋白質屬于β-內酰胺酶大家族，即碳青霉烯酶，且產 生碳青霉烯酶的細菌感染很難治療，因為幾乎沒有新的化合物能對抗這些多重耐藥細菌。 此外，由于希望避免抗性的廣泛發展，和通常碳雜青霉烯的口服生物利用度差這一事實，在 醫院里它們被選擇性地進行靜脈注射施用。
[0029] 已經被成功地用于抗產生碳青霉烯酶的多重耐藥細菌的碳青霉烯酶的一種替 代抗生素是粘菌素。粘菌素（或多粘菌素 Ε)是由多粘芽肥桿菌粘菌素變種（Bacillus polymyxa var. colistinus)的某些菌株產生的抗生素。其也是用于多重耐藥細菌如克雷 伯菌、銅綠假單胞菌（Pseudomonas aeruginosa)和不動桿菌的最后使用的抗生素，但不幸 的是對粘菌素的耐藥性已經被確定。粘菌素不會經由胃腸道吸收，因此必須予以靜脈注射。 此外，配量是復雜的。
[0030] 因此，可以口服使用的替代有效藥劑非常有利。
[0031] 富里酸是W02007/125492中描述的且通過其中描述的方法產生的富里酸，并且下 文中稱為CHD-FA。
[0032] 在本文所描述的第一項研究中，評估了富里酸抗若干多重耐藥細菌菌株的抗菌功 效。
[0033] 第二項研究評估了富里酸與來自碳青霉烯家族的抗生素一起抗NDM-1多重耐藥 細菌菌株的抗菌功效。
[0034] 以下實施例僅用于說明的目的，且不應解釋為以任何形式對本發明進行限制。
[0035] 實施例1 :富里酸的抗多重耐藥細菌的抗菌活性
[0036] 概要
[0037] 對CHD-FA體外抗多重耐藥腸桿菌（Enterobactenaceae)活性的功效進行評估。遞 送后，將CHD-FA有效成分于室溫下避光保存。
[0038] 方法
[0039] a)菌株
[0040] 對一系列多重耐藥腸桿菌菌株進行藥敏試驗。所用菌株的詳情列于表1中。
[0041] b)菌株的復活及生長
[0042] 通過在CLED瓊脂平板上傳代培養，所有菌株從-80°C下的長期存儲物恢復。然后， 將平板在空氣中于35-37°C下培養24小時。肉眼檢查以確保純凈和適當的菌落特征后，分 離物被認為適合使用。
[0043] 表1 :含NDM-1和KPC的腸桿菌菌株（研究1)
[0044]
【權利要求】
1. 富里酸或其鹽作為有效成分用于治療或抑制多重耐藥細菌。
2. 根據權利要求1所述的富里酸或其鹽，其中所述多重耐藥細菌是產生碳青霉烯酶的 NDM-1陽性細菌或超廣譜β內酰胺酶（ESBL)耐藥細菌。
3. 根據權利要求1或2所述的富里酸或其鹽，其中所述多重耐藥細菌是革蘭氏陰性菌， 包括但不限于肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae)或大腸桿菌（Escherichia coli)。
4. 包含富里酸或其鹽作為有效成分與來自碳青霉烯類或多粘菌素抗生素類中的一種 或多種抗生素的組合物，用于治療多重耐藥細菌。
5. 根據權利要求1-3中任一項所述的富里酸或其鹽，或根據權利要求4所述的組合物， 其中所述多重耐藥細菌是產生碳青霉烯酶的NDM-1陽性細菌。
6. 根據權利要求5所述的富里酸或其鹽或組合物，其中所述產生碳青霉烯酶的NDM-1 陽性細菌是革蘭氏陰性菌，包括但不限于肺炎克雷伯菌。
7. 根據權利要求4所述的組合物，其中所述碳青霉烯選自美羅培南、厄他培南、多尼培 南、帕尼培南/倍他米隆和比阿培南，且其中所述多粘菌素抗生素選自硫酸粘菌素和多粘 菌素 E甲橫酸鈉（包括粘桿菌素甲基橫酸鈉 （colistin methanesulfonate sodium)和粘 桿菌素甲基橫酸鈉 （colistin sulfomethate sodium))。
8. 根據權利要求1-3、5或6中任一項所述的富里酸或其鹽，或根據權利要求4-7中任 一項所述的組合物，其中所述富里酸或其鹽的pH值為從酸性到中性。
9. 根據權利要求1_3、5、6或8中任一項所述的富里酸或其鹽，或根據權利要求4-8中 任一項所述的組合物，其中所述富里酸是碳水化合物衍生的富里酸（CHD-FA)。
10. 根據權利要求1_3、5、6、8或9中任一項所述的富里酸或其鹽，或根據權利要求4-9 中任一項所述的組合物，其可配制成藥物劑型。
11. 根據權利要求10所述的富里酸或其鹽或組合物，其中所述藥物劑型是液體、片劑、 膠囊、乳劑、凝膠或本領域技術人員已知的其它藥物劑型。
12. 根據權利要求1_3、5、6或8-11中任一項所述的富里酸或其鹽，或根據權利要求 4-11中任一項所述的組合物在制造用于治療或抑制個體中多重耐藥細菌的方法的藥物組 合物中的用途，所述方法包括對所述個體施用所述富里酸或其鹽或組合物。
13. 通過使用權利要求1-3、5、6、或8-11中任一項所述的富里酸或其鹽，或根據權利要 求4-11中任一項所述的組合物，治療、殺死或抑制多重耐藥細菌生長的方法。
14. 根據權利要求13所述的方法，其中所述治療、殺死或抑制多重耐藥細菌生長是通 過施用有效量的所述富里酸或其鹽或所述組合物進行。
15. 根據權利要求12所述的用途或根據權利要求14所述的方法，其中所述個體是人或 非人類動物。
16. 根據權利要求12所述的用途或根據權利要求14或權利要求15所述的方法，其中 所述多重耐藥細菌是產生碳青霉烯酶的NDM-1陽性細菌或超廣譜β內酰胺酶（ESBL)耐藥 細菌。
17. 根據權利要求16所述的用途或方法，其中所述多重耐藥細菌是革蘭氏陰性菌，包 括但不限于肺炎克雷伯菌或大腸桿菌。
18. 根據權利要求12所述的用途或根據權利要求14或權利要求15所述的方法，其中 所述施用是口服、靜脈注射、外用或任何其它合適的施用形式。
【文檔編號】A61P31/04GK104203227SQ201380012421
【公開日】2014年12月10日 申請日期:2013年3月6日 優先權日:2012年3月7日
【發明者】斯蒂芬·威廉·雷弗斯, 彼得·沃恩 申請人:南徹森英國有限公司