一種藥物組合物用于制備降脂保肝藥物的新用途
【專利摘要】本發明公開了一種藥物組合物用于降脂保肝的新用途，該藥物組合物由以下原料藥組成：黃芪200-400重量份，生地50-200重量份，三七6-60重量份，制大黃20-100重量份，衛矛80-280重量份，山萸肉40-150重量份，枳殼30-180重量份。該藥物組合物具有較好的降脂保肝的功效，可有效治療血脂異常和肝損傷引起的疾病，尤其對糖尿病引起的血脂紊亂和肝損傷有較好的療效。
【專利說明】一種藥物組合物用于制備降脂保肝藥物的新用途
【技術領域】
[0001]本發明屬于中藥應用領域，具體涉及一種藥物組合物用于降脂保肝的新用途。
【背景技術】
[0002]聞脂血癥是指血脂水平過聞，是心腦血管疾病的基本原因，也是聞血壓、誕心病、動脈粥樣硬化等疾病的誘因之一，嚴重威脅人類健康。研究表明，高脂血癥主要與膽固醇、動物脂肪攝入過多和脂代謝紊亂有關。目前，臨床上高脂血癥的治療藥物主要包括他汀類、貝特類、煙酸類和膽酸螯合劑。特別是他汀類和貝特類藥物，目前分別是降低血清總膽固醇和血清甘油三酯的首選藥物。但長期或大劑量服用此類藥物往往產生明顯的毒副作用，而且價格昂貴，對于長期服用的患者而言是一種沉重的經濟負擔。
[0003]目前，肝病在人類疾病譜中的重要性日益凸顯，脂肪性肝病(簡稱脂肪肝)已成為臨床常見的慢性病之一。研究表明，脂肪肝可以導致胰島素抵抗，并進一步發展為肝纖維化、肝硬化、甚至肝功能衰竭，嚴重威脅著人類的健康，已成為僅次于病毒性肝炎的第二大肝病，被公認為隱蔽性肝硬化的常見原因。目前，脂肪肝的治療藥物有多烯磷脂先酰膽堿、熊去氧膽酸、肌苷、還原型谷光甘肽、水飛素等，但大多數的化學合成藥短期治療效果不理想，長期服用又存在潛在的肝毒性的問題，所以對脂肪肝缺乏理想的治療藥物。 [0004]高脂血癥和脂肪肝通常互為因果，伴隨發病。近年來，我國脂肪肝和高脂血癥的發病率有逐年上升的趨勢，而且發病年齡有下降的趨勢。因此，研究新型的降脂保肝的藥物具有非常重要的意義。
【發明內容】
[0005]本發明的目的是提供一種現有治療糖尿病腎病的藥物組合物用于制備降脂保肝藥物的新用途，所述藥物組合物的原料藥組成為:黃芪200-400重量份，生地50-200重量份，三七6-60重量份，制大黃20-100重量份，衛矛80-280重量份，山萸肉40-150重量份，枳殼30-180重量份。
[0006]優選地，本發明所述藥物組合物的原料藥組成為:黃芪250-350重量份，生地80-160重量份，三七10-50重量份，制大黃30-90重量份，衛矛100-200重量份，山萸肉60-120重量份，枳殼50-150重量份。
[0007]更優選地，本發明所述藥物組合物的原料藥組成為:黃芪300重量份，生地120重量份，三七30重量份,制大黃60重量份,衛矛150重量份，山萸肉90重量份,積殼100重量份；或者
[0008]黃芪260重量份，生地150重量份，三七20重量份，制大黃80重量份，衛矛120重量份，山萸肉110重量份,積殼60重量份；或者
[0009]黃苗340重量份，生地90重量份,三七50重量份,制大黃40重量份,衛矛180重量份，山萸肉70重量份，積殼140重量份。
[0010]本發明所述藥物組合物加入常規輔料，按照常規工藝，制成臨床上可接受的片劑、膠囊劑、散劑、合劑、丸劑、顆粒劑、糖漿劑、貼膏劑、栓劑、氣霧劑、軟膏劑或注射劑。
[0011]本發明所述藥物組合物由以下方法制成:按照選定的重量份數取黃芪、生地、三七、制大黃、衛矛、山萸肉和枳殼加水煎煮或者加乙醇提取，合并提取液，減壓濃縮得稠膏；并按照常規工藝，加入常規輔料制成臨床上可接受的片劑、膠囊劑、散劑、合劑、丸劑、顆粒劑、糖漿劑、貼膏劑、栓劑、氣霧劑、軟膏劑或注射劑；或者
[0012]按照選定的重量份數取黃芪、生地、制大黃、衛矛、山萸肉和枳殼加水煎煮或者加乙醇提取，合并提取液，減壓濃縮得稠膏；并取選定重量份數的三七，打粉后與稠膏混勻，并按照常規工藝，加入常規輔料制成臨床上可接受的片劑、膠囊劑、散劑、合劑、丸劑、顆粒劑、糖漿劑、貼膏劑、栓劑、氣霧劑、軟膏劑或注射劑。
[0013]本發明所述藥物組合物由以下方法制成:按照選定的重量份數取黃芪、生地、三七、制大黃、衛矛、山萸肉和枳殼七味中藥，加水煎煮1-4次，每次加8-12重量倍量，煎煮
0.5-2.0小時，合并煎煮液，濾過，減壓濃縮得稠膏；按照常規工藝，加入常規輔料制成臨床可接受的劑型；或者
[0014]按照選定的重量份數取黃芪、生地、制大黃、衛矛、山萸肉和枳殼，加水煎煮1-4次，每次加8-12重量倍量，煎煮0.5-2.0小時，合并煎煮液，濾過，減壓濃縮得稠膏；并取選定重量份數的三七，打粉后與稠膏混勻，按照常規工藝，加入常規輔料制成臨床可接受的劑型。
[0015]本發明所述藥物組合物由以下方法制成:按照選定的重量份數取黃芪、生地、三七、制大黃、衛矛、山萸肉和枳殼，加水提取1-4次，每次加水8-30重量倍，提取0.5-3小時；所述水提取液濾過，濾液通過大孔樹脂，先用4-6倍量水或20%以下濃度的乙醇洗脫，洗脫液棄取，再用10-90%乙醇1-10倍洗脫，收集洗脫液，減壓回收乙醇至無醇味，得純化提取液；按照常規工藝，加入常規輔料制成臨床可接受的劑型。
[0016]本發明所述藥物組合物由以下方法制成:按照選定的重量份數取黃芪、生地、三七、制大黃、衛矛、山萸肉和枳殼，加5-100%的乙醇提取1-4次，每次加4-15重量倍，提取
0.5-2小時；所述醇提取液濾過，濾液通過大孔樹脂，先用4-6倍量水或20%以下濃度的乙醇洗脫，洗脫液棄取，再用10-90%乙醇1-10倍洗脫，收集洗脫液，減壓回收乙醇至無醇味，得純化提取液；按照常規工藝，加入常規輔料制成臨床可接受的劑型。
[0017]本發明所述降脂保肝是指由糖尿病引起的脂代謝紊亂及肝功能異常癥狀。
[0018]本發明所述糖尿病為I型或II型糖尿病。
[0019]所述藥學上可接受的輔料為:填充劑、崩解劑、潤滑劑、助懸劑、粘合劑、甜味劑、矯味劑、防腐劑、基質等。填充劑包括:淀粉、預膠化淀粉、乳糖、甘露醇、甲殼素、微晶纖維素、蔗糖等；崩解劑包括:淀粉、預膠化淀粉、微晶纖維素、羧甲基淀粉鈉、交聯聚乙烯吡咯烷酮、低取代羥丙纖維素、交聯羧甲基纖維素納等；潤滑劑包括:硬脂酸鎂、十二烷基硫酸鈉、滑石粉、二氧化硅等；助懸劑包括:聚乙烯吡咯烷酮、微晶纖維素、蔗糖、瓊脂、羥丙基甲基纖維素等；粘合劑包括，淀粉漿、聚乙烯吡咯烷酮、羥丙基甲基纖維素等；甜味劑包括:糖精鈉、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等；矯味劑包括:甜味劑及各種香精；防腐劑包括:尼泊金類、苯甲酸、苯甲酸鈉、山梨酸及其鹽類、苯扎溴銨、醋酸氯乙定、桉葉油等；基質包括:PEG6000、PEG4000、蟲蠟等。
[0020]本發明所述藥物組合物具有較好的降脂保肝的功效，可有效治療血脂異常和肝損傷引起的疾病，尤其對糖尿病引起的血脂紊亂和肝損傷有較好的療效。
[0021 ] 下述實驗例和實施例用于進一步說明本發明但不限于本發明。
[0022]實驗例1:本發明藥物組合物治療2型糖尿病血脂異常和肝損傷的療效研究
[0023]一、材料及方法
[0024]1.實驗材料
[0025]1.1 動物
[0026]自發性2型糖尿病模型db/db小鼠,雄性，10周齡,體35g±5g,同周齡和性別的不發病db/m小鼠，體重20g±2g，動物許可證號:SCXK (京)2012-0001，飼養于中日友好醫院SPF級實驗動物室，許可證號:SYXK(京)2010-0011。實驗期間，小鼠給予普通飼料(中國醫學科學院實驗動物研究所提供)，自由飲水、進食。
[0027]1.2藥物與試劑
[0028]供試品藥物組合物按照以下方法制備本發明藥物組合物提取物，即為:黃芪300g，生地120g,三七30g,制大黃60g,衛矛150g,山萸肉90g,枳殼10g加水煎煮2次，每次加10倍量，煎煮I小時，合并提取液，減壓濃縮得稠膏。干燥，粉碎，得干粉；以蒸餾水按
1.60g/kg的給藥劑量配制成溶液，4°C保存，有效期3天，灌胃給藥前取出放置至室溫。 [0029]1.3主要試劑
[0030]血糖試紙:強生公司
[0031]水合氯醛:北京化學試劑公司
[0032]甲醛溶液:國藥集團化學試劑有限公司，分析純
[0033]2.實驗方法
[0034]2.1分組與給藥
[0035]實驗動物購入順應性喂養3天，進行體重、空腹血糖的基礎狀態測定，db/db小鼠隨機分為5組，db/m作為正常對照組，實驗具體分組及給藥方案如表1所示，所有動物從分組后第I天開始灌胃給藥，每日I次，連續給藥12周。實驗期間大鼠自由飲食飲水。
[0036]表1實驗例I的動物分組及給藥情況
[0037]
_m\_只數(η)干預措施_刑量
正常對照組(db/m)9蒸飽水20ml/kg/day
模型組(db/db)9蒸餾水20ml/kg/day
本發明藥物組合物組 9 本發明藥物組 2.4g,/kg/day(db/db+本發明藥物組合物) 合物 (相當于生藥12.75_g/kg/day)_
[0038]2.標本采集與指標檢測
[0039]2.1標本采集[0040]各實驗組小鼠在實驗第0，4，8，12周時，禁食12小時，尾尖采血測空腹血糖。實驗取材前動物禁食12h，眼內眥靜脈叢取血，3000轉/分離心分離血清。將肝臟稱重記錄重量，部分固定于10%中性甲醛溶液中進行組織病理學檢查，其余部分置液氮中保存。
[0041]2.2體重及一般狀態
[0042]實驗期間動物每周稱重I次，密切觀察動物精神狀態、活動、毛發變化及飲食飲水情況。
[0043]2.3血生化指標
[0044]用血糖儀(強生倍易型，美國)測定各時間點小鼠空腹血糖值。取實驗結束時分離的血清樣本，用全自動血生化分析儀測定血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)及低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)。
[0045]2.4肝功能
[0046]2.5肝組織病理改變:
[0047]腎組織固定于10%中性甲醛溶液24h以上，脫水，包埋，切片，進行PAS染色，光鏡下觀察肝組織病理改變。肝細胞脂肪變程度判斷標準參照1999年Brunt等提出的分級方法，根據肝細胞脂肪含量將 脂肪變性評分為0-3分(無，O分；〈33%，I分；33% — 66%，2分；>66%, 3 分)。
[0048]3.統計學處理
[0049]所有計量資料以均數土標準差(X士S)表示，應用統計軟件SPSS13.0進行One-Way ANOVA單因素方差分析，組間兩兩比較采用LSD檢驗，P < 0.05表示組間差異有統計學意義。
[0050]二、實驗結果
[0051]1.一般狀態
[0052]實驗過程中，db/m組小鼠健康狀態良好，進食、飲水均正常，毛色光澤；模型組db/db小鼠飲食飲水量明顯增多，活動減少，精神稍萎靡，被毛蓬松無光澤。
[0053]2.體重變化
[0054]自實驗O周至實驗12周，db/db小鼠體重顯著高于db/m對照組，p〈0.001 ;自實驗第7周至12周，本發明藥物組合物能夠顯著減輕模型小鼠體重。結果見圖1。
[0055]3.小鼠血糖變化
[0056]模型組db/db小鼠空腹血糖水平在整個實驗期間與正常對照組db/m小鼠相比，均顯著升高，P〈0.05。本發明藥物組合物治療組對空腹血糖水平無改善作用。結果見圖2。
[0057]4.小鼠血脂水平的變化
[0058]與db/m小鼠比，db/db小鼠血清TC和LDL-C均顯著升高，本發明藥物組合物治療后小鼠血清TC合LDL-C顯著降低，有統計學意義，說明本發明藥物組合物具有降血脂作用。結果見圖3。
[0059]5.小鼠肝功能的變化
[0060]與db/m小鼠比，db/db小鼠血清谷氨酸丙酮酸轉氨酶(ALT)和門冬氨酸氨基轉移酶(AST)水平顯著升高，均為p〈0.01。本發明藥物組合物治療后ALT和AST均顯著下降，說明本發明藥物組合物具有保護肝功能的作用。結果見圖4。
[0061]6.小鼠肝臟病理的變化[0062]實驗12周小鼠肝臟病理圖片(HE染色和油紅O染色)見圖5和6。HE染色結果表明，光鏡下，db/m對照組肝小葉結構清晰完整，肝細胞索以中央靜脈為中心呈放射狀排列，肝細胞分界清楚，細胞中央有大而圓的核，細胞質均勻，未見明顯炎性細胞浸潤、脂肪變肝細胞及纖維組織異常增生。db/db模型組肝細胞索排列紊亂，肝細胞腫脹，體積較正常增大，嚴重者胞質疏松，且匯管區及中央靜脈周圍脂肪變性明顯。本發明藥物組合物治療組肝小葉結構完整，肝細胞排列尚整齊，肝細胞無明顯脂肪變性。脂肪病變程度評分見圖5。
[0063]油紅O染色結果表明，db/m對照組肝組織無油紅O著色，說明肝臟沒有脂質沉積；與之相比，db/db小鼠肝組織大量油紅沉積，而本發明藥物組合物治療后脂滴變小，數量變少，說明本發明藥物組合物能夠顯著減少肝臟脂質沉積。結果見圖6。
[0064]實驗例2:本發明藥物組合物治療2型糖尿病脂代謝紊亂和肝損傷的療效研究
[0065]一、材料及方法
[0066]1.實驗動物
[0067]SPF級雄性Wistar大鼠，6周齡，體重160_180g，北京華阜康實驗動物技術有限公司提供，合格證號:SCXK(京)2010-0001飼養于中日友好醫院動物室屏障系統,許可證號:SYXK(京)2010-0011。實驗期間，大鼠給予普通飼料(中國醫學科學院實驗動物研究所提供)，自由飲水、進食。
[0068]2.實驗藥物
[0069]供試品藥物組合物按照以下方法制備本發明提取物，即為:黃芪300g，生地120g，三七30g，制大黃60g，衛矛150g，山萸肉90g，枳殼10g加水煎煮2次，每次加10倍量，煎煮I小時，合并提取液，減壓濃縮得稠膏，干燥，粉碎，得干粉；以蒸餾水按1.33g/kg和2.67g/kg的給藥劑量配制成兩種不同濃度的溶液，4°C保存，有效期3天，灌胃給藥前取出放置至室溫。
[0070]3.主要試劑
[0071]鏈脲佐菌素:美國Sigma公司，其他試劑與儀器同實驗例I。
[0072]4.實驗動物模型的建立
[0073]動物購入后適應性喂養3天，進行基礎狀態測定，剔除血糖與尿蛋白異常的動物3只，其余動物先按體重隨機分為正常組(η = 10)和模型組(η = 22)。正常組大鼠給予普通飼料，模型組大鼠給予高脂飼料，5周后，正常組和模型組大鼠每組取4周進行胰島素鉗夾實驗確認胰島素抵抗的發生，模型組大鼠以25mg/kg體重的劑量給予I %的鏈脲佐菌素(STZ)(以ρΗ4.2-4.5的0.1M檸檬酸緩沖液配制)腹腔注射，72h后測定血糖，大于16.7mM視為造模成功。
[0074]5.分組與給藥
[0075]造模成功動物20只，按體重和血糖隨機分為模型組，發明提取物治療組各10只，具體分組與給藥方案如表2。
[0076]表2實驗例2的動物分組及給藥情況
[0077]
【權利要求】
1.一種藥物組合物用于制備降脂保肝藥物的應用，其特征在于，所述藥物組合物的原料藥組成為:黃芪200-400重量份，生地50-200重量份，三七6_60重量份，制大黃20-100重量份，衛矛80-280重量份，山萸肉40-150重量份，枳殼30-180重量份。
2.如權利要求1所述的應用，其特征在于:所述藥物組合物的原料藥組成為:黃芪250-350重量份，生地80-160重量份，三七10-50重量份，制大黃30-90重量份，衛矛100-200重量份，山萸肉60-120重量份，枳殼50-150重量份。
3.如權利要求2所述的應用，其特征在于:所述藥物組合物的原料藥組成為: 黃芪300重量份，生地120重量份，三七30重量份，制大黃60重量份，衛矛150重量份，山萸肉90重量份,積殼100重量份；或者 黃芪260重量份，生地150重量份，三七20重量份，制大黃80重量份，衛矛120重量份，山萸肉110重量份,積殼60重量份；或者 黃苗340重量份,生地90重量份,三七50重量份,制大黃40重量份,衛矛180重量份，山萸肉70重量份，枳殼140重量份。
4.如權利要求1-3任一所述的應用，其特征在于:所述藥物組合物加入常規輔料，按照常規工藝，制成臨床上可接受的片劑、膠囊劑、散劑、合劑、丸劑、顆粒劑、糖漿劑、貼膏劑、栓劑、氣霧劑、軟膏劑或注射劑。
5.如權利要求1-4任一所述的應用，其特征在于，所述藥物組合物由以下方法制成:按照選定的重量份數取黃苗、生地、三七、制大黃、衛矛、山萸肉和枳殼加水煎煮或者加乙醇提取，合并提取液，減壓濃縮得稠膏；并按照常規工藝，加入常規輔料制成臨床上可接受的片齊?、膠囊劑、散劑、合劑、丸劑、顆粒劑、糖漿劑、貼膏劑、栓劑、氣霧劑、軟膏劑或注射劑；或者 按照選定的重量份數取黃芪、生地、制大黃、衛矛、山萸肉和枳殼加水煎煮或者加乙醇提取，合并提取液，減壓濃縮得稠膏；并取選定重量份數的三七，打粉后與稠膏混勻，并按照常規工藝，加入常規輔料制成臨床上可接受的片劑、膠囊劑、散劑、合劑、丸劑、顆粒劑、糖漿劑、貼膏劑、栓劑、氣霧劑、軟膏劑或注射劑。
6.如權利要求5所述的應用，其特征在于，所述藥物組合物由以下方法制成:按照選定的重量份數取黃芪、生地、三七、制大黃、衛矛、山萸肉和枳殼，加水煎煮1-4次，每次加8-12重量倍量，煎煮0.5-2.0小時，合并煎煮液，濾過，減壓濃縮得稠膏；按照常規工藝，加入常規輔料制成臨床可接受的劑型；或者按照選定的重量份數取黃芪、生地、制大黃、衛矛、山萸肉和枳殼，加水煎煮1-4次，每次加8-12重量倍量，煎煮0.5-2.0小時，合并煎煮液，濾過，減壓濃縮得稠膏；并取選定重量份數的三七，打粉后與稠膏混勻，按照常規工藝，加入常規輔料制成臨床可接受的劑型。
7.如權利要求5所述的應用，其特征在于，所述藥物組合物由以下方法制成:按照選定的重量份數取黃芪、生地、三七、制大黃、衛矛、山萸肉和枳殼，加水提取1-4次，每次加水8-30重量倍，提取0.5-3小時；所述水提取液濾過，濾液通過大孔樹脂，先用4-6倍量水或20%以下濃度的乙醇洗脫，洗脫液棄取，再用10-90 %乙醇1-10倍洗脫，收集洗脫液，減壓回收乙醇至無醇味，得純化提取液；按照常規工藝，加入常規輔料制成臨床可接受的劑型。
8.如權利要求5所述的應用，其特征在于，所述藥物組合物由以下方法制成:按照選定的重量份數取黃芪、生地、三七、制大黃、衛矛、山萸肉和枳殼，加5-100%的乙醇提取1-4次，每次加4-15重量倍，提取0.5-2小時；所述醇提取液濾過，濾液通過大孔樹脂，先用4-6倍量水或20%以下濃度的乙醇洗脫，洗脫液棄取，再用10-90%乙醇1-10倍洗脫，收集洗脫液，減壓回收乙醇至無醇味，得純化提取液；按照常規工藝，加入常規輔料制成臨床可接受的劑型。
9.如權利要求1-8任一所述的應用，其特征在于，所述降脂保肝是指由糖尿病引起的脂代謝紊亂及肝功能異常癥狀。
10.如權利要 求9所述的應用，其特征在于，所述糖尿病為I型或II型糖尿病。
【文檔編號】A61P3/00GK104027458SQ201410208380
【公開日】2014年9月10日 申請日期:2014年5月16日 優先權日:2014年5月16日
【發明者】李平 申請人:中日友好醫院