一種治療糖尿病慢性并發癥的組合物的制作方法
【專利摘要】本發明涉及一種內服治療糖尿病慢性并發癥的醛糖還原酶抑制劑，該組合物有選自醛糖酶抑制作用與至少一種α-糖苷酶抑制作用的天然藥物，提供含有醛糖酶抑制作用與α糖苷酶抑制作用等雙重作用的組合物。本發明組合物通過臨床及藥理意外的發現，具備通過糖苷酶抑制降低餐后血糖、醛糖還原酶抑制作用，保護糖尿病患者視網膜，延緩糖尿病老年癡呆進程、改善糖尿病老年癡呆癥狀。
【專利說明】一種治療糖尿病慢性并發癥的組合物
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種內服治療糖尿病并發癥的醛糖還原酶抑制劑；屬天然藥物領域。【背景技術】
[0002]醛糖還原酶存在于人體神經、紅細胞、晶狀體、視網膜等組織器官中，在多元醇通路中催化血液中的葡萄糖生成山梨醇。山梨醇本身由于極性強不易通過細胞膜，在細胞內會形成蓄積，使細胞膜的通透性發生改變，并使細胞中Na+-K+-ATP酶活性下降，造成肌醇喪失，導致細胞代謝與功能的損害。醛糖還原酶是多元醇通路的關鍵限速酶。當血糖濃度維持在正常生理水平時，它并不激活，它對葡萄糖的親和力較低，此時葡萄糖很少轉化為山梨醇。在高血糖狀況下(如糖尿病)，己糖激酶被飽和，這時醛糖還原酶激活，促使體內的葡萄糖轉化為山梨醇。
[0003]山梨醇的增多使得果糖也隨之增多，果糖的聚集繼而抑制山梨醇脫氫酶的活性，使山梨醇分解減少。以上兩方面的作用使山梨醇在組織中大量堆積，它作為一種極性很強的化合物，不能自由出入細胞，造成細胞內的高滲狀態，從而造成細胞的滲透性水腫，同時細胞內山梨醇大量蓄積也可使Na+、K+-ATP酶活性下降，細胞中肌醇流失，從而導致細胞代謝與功能的損害，進而出現糖尿病并發癥等器官病變。
[0004]由于眼睛和神經細胞等組織內醛糖還原酶的含量較高，糖尿病病人體內高血糖的環境使這一通路很容易 被打開，造成對這些組織的病理損害，如糖尿病、白內障、神經病變、腎臟病變、視網膜病變、動脈粥樣硬化等糖尿病并發癥。
[0005]臨床需要能夠有效調控血糖濃度，并能改善糖尿病眼睛和神經細胞慢性并發癥的安全藥物。
【發明內容】
[0006]鐵皮石斛(PendrobiumofficinaleKiMuraetMigo’)為蘭科(Prchidaceaes)石斛屬多年生草本植物的新鮮或干燥莖。其味甘，性微寒，歸胃、腎經，具有養陰清熱、益胃生津的功效，用于熱病津傷，口干煩渴，胃陰不足，食少干嘔，病后虛熱不退，陰虛火旺，骨蒸勞熱，目暗不明，筋骨痿軟。《神農本草經》中記載:石斛“主傷中，除痹，下氣，補五臟，虛癆羸瘦，強陰，久服厚腸胃”。李時珍在《本草綱目》中評價鐵皮石斛“除痹，下氣，補五臟虛勞羸瘦，強陰益精，久服，厚腸胃，補內絕不足，平胃氣，長肌肉，益智除驚，輕身延年。”但一直以來，鐵皮石斛的藥用配伍不甚明確，常規的中藥材提取制備方法對石斛的藥用價值有較大破壞或遺失。
[0007]桑葉是衛生部公布的藥食同源物品，充分、合理、高效的利用藥食同源物質，可以防病治病，改善患者生活質量。
[0008]本發明的目的在于提供含有醛糖酶抑制劑的組合物，用于糖尿病患者控制血糖、同時延緩糖尿病慢性并發癥的進程。
[0009]本發明全部選用天然中草藥制成適當的藥物；還可以制成食品、保健食品、食品補充劑、或飲料。
[0010]本發明提供一種治療糖尿病慢性并發癥的組合物，由有效成分和藥學上可接受的載體組成，其特征在于:所述的有效成分是來自于下列原料制成的:至少一種醛糖酶還原抑制劑與至少一種α-糖苷酶抑制劑，所述組合物制劑α-糖苷酶抑制劑選自桑葉提取物、桑枝提取物或桑白皮提取物或荷葉提取物一種或兩種以上，所述組合物制劑醛糖還原酶抑制劑選自石斛、或石斛提取物或桑寄生、或槲寄生、或槐米、或知母一種或兩種以上。
[0011]所述的桑葉提取物中，桑葉提取物的桑葉總生物堿含量為15% — 35%、桑葉多糖含量為5%-25% ;石斛提取物中，石斛提取物是藥材洗凈，用不超過低溫50°C的水、或乙醇提取；不超過70°C低溫濃縮制成的。
[0012]優選的所述的桑葉、石斛提取物提取物中，石斛提取物是通過藥材洗凈，用不超過低溫50 V的水、醇提取；濾過、凍干固化而成的。[0013]本發明特別提供該組合物在制備治療糖尿病視網膜病中的應用。
[0014]本發明特別提供該組合物在制備治療糖尿病老年癡呆癥中的應用。
[0015]本發明并提供該組合物在制備治療糖尿病患者腎小管轉分化相關疾病的應用。
[0016]本發明特別提供該組合物在制備治療糖尿病患者腎臟間質成纖維細胞活化相關疾病的應用。
[0017]本發明組合物技術方案以石斛為君藥，桑葉為臣藥。君藥性味甘寒入胃生津；臣藥性味甘平，入肺經，疏散肺熱而潤燥；使肺金清肅，則金能生水，有利于口干口渴證的改善。二藥合用，石斛滋胃生津、桑葉潤肺燥、清肺熱。二藥相合，作用互濟互補達到共同改善消渴胃陰耗傷、肺燥的特殊病機，二藥配伍作用難得的協同性及作用的完備性。
[0018]本發明同時提供了基于α-糖苷酶抑制作用與醛糖還原酶抑制作用雙重作用的組合物，有效的改善了高血糖所帶來的引起人腦血管動脈粥樣硬化導致高血壓、高血脂，嚴重者發生心肌梗塞、腦梗塞等病理進程，從而防治糖尿病慢性并發癥。
[0019]本發明的技術效果:
實驗例:
桑葉-石斛提取物對糖尿病大鼠腎醛糖還原酶活性的影響
方法:用桑葉-石斛提取物和醒糖還原酶抑制劑螺旋已內酰脲(sorbinil)對糖尿病Wistar大鼠模型進行治療，并觀察腎組織腎醛糖還原酶(AR)活性、尿蛋白和Na+2K+2ATP酶活性的變化。
[0020]結果:糖尿病鼠模型組其腎醛糖還原酶活性顯著高于正常鼠組(P〈0.01)，使用螺旋已內酰脲(sorbinil)、桑葉-石斛提取物后醛糖還原酶活性明顯下降(P〈0.01))，與正常對照組相比較無顯著性差異(P>0.05)。治療8周末，兩個治療組尿蛋白水平與4周末相當，但糖尿病模型組尿蛋白明顯升高，遠高于兩個治療組(P〈0.01))，治療后兩組間無明顯差異(P>0.05)。用sorbinil和桑葉-石斛提取物治療后，Na+2K+2ATP酶活性顯著升高(與模型組相比P〈0.05))。結論:桑葉-石斛提取物可通過抑制糖尿病大鼠腎臟組織醛糖還原酶活性而發揮其防治效用。
[0021]1、實驗動物及分組
32只雄性Wistar大鼠隨機分出8只為正常對照組(以下稱正常組)；另24只用四氧喃唳(100 mg/ kg)誘發糖尿病，血糖值>11.0 mmol/ L，隨機分為糖尿病模型組、sorbinil治療組、桑葉-石斛提取物治療組。
[0022]sorbinil 用法為 IOmg.kg-1/ 天;
桑葉-石斛提取物由桑葉-石斛等中藥組成(錦州醫學院新藥開發中心制備)，每日灌服提取物混懸溶液10ml/kg，每毫升溶液中含生藥0.5g。
[0023]2、實驗方法
實驗開始第4、8周各測定血糖和尿蛋白I次，第16周時將大鼠斷頭處死，取腎臟剔除附著物，搗碎取勻漿，供測定AR活性用。
[0024]腎醛糖還原酶活性測定參照Maragoudakis法測定；即記錄NADPH在340nm處吸收光值下降IOU來表示酶活性。
[0025]其中使用兩種反應體系，反應體系I包括67mmol/L、pH6.2的Na-K磷酸緩沖液，10mmol/L的DL-甘油醛，5mmol/L的2-巰基乙醇，0.lmmol/L的NADPH和酶適量；實驗杯包括全部試劑，對照杯以雙蒸水代替底物DL2甘油醛。
[0026]反應體系II以0.lmmol/L的NADH代替NADPH，其余試劑同反應體系I。
[0027]測定組織勻漿酶活性，同時測定蛋白含量，一單位酶活性規定為Imin產生I μ moINADP+ (或NAD+)的酶量，各組織酶活性用比活性進行比較，比活性=酶單位/mg蛋白。
[0028]3、Na+2K+2ATP 酶活性測定:
取少量腎皮質和髓質，稱重后用組織勻漿緩沖液(含蔗糖0.2mmol/L、TriS2HC10.02mmol/L、pH7.40)，組織重量與組織勻漿緩沖液比為1: 40，在玻璃勻漿器中制備勻漿，直接用粗制腎組織勻漿加于酶反應管中(總量1.0ml)，反應液中各化合物濃度為:NaC1100、Mg2C122.5、KCL10、EDTA2.0、ATPNa21.0mmoI/L 或哇巴因 0.2mmol/L，37°C水浴中反應30min，速加無機磷顯色劑2.5ml (含0.02%孔雀綠、0.55%鑰酸銨和0.1%TWEEN220)，再加24%檸檬酸鈉0.2ml,室溫反應30min，用波長660nm比色測光密度，計算無機鹽含量，Na+2K+2ATP酶活性單位以每小時每克組織蛋白(g_lpro)產生的無機磷(Pi)含量(mmol)來表示，即mmolPi.g-lpr0.h_l。每次作標準曲線，各反應管均作復管。
[0029]統計學方法計量資料值以x±s表示，各配伍組樣本均數比較采用方差分析。
[0030]4、結果:
體重、血糖變化治療開始糖尿病鼠體重與正常鼠相當，治療8周結束時，糖尿病各組的體重明顯低于正常組，用2種藥物治療血糖無變化，糖尿病各組間體重無明顯差
巳
[0031]腎臟AR活性:
分別以還原型輔酶II (NADPH)和還原型輔酶I (NADH)測定腎臟的AR活性，結果見表1。
[0032]糖尿病鼠模型組其AR活性顯著高于正常組(P < 0.01)，使用sorbinil、桑葉-石斛提取物后AR活性明顯下降，與模型組相比，P值均〈0.01 ;雖然各治療組AR活性仍高于正常組 ，但與正常組相比較無顯著性差異(P > 0.05)。
[0033]表1:各組腎臟醛糖還原酶AR活性比較
【權利要求】
1.一種治療糖尿病慢性并發癥的組合物，由有效成分和藥學上可接受的載體組成，其特征在于:所述的有效成分是來自于下列原料制成的:至少一種α-糖苷酶抑制劑與至少一種醛糖酶還原抑制劑，所述組合物制劑中α-糖苷酶抑制劑選自桑葉提取物、桑枝提取物或桑白皮提取物或荷葉提取物一種或兩種以上，所述組合物制劑中醛糖還原酶抑制劑選自石斛、或石斛提取物或桑寄生、或槲寄生、或槐米、或知母一種或兩種以上。
2.根據權利要求1所述的一種治療糖尿病慢性并發癥的組合物，其特征在于:所述的桑葉提取物中，桑葉提取物的桑葉總生物堿含量為15% — 35%、桑葉多糖含量為5%-25%。
3.根據權利要求2所述的一種治療糖尿病慢性并發癥的組合物，其特征在于:所述的石斛提取物中，石斛提取物是藥材洗凈，用不超過低溫50°C的水、醇提取；不超過70°C低溫濃縮制成的。
4.根據權利要求2所述的一種治療糖尿病慢性并發癥的組合物，其特征在于:所述的石斛提取物中，石斛提取物是通過藥材洗凈，用不超過低溫50°C的水、醇提取；濾過、凍干固化而成的。
5.如權利要求1~3 中任意一項的一種治療糖尿病慢性并發癥的組合物在制備治療糖尿病視網膜病中的應用。
6.如權利要求1~3中任意一項的一種治療糖尿病慢性并發癥的組合物在制備治療糖尿病老年癡呆癥中的應用。
7.如權利要求1~3中任意一項的一種治療糖尿病慢性并發癥的組合物在制備治療糖尿病患者腎小管轉分化相關疾病的應用。
8.如權利要求1~3中任意一項的一種治療糖尿病慢性并發癥的組合物在制備治療糖尿病患者腎臟間質成纖維細胞活化相關疾病的應用。
【文檔編號】A61K36/8984GK103920151SQ201410168158
【公開日】2014年7月16日 申請日期:2014年4月25日 優先權日:2014年4月25日
【發明者】不公告發明人 申請人:錦州博澤醫藥科技開發有限公司