本公開提供了與抗-cxcr3抗體相關或源自抗-cxcr3抗體的組合物和方法。更具體地，本公開提供了結合cxcr3的人抗體、cxcr3-結合片段和這類片段的衍生物及包含這類片段的cxcr3-結合多肽。再進一步地，本公開提供了編碼這類抗體、抗體片段和衍生物及多肽的核酸，包含這類多核苷酸的細胞，制備這類抗體、抗體片段和衍生物及多肽的方法，及使用這類抗體、抗體片段和衍生物及多肽的方法，包括治療或診斷患有cxcr3相關障礙和病癥(包括各種炎性障礙和各種癌癥)的受試者的方法。
背景技術：
：c-x-c趨化因子受體-3(cxcr3)在某些白細胞(如活化t細胞和nk細胞)上表達。cxcr3受體結合配體如干擾素γ誘導的10kd蛋白(ip-10)、γ干擾素誘導的單核因子(mig；mig)、干擾素誘導的t-細胞α化學引誘物(i-tac)和b細胞吸引趨化因子(bca-1)。某些形式的cxcr3也結合血小板因子-4(pf-4,lasagni等,j.exp.med.197:1537-1549,2003)。一些cxcr3配體(ip-10、mig和i-tac)的表達在組織中通過干擾素或腫瘤壞死因子(炎癥的強力介質)誘導(farber,j.m.j.leukoc.biol.61:246-257',2007；piali等eur.j.immunol.28:961-972,1998和cole等j.exp.med.187:2009-2021,1998)。由于這些發現，已經推測在炎癥過程中，cxcr3的配體的表達上調，導致cxcr3+淋巴細胞募集到發炎的組織中。浸潤的cxcr3+淋巴細胞可造成炎癥的不利病理作用。因此，抑制cxcr3的活性可具有有益的抗炎作用。因此，存在著對抑制cxcr3功能的治療劑的需要。趨化因子與其受體之間的相互作用是白細胞遷移的控制中的重要步驟。趨化因子也介導多種不依賴于趨化性的作用，包括細胞相關細胞因子反應的誘導和增強。人細胞表面蛋白cd183是具有對三種趨化因子(包括ip10(干擾素-γ-誘導的10kda蛋白)、mig(干擾素-γ-誘導的單核因子)和i-tac(干擾素誘導的t細胞ot-化學引誘物))的選擇性的g蛋白偶聯受體。這三種趨化因子屬于"cxc"趨化因子的結構亞族，其中單一氨基酸殘基分隔四個高度保守的cys殘基中的前兩個。歷史上，cd183是第三個發現的cxc趨化因子受體，且因此cd183通常稱為"cxcr3"。趨化因子與cxcr3的結合誘導參與白細胞遷移、最顯著地整聯蛋白激活、細胞骨架變化和趨化遷移的細胞反應。cxcr3在效應/記憶t細胞上和/或許多類型的發炎組織中存在的t細胞(例如，t-輔助1細胞或th1細胞和cd8+tc1細胞)中表達。另外，ip10、mig和i-tac通常通過炎性病灶中的局部細胞產生，表明cxcr3及其趨化因子參與白細胞到炎癥部位的募集。因此，cxcr3是開發可以用于多樣的炎癥及免疫疾病和障礙如類風濕性關節炎、多發性硬化、克羅恩氏病、炎性腸病、慢性阻塞性肺病、銀屑病、1型糖尿病和移植排斥的治療和診斷的抗體和拮抗劑的靶標。因為cxcr3在b-細胞淋巴瘤的亞組上表達，cxcr3也可以是用于治療和診斷淋巴瘤和白血病的靶標。因此，本領域中存在著對于可用作治療劑的改進的抗-cxcr3抗體的需要。技術實現要素：本公開提供了以至少10-6m的結合親和力結合cxcr3表位的igg類的全人抗體，其具有與選自以下的氨基酸序列至少95％同一的重鏈可變域序列：seqidno.1、seqidno.3、seqidno.5、seqidno.7、seqidno.9、seqidno.11、seqidno.13、seqidno.15、seqidno.17、seqidno.19、seqidno.21、seqidno.23、seqidno.25、seqidno.27、seqidno.29、seqidno.31、seqidno.33及其組合，且具有與選自以下的氨基酸序列至少95％同一的輕鏈可變域序列：seqidno.2、seqidno.4、seqidno.6、seqidno.8、seqidno.10、seqidno.12、seqidno.14、seqidno.16、seqidno.18、seqidno.20、seqidno.22、seqidno.24、seqidno.26、seqidno.28、seqidno.30、seqidno.32、seqidno.33、seqidno.34、seqidno.35、seqidno.36、seqidno.37及其組合。優選地，該全人抗體具有重鏈和輕鏈兩者，其中所述抗體具有選自以下的重鏈/輕鏈可變域序列：seqidno.1/seqidno.2(本文中稱為32b12)、seqidno.3/seqidno.4(本文中稱為32d12)、seqidno.5/seqidno.6(本文中稱為h1)、seqidno.7/seqidno.8(本文中稱為b7)、seqidno.9/seqidno.10(本文中稱為c12)、seqidno.11/seqidno.12(本文中稱為d12)、seqidno.13/seqidno.14(本文中稱為e1)、seqidno.15/seqidno.16(本文中稱為g12)、seqidno.17/seqidno.18(本文中稱為3a3)、seqidno.19/seqidno.20(本文中稱為3a5)、seqidno.21/seqidno.22(本文中稱為3a11)、seqidno.23/seqidno.24(本文中稱為3b12)、seqidno.25/seqidno.26(本文中稱為3c11)、seqidno.27/seqidno.28(本文中稱為4c3)、seqidno.29/seqidno.30(本文中稱為b12)、seqidno.31/seqidno.32(本文中稱為c4)、seqidno.31/seqidno.33(本文中稱為f7)、seqidno.31/seqidno.34(本文中稱為2a3)、seqidno.31/seqidno.35(本文中稱為3a7)、seqidno.31/seqidno.36(本文中稱為3a8)、seqidno.31/seqidno.37(本文中稱為4d5)及其組合。本公開提供了全人抗體fab片段，其具有來自重鏈的可變域區域和來自輕鏈的可變域區域，其中所述重鏈可變域序列與選自以下的氨基酸序列至少95％同一：seqidno.1、seqidno.3、seqidno.5、seqidno.7、seqidno.9、seqidno.11、seqidno.13、seqidno.15、seqidno.17、seqidno.19、seqidno.21、seqidno.23、seqidno.25、seqidno.27、seqidno.29、seqidno.31、seqidno.33及其組合，且具有與選自以下的氨基酸序列至少95％同一的輕鏈可變域序列：seqidno.2、seqidno.4、seqidno.6、seqidno.8、seqidno.10、seqidno.12、seqidno.14、seqidno.16、seqidno.18、seqidno.20、seqidno.22、seqidno.24、seqidno.26、seqidno.28、seqidno.30、seqidno.32、seqidno.33、seqidno.34、seqidno.35、seqidno.36、seqidno.37及其組合。優選地，全人抗體fab片段具有重鏈可變域區域和輕鏈可變域區域兩者，其中所述抗體具有選自以下的重鏈/輕鏈可變域序列：seqidno.1/seqidno.2、seqidno.3/seqidno.4、seqidno.5/seqidno.6、seqidno.7/seqidno.8、seqidno.9/seqidno.10、seqidno.11/seqidno.12、seqidno.13/seqidno.14、seqidno.15/seqidno.16、seqidno.17/seqidno.18、seqidno.19/seqidno.20、seqidno.21/seqidno.22、seqidno.23/seqidno.24、seqidno.25/seqidno.26、seqidno.27/seqidno.28、seqidno.29/seqidno.30、seqidno.31/seqidno.32、seqidno.31/seqidno.33、seqidno.31/seqidno.34、seqidno.31/seqidno.35、seqidno.31/seqidno.36、seqidno.31/seqidno.37及其組合。本公開提供了單鏈人抗體，其具有來自重鏈的可變域區域和來自輕鏈的可變域區域及連接所述重鏈和輕鏈可變域區域的肽接頭，其中所述重鏈可變域序列與選自以下的氨基酸序列至少95％同一：seqidno.1、seqidno.3、seqidno.5、seqidno.7、seqidno.9、seqidno.11、seqidno.13、seqidno.15、seqidno.17、seqidno.19、seqidno.21、seqidno.23、seqidno.25、seqidno.27、seqidno.29、seqidno.31、seqidno.33及其組合，且具有與選自以下的氨基酸序列至少95％同一的輕鏈可變域序列：seqidno.2、seqidno.4、seqidno.6、seqidno.8、seqidno.10、seqidno.12、seqidno.14、seqidno.16、seqidno.18、seqidno.20、seqidno.22、seqidno.24、seqidno.26、seqidno.28、seqidno.30、seqidno.32、seqidno.33、seqidno.34、seqidno.35、seqidno.36、seqidno.37及其組合。優選地，所述全人單鏈抗體具有重鏈可變域區域和輕鏈可變域區域兩者，其中所述單鏈全人抗體具有選自以下的重鏈/輕鏈可變域序列：seqidno.1/seqidno.2、seqidno.3/seqidno.4、seqidno.5/seqidno.6、seqidno.7/seqidno.8、seqidno.9/seqidno.10、seqidno.11/seqidno.12、seqidno.13/seqidno.14、seqidno.15/seqidno.16、seqidno.17/seqidno.18、seqidno.19/seqidno.20、seqidno.21/seqidno.22、seqidno.23/seqidno.24、seqidno.25/seqidno.26、seqidno.27/seqidno.28、seqidno.29/seqidno.30、seqidno.31/seqidno.32、seqidno.31/seqidno.33、seqidno.31/seqidno.34、seqidno.31/seqidno.35、seqidno.31/seqidno.36、seqidno.31/seqidno.37及其組合。本公開還提供了用于治療廣譜哺乳動物癌癥的方法，包括施用有效量的抗-cxcr3多肽，其中所述抗-cxcr3多肽選自以至少10-6m的結合親和力結合cxcr3表位的igg類的全人抗體、具有來自重鏈的可變域區域和來自輕鏈的可變域區域的全人抗體fab片段、具有來自重鏈的可變域區域和來自輕鏈的可變域區域及連接所述重鏈和輕鏈可變域區域的肽接頭的單鏈人抗體，及其組合；其中所述全人抗體具有與選自以下的氨基酸序列至少95％同一的重鏈可變域序列：seqidno.1、seqidno.3、seqidno.5、seqidno.7、seqidno.9、seqidno.11、seqidno.13、seqidno.15、seqidno.17、seqidno.19、seqidno.21、seqidno.23、seqidno.25、seqidno.27、seqidno.29、seqidno.31、seqidno.33及其組合，且具有與選自以下的氨基酸序列至少95％同一的輕鏈可變域序列：seqidno.2、seqidno.4、seqidno.6、seqidno.8、seqidno.10、seqidno.12、seqidno.14、seqidno.16、seqidno.18、seqidno.20、seqidno.22、seqidno.24、seqidno.26、seqidno.28、seqidno.30、seqidno.32、seqidno.33、seqidno.34、seqidno.35、seqidno.36、seqidno.37及其組合；其中所述全人抗體fab片段具有與選自以下的氨基酸序列至少95％同一的重鏈可變域序列：seqidno.1、seqidno.3、seqidno.5、seqidno.7、seqidno.9、seqidno.11、seqidno.13、seqidno.15、seqidno.17、seqidno.19、seqidno.21、seqidno.23、seqidno.25、seqidno.27、seqidno.29、seqidno.31、seqidno.33及其組合，且具有與選自以下的氨基酸序列至少95％同一的輕鏈可變域序列：seqidno.2、seqidno.4、seqidno.6、seqidno.8、seqidno.10、seqidno.12、seqidno.14、seqidno.16、seqidno.18、seqidno.20、seqidno.22、seqidno.24、seqidno.26、seqidno.28、seqidno.30、seqidno.32、seqidno.33、seqidno.34、seqidno.35、seqidno.36、seqidno.37及其組合；和其中所述單鏈人抗體具有與選自以下的氨基酸序列至少95％同一的重鏈可變域序列：seqidno.1、seqidno.3、seqidno.5、seqidno.7、seqidno.9、seqidno.11、seqidno.13、seqidno.15、seqidno.17、seqidno.19、seqidno.21、seqidno.23、seqidno.25、seqidno.27、seqidno.29、seqidno.31、seqidno.33及其組合，且具有與選自以下的氨基酸序列至少95％同一的輕鏈可變域序列：seqidno.2、seqidno.4、seqidno.6、seqidno.8、seqidno.10、seqidno.12、seqidno.14、seqidno.16、seqidno.18、seqidno.20、seqidno.22、seqidno.24、seqidno.26、seqidno.28、seqidno.30、seqidno.32、seqidno.33、seqidno.34、seqidno.35、seqidno.36、seqidno.37及其組合。優選地，所述全人抗體具有重鏈和輕鏈兩者，其中所述抗體具有選自以下的重鏈/輕鏈可變域序列：seqidno.1/seqidno.2(本文中稱為32b12)、seqidno.3/seqidno.4(本文中稱為32d12)、seqidno.5/seqidno.6(本文中稱為h1)、seqidno.7/seqidno.8(本文中稱為b7)、seqidno.9/seqidno.10(本文中稱為c12)、seqidno.11/seqidno.12(本文中稱為d12)、seqidno.13/seqidno.14(本文中稱為e1)、seqidno.15/seqidno.16(本文中稱為g12)、seqidno.17/seqidno.18(本文中稱為3a3)、seqidno.19/seqidno.20(本文中稱為3a5)、seqidno.21/seqidno.22(本文中稱為3a11)、seqidno.23/seqidno.24(本文中稱為3b12)、seqidno.25/seqidno.26(本文中稱為3c11)、seqidno.27/seqidno.28(本文中稱為4c3)、seqidno.29/seqidno.30(本文中稱為b12)、seqidno.31/seqidno.32(本文中稱為c4)、seqidno.31/seqidno.33(本文中稱為f7)、seqidno.31/seqidno.34(本文中稱為2a3)、seqidno.31/seqidno.35(本文中稱為3a7)、seqidno.31/seqidno.36(本文中稱為3a8)、seqidno.31/seqidno.37(本文中稱為4d5)及其組合。優選地，全人抗體fab片段具有重鏈可變域區域和輕鏈可變域區域兩者，其中所述抗體具有選自以下的重鏈/輕鏈可變域序列：seqidno.1/seqidno.2(本文中稱為32b12)、seqidno.3/seqidno.4(本文中稱為32d12)、seqidno.5/seqidno.6(本文中稱為h1)、seqidno.7/seqidno.8(本文中稱為b7)、seqidno.9/seqidno.10(本文中稱為c12)、seqidno.11/seqidno.12(本文中稱為d12)、seqidno.13/seqidno.14(本文中稱為e1)、seqidno.15/seqidno.16(本文中稱為g12)、seqidno.17/seqidno.18(本文中稱為3a3)、seqidno.19/seqidno.20(本文中稱為3a5)、seqidno.21/seqidno.22(本文中稱為3a11)、seqidno.23/seqidno.24(本文中稱為3b12)、seqidno.25/seqidno.26(本文中稱為3c11)、seqidno.27/seqidno.28(本文中稱為4c3)、seqidno.29/seqidno.30(本文中稱為b12)、seqidno.31/seqidno.32(本文中稱為c4)、seqidno.31/seqidno.33(本文中稱為f7)、seqidno.31/seqidno.34(本文中稱為2a3)、seqidno.31/seqidno.35(本文中稱為3a7)、seqidno.31/seqidno.36(本文中稱為3a8)、seqidno.31/seqidno.37(本文中稱為4d5)及其組合。優選地，所述全人單鏈抗體具有具有重鏈可變域區域和輕鏈可變域區域兩者，其中所述單鏈全人抗體具有選自以下的重鏈/輕鏈可變域序列：seqidno.1/seqidno.2、seqidno.3/seqidno.4、seqidno.5/seqidno.6、seqidno.7/seqidno.8、seqidno.9/seqidno.10、seqidno.11/seqidno.12、seqidno.13/seqidno.14、seqidno.15/seqidno.16、seqidno.17/seqidno.18、seqidno.19/seqidno.20、seqidno.21/seqidno.22、seqidno.23/seqidno.24、seqidno.25/seqidno.26、seqidno.27/seqidno.28、seqidno.29/seqidno.30、seqidno.31/seqidno.32、seqidno.31/seqidno.33、seqidno.31/seqidno.34、seqidno.31/seqidno.35、seqidno.31/seqidno.36、seqidno.31/seqidno.37及其組合。優選地，待治療的廣譜哺乳動物癌癥是cxcr3-陽性癌癥。優選地，待治療的廣譜哺乳動物癌癥選自白血病、淋巴瘤、癌瘤(cancinomas)、前列腺癌、非小細胞肺癌、乳腺癌、子宮內膜癌、卵巢癌、胃癌、頭頸癌、黑素瘤、骨肉瘤、腸和結腸癌，及各種轉移性癌。本公開還提供了用于治療炎性障礙的方法，包括施用有效量的抗-cxcr3多肽，其中所述抗-cxcr3多肽選自以至少10-6m的結合親和力結合cxcr3表位的igg類的全人抗體、具有來自重鏈的可變域區域和來自輕鏈的可變域區域的全人抗體fab片段、具有來自重鏈的可變域區域和來自輕鏈的可變域區域及連接所述重鏈和輕鏈可變域區域的肽接頭的單鏈人抗體，及其組合；其中所述全人抗體具有與選自以下的氨基酸序列至少95％同一的重鏈可變域序列：seqidno.1、seqidno.3、seqidno.5、seqidno.7、seqidno.9、seqidno.11、seqidno.13、seqidno.15、seqidno.17、seqidno.19、seqidno.21、seqidno.23、seqidno.25、seqidno.27、seqidno.29、seqidno.31、seqidno.33及其組合，且具有與選自以下的氨基酸序列至少95％同一的輕鏈可變域序列：seqidno.2、seqidno.4、seqidno.6、seqidno.8、seqidno.10、seqidno.12、seqidno.14、seqidno.16、seqidno.18、seqidno.20、seqidno.22、seqidno.24、seqidno.26、seqidno.28、seqidno.30、seqidno.32、seqidno.33、seqidno.34、seqidno.35、seqidno.36、seqidno.37及其組合；其中所述全人抗體fab片段具有與選自以下的氨基酸序列至少95％同一的重鏈可變域序列：seqidno.1、seqidno.3、seqidno.5、seqidno.7、seqidno.9、seqidno.11、seqidno.13、seqidno.15、seqidno.17、seqidno.19、seqidno.21、seqidno.23、seqidno.25、seqidno.27、seqidno.29、seqidno.31、seqidno.33及其組合，且具有與選自以下的氨基酸序列至少95％同一的輕鏈可變域序列：seqidno.2、seqidno.4、seqidno.6、seqidno.8、seqidno.10、seqidno.12、seqidno.14、seqidno.16、seqidno.18、seqidno.20、seqidno.22、seqidno.24、seqidno.26、seqidno.28、seqidno.30、seqidno.32、seqidno.33、seqidno.34、seqidno.35、seqidno.36、seqidno.37及其組合；和其中所述單鏈人抗體具有與選自以下的氨基酸序列至少95％同一的重鏈可變域序列：seqidno.1、seqidno.3、seqidno.5、seqidno.7、seqidno.9、seqidno.11、seqidno.13、seqidno.15、seqidno.17、seqidno.19、seqidno.21、seqidno.23、seqidno.25、seqidno.27、seqidno.29、seqidno.31、seqidno.33及其組合，且具有與選自以下的氨基酸序列至少95％同一的輕鏈可變域序列：seqidno.2、seqidno.4、seqidno.6、seqidno.8、seqidno.10、seqidno.12、seqidno.14、seqidno.16、seqidno.18、seqidno.20、seqidno.22、seqidno.24、seqidno.26、seqidno.28、seqidno.30、seqidno.32、seqidno.33、seqidno.34、seqidno.35、seqidno.36、seqidno.37及其組合。優選地，所述全人抗體具有重鏈和輕鏈兩者，其中所述抗體具有選自以下的重鏈/輕鏈可變域序列：seqidno.1/seqidno.2(本文中稱為32b12)、seqidno.3/seqidno.4(本文中稱為32d12)、seqidno.5/seqidno.6(本文中稱為h1)、seqidno.7/seqidno.8(本文中稱為b7)、seqidno.9/seqidno.10(本文中稱為c12)、seqidno.11/seqidno.12(本文中稱為d12)、seqidno.13/seqidno.14(本文中稱為e1)、seqidno.15/seqidno.16(本文中稱為g12)、seqidno.17/seqidno.18(本文中稱為3a3)、seqidno.19/seqidno.20(本文中稱為3a5)、seqidno.21/seqidno.22(本文中稱為3a11)、seqidno.23/seqidno.24(本文中稱為3b12)、seqidno.25/seqidno.26(本文中稱為3c11)、seqidno.27/seqidno.28(本文中稱為4c3)、seqidno.29/seqidno.30(本文中稱為b12)、seqidno.31/seqidno.32(本文中稱為c4)、seqidno.31/seqidno.33(本文中稱為f7)、seqidno.31/seqidno.34(本文中稱為2a3)、seqidno.31/seqidno.35(本文中稱為3a7)、seqidno.31/seqidno.36(本文中稱為3a8)、seqidno.31/seqidno.37(本文中稱為4d5)及其組合。優選地，所述全人抗體fab片段具有重鏈可變域區域和輕鏈可變域區域兩者，其中所述抗體具有選自以下的重鏈/輕鏈可變域序列：seqidno.1/seqidno.2(本文中稱為32b12)、seqidno.3/seqidno.4(本文中稱為32d12)、seqidno.5/seqidno.6(本文中稱為h1)、seqidno.7/seqidno.8(本文中稱為b7)、seqidno.9/seqidno.10(本文中稱為c12)、seqidno.11/seqidno.12(本文中稱為d12)、seqidno.13/seqidno.14(本文中稱為e1)、seqidno.15/seqidno.16(本文中稱為g12)、seqidno.17/seqidno.18(本文中稱為3a3)、seqidno.19/seqidno.20(本文中稱為3a5)、seqidno.21/seqidno.22(本文中稱為3a11)、seqidno.23/seqidno.24(本文中稱為3b12)、seqidno.25/seqidno.26(本文中稱為3c11)、seqidno.27/seqidno.28(本文中稱為4c3)、seqidno.29/seqidno.30(本文中稱為b12)、seqidno.31/seqidno.32(本文中稱為c4)、seqidno.31/seqidno.33(本文中稱為f7)、seqidno.31/seqidno.34(本文中稱為2a3)、seqidno.31/seqidno.35(本文中稱為3a7)、seqidno.31/seqidno.36(本文中稱為3a8)、seqidno.31/seqidno.37(本文中稱為4d5)及其組合。優選地，所述全人單鏈抗體具有重鏈可變域區域和輕鏈可變域區域兩者，其中所述單鏈全人抗體具有選自以下的重鏈/輕鏈可變域序列：seqidno.1/seqidno.2、seqidno.3/seqidno.4、seqidno.5/seqidno.6、seqidno.7/seqidno.8、seqidno.9/seqidno.10、seqidno.11/seqidno.12、seqidno.13/seqidno.14、seqidno.15/seqidno.16、seqidno.17/seqidno.18、seqidno.19/seqidno.20、seqidno.21/seqidno.22、seqidno.23/seqidno.24、seqidno.25/seqidno.26、seqidno.27/seqidno.28、seqidno.29/seqidno.30、seqidno.31/seqidno.32、seqidno.31/seqidno.33、seqidno.31/seqidno.34、seqidno.31/seqidno.35、seqidno.31/seqidno.36、seqidno.31/seqidno.37及其組合。優選地，待治療的炎性障礙選自類風濕性關節炎、多發性硬化、克羅恩氏病、格雷夫斯氏病、舍格倫綜合征、炎性腸病、慢性阻塞性肺病、銀屑病、1型糖尿病、移植排斥、慢性丙型肝炎、瘧疾和動脈粥樣硬化。附圖說明圖1顯示抗-cxcr3抗體32b12與cho-cxcr3細胞的結合。具體實施方式本公開提供了以10-6m或更小的結合親和力結合cxcr3表位的igg類的全人抗體，其具有與選自以下的氨基酸序列至少95％同一的重鏈可變域序列：seqidno.1、seqidno.3、seqidno.5、seqidno.7、seqidno.9、seqidno.11、seqidno.13、seqidno.15、seqidno.17、seqidno.19、seqidno.21、seqidno.23、seqidno.25、seqidno.27、seqidno.29、seqidno.31、seqidno.33及其組合，且具有與以下的氨基酸序列至少95％同一的輕鏈可變域序列：seqidno.2、seqidno.4、seqidno.6、seqidno.8、seqidno.10、seqidno.12、seqidno.14、seqidno.16、seqidno.18、seqidno.20、seqidno.22、seqidno.24、seqidno.26、seqidno.28、seqidno.30、seqidno.32、seqidno.33、seqidno.34、seqidno.35、seqidno.36、seqidno.37及其組合。優選地，全人抗體具有重鏈和輕鏈兩者，其中所述抗體具有選自以下的重鏈/輕鏈可變域序列：seqidno.1/seqidno.2(本文中稱為32b12)、seqidno.3/seqidno.4(本文中稱為32d12)、seqidno.5/seqidno.6(本文中稱為h1)、seqidno.7/seqidno.8(本文中稱為b7)、seqidno.9/seqidno.10(本文中稱為c12)、seqidno.11/seqidno.12(本文中稱為d12)、seqidno.13/seqidno.14(本文中稱為e1)、seqidno.15/seqidno.16(本文中稱為g12)、seqidno.17/seqidno.18(本文中稱為3a3)、seqidno.19/seqidno.20(本文中稱為3a5)、seqidno.21/seqidno.22(本文中稱為3a11)、seqidno.23/seqidno.24(本文中稱為3b12)、seqidno.25/seqidno.26(本文中稱為3c11)、seqidno.27/seqidno.28(本文中稱為4c3)、seqidno.29/seqidno.30(本文中稱為b12)、seqidno.31/seqidno.32(本文中稱為c4)、seqidno.31/seqidno.33(本文中稱為f7)、seqidno.31/seqidno.34(本文中稱為2a3)、seqidno.31/seqidno.35(本文中稱為3a7)、seqidno.31/seqidno.36(本文中稱為3a8)、seqidno.31/seqidno.37(本文中稱為4d5)及其組合。本公開提供了全人抗體fab片段，其具有來自重鏈的可變域區域和來自輕鏈的可變域區域，其中所述重鏈可變域序列與選自以下的氨基酸序列至少95％同一：seqidno.1、seqidno.3、seqidno.5、seqidno.7、seqidno.9、seqidno.11、seqidno.13、seqidno.15、seqidno.17、seqidno.19、seqidno.21、seqidno.23、seqidno.25、seqidno.27、seqidno.29、seqidno.31、seqidno.33及其組合，且具有與選自以下的氨基酸序列至少95％同一的輕鏈可變域序列：seqidno.2、seqidno.4、seqidno.6、seqidno.8、seqidno.10、seqidno.12、seqidno.14、seqidno.16、seqidno.18、seqidno.20、seqidno.22、seqidno.24、seqidno.26、seqidno.28、seqidno.30、seqidno.32、seqidno.33、seqidno.34、seqidno.35、seqidno.36、seqidno.37及其組合。優選地，全人抗體fab片段具有重鏈可變域區域和輕鏈可變域區域兩者，其中所述抗體具有選自以下的重鏈/輕鏈可變域序列：seqidno.1/seqidno.2、seqidno.3/seqidno.4、seqidno.5/seqidno.6、seqidno.7/seqidno.8、seqidno.9/seqidno.10、seqidno.11/seqidno.12、seqidno.13/seqidno.14、seqidno.15/seqidno.16、seqidno.17/seqidno.18、seqidno.19/seqidno.20、seqidno.21/seqidno.22、seqidno.23/seqidno.24、seqidno.25/seqidno.26、seqidno.27/seqidno.28、seqidno.29/seqidno.30、seqidno.31/seqidno.32、seqidno.31/seqidno.33、seqidno.31/seqidno.34、seqidno.31/seqidno.35、seqidno.31/seqidno.36、seqidno.31/seqidno.37及其組合.本公開提供了單鏈人抗體，其具有來自重鏈的可變域區域和來自輕鏈的可變域區域及連接所述重鏈和輕鏈可變域區域的肽接頭，其中所述重鏈可變域序列與選自以下的氨基酸序列至少95％同一：seqidno.1、seqidno.3、seqidno.5、seqidno.7、seqidno.9、seqidno.11、seqidno.13、seqidno.15、seqidno.17、seqidno.19、seqidno.21、seqidno.23、seqidno.25、seqidno.27、seqidno.29、seqidno.31、seqidno.33及其組合，且具有與選自以下的氨基酸序列至少95％同一的輕鏈可變域序列：seqidno.2、seqidno.4、seqidno.6、seqidno.8、seqidno.10、seqidno.12、seqidno.14、seqidno.16、seqidno.18、seqidno.20、seqidno.22、seqidno.24、seqidno.26、seqidno.28、seqidno.30、seqidno.32、seqidno.33、seqidno.34、seqidno.35、seqidno.36、seqidno.37及其組合。優選地，全人單鏈抗體具有重鏈可變域區域和輕鏈可變域區域兩者，其中所述單鏈全人抗體具有選自以下的重鏈/輕鏈可變域序列：seqidno.1/seqidno.2、seqidno.3/seqidno.4、seqidno.5/seqidno.6、seqidno.7/seqidno.8、seqidno.9/seqidno.10、seqidno.11/seqidno.12、seqidno.13/seqidno.14、seqidno.15/seqidno.16、seqidno.17/seqidno.18、seqidno.19/seqidno.20、seqidno.21/seqidno.22、seqidno.23/seqidno.24、seqidno.25/seqidno.26、seqidno.27/seqidno.28、seqidno.29/seqidno.30、seqidno.31/seqidno.32、seqidno.31/seqidno.33、seqidno.31/seqidno.34、seqidno.31/seqidno.35、seqidno.31/seqidno.36、seqidno.31/seqidno.37及其組合。本公開還提供了用于治療廣譜哺乳動物癌癥或炎性疾病或自身免疫性疾病的方法，包括施用有效量的抗-cxcr3多肽，其中所述抗-cxcr3多肽選自以至少10-6m的結合親和力結合cxcr3表位的igg類的全人抗體、具有來自重鏈的可變域區域和來自輕鏈的可變域區域的全人抗體fab片段、具有來自重鏈的可變域區域和來自輕鏈的可變域區域及連接所述重鏈和輕鏈可變域區域的肽接頭的單鏈人抗體，及其組合；其中全人抗體具有與選自以下的氨基酸序列至少95％同一的重鏈可變域序列：seqidno.1、seqidno.3、seqidno.5、seqidno.7、seqidno.9、seqidno.11、seqidno.13、seqidno.15、seqidno.17、seqidno.19、seqidno.21、seqidno.23、seqidno.25、seqidno.27、seqidno.29、seqidno.31、seqidno.33及其組合，且具有與選自以下的氨基酸序列至少95％同一的輕鏈可變域序列：seqidno.2、seqidno.4、seqidno.6、seqidno.8、seqidno.10、seqidno.12、seqidno.14、seqidno.16、seqidno.18、seqidno.20、seqidno.22、seqidno.24、seqidno.26、seqidno.28、seqidno.30、seqidno.32、seqidno.33、seqidno.34、seqidno.35、seqidno.36、seqidno.37及其組合；其中全人抗體fab片段具有與選自以下的氨基酸序列至少95％同一的重鏈可變域序列：seqidno.1、seqidno.3、seqidno.5、seqidno.7、seqidno.9、seqidno.11、seqidno.13、seqidno.15、seqidno.17、seqidno.19、seqidno.21、seqidno.23、seqidno.25、seqidno.27、seqidno.29、seqidno.31、seqidno.33及其組合，且具有與選自以下的氨基酸序列至少95％同一的輕鏈可變域序列：seqidno.2、seqidno.4、seqidno.6、seqidno.8、seqidno.10、seqidno.12、seqidno.14、seqidno.16、seqidno.18、seqidno.20、seqidno.22、seqidno.24、seqidno.26、seqidno.28、seqidno.30、seqidno.32、seqidno.33、seqidno.34、seqidno.35、seqidno.36、seqidno.37及其組合；和其中單鏈人抗體具有與選自以下的氨基酸序列至少95％同一的重鏈可變域序列：seqidno.1、seqidno.3、seqidno.5、seqidno.7、seqidno.9、seqidno.11、seqidno.13、seqidno.15、seqidno.17、seqidno.19、seqidno.21、seqidno.23、seqidno.25、seqidno.27、seqidno.29、seqidno.31、seqidno.33及其組合，且具有與選自以下的氨基酸序列至少95％同一的輕鏈可變域序列：seqidno.2、seqidno.4、seqidno.6、seqidno.8、seqidno.10、seqidno.12、seqidno.14、seqidno.16、seqidno.18、seqidno.20、seqidno.22、seqidno.24、seqidno.26、seqidno.28、seqidno.30、seqidno.32、seqidno.33、seqidno.34、seqidno.35、seqidno.36、seqidno.37及其組合。優選地，全人抗體具有重鏈和輕鏈兩者，其中所述抗體具有選自以下的重鏈/輕鏈可變域序列：seqidno.1/seqidno.2、seqidno.3/seqidno.4、seqidno.5/seqidno.6、seqidno.7/seqidno.8、seqidno.9/seqidno.10、seqidno.11/seqidno.12、seqidno.13/seqidno.14、seqidno.15/seqidno.16、seqidno.17/seqidno.18、seqidno.19/seqidno.20、seqidno.21/seqidno.22、seqidno.23/seqidno.24、seqidno.25/seqidno.26、seqidno.27/seqidno.28、seqidno.29/seqidno.30、seqidno.31/seqidno.32、seqidno.31/seqidno.33、seqidno.31/seqidno.34、seqidno.31/seqidno.35、seqidno.31/seqidno.36、seqidno.31/seqidno.37及其組合。優選地，全人抗體fab片段具有重鏈可變域區域和輕鏈可變域區域兩者，其中所述抗體具有選自以下的重鏈/輕鏈可變域序列：seqidno.1/seqidno.2、seqidno.3/seqidno.4、seqidno.5/seqidno.6、seqidno.7/seqidno.8、seqidno.9/seqidno.10、seqidno.11/seqidno.12、seqidno.13/seqidno.14、seqidno.15/seqidno.16、seqidno.17/seqidno.18、seqidno.19/seqidno.20、seqidno.21/seqidno.22、seqidno.23/seqidno.24、seqidno.25/seqidno.26、seqidno.27/seqidno.28、seqidno.29/seqidno.30、seqidno.31/seqidno.32、seqidno.31/seqidno.33、seqidno.31/seqidno.34、seqidno.31/seqidno.35、seqidno.31/seqidno.36、seqidno.31/seqidno.37及其組合。優選地，全人單鏈抗體具有具有重鏈可變域區域和輕鏈可變域區域兩者，其中所述單鏈全人抗體具有選自以下的重鏈/輕鏈可變域序列：seqidno.1/seqidno.2、seqidno.3/seqidno.4、seqidno.5/seqidno.6、seqidno.7/seqidno.8、seqidno.9/seqidno.10、seqidno.11/seqidno.12、seqidno.13/seqidno.14、seqidno.15/seqidno.16、seqidno.17/seqidno.18、seqidno.19/seqidno.20、seqidno.21/seqidno.22、seqidno.23/seqidno.24、seqidno.25/seqidno.26、seqidno.27/seqidno.28、seqidno.29/seqidno.30、seqidno.31/seqidno.32、seqidno.31/seqidno.33、seqidno.31/seqidno.34、seqidno.31/seqidno.35、seqidno.31/seqidno.36、seqidno.31/seqidno.37及其組合。優選地，待治療的廣譜哺乳動物癌癥是cxcr3-陽性癌癥。優選地，待治療的廣譜哺乳動物癌癥選自白血病、淋巴瘤、癌瘤、前列腺癌、非小細胞肺癌、乳腺癌、子宮內膜癌、卵巢癌、胃癌、頭頸癌、黑素瘤、骨肉瘤、腸和結腸癌，及各種轉移性癌。優選地，待治療的炎性障礙選自類風濕性關節炎、多發性硬化、克羅恩氏病、格雷夫斯氏病、舍格倫綜合征、炎性腸病、慢性阻塞性肺病、銀屑病、1型糖尿病、移植排斥、慢性丙型肝炎、瘧疾和動脈粥樣硬化。“抗原結合蛋白”是包含與抗原結合的部分和，任選地，允許抗原結合部分采取促進抗原結合蛋白與抗原的結合的構象的骨架或框架部分的蛋白質。抗原結合蛋白的例子包括抗體、抗體片段(例如，抗體的抗原結合部分)、抗體衍生物和抗體類似物。抗原結合蛋白可以包含，例如，具有移植的cdr或cdr衍生物的替代性蛋白質骨架或人工骨架。這些骨架包括，但不限于抗體衍生的骨架(包含引入以例如使抗原結合蛋白的三維結構穩定的突變)以及完全合成的骨架(包含，例如，生物相容性聚合物)。參見，例如，korndorfer等，2003，proteins:structure,function,andbioinformatics,第53卷,第1期:121-129；roque等，2004，biotechnol.prog.20:639-654。此外，可以使用肽抗體模擬物(“pam”)以及基于抗體模擬物的骨架(利用纖維連接蛋白組分作為骨架)。抗原結合蛋白可以具有，例如，天然存在的免疫球蛋白的結構。“免疫球蛋白”是四聚體分子。在天然存在的免疫球蛋白中，每個四聚體由兩個相同的多肽鏈對組成，每對具有一條“輕”鏈(約25kda)和一條“重”鏈(約50-70kda)。每條鏈的氨基端部分包括主要負責抗原識別的約100至110個或更多個氨基酸的可變區。每條鏈的羧基端部分限定主要負責效應子功能的恒定區。人輕鏈分類為κ或λ輕鏈。重鏈分類為μ、δ、γ、α或ε，并分別定義抗體同種型為igm、igd、igg、iga和ige。在輕鏈和重鏈內，可變區和恒定區通過約12個或更多個氨基酸的“j”區連接，并且重鏈還包括約10個或更多個氨基酸的“d”區。通常參見，fundamentalimmunology，第7章(paul,w.編輯，第二版，raven出版社，n.y.(1989))(通過引用結合其全部內容用于所有目的)。每個輕/重鏈對的可變區形成抗體結合位點，使得完整的免疫球蛋白具有兩個結合位點。天然存在的免疫球蛋白鏈的可變區表現出相同的總體結構：具有通過三個高變區(也稱為互補決定區或cdr)連接的相對保守的框架區(fr)。從n端至c端，輕鏈和重鏈都包含結構域fr1、cdr1、fr2、cdr2、fr3、cdr3和fr4。每個結構域的氨基酸按照kabat等在sequencesofproteinsofimmunologicalinterest,第5版,usdept.ofhealthandhumanservices,phs,nih,nih出版號91-3242,1991中的定義命名。免疫球蛋白鏈中氨基酸的其它編號系統包括imgt.rtm.(國際immunogenetics信息系統；lefranc等，dev.comp.immunol.29:185-203；2005)和aho(honegger和pluckthun,j.mol.biol.309(3):657-670；2001)。可以從含有具有變化的抗原特異性的免疫球蛋白的來源比如血清或血漿獲得抗體。如果將這樣的抗體進行親和純化，它們可以針對特定的抗原特異性富集。通常由少于約10％的對特定抗原具有特異性結合活性的抗體制備這類富集的抗體制劑。使這些制劑進行若干輪親和純化可以提高對抗原具有特異性結合活性的抗體的比例。以這種方式制備的抗體通常稱為“單特異性的”。單特異性抗體制劑可以由約10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、97％、99％或99.9％的對特定抗原具有特異性結合活性的抗體構成。除非另有說明，“抗體”是指完整的免疫球蛋白或與完整抗體為特異性結合而競爭的其抗原結合部分。可以通過重組dna技術或通過完整抗體的酶促或化學切割產生抗原結合部分。抗原結合部分包括，特別是，fab、fab'、f(ab')2、fv、域抗體(dab)和互補決定區(cdr)片段、單鏈抗體(scfv)、嵌合抗體、雙抗體(diabodies)、三抗體(triabodies)、四抗體(tetrabodies)和含有至少足以賦予多肽特異性抗原結合的免疫球蛋白部分的多肽。fab片段為具有vl、vh、cl和ch1結構域的單價片段；f(ab')2片段為具有通過在鉸鏈區的二硫鍵連接的2個fab片段的雙價片段；fd片段具有vh和ch1結構域；fv片段具有抗體單臂的vl和vh結構域；并且dab片段具有vh結構域、vl結構域或者vh或vl結構域的抗原結合片段(美國專利號6,846,634、6,696,245，美國專利申請公開號2002/02512、2004/0202995、2004/0038291、2004/0009507、2003/0039958和ward等，nature341:544-546,1989)。單鏈抗體(scfv)為其中vl和vh區通過接頭(例如，合成的氨基酸殘基的序列)連接以形成連續的蛋白鏈(其中該接頭足夠長以允許蛋白鏈自身回折并形成單價抗原結合位點)的抗體(bird等，1988,science242:423-26和huston等，1988,proc.natl.acad.sci.usa85:5879-83)。雙抗體為包含2條多肽鏈的二價抗體，其中每條多肽鏈包含由接頭連接的vh和vl結構域，該接頭太短而不允許相同鏈上的2個結構域之間配對，因此使得每個結構域與在另一多肽鏈上的互補結構域配對(holliger等，proc.natl.acad.sci.usa90:6444-48,1993和poljak等，structure2:1121-23,1994)。如果雙抗體的兩條多肽鏈是相同的，那么由其配對產生的雙抗體將具有2個相同的抗原結合位點。具有不同序列的多肽鏈可以用于形成具有2個不同抗原結合位點的雙抗體。類似地，三抗體和四抗體分別為包含3條和4條多肽鏈并分別形成3個和4個抗原結合位點(其可以是相同的或不同的)的抗體。可以利用kabat等(同上)、lefranc等(同上)和/或honegger和pluckthun(同上)描述的系統確定給定抗體的互補決定區(cdr)和框架區(fr)。可以將一個或多個cdr共價或非共價地整合到分子中以使其成為抗原結合蛋白。抗原結合蛋白可以使cdr作為較大多肽鏈的部分并入，可以共價地將cdr連接至另一多肽鏈，或可以非共價地整合cdr。cdr允許抗原結合蛋白特異性地結合特定的目標抗原。抗原結合蛋白可以具有一個或多個結合位點。如果存在多于一個結合位點，那么結合位點可以彼此相同或可以不同。例如，天然存在的人免疫球蛋白通常具有兩個相同的結合位點，而“雙特異性”或“雙功能”抗體具有兩個不同的結合位點。術語“人抗體”包括具有源自人免疫球蛋白序列的一個或多個可變區和恒定區的所有抗體。在一個實施方式中，所有的可變域和恒定域源自人免疫球蛋白序列(全人抗體)。這些抗體可以以多種方式制備，其實例如下文所述，包括通過用目標抗原對小鼠(其經遺傳修飾以表達來源于人重鏈和/或輕鏈編碼基因的抗體)進行免疫。人源化抗體的序列與來源于非人物種的抗體的序列不同在于一個或多個氨基酸置換、刪除和/或添加，以使得在施用于人類受試者時，人源化抗體與非人物種的抗體相比較少可能誘導免疫應答和/或誘導較不嚴重的免疫應答。在一個實施方式中，非人物種抗體的重鏈和/或輕鏈的框架和恒定域中的某些氨基酸突變以產生人源化抗體。在另一實施方式中，來自人抗體的恒定域與非人物種的可變域融合。在另一實施方式中，改變非人抗體的一個或多個cdr序列中的一個或多個氨基酸殘基以降低非人抗體在施用于人類受試者時可能的免疫原性，其中改變的氨基酸殘基對于抗體與其抗原的免疫特異性結合不是關鍵的，或對氨基酸序列進行的改變是保守性改變，使得人源化抗體與抗原的結合不會比非人抗體與抗原的結合明顯更差。如何制備人源化抗體的例子可以在美國專利號6,054,297、5,886,152和5,877,293中找到。術語“嵌合抗體”指的是含有來自一個抗體的一個或多個區域和來自一個或多個其它抗體的一個或多個區域的抗體。在一個實施方式中，一個或多個cdr來源于人抗-cxcr3抗體。在另一實施方式中，所有的cdr來源于人抗-cxcr3抗體。在另一實施方式中，來自多于一個人抗-cxcr3抗體的cdr在嵌合抗體中混合并匹配。例如，嵌合抗體可以包含來自第一人抗par-2抗體的輕鏈的cdr1，來自第二人抗-cxcr3抗體的輕鏈的cdr2和cdr3，以及來自第三抗-cxcr3抗體的重鏈的cdr。其它組合是可能的。此外，框架區可以來源于相同抗-cxcr3抗體中的一個、源自一個或多個不同抗體(比如人抗體)或源自人源化抗體。在嵌合抗體的一個例子中，重鏈和/或輕鏈的一部分與來自特定物種或者屬于特定抗體類別或子類的抗體相同、同源或來源于該抗體，而鏈的其余部分與來自另一物種或者屬于另一抗體類別或子類的抗體相同、同源或來源于該抗體。也包括這些抗體的表現出所需生物活性(即，特異性結合cxcr3的能力)的片段。“中和抗體”或“抑制性抗體”為使用例如本文實施例中描述的那些分析，在過量的抗-cxcr3抗體降低激活的量至少約20％時抑制cxcr3的激活的抗體。在各種實施方式中，抗原結合蛋白降低cxcr3的激活的量至少30％、40％、50％、60％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、97％、99％和99.9％。本領域技術人員可以根據本說明書的教導并使用本領域已知技術容易地制備抗體片段或類似物。片段或類似物的優選氨基端和羧基端存在于功能域的邊界附近。可以通過將核苷酸和/或氨基酸序列數據與公共或專有序列數據庫比較來識別結構域和功能域。計算機化的比較方法可用于識別在已知結構和/或功能的其它蛋白質中存在的序列基序或預測的蛋白質構象結構域。識別折疊成已知三維結構的蛋白質序列的方法是已知的。參見，bowie等,1991,science253:164。“cdr移植抗體”是包含來源于特定物種或同種型的抗體的一個或多個cdr和相同或不同物種或同種型的另一抗體的框架的抗體。“多特異性抗體”是識別在一個或多個抗原上的超過一個表位的抗體。這種類型的抗體的子類為“雙特異性抗體”，其識別在相同或不同抗原上的2個不同的表位。如果抗原結合蛋白以1納摩爾或更小的解離常數結合抗原(例如，人cxcr3)，那么該抗原結合蛋白“特異性地結合”該抗原。“抗原結合結構域”、“抗原結合區”或“抗原結合位點”為含有與抗原相互作用并造成抗原結合蛋白對抗原的特異性和親和力的氨基酸殘基(或其它部分)的抗原結合蛋白的部分。對于特異性地結合其抗原的抗體，這包括其cdr域中至少一個的至少一部分。“表位”為分子的被抗原結合蛋白(例如，抗體)結合的部分。表位可以包括分子的非連續部分(例如在多肽中，在多肽的一級序列中非連續的但在多肽的三級和四級結構的情況下彼此足夠接近以被抗原結合蛋白結合的氨基酸殘基)。兩個多核苷酸或兩個多肽序列的“百分同一性”通過利用gap計算機程序(gcgwisconsinpackage的部分，版本10.3(accelrys，圣地亞哥，加利福尼亞州))使用其默認參數比較該序列來確定。術語“多核苷酸”、“寡核苷酸”和“核酸”在全文中可互換地使用并包括dna分子(例如，cdna或基因組dna)、rna分子(例如，mrna)、用核苷酸類似物(例如，肽核酸和非天然存在的核苷酸類似物)產生的dna或rna的類似物及其雜合體。核酸分子可以為單鏈或雙鏈的。在一個實施方式中，本發明的核酸分子包含編碼抗體或其片段、衍生物、突變蛋白或變體的連續開放閱讀框。如果兩個單鏈多核苷酸的序列可以按反平行定向對齊以使得一個多核苷酸中的每個核苷酸與另一多核苷酸中的其互補核苷酸相對的而沒有引入空位和在任一序列的5'或3'端沒有未配對的核苷酸，那么這兩個單鏈多核苷酸是彼此的“互補序列”。如果兩個多核苷酸可以在中等嚴格條件下彼此雜交，那么一個多核苷酸與另一多核苷酸“互補”。因此，多核苷酸可以與另一多核苷酸互補而不是其互補序列。“載體”為可以用于將與其連接的另一核酸引入細胞中的核酸。一種類型的載體為“質粒”，其指的是可以將另外的核酸片段接合至其中的線性或環狀雙鏈dna分子。另一類型的載體為病毒載體(例如，復制缺陷型逆轉錄病毒、腺病毒和腺相關病毒)，其中可將另外的dna片段引入到病毒基因組中。某些載體能夠在其所引入的宿主細胞中自主復制(例如，包含細菌復制起點的細菌載體和附加型哺乳動物載體)。其它載體(例如，非附加型哺乳動物載體)在引入宿主細胞中后被整合到宿主細胞的基因組中，且由此與宿主基因組一起復制。“表達載體”為可以指導選定多核苷酸的表達的載體類型。如果調控序列影響核苷酸序列的表達(例如，表達的水平、時機或位置)，那么該核苷酸序列“可操作地連接”于調控序列。“調控序列”為影響其可操作地連接的核酸的表達(例如，表達的水平、時機或位置)的核酸。調控序列可以，例如，直接在所調節的核酸上，或通過一個或多個其它分子(例如，結合于該調控序列和/或該核酸的多肽)的作用施加其影響。調控序列的例子包括啟動子、增強子和其它表達控制元件(例如，聚腺苷酸化信號)。調控序列的另外的例子在，例如，goeddel,1990,geneexpressiontechnology:methodsinenzymology185,academicpress,sandiego,calif.和baron等,1995,nucleicacidsres.23:3605-06中描述。“宿主細胞”為可以用于表達核酸(例如，本發明的核酸)的細胞。宿主細胞可以是原核細胞，例如，大腸桿菌，或其可以是真核細胞，例如，單細胞真核生物(例如，酵母或其它真菌)、植物細胞(例如，煙草或番茄植物細胞)、動物細胞(例如，人細胞、猴細胞、倉鼠細胞、大鼠細胞、小鼠細胞或昆蟲細胞)或雜交瘤。宿主細胞的例子包括cos-7猴腎細胞系(atcccrl1651)(參見gluzman等，1981,cell23:175)、l細胞、c127細胞、3t3細胞(atccccl163)、中國倉鼠卵巢(cho)細胞或其衍生物如veggiecho和相關細胞系(其在無血清培養基中生長)(參見rasmussen等，1998,cytotechnology28:31)或cho株dx-b11(其為dhfr缺陷的)(參見urlaub等，1980,proc.natl.acad.sci.usa77:4216-20)、hela細胞、bhk(atcccrl10)細胞系、來源于非洲綠猴腎細胞系cv1的cv1/ebna細胞系(atccccl70)(參見mcmahan等，1991,emboj.10:2821)、人胚腎細胞(比如293、293ebna或msr293)、人表皮a431細胞，人colo205細胞、其它轉化的靈長類細胞系、正常二倍體細胞、來源于原代組織、原代外植體的體外培養物的細胞株、hl-60、u937、hak或jurkat細胞。通常，宿主細胞是可用多肽編碼核酸(其隨后可以在宿主細胞中表達)轉化或轉染的培養細胞。短語“重組宿主細胞”可以用于表示已經用待表達的核酸轉化或轉染的宿主細胞。宿主細胞也可以為包含核酸，但除非將調控序列引入到該宿主細胞中以使該調控序列可操作地與該核酸連接，不以所需的水平表達該核酸的細胞。應該理解，術語宿主細胞不僅僅指特定的受試細胞，還指這種細胞的后代或潛在的后代。因為在后續的世代中可能由于例如突變或環境影響而出現一些變化，因此實際上這類后代可能與親本細胞不相同，但仍然包含在本文使用的該術語的范圍內。優選地，待治療的哺乳動物癌癥選自卵巢、結腸、乳腺或肝癌細胞系，骨髓瘤，神經母細胞源的cns腫瘤，單核細胞性白血病，b-細胞源白血病，t-細胞源白血病，b-細胞源淋巴瘤，t-細胞源淋巴瘤，肥大細胞源的腫瘤及其組合。可以利用本領域已知的任何標準方法產生本公開的多肽。在一個實例中，通過重組dna方法將編碼多肽的核酸序列(例如，cdna)插入到重組表達載體中并且在促進表達的條件下表達dna序列來產生該多肽。可以化學合成編碼本文公開的各種多肽中任何一種的核酸。可以選擇密碼子使用以改善在細胞中的表達。這類密碼子選擇取決于選擇的細胞類型。已經開發了用于大腸桿菌和其它細菌以及哺乳動物細胞、植物細胞、酵母細胞和昆蟲細胞的專用的密碼子選擇模式。參見，例如：mayfield等，proc.natl.acad.sci.usa.2003，100(2):438-42、sinclair等，proteinexpr.purif.2002(1):96-105、connellnd.curr.opin.biotechnol.2001，12(5):446-9、makrides等，microbiol.rev.1996，60(3):512-38和sharp等，yeast.1991，7(7):657-78。用于核酸操作的一般技術在，例如，sambrook等，molecularcloning:alaboratorymanual,vols.1-3,coldspringharborlaboratorypress,2ed.,1989或f.ausubel等，currentprotocolsinmolecularbiology(greenpublishingandwiley-interscience:newyork,1987)及其定期更新中描述，其內容通過引用結合于本文中。編碼多肽的dna可操作地連接至源自哺乳動物、病毒或昆蟲基因的合適的轉錄或翻譯調控元件。這些調控元件包括轉錄啟動子、任選的控制轉錄的操縱子序列、編碼合適的mrna核糖體結合位點的序列及控制轉錄和翻譯的終止的序列。在宿主中復制的能力(通常由復制起點賦予)和幫助識別轉化體的選擇基因另外地并入。重組dna也可以包括可以用于純化蛋白質的任何類型的蛋白質標簽序列。蛋白質標簽的例子包括，但不限于組氨酸標簽、flag標簽、myc標簽、ha標簽或gst標簽。用于細菌、真菌、酵母和哺乳動物細胞宿主的合適的克隆和表達載體可以在cloningvectors:alaboratorymanual,(elsevier,n.y.,1985)中找到。利用適合于宿主細胞的方法將表達構建體引入宿主細胞中。本領域已知將核酸引入宿主細胞中的多種方法，包括但不限于：電穿孔，采用氯化鈣、氯化銣、磷酸鈣、deae-葡聚糖或其它物質的轉染，基因槍法，脂質轉染和感染(其中載體是傳染劑)。合適的宿主細胞包括原核細胞、酵母、哺乳動物細胞或細菌細胞。合適的細菌包括革蘭氏陰性或革蘭氏陽性有機體，例如，大腸桿菌或芽孢桿菌屬。酵母，優選來自酵母屬物種，比如釀酒酵母，也可用于產生多肽。各種哺乳動物或昆蟲細胞培養系統也可以用于表達重組蛋白。luckow和summers綜述了在昆蟲細胞中用于產生異源蛋白質的桿狀病毒系統(bio/technology,6:47,1988)。合適的哺乳動物宿主細胞系的例子包括內皮細胞、cos-7猴腎細胞、cv-1、l細胞、c127、3t3、中國倉鼠卵巢(cho)、人胚腎細胞、hela、293、293t和bhk細胞系。純化的多肽通過培養合適的宿主/載體系統以表達重組蛋白來制備。對于許多應用，本文公開的許多多肽的小尺寸使得在大腸桿菌中表達成為優選的表達方法。然后從培養基或細胞提取物純化蛋白質。本文公開的蛋白質也可以使用細胞翻譯系統產生。為了此類目的，必須修飾編碼多肽的核酸以允許進行體外轉錄而產生mrna并且允許利用mrna在特定的無細胞系統(真核的，比如哺乳動物或酵母無細胞翻譯系統，或原核的，比如，細菌無細胞翻譯系統)中的無細胞翻譯。cxcr3-結合多肽也可以通過化學合成產生(例如，通過在solidphasepeptidesynthesis,2nded.,1984,thepiercechemicalco.,rockford,ill中描述的方法)。也可以通過化學合成產生對蛋白質的修飾。本公開的多肽可以通過蛋白質化學領域公知的蛋白質分離/純化方法進行純化。非限制性例子包括萃取、重結晶、鹽析(例如，用硫酸銨或硫酸鈉)、離心、透析、超濾、吸附色譜、離子交換色譜、疏水性色譜、正相色譜、反相色譜、凝膠過濾、凝膠滲透色譜、親和色譜、電泳、逆流分布或這些的任意組合。純化后，可以通過本領域已知的多種方法中的任何一種，包括但不限于，過濾和透析，使多肽交換到不同的緩沖液中和/或濃縮。純化的多肽優選至少85％純，更優選至少95％純，并且最優選至少98％純。無論純度的確切數值如何，多肽都足夠純以用作藥物產品。多肽的翻譯后修飾在某些實施方式中，本發明的結合多肽可以進一步包括翻譯后修飾。示例性的蛋白質翻譯后修飾包括磷酸化、乙酰化、甲基化、adp-核糖基化、泛素化、糖基化、羰基化、sumo化、生物素化或者多肽側鏈或疏水性基團的添加。結果，修飾的可溶性多肽可含有非氨基酸成分，例如脂質、多糖或單糖和磷酸類。糖基化的優選形式是唾液酸化，其將一個或多個唾液酸部分與多肽綴合。唾液酸部分改善溶解性和血清半衰期，同時還降低該蛋白質的可能的免疫原性。參見raju等，biochemistry.2001，31；40(30):8868-76。在一個具體的實施方式中，所述可溶性多肽的修飾形式包括將所述可溶性多肽連接至非蛋白質性的聚合物。在一個具體的實施方式中，該聚合物為聚乙二醇("peg")、聚丙二醇或聚氧化烯類，以如美國專利號4,640,835、4,496,689、4,301,144、4,670,417、4,791,192或4,179,337中所述的方式。修飾多肽的實例包括peg化抗體。peg是可在市場上買到或可以根據本領域公知的方法通過乙二醇的開環聚合制備(sandler和karo,polymersynthesis,academicpress,newyork,vol.3,138-161頁)的水溶性聚合物。術語“peg”廣泛地用于涵蓋任何聚乙二醇分子而不涉及大小或在peg末端的修飾，并且可以由下式表示：x-o(ch2ch2o)n-1ch2ch2oh(1)，其中n為20至2300，并且x為h或末端修飾，例如：c1-4烷基。在一個實施方式中，本發明的peg在一端以羥基或甲氧基封端，即，x為h或ch3("甲氧基peg")。peg可以包含結合反應所需的進一步的化學基團，其由分子的化學合成產生，或者是使分子的部分具有最佳距離的間隔物。另外，這種peg可以由一條或多條連接在一起的peg側鏈組成。具有多于一條peg鏈的peg被稱為多臂或枝化peg。枝化peg可以通過，例如，將聚環氧乙烷添加到各種多元醇(包括甘油、季戊四醇和山梨糖醇)上而制備。例如，四臂的枝化peg可以由季戊四醇和環氧乙烷制備。例如，ep-a0473084和美國專利號5,932,462描述了枝化peg。peg的一種形式包括由賴氨酸的伯氨基基團連接的兩個peg側鏈(peg2)(monfardini等，bioconjugatechem.6(1995)62-69)。雖然peg是公知的，但這是首次證明peg化的10fn3多肽可以被peg化并保留配體結合活性。在優選的實施方式中，peg化的10fn3多肽通過定點peg化產生，特別是通過peg與n-或c-末端的半胱氨酸部分的偶聯。因此，本公開提供了具有改善的藥代動力學性質的靶標結合10fn3多肽，該多肽包含：具有約80-約150個氨基酸的10fn3結構域，其中所述10fn3結構域的至少一個環參與靶標結合；和共價結合的peg部分，其中所述10fn3多肽以小于100nm的kd結合靶標并在哺乳動物中具有小于30ml/hr/kg的清除率。peg部分可以通過定點peg化附接于10fn3多肽，如通過附接于cys殘基，其中該cys殘基可以位于10fn3多肽的n-末端或在n-末端與最n-末端的β或β-樣鏈之間或者位于10fn3多肽的c-末端或在c-末端與最c-末端的β或β-樣鏈之間。cys殘基也可以位于其它位置，特別是不參與靶標結合的任何環。peg部分也可以通過其它化學作用附接，包括通過與胺偶聯。peg與肽或蛋白質的偶聯一般包括peg的活化和活化的peg-中間體直接與靶蛋白/肽或與接頭的偶聯，接頭隨后活化并與靶蛋白/肽偶聯(參見abuchowski等,j.biol.chem.,252,3571(1977)和j.biol.chem.,252,3582(1977),zalipsky等和harris等,in:poly(ethyleneglycol)chemistry:biotechnicalandbiomedicalapplications；(j.m.harris編輯)plenumpress:newyork,1992；第21和22章)。注意到包含peg分子的結合多肽也稱為偶聯蛋白，而缺乏附接的peg分子的蛋白可稱為未偶聯的。可以選擇多種分子量形式的peg用于與cxcr3-結合多肽偶聯，例如，約1,000道爾頓(da)-100,000da(n是20-2300)。peg中重復單元的數目"n"對于以道爾頓描述的分子量是近似的。優選的是活化的接頭上的peg的總分子量適合于藥物用途。因此，在一個實施方式中，peg分子的分子量不超過100,000da。例如，如果三個peg分子附接于接頭，其中各peg分子具有12,000da的相同分子量(各n為約270)，則接頭上的peg的總分子量為約36,000da(總n為約820)。附接于接頭的peg的分子量也可以不同，例如，在接頭上的三個分子中，兩個peg分子各自可以是5,000da(各n為約110)和一個peg分子可以是12,000da(n為約270)。在本公開的具體實施方式中，cxcr3結合多肽與下式的一個聚(乙二醇)基團共價連接：-co-(ch2)x-(och2ch2)m-or，其中聚(乙二醇)基團的-co(即，羰基)與結合多肽的一個氨基形成酰胺鍵；r是低級烷基；x是2或3；m是約450-約950；且n和m選擇為使得偶聯物減去結合多肽的分子量為約10-40kda。在一個實施方式中，結合多肽的賴氨酸的6-氨基是可用(游離)的氨基。以上偶聯物可以更具體地通過下式(ii)表示：p-nhco-(ch2)x-(och2ch2)m-or(ii)，其中p是如本文所述的結合多肽的基團(即，沒有如式(ii)中所示與羰基形成酰胺鍵的一個或多個氨基基團)；和其中r是低級烷基；x是2或3；m是約450-約950且選擇為使得偶聯物減去結合多肽的分子量是約10-約40kda。如本文使用的，"m"的給定范圍具有定向的含義。"m"的范圍在任何情況下和精確地通過peg基團的分子量確定。本領域技術人員可以基于，例如，peg化結合多肽如何治療地使用、所需劑量、循環時間、對蛋白水解的抗性、免疫原性和其它考慮因素來選擇合適的peg的分子量。對于peg及其用于增強蛋白質性質的用途的討論，參見katre,advanceddrugdeliveryreviews10:91-114(1993)。在一個實施方式中，peg分子可以被活化以與結合多肽上的氨基反應，如與賴氨酸反應(bencham等,anal.biochem.,131,25(1983)；veronese等,appl.biochem.,11,141(1985)；zalipsky等,polymericdrugsanddrugdeliverysystems,adrs9-110acssymposiumseries469(1999)；zalipsky等,europ.polym.j.,19,1177-1183(1983)；delgado等,biotechnologyandappliedbiochemistry,12,119-128(1990))。在一個具體實施方式中，peg的碳酸酯用于形成peg-結合多肽偶聯物。ν,ν'-二琥珀酰亞胺基碳酸酯(dsc)可以用于與peg的反應中以形成活性的混合peg-琥珀酰亞胺基碳酸酯，其可以隨后與接頭的親核基團或結合多肽的氨基反應(參見美國專利號5,281,698和5,932,462)。在相似類型的反應中，1,1'-(二苯并三唑基)碳酸酯和二-(2-吡啶基)碳酸酯可以與peg反應以分別形成peg-苯并三唑基和peg-吡啶基混合碳酸酯(美國專利號5,382,657)。10fn3多肽的peg化可以按照現有技術的方法進行，例如通過結合多肽與親電子活性peg(供應商：shearwatercorp.,usa,www.shearwatercorp.com)的反應。本發明的優選peg試劑是，例如，n-羥基琥珀酰亞胺基丙酸酯(peg-spa)、丁酸酯(peg-sba)、peg-琥珀酰亞胺基丙酸酯或分支的n-羥基琥珀酰亞胺如mpeg2-nhs(monfardini等,bioconjugatechem.6(1995)62-69)。這樣的方法可以用于在結合多肽賴氨酸的f-氨基或結合多肽的n-末端氨基處peg化。在另一個實施方式中，peg分子可以與結合多肽上的巰基偶聯(sartore等,appl.biochem.biotechnol.,27,45(1991)；morpurgo等,biocon.chem.,7,363-368(1996)；goodson等,bio/technology(1990)8,343；美國專利號5,766,897)。美國專利號6,610,281和5,766,897描述了可以與巰基偶聯的示例性的反應性peg物質。在其中peg分子與結合多肽上的半胱氨酸殘基偶聯的一些實施方式中，半胱氨酸殘基是結合多肽原有的，而在其它實施方式中，一個或多個半胱氨酸殘基經工程化而進入到結合多肽中。突變可以引入結合多肽編碼序列中以產生半胱氨酸殘基。這可以，例如，通過使一個或多個氨基酸殘基突變為半胱氨酸而實現。用于突變為半胱氨酸殘基的優選氨基酸包括絲氨酸、蘇氨酸、丙氨酸和其它親水性殘基。優選地，待突變為半胱氨酸的殘基是表面暴露的殘基。本領域中公知用于基于蛋白質的一級結構預測殘基的表面可接近性的算法。或者，表面殘基可以通過比較結合多肽的氨基酸序列來預測，條件是結合多肽基于其進行設計和進化的框架晶體結構已經被解析(參見himanen等,nature.(2001)20-27；414(6866):933-8)且因此表面暴露的殘基已經被確定。在一個實施方式中，半胱氨酸殘基在或接近n-和/或c-末端處或在環區域內引入結合多肽中。在一些實施方式中,peg化的結合多肽包含共價附接于n-末端氨基酸的α氨基的peg分子。位點特異性的n-末端還原胺化描述于pepinsky等,(2001)jpet,297,1059和美國專利號5,824,784中。peg-醛利用其它可用親核氨基用于蛋白質的還原胺化的用途描述于美國專利號4,002,531、wieder等,(1979)j.biol.chem.254,12579和chamow等,(1994)bioconjugatechem.5,133中。在另一個實施方式中，peg化的結合多肽包含共價附接于接頭的一個或多個peg分子，該接頭隨之附接于結合多肽n-末端的氨基酸殘基的α氨基。這種方式公開于美國專利公開2002/0044921和wo094/01451中。在一個實施方式中，結合多肽在c-末端peg化。在具體的實施方式中，蛋白質通過引入疊氮基-甲硫氨酸和隨后通過staudinger反應偶聯甲基-peg-三芳基膦化合物而peg化。這種c-末端偶聯方法描述于cazalis等,bioconjug.chem.2004；15(5):1005-1009中。結合多肽的單peg化也可以按照wo94/01451中描述的一般方法產生。wo94/01451描述了用于制備具有修飾的末端氨基酸α-碳反應性基團的重組多肽的方法。該方法的步驟包括形成重組多肽和在n-末端α-胺和c-末端α-羧基處用一個或多個生物添加的保護基團對其進行保護。多肽然后可以與化學保護劑反應以選擇性地保護反應性側鏈基團并由此防止側鏈基團被改變。多肽然后用對于生物保護基團特異性的切割試劑切割以形成未保護的末端氨基酸α-碳反應性基團。未保護的末端氨基酸α-碳反應性基團用化學修飾劑進行修飾。側鏈保護的末端修飾單拷貝多肽然后在側鏈基團處脫保護以形成末端修飾的重組單拷貝多肽。方法中步驟的數量和順序可以變化以實現多肽的n-和/或c-末端氨基酸處的選擇性修飾。偶聯反應中結合多肽與活化peg的比率可以為約1:0.5-1:50、約1:1-1:30或約1:5-1:15。各種水性緩沖液可以用于本方法中以催化peg共價添加到結合多肽。在一個實施方式中，所使用的緩沖液的ph為約7.0-9.0。在另一個實施方式中，ph是在略堿性范圍內，例如，約7.5-8.5。可以使用具有接近于中性ph范圍的pka的緩沖液，例如磷酸鹽緩沖劑。本領域中已知的常規分離和純化技術可用于純化peg化的結合多肽，如尺寸排阻(例如，凝膠過濾)和離子交換色譜。產物也可以使用sds-page分離。可以分離的產物包括單-、二-、三-、多-或未-peg化的結合多肽以及游離的peg。單-peg偶聯物的百分比可以通過匯合洗脫峰周圍的較寬級分來控制以提高組合物中單-peg的百分比。約90％的單-peg偶聯物代表了產率和活性的良好平衡。其中例如，至少92％或至少96％的偶聯物是單-peg種類的組合物可能是希望的。在本發明的實施方式中，單-peg偶聯物的百分比為90％至96％。在一個實施方式中，本發明的peg化結合多肽包含一個、兩個或更多個peg部分。在一個實施方式中，peg部分結合于在蛋白質的表面上和/或遠離接觸靶配體的表面的氨基酸殘基。在一個實施方式中，peg-結合多肽中peg的綜合或總分子量為約3,000da-60,000da，任選地約10,000da-36,000da。在一個實施方式中，peg化結合多肽中的peg基本上是線性的、直鏈peg。在本發明的一個實施方式中，peg化結合多肽中的peg在室溫下8-16小時內使用羥胺分析(例如，450mm羥胺(ph6.5))不從peg化氨基酸殘基水解，且因此是穩定的。在一個實施方式中，組合物的超過80％是穩定的單-peg-結合多肽，更優選至少90％，和最優選至少95％。在另一個實施方式中，本發明的peg化結合多肽優選保留至少25％、50％、60％、70％、80％、85％、90％、95％或100％的與未修飾蛋白質相關的生物活性。在一個實施方式中，生物活性是指其結合cxcr3的能力，如通過kd、kon或koff評價的。在一個具體實施方式中，peg化結合多肽蛋白相對于未peg化結合多肽顯示出與cxcr3的結合的提高。相對于未修飾的結合多肽的清除率，peg修飾的多肽的血清清除率可以降低約10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％或甚至90％。peg修飾的多肽的半衰期(t1/2)可以相對于未修飾蛋白質的半衰期增加。相對于未修飾的結合多肽的半衰期，peg結合多肽的半衰期可以增加至少10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％、125％、150％、175％、200％、250％、300％、400％或500％，或者甚至1000％。在一些實施方式中，在體外測定蛋白質半衰期，比如，在緩沖鹽水溶液中或在血清中。在其它實施方式中，蛋白質半衰期是體內半衰期，比如在動物的血清或其它體液中的蛋白質半衰期。治療性制劑和施用方式本公開特征在于用于治療響應于cxcr3生物活性的抑制的病癥或預防前期病癥的方法。優選的實例是特征為炎癥或細胞過度增殖的病癥。施用的技術和劑量根據特定多肽的類型和所治療的特定病癥而不同，但可以由技術人員容易地確定。通常，管理機構要求用作治療劑的蛋白質試劑進行配制以具有可接受的低熱原水平。因此，治療性制劑與其它制劑的區別通常在于：其基本上是無熱原的，或者至少包含的熱原不超過由適當的管理機構(例如，fda)確定的可接受的熱原水平。本公開的治療性組合物可以以單位劑量形式與藥學上可接受的稀釋劑、載體或賦形劑一起施用。作為非限制性的例子，可以腸胃外(例如，靜脈內、皮下)、口服或局部施用。此外，可以采用任何基因治療技術(使用編碼本發明多肽的核酸)，例如裸dna遞送、重組基因和載體、基于細胞的遞送，包括患者細胞的離體操作，等。該組合物可以是用于口服施用的丸劑、片劑、膠囊、液體或持續釋放片劑，或者用于靜脈內、皮下或腸胃外施用的液體，或者用于局部施用的凝膠、洗劑、軟膏、霜劑或者聚合物或其它持續釋放媒介的形式。在例如"remington:thescienceandpracticeofpharmacy"(20thed.,a.r.gennaroar.編輯,2000,lippincottwilliams&wilkins,philadelphia,pa.)中可以找到本領域公知的用于制備制劑的方法。用于腸胃外施用的制劑可以，例如，含有賦形劑、無菌水、鹽水、聚烷撐二醇比如聚乙二醇、植物來源的油或氫化萘類。生物相容性的、可生物降解的交酯聚合物、丙交酯/乙交酯共聚物或聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物可以用于控制化合物的釋放。納米顆粒制劑(例如，可生物降解的納米顆粒、固體脂質納米顆粒、脂質體)可用于控制化合物的生物分布。其它潛在有用的腸胃外遞送體系包括乙烯-乙酸乙烯酯共聚物顆粒、滲透泵、可植入式輸注系統和脂質體。制劑中化合物的濃度根據多種因素變化，包括待施用藥物的劑量和施用途徑。多肽可任選地作為藥學上可接受的鹽施用，比如在制藥工業中常用的無毒的酸加成鹽或金屬復合物。酸加成鹽的例子包括有機酸，比如乙酸、乳酸、撲酸、馬來酸、檸檬酸、蘋果酸、抗壞血酸、琥珀酸、苯甲酸、棕櫚酸、辛二酸、水楊酸、酒石酸、甲磺酸、甲苯磺酸或三氟乙酸等；聚合酸如單寧酸、羧甲基纖維素等；和無機酸，如鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸等。金屬復合物包括鋅、鐵等等。在一個實例中，多肽在乙酸鈉存在的情況下配制以提高熱穩定性。用于口服使用的制劑包括在與非毒性的藥學上可接受的賦形劑的混合物中包含活性成分的片劑。這些賦形劑可以是，例如，惰性稀釋劑或填充劑(例如，蔗糖和山梨醇)、潤滑劑、助流劑和抗粘劑(例如，硬脂酸鎂、硬脂酸鋅、硬脂酸、硅石、氫化植物油或滑石)。用于口服使用的制劑也可以作為可咀嚼片劑，或作為硬明膠膠囊(其中活性成分與惰性固體稀釋劑混合)或作為軟明膠膠囊劑(其中活性成分與水或油介質混合)提供。治療有效劑量是指產生施用所要達到的治療效果的劑量。確切的劑量取決于待治療的病癥，并且可以由本領域技術人員利用已知技術確定。通常，多肽以每天約0.01g/kg至約50mg/kg，優選每天0.01mg/kg至約30mg/kg，最優選每天0.1mg/kg至約20mg/kg施用。多肽可以每天(例如，每天一次、二次、三次或四次)或優選以較低頻率(例如、每周、每兩周、每三周、每月或每季度)給予。此外，如本領域已知的，根據年齡以及體重、一般健康狀況、性別、飲食、給藥時間、藥物相互作用和疾病的嚴重程度做出調整可能是必要的，并且將由本領域技術人員通過常規實驗確定。示例性用途本文描述的cxcr3結合蛋白及其相關變體可用于多種治療和診斷應用中。這些包括通過競爭或阻斷與cxcr3的結合抑制cxcr3的生物學活性以及向細胞(優選表達cxcr3的細胞)遞送細胞毒性部分或成像部分。這些分子的小尺寸和穩定結構對于藥物的制造可能是特別有價值的，從身體的快速清除對于其中快速清除是希望的某些應用或者使用具有這樣的特性的分子配制成合適的或改進的新型遞送系統是特別有價值的。基于其作為cxcr3生物活性的抑制劑的效力，本公開的多肽對于多種癌癥病癥以及由癌癥產生的并發癥如胸膜積液和腹水、結腸直腸癌、白血病、淋巴瘤、頭頸癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌(nsclc)和胰腺癌是有效的。癌癥的非限制性實例包括膀胱癌、血癌、骨癌、腦癌、乳腺癌、軟骨癌、結腸癌、腎癌、肝癌、肺癌、淋巴結癌、神經組織癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、骨骼肌癌、皮膚癌、脊髓癌、脾癌、胃癌、睪丸癌、胸腺癌、甲狀腺癌、氣管癌、泌尿生殖道癌、輸尿管癌、尿道癌、子宮癌或陰道癌。cxcr3結合多肽可單獨或與一種或多種另外的治療如化療、放療、免疫療法、外科手術介入或這些方法的任何組合聯合施用。如上所述的，長期治療在其它治療策略的情況下作為輔助療法同樣是可能的。優選地，在乳腺癌中，聯合療法是與赫塞汀或其它her-2療法。在這些方法的某些實施方式中，可以一起(同時地)或在不同時間(依次地)施用一種或多種多肽治療劑。此外，多肽治療劑可以與用于治療癌癥或抑制血管生成的另一類型的化合物一起施用。在某些實施方式中，可以單獨使用本發明的所述抗-cxcr3抗體藥劑。或者，所述藥劑可以與針對增殖性障礙(例如，腫瘤)的治療或預防的其他常規抗癌治療途徑組合使用。例如，這些方法可用于癌癥預防、癌癥術后復發和轉移的預防以及作為其他常規癌癥療法的輔助治療。本公開認為，常規癌癥療法(例如化療、放療、光療、免疫療法和手術)的效力可以通過使用所述多肽治療劑來增強。眾多的常規化合物已被證明具有抗腫瘤活性。這些化合物已被用作化療中的藥劑以收縮實體腫瘤、預防腫瘤轉移和進一步生長或降低白血病或骨髓惡性腫瘤中的惡性細胞數量。雖然化療對治療各種類型的惡性腫瘤有效，但許多抗腫瘤化合物會導致有害副作用。已證明，當結合兩種或更多種不同治療時，治療可能協同地作用并允許降低每種治療的劑量，由此降低每種化合物在較高劑量下產生的有害副作用。在其他情況中，難于以一種療法治療的惡性腫瘤可能響應于兩種或更多種不同治療的組合療法。當本發明的多肽治療劑伴隨地或相繼地與另一常規抗腫瘤劑組合施用時，這種治療劑可發現為提高抗腫瘤劑的療效或克服這種抗腫瘤劑的細胞抗性。這允許減小抗腫瘤劑的劑量，由此減輕有害副作用，或恢復抗腫瘤劑在抗性細胞中的效力。可用于組合抗腫瘤療法的藥物化合物包括(僅舉例說明)：氨魯米特、安吖啶、阿那曲唑、天冬酰胺酶、卡介苗、比卡魯胺、博來霉素、布舍瑞林、白消安、喜樹堿、卡培他濱、卡鉑、卡莫司汀、苯丁酸氮芥、順鉑、克拉屈濱、氯膦酸鹽、秋水仙堿、環磷酰胺、環丙孕酮、阿糖胞苷、達卡巴嗪、更生霉素、柔紅霉素、雙烯雌酚、己烯雌酚、多西他賽、多柔比星、表柔比星、雌二醇、雌莫司汀、依托泊苷、依西美坦、非格司亭、氟達拉濱、氟氫可的松、氟尿嘧啶、氟甲睪酮、氟他胺、吉西他濱、染料木黃酮、戈舍瑞林、羥基脲、伊達比星、異環磷酰胺、伊馬替尼、干擾素、伊立替康、ironotecan、來曲唑、亞葉酸、亮丙瑞林、左旋咪唑、洛莫司汀、氮芥、甲羥孕酮、甲地孕酮、美法侖、巰基嘌呤、美司鈉、甲氨蝶呤、絲裂霉素、米托坦、米托蒽醌、尼魯米特、諾考達唑、奧曲肽、奧沙利鉑、紫杉醇、帕米膦酸、噴司他丁、普卡霉素、卟吩姆、丙卡巴肼、雷替曲塞、利妥昔單抗、鏈佐星、蘇拉明、他莫昔芬、替莫唑胺、替尼泊苷、睪酮、硫鳥嘌呤、噻替派、二氯二茂鈦、拓撲替康、曲妥珠單抗、維甲酸、長春花堿、長春新堿、長春地辛和長春瑞濱。某些化療抗腫瘤化合物可以通過其作用機理分類到例如下列組中：抗代謝物/抗癌劑如嘧啶類似物(5-氟尿嘧啶、氟尿苷、卡培他濱、吉西他濱和阿糖胞苷)和嘌呤類似物、葉酸拮抗劑和相關抑制劑(巰基嘌呤、硫鳥嘌呤、噴司他丁和2-氯脫氧腺苷(克拉屈濱))；抗增殖/抗有絲分裂劑，包括天然產物如長春花生物堿(長春花堿、長春新堿和長春瑞濱)、微管破壞劑如紫杉烷(紫杉醇、多西他賽)、長春新堿、長春花堿、諾考達唑、埃博霉素和諾維本、epidipodophyllotoxins(依托泊苷、替尼泊苷)、dna損傷劑(放線菌素、安吖啶、蒽環類、博來霉素、白消安、喜樹堿、卡鉑、苯丁酸氮芥、順鉑、環磷酰胺、癌得星、更生霉素、柔紅霉素、多柔比星、表柔比星、六甲蜜胺、奧沙利鉑、異環磷酰胺、美法侖、氮芥(merchlorehtamine)、絲裂霉素、米托蒽醌、亞硝基脲、普卡霉素、丙卡巴肼、泰素、泰索帝、替尼泊苷、三亞乙基硫代磷酰胺和依托泊苷(vp16))；抗生素類如更生霉素(放線菌素d)、柔紅霉素、多柔比星(阿霉素)、伊達比星、蒽環類、米托蒽醌、博來霉素、普卡霉素(光神霉素)和絲裂霉素；酶(l-天冬酰胺酶，其系統性地代謝l-天冬酰胺并剝奪無合成自身的天冬酰胺的能力的細胞)；抗血小板藥物；抗增殖/抗有絲分裂烷化劑如氮芥類(氮芥、環磷酰胺和類似物、美法侖、苯丁酸氮芥)、乙烯亞胺類和甲基三聚氰胺類(六甲蜜胺和噻替派)、烷基磺酸酯-白消安、亞硝基脲(卡莫司汀(bcnu)及類似物、鏈佐星)、trazenes-達卡巴嗪(dtic)；抗增殖/抗有絲分裂抗代謝物如葉酸類似物(甲氨蝶呤)；鉑配位絡合物(順鉑、卡鉑)、丙卡巴肼、羥基脲、米托坦、氨魯米特；激素類、激素類似物(雌激素、他莫昔芬、戈舍瑞林、比卡魯胺、尼魯米特)和芳香酶抑制劑(來曲唑、阿那曲唑)；抗凝劑(肝素、合成肝素鹽和其他凝血酶抑制劑)；纖維蛋白溶解劑(例如組織纖維溶酶原活化劑、鏈激酶和尿激酶)、阿司匹林、雙嘧達莫、噻氯匹定、氯吡格雷、阿昔單抗；抗遷移劑；抗分泌劑(breveldin)；免疫抑制劑(環孢霉素、他克莫司(fk-506)、西羅莫司(雷帕霉素)、硫唑嘌呤、霉酚酸酯)；抗血管生成化合物(tnp-470、染料木黃酮)和生長因子抑制劑(例如，vegf抑制劑、成纖維細胞生長因子(fgf)抑制劑)；血管緊張素受體阻斷劑；一氧化氮供體；反義寡核苷酸；抗體(曲妥珠單抗)；細胞周期抑制劑和分化誘導劑(維甲酸)；mtor抑制劑、拓撲異構酶抑制劑(多柔比星(阿霉素)、安吖啶、喜樹堿、柔紅霉素、更生霉素、eniposide、表柔比星、依托泊苷、伊達比星和米托蒽醌、拓撲替康、伊立替康)、皮質類固醇類(可的松、地塞米松、氫化可的松、甲基強的松龍、潑尼松和潑尼松龍)；生長因子信號轉導激酶抑制劑；線粒體功能障礙誘導劑和半胱天冬酶活化劑；和染色質破壞劑。根據組合療法的性質，可以在施用其他療法的同時和/或之后施用該多肽治療劑。多肽治療劑的施用可以以單劑量或多劑量進行。在一些情況中，多肽治療劑的施用開始于常規療法之前的至少數天；而在其他情況中，施用在緊接傳統療法之前或在施用傳統療法的同時開始。在診斷應用的一個實例中，來自疑似患有特征為不當的血管生成的病癥的患者的生物樣品如血清或組織活檢樣品與本公開的可檢測地標記的多肽接觸以檢測cxcr3的水平。該檢測的cxcr3水平然后與也接觸標記多肽的正常樣品中檢測的cxcr3水平比較。cxcr3水平的至少10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％或90％的提高可以考慮為診斷指標。在某些實施方式中，cxcr3結合多肽進一步附接于能夠被檢測的標記(例如，該標記可以是放射性同位素、熒光化合物、酶或輔酶因子)。活性部分可以是放射活性試劑，例如放射性重金屬如鐵螯合物，釓或錳的放射性螯合物，氧、氮、鐵、碳或釓的正電子發射體，43k、52fe、57co、67cu、67ga、68ga、123i、125i、131i、132i或99tc。可以使用固定于這樣的部分的結合劑來作為成像劑，并以對于哺乳動物(例如人類)中的診斷目的有效的量來施用，然后檢測該成像劑的定位和累積。可以用放射性閃爍攝影術、核磁共振成像、計算機斷層掃描或正電子成像術來檢測該成像劑的定位和累積。針對cxcr3的cxcr3結合多肽的免疫閃爍成像可以用于檢測和/或診斷癌癥和脈管系統。例如，以99锝、111銦或125碘標記的任何針對cxcr3標志物的結合多肽可以有效地用于這種成像。對于本領域技術人員來說顯而易見的，待施用的放射性同位素的量取決于該放射性同位素。本領域普通技術人員可以容易地根據用作活性部分的給定放射性核素的比活性和能量來計算待施用的成像劑的量。典型地，施用每劑成像劑0.1-100毫居，優選1-10毫居，最通常2-5毫居。因此，根據本發明可用作成像劑的組合物(其包含與放射性部分偶聯的靶向部分)包含0.1-100毫居，在一些實施方式中優選為1-10毫居，在一些實施方式中優選為2-5毫居，在一些實施方式中更優選為1-5毫居。cxcr3結合多肽還可用于向表達cxcr3的細胞或組織遞送另外的治療劑(包括但不限于藥物化合物、化療化合物和放療化合物)。在一個實例中，該cxcr3結合多肽與化療劑融合以將該化療劑靶向遞送至表達cxcr3的腫瘤細胞或組織。cxcr3結合多肽可用于多種應用中，包括研究、診斷和治療應用。例如，其可用于分離和/或純化受體或其部分，以及用于研究受體結構(例如構象)和功能。在某些方面，各種結合多肽可用于檢測或測量cxcr3的表達，例如，在內皮細胞(例如，靜脈內皮細胞)上或在用cxcr3基因轉染的細胞上。因此，它們也在用于診斷或研究目的的諸如細胞分選和成像的應用(例如，流式細胞術和熒光激活細胞分選)中有用。在某些實施方式中，為了診斷的目的，可以標記或不標記結合多肽或其片段。通常，診斷分析需要檢測由結合多肽與cxcr3的結合產生的復合物的形成。與抗體類似，可以直接標記結合多肽或片段。可以采用多種標記，包括，但不限于：放射性核素、熒光劑、酶、酶底物、酶輔因子、酶抑制劑和配體(如，生物素、半抗原)。本領域技術人員已知許多合適的免疫分析法(參見，例如，美國專利號3,817,827、3,850,752、3,901,654和4,098,876)。在未標記時，結合多肽可以用于分析中，比如凝集分析。未標記的結合多肽也可以與另外(一種或多種)合適的試劑結合使用，該試劑可以用于檢測結合多肽，比如，與結合多肽反應的標記抗體或其它合適的試劑(例如，標記的蛋白a)。在一個實施方式中，本發明的結合多肽可以用于酶免疫分析法中，其中所述多肽與酶偶聯。當包含cxcr3蛋白的生物樣品與所述結合多肽組合時，在結合多肽和cxcr3蛋白之間發生結合。在一個實施方式中，含有表達cxcr3蛋白的細胞(例如，內皮細胞)的樣品與所述抗體組合，并且在結合多肽和攜帶被該結合多肽識別的cxcr3蛋白的細胞之間發生結合。這些結合的細胞可以與未結合的試劑分離并且可以測定特異地結合細胞的結合多肽-酶偶聯物的存在，例如，通過將樣品與酶的底物(其在受到酶的作用時產生顏色變化或其它可檢測的變化)接觸。在另一實施方式中，所述結合多肽可以是未標記的，并且可以加入識別所述結合多肽的第二標記多肽(例如，抗體)。在某些方面，還可以制備用于檢測生物樣品中cxcr3蛋白的存在的試劑盒。這些試劑盒將包括與cxcr3蛋白或所述受體的部分結合的cxcr3結合多肽，以及一種或多種適于檢測結合多肽和受體蛋白或其部分之間的復合物的存在的輔助試劑。本發明的多肽組合物可以單獨地或與對于其它表位特異性的另外的抗體組合以凍干形式提供。結合多肽和/或抗體(其可以是標記或未標記的)可以與輔助成分(例如，緩沖劑如tris、磷酸鹽和碳酸鹽，穩定劑，賦形劑，殺生物劑和/或惰性蛋白質，例如，牛血清白蛋白)一起包括在試劑盒中。例如，結合多肽和/或抗體可以作為與輔助成分的凍干混合物提供，或輔助成分可以單獨地提供用于由使用者組合。一般地，這些輔助材料基于活性結合多肽或抗體的量以小于約5％重量存在，且通常基于多肽或抗體濃度以至少約0.001％重量的總量存在。當采用能夠與結合多肽結合的第二抗體時，這種抗體可以在試劑盒中提供，例如在單獨的小瓶或容器中。第二抗體(如果存在)通常是標記的，并且可以以與上文描述的抗體制劑相似的方式配制。類似地，本公開還提供了檢測和/或定量cxcr3的表達的方法，其中包含細胞或其部分(例如，膜部分)的組合物在適合于結合的條件下與結合cxcr3或受體的部分的結合多肽接觸，并監測該結合。檢測到指示結合多肽與cxcr3或其部分之間的復合物的形成的結合多肽表明受體的存在。多肽與細胞的結合可以通過標準方法測定，如工作實施例中描述的那些。該方法可用于檢測來自個體的細胞上的cxcr3表達。任選地，可以評估內皮細胞表面上cxcr3的定量表達，例如，通過流式細胞術，且染色強度可與疾病易感性、進展或風險相關聯。本公開還提供了檢測哺乳動物對某些疾病的易感性的方法。舉例來說，該方法可用于基于細胞上存在的cxcr3的量和/或哺乳動物中cxcr3-陽性細胞的數量檢測哺乳動物對進展的疾病的易感性。使用標準的一字母或三字母的縮寫表示多肽序列。除非另有說明，每條多肽序列具有左側的氨基端和右側的羧基端；各單鏈核酸序列和各雙鏈核酸序列的頂部鏈具有左側的5'端和右側的3'端。還可以通過解釋特定多肽序列與參考序列如何不同來描述該特定多肽序列。除非另有說明，以下術語應該理解為具有下面的意思：術語"cxcr3抑制劑"和"cxcr3拮抗劑"可互換使用。各自是可檢測地抑制cxcr3的至少一種功能的分子。相反地，“cxcr3激動劑”是可檢測地提高cxcr3的至少一種功能的分子。由cxcr3抑制劑引起的抑制無需是完全的，只要其可使用測定方法檢測。可以使用cxcr3功能的任何測定法，本文提供了其實例。可被cxcr3抑制劑抑制或被cxcr3激動劑提高的cxcr3功能的例子包括：癌細胞生長或細胞凋亡(程序性細胞死亡)等等。cxcr3抑制劑和cxcr3激動劑的類型的實例包括，但不限于cxcr3結合多肽如抗原結合蛋白(例如，cxcr3抑制性抗原結合蛋白)、抗體、抗體片段和抗體衍生物。術語“肽”、“多肽”和“蛋白質”各自指包含通過肽鍵彼此接合的兩個或更多個氨基酸殘基的分子。這些術語包含，例如，天然和人工蛋白質、蛋白質片段和蛋白質序列的多肽類似物(比如突變蛋白、變體和融合蛋白)以及翻譯后或者以其它方式共價或非共價地修飾的蛋白質。肽、多肽或蛋白質可以為單體的或多聚的。多肽(例如，抗體)的“變體”包括其中相對于另一多肽序列，一個或多個氨基酸殘基插入氨基酸序列中、從氨基酸序列刪除和/或被置換的氨基酸序列。公開的變體包括，例如，融合蛋白。多肽的“衍生物”為已經進行化學修飾的多肽(例如，抗體)，例如，通過與另一化學部分(比如，聚乙二醇或白蛋白，例如，人血清白蛋白)偶聯、磷酸化和糖基化。除非另有說明，除了包括兩條全長重鏈和兩條全長輕鏈的抗體之外，術語“抗體”包括其衍生物、變體、片段或突變蛋白，其例子在下文有描述。“抗原結合蛋白”是包含與抗原結合的部分和，任選地，允許抗原結合部分采取促進抗原結合蛋白與抗原結合的構象的骨架或框架部分的蛋白質。抗原結合蛋白的例子包括抗體、抗體片段(例如，抗體的抗原結合部分)、抗體衍生物和抗體類似物。抗原結合蛋白可以包括，例如，具有移植的cdr或cdr衍生物的替代性蛋白質骨架或人工骨架。這些骨架包括，但不限于抗體衍生的骨架(包含引入以例如使抗原結合蛋白的三維結構穩定的突變)以及完全合成的骨架(包含，例如，生物相容性聚合物)。參見，例如，korndorfer等,2003,proteins:structure,function,andbioinformatics,第53卷,第1期:121-129；roque等,2004,biotechnol.prog.20:639-654。此外，可以使用肽抗體模擬物(“pam”)以及基于抗體模擬物的骨架(利用纖維連接蛋白組分作為骨架)。抗原結合蛋白可以具有，例如，天然存在的免疫球蛋白的結構。“免疫球蛋白”是四聚體分子。在天然存在的免疫球蛋白中，每個四聚體由兩個相同的多肽鏈對組成，每對具有一條“輕”鏈(約25kda)和一條“重”鏈(約50-70kda)。每條鏈的氨基端部分包括主要負責抗原識別的約100至110個或更多個氨基酸的可變區。每條鏈的羧基端部分限定主要負責效應子功能的恒定區。人輕鏈分類為κ或λ輕鏈。重鏈分類為μ、δ、γ、α或ε，并分別定義抗體同種型為igm、igd、igg、iga和ige。優選地，本文公開的抗-cxcr3抗體的特征在于在重鏈vh和輕鏈vl氨基酸序列中的其可變域區域序列。優選的抗體為a6，其為κigg抗體。在輕鏈和重鏈內，可變區和恒定區通過約12個或更多個氨基酸的“j”區連接，其中重鏈還包括約10個或更多個氨基酸的“d”區。通常參見，fundamentalimmunology，第7章(paul,w.編輯,第二版.raven出版,n.y.(1989))。每個輕/重鏈對的可變區形成抗體結合位點，使得完整的免疫球蛋白具有兩個結合位點。“多特異性抗體”是識別在一個或多個抗原上的超過一個表位的抗體。該類型抗體的子類為“雙特異性抗體”，其識別在相同或不同抗原上的2個不同的表位。如果抗原結合蛋白以1納摩爾或更小的解離常數結合抗原(例如，人cxcr3)，那么其“特異性地結合”該抗原。“抗原結合結構域”、“抗原結合區”或“抗原結合位點”為含有與抗原相互作用并造成抗原結合蛋白對抗原的特異性和親和力的氨基酸殘基(或其它部分)的抗原結合蛋白的部分。對于特異性地結合其抗原的抗體，這包括其cdr結構域中至少一個的至少部分。“表位”為分子的被抗原結合蛋白(例如，被抗體)結合的部分。表位可以包括分子的非連續部分(例如在多肽中，在多肽的一級序列中不連續但在多肽的三級和四級結構的情況下彼此足夠接近從而能夠被抗原結合蛋白結合的氨基酸殘基)。兩個多核苷酸或兩個多肽序列的“百分同源性”通過利用gap計算機程序(gcgwisconsinpackage的部分，版本10.3(accelrys，圣地亞哥，加利福尼亞州))使用其默認參數比較序列來確定。“宿主細胞”為可以用于表達核酸的細胞。宿主細胞可以是原核細胞，例如，大腸桿菌，或其可以是真核細胞，例如，單細胞真核生物(例如，酵母或其它真菌)、植物細胞(例如，煙草或番茄植物細胞)、動物細胞(例如，人細胞、猴細胞、倉鼠細胞、大鼠細胞、小鼠細胞或昆蟲細胞)或雜交瘤。宿主細胞的例子包括cos-7猴腎細胞系(atcccrl1651)(參見gluzman等，1981,cell23:175)、l細胞、c127細胞、3t3細胞(atccccl163)、中國倉鼠卵巢(cho)細胞或其衍生物如veggiecho和相關細胞系(其在無血清培養基中生長)(rasmussen等，1998,cytotechnology28:31)或cho株dx-b11(其是dhfr缺陷的)(urlaub等，1980,proc.natl.acad.sci.usa77:4216-20)、hela細胞、bhk(atcccrl10)細胞系、源于非洲綠猴腎細胞系cv1的cv1/ebna細胞系(atccccl70)(mcmahan等，1991,emboj.10:2821)、人胚腎細胞(如293、293ebna或msr293)、人表皮a431細胞、人colo205細胞、其它轉化的靈長類細胞系、正常二倍體細胞、來源于原代組織、原代外植體的體外培養物的細胞株、hl-60、u937、hak或jurkat細胞。通常，宿主細胞是可以用多肽編碼核酸(其隨后可以在宿主細胞中表達)轉化或轉染的培養細胞。短語“重組宿主細胞”可以用于表示已經用待表達的核酸轉化或轉染的宿主細胞。宿主細胞也可以為包含核酸但除非將調控序列引入到該宿主細胞中以使得該調控序列可操作地與該核酸連接，否則不以所需的水平表達該核酸的細胞。應該理解，術語宿主細胞不僅僅指特定的受試細胞，還指這種細胞的后代或潛在的后代。因為某些改變可能由于例如突變或環境影響而在后續的世代中出現，因此實際上，這些后代可能與親本細胞不相同，但仍然包括在本文使用的該術語的范圍內。抗原結合蛋白抗原結合蛋白(例如，抗體、抗體片段、抗體衍生物、抗體突變蛋白和抗體變體)為結合cxcr3(優選地，人cxcr3)的多肽。抗原結合蛋白包括抑制cxcr3的生物活性的抗原結合蛋白。包含一個或多個抗原結合蛋白的寡聚體可以用作cxcr3拮抗劑。寡聚體可以為共價連接或非共價連接的二聚體、三聚體或更高級的寡聚體的形式。考慮使用包含兩個或更多個抗原結合蛋白的寡聚體，一個例子是同源二聚體。其它寡聚體包括異源二聚體、同源三聚體、異源三聚體、同源四聚體、異源四聚體等。一個實施方式涉及包括通過在與抗原結合蛋白融合的肽部分之間的共價或非共價相互作用連接的多個抗原結合蛋白的寡聚體。這類肽可以是肽接頭(間隔物)，或具有促進低聚化的性質的肽。亮氨酸拉鏈和來源于抗體的某些多肽屬于能夠促進與其連接的抗原結合蛋白的低聚化的肽，如下文更詳細描述的。在特定實施方式中，寡聚體包含兩個至四個抗原結合蛋白。寡聚體的抗原結合蛋白可以是任何形式的，如上述形式的任何一種，例如，變體或片段。優選地，寡聚體包含具有cxcr3結合活性的抗原結合蛋白。在一個實施方式中，寡聚體使用源自免疫球蛋白的多肽制備。例如，ashkenazi等,1991,proc.natl.acad.sci.usa88:10535、byrn等,1990,nature344:677和hollenbaugh等,1992"constructionofimmunoglobulinfusionproteins",incurrentprotocolsinimmunology,suppl.4，第10.19.1-10.19.11頁已經描述了包含與抗體來源的多肽的各種不同部分(包括fc結構域)融合的某些異源多肽的融合蛋白的制備。一個實施方式涉及通過將抗-cxcr3抗體的cxcr3結合片段與抗體的fc區融合產生的包含兩個融合蛋白的二聚體。可以通過例如，將編碼融合蛋白的基因融合體插入合適的表達載體中，在用重組表達載體轉化的宿主細胞中表達該基因融合體和使表達的融合蛋白非常像抗體分子一樣組裝，由此在fc部分之間形成鏈間二硫鍵以產生二聚體來制備該二聚體。術語“fc多肽”包括源自抗體fc區的多肽的天然和突變蛋白形式。也包括含有促進二聚化的鉸鏈區的這種多肽的截短形式。包含fc部分的融合蛋白(以及由其形成的寡聚體)具有如下優勢：易于通過在蛋白a或蛋白g柱上的親和色譜純化。制備低聚抗原結合蛋白的另一方法包括使用亮氨酸拉鏈。亮氨酸拉鏈結構域為促進其中存在亮氨酸拉鏈結構域的蛋白質的低聚化的肽。亮氨酸拉鏈最初在幾種dna結合蛋白中識別(landschulz等,1988,science240:1759)，并且此后在多種不同的蛋白質中發現。已知的亮氨酸拉鏈中有二聚化或三聚化的天然存在的肽及其衍生物。wo94/10308描述了適于產生可溶性低聚蛋白質的亮氨酸拉鏈結構域的例子，并且hoppe等,1994,febsletters344:191中描述了來源于肺表面活性蛋白d(spd)的亮氨酸拉鏈。fanslow等,1994,semin.immunol.6:267-78中描述了修飾的亮氨酸拉鏈的使用，該修飾的亮氨酸拉鏈允許與其融合的異源蛋白質穩定地三聚化。在一種方法中，在合適的宿主細胞中表達包含與亮氨酸拉鏈肽融合的抗cxcr3抗體片段或衍生物的重組融合蛋白，并從培養物上清液回收形成的可溶性低聚化抗-cxcr3抗體片段或衍生物。可以通過常規技術產生本發明的抗原結合蛋白的抗原結合片段。這些片段的例子包括，但不限于fab和f(ab')2片段。本公開提供了結合cxcr3的單克隆抗體。單克隆抗體可以利用本領域已知的任何技術產生，例如，通過使在完成免疫方案后從轉基因動物中收集的脾細胞永生化。可以使用本領域已知的任何技術使脾細胞永生化，例如，通過使脾細胞與骨髓瘤細胞融合以產生雜交瘤。在產生雜交瘤的融合過程中使用的骨髓瘤細胞優選為不產生抗體的，具有高融合效率和酶缺陷的(這使得該骨髓瘤細胞不能在僅支持期望的融合細胞(雜交瘤)生長的某些選擇培養基中生長)。在小鼠融合中使用的合適的細胞系的例子包括sp-20、p3-x63/ag8、p3-x63-ag8.653、ns1/1.ag41、sp210-ag14、fo、nso/u、mpc-11、mpc11-x45-gtg1.7和s194/5xx0bul；在大鼠融合中使用的細胞系的例子包括r210.rcy3、y3-ag1.2.3、ir983f和48210。可用于細胞融合的其它細胞系為u-266、gm1500-grg2、licr-lon-hmy2和uc729-6。針對cxcr3的抗原結合蛋白可以用于例如，在體外或體內檢測cxcr3多肽的存在的分析中。也可以采用該抗原結合蛋白通過免疫親和色譜來純化cxcr3蛋白。阻斷性抗原結合蛋白可以用于本文公開的方法中。可以使用作為cxcr3拮抗劑發揮作用的抗原結合蛋白治療任何cxcr3誘導的病癥，包括但不限于各種癌癥。抗原結合蛋白可以在體外過程中使用，或體內施用以抑制cxcr3誘導的生物活性。因此，可以治療(直接或間接地)由cxcr3的蛋白水解活化引起或惡化的病癥，本文提供了其實例。在一個實施方式中，本發明提供治療方法，包括對需要的哺乳動物體內施用有效降低cxcr3誘導的生物活性的量的cxcr3阻斷性抗原結合蛋白。抗原結合蛋白包括抑制cxcr3的生物活性的全人單克隆抗體。可以通過許多常規技術的任何一種制備抗原結合蛋白。例如，它們可以從天然表達該抗原結合蛋白的細胞純化(例如，抗體可以從產生抗體的雜交瘤純化)，或利用本領域已知的任何技術在重組表達體系中產生。參見，例如，monoclonalantibodies,hybridomas:anewdimensioninbiologicalanalyses,kennet等(編輯),plenum出版社,紐約(1980)和antibodies:alaboratorymanual,harlowandland(編輯),coldspringharborlaboratory出版社，冷泉港實驗室,紐約(1988)。可以使用本領域已知的任何表達系統制備本發明的重組多肽。通常，用包含編碼所需多肽的dna的重組表達載體轉化宿主細胞。可以采用的宿主細胞包括原核細胞、酵母或高等真核細胞。原核細胞包括革蘭氏陰性或革蘭氏陽性有機體，例如，大腸桿菌或芽孢桿菌。高等真核細胞包括昆蟲細胞和哺乳動物來源的已建立細胞系。合適的哺乳動物宿主細胞系的例子包括cos-7系猴腎細胞(atcccrl1651)(gluzman等,1981,cell23:175)、l細胞、293細胞、c127細胞、3t3細胞(atccccl163)、中國倉鼠卵巢(cho)細胞、hela細胞、bhk(atcccrl10)細胞系和如mcmahan等，1991,emboj.10:2821所述的源自非洲綠猴腎細胞系cv1的cv1/ebna細胞系(atccccl70)。pouwels等(cloningvectors:alaboratorymanual,elsevier,n.y.,1985)描述了用于細菌、真菌、酵母和哺乳動物細胞宿主的合適的克隆和表達載體。轉化的細胞可以在促進多肽表達的條件下培養，并且多肽通過常規蛋白質純化過程回收。一種這樣的純化過程包括使用親和色譜，例如在cxcr3的全部或部分(例如，細胞外結構域)與其結合的基質上。本文考慮使用的多肽包括基本上沒有污染的內源物質的基本上同源的重組哺乳動物抗-cxcr3抗體多肽。可以通過許多已知技術中的任何一種制備抗原結合蛋白并針對所需的性質進行篩選。某些技術包括分離編碼目標抗原結合蛋白(例如，抗-cxcr3抗體)的多肽鏈(或其部分)的核酸，和通過重組dna技術操縱該核酸。例如，核酸可以另一目標核酸融合，或被改變(例如，通過誘突或其它常規技術)以添加、刪除或置換一個或多個氨基酸殘基。單鏈抗體可以通過經由氨基酸橋(短肽接頭)連接重鏈和輕鏈可變域(fv區)片段而得到單多肽鏈來形成。這樣的單鏈fv(scfv)通過將編碼肽接頭的dna融合在編碼兩個可變域多肽(vl和vh)的dna之間制備。取決于在兩個可變域之間的柔性接頭的長度，得到的多肽可以本身回折以形成抗原結合單體，或其可以形成多聚體(例如，二聚體、三聚體或四聚體)(kortt等,1997,prot.eng.10:423；kortt等,2001,biomol.eng.18:95-108)。通過將不同的包含vl和vh的多肽組合，可以形成結合不同表位的多聚scfv(kriangkum等,2001,biomol.eng.18:31-40)。為產生單鏈抗體而開發的技術包括在美國專利4,946,778；bird,1988,science242:423；huston等,1988,proc.natl.acad.sci.usa85:5879；ward等,1989,nature334:544和degraaf等,2002,methodsmol.biol.178:379-87中描述的那些技術。已知用于從目標抗體衍生不同亞類或同種型的抗體(即，亞類轉換)的技術。因此，例如，可以從igm抗體衍生igg抗體，反之亦然。這些技術允許制備具有給定抗體(親本抗體)的抗原結合性質，但也展示與不同于親本抗體的抗體同種型或亞類相關的生物學性質的新抗體。可以采用重組dna技術。在這些過程中可以采用編碼特定抗體多肽的克隆dna，例如，編碼所需同種型的抗體的恒定結構域的dna(lantto等,2002,methodsmol.biol.178:303-16)。此外，如果igg4是需要的，那么在鉸鏈區中引入點突變(cpscp->cppcp)(bloom等,1997,proteinscience6:407)以減輕形成h鏈內二硫鍵(其可以導致igg4抗體的異質性)的趨勢也可能是理想的。在特定實施方式中，本發明的抗原結合蛋白對cxcr3的結合親和力(ka)為至少106。在其它實施方式中，抗原結合蛋白的ka為至少107、至少108、至少109或至少1010。在另一實施方式中，該抗原結合蛋白表現的ka與本文實施例中描述的抗體的ka基本上相同。在另一實施方式中，本公開提供了對cxcr3具有低解離速率的抗原結合蛋白。在一個實施方式中，該抗原結合蛋白的koff為1×10-4至10-1或更小。在另一實施方式中，該koff為5×10-5至10-1或更小。在另一實施方式中，該koff與本文描述的抗體的koff基本上相同。在另一實施方式中，該抗原結合蛋白以與本文描述的抗體基本上相同的koff結合cxcr3。在另一方面，本公開提供抑制cxcr3的活性的抗原結合蛋白。在一個實施方式中，該抗原結合蛋白的ic50為1000nm或更小。在另一實施方式中，該ic50為100nm或更小；在另一實施方式中，該ic50為10nm或更小。在另一實施方式中，該ic50與在實施例中描述的抗體的ic50基本上相同。在另一實施方式中，該抗原結合蛋白以與本文描述的抗體基本上相同的ic50抑制cxcr3的活性。在另一方面，本公開提供了結合在細胞表面上表達的人cxcr3的抗原結合蛋白，且在如此結合時，其抑制細胞中的cxcr3信號傳導活性而不導致細胞表面上cxcr3量的顯著下降。可以使用任何測定或估算細胞表面上和/或內部的cxcr3量的方法。在其它實施方式中，抗原結合蛋白與cxcr3表達細胞的結合導致少于約75％、50％、40％、30％、20％、15％、10％、5％、1％或0.1％的細胞表面cxcr3內化。在另一方面，本公開提供了在體外或體內(例如，當施用于人類受試者時)具有至少一天的半衰期的抗原結合蛋白。在一個實施方式中，抗原結合蛋白的半衰期為至少三天。在另一實施方式中，抗原結合蛋白的半衰期為四天或更長。在另一實施方式中，該抗原結合蛋白的半衰期為八天或更長。在另一實施方式中，抗原結合蛋白被衍生化或修飾以使得其相比于未衍生化或未修飾的抗原結合蛋白具有更長的半衰期。在另一實施方式中，抗原結合蛋白含有一個或多個點突變以增加血清半衰期，比如在wo00/09560中所述，該文獻通過引入并入本文。本公開進一步提供了多特異性抗原結合蛋白，例如，雙特異性抗原結合蛋白，比如，通過兩個不同的抗原結合位點或區域結合cxcr3的兩個不同表位，或結合cxcr3的表位和另一分子的表位的抗原結合蛋白。此外，本文公開的雙特異性抗原結合蛋白可以包含來自本文描述的抗體之一的cxcr3結合位點和來自本文描述抗體中另一種(包括通過引用其它公開文獻在本文中描述的那些)的第二cxcr3結合位點。可選地，雙特異性抗原結合蛋白可以包含來自本文描述的抗體之一的抗原結合位點和來自本領域已知的另一cxcr3抗體或來自通過已知的方法或本文描述的方法制備的抗體的第二抗原結合位點。本領域已知許多用于制備雙特異性抗體的方法。這些方法包括如milstein等,1983,nature305:537描述的雜種-雜交瘤的使用及抗體片段的化學偶聯(brennan等,1985,science229:81；glennie等,1987,j.immunol.139:2367；美國專利號6,010,902)。此外。可以通過重組手段產生雙特性抗體，例如，通過利用亮氨酸拉鏈部分(即，來自fos和jun蛋白，其優先形成異源二聚體；kostelny等,1992,j.immunol.148:1547)或如美國專利號5,582,996中描述的其它“鎖和鑰”相互作用的結構域結構。另外的有用技術包括美國專利號5,959,083和5,807,706中描述的那些技術。在另一方面，該抗原結合蛋白包括抗體的衍生物。衍生化的抗體可以包含任何賦予該抗體所需的性質(比如，在特定用途中增加的半衰期)的分子或物質。衍生化的抗體可以包含，例如，可檢測(或標記)的部分(例如，放射性的、比色的、抗原的或酶的分子)，可檢測的珠(例如，磁珠或電子致密(例如，金)珠)或者結合另一分子的分子(例如，生物素或鏈霉親和素)，治療或診斷部分(例如，放射性的、細胞毒性的或藥學活性的部分)，增加抗體對特定用途(例如，施用于受試者如人類受試者，或其它體內或體外用途)的適用性的分子。可以用于抗體衍生化的分子的例子包括白蛋白(例如，人血清白蛋白)和聚乙二醇(peg)。可以利用本領域公知的技術制備白蛋白連接的和聚乙二醇化的抗體衍生物。在一個實施方式中，抗體與轉甲狀腺素蛋白(ttr)或ttr變體綴合或以其他方式連接。ttr或ttr變體可以用例如選自以下的化學物質進行化學修飾：葡聚糖、聚(n-乙烯基吡咯烷酮)、聚乙二醇、丙二醇均聚物、聚環氧丙烷/環氧乙烷共聚物、聚氧乙烯化多元醇和聚乙烯醇。95％同源性本公開提供了結構上特征為其可變結構域區域的氨基酸序列的多種抗體。但是，氨基酸序列可以發生一些改變而同時保留它們與其特異性靶標的高結合水平。更具體地，可變結構域區域的許多氨基酸可以用保守置換進行改變且可預期所得的抗體的結合特性與野生型抗體序列的結合特性沒有不同。抗體可變結構域中具有許多不與抗原直接相互作用或影響抗原結合且對于確定抗體結構不關鍵的氨基酸。例如，任何公開的抗體中預測的非關鍵氨基酸殘基優選用來自同一類別的另一氨基酸殘基替換。鑒別不消除抗原結合的氨基酸保守置換的方法是本領域中公知的(參見，例如，brummell等,biochem.32:1180-1187(1993)；kobayashi等proteineng.12(10):879-884(1999)和burks等proc.natl.acad.sci.usa94:412-417(1997))。near等mol.immunol.30:369-377,1993解釋了如何通過定點誘變影響或不影響結合。near等僅突變他們認為具有改變抗原結合的高可能性的殘基。大多數對結合親和力(near等，表3)和與不同形式的地高辛的結合具有輕度的或負面的影響(near等，表2)。適應癥在一個方面，本公開提供了治療受試者的方法。該方法對于受試者可以，例如，具有總體上有益健康的作用，例如，其可以提高受試者的預期壽命。或者，該方法可以，例如，治療、預防、治愈、緩解或改善("治療")疾病、障礙、狀況或病態("病癥")。待治療的病癥包括特征在于不適當的cxcr3表達或活性的病癥。在一些這樣的病癥中，表達或活性水平太高，且治療包括施用如本文所述的cxcr3拮抗劑。障礙或病癥是癌癥相關的。特別地，那些癌癥包括，但不限于乳腺癌、肺癌、卵巢癌和結腸癌及各種骨髓瘤。可用本公開的抗原結合蛋白治療或預防的特定醫學狀況和疾病包括各種癌癥。治療方法和抗原結合蛋白的施用本文所提供的某些方法包括向受試者施用cxcr3結合性抗原結合蛋白，從而降低cxcr3誘導的在特定病癥中發揮作用的生物反應。在特定實施方式中，本發明的方法包括使內源性cxcr3與cxcr3結合性抗原結合蛋白接觸，例如，通過施用于受試者或通過活體外過程。術語“治療”涵蓋緩解或預防障礙的至少一種癥狀或其他方面，或減輕疾病嚴重程度等。抗原結合蛋白不需要實現完全治愈或根除疾病的每一種癥狀或表現以構成可行的治療劑。如相關領域所公認的，用作治療劑的藥物可以減輕給定疾病狀態的嚴重程度，而不需要根除障礙的每一表現以被看作是有用的治療劑。類似地，預防性施用的治療不需要完全有效地預防病癥的發作以構成可行的預防劑。只要降低疾病的影響(例如，通過降低其癥狀數量或嚴重程度，或通過提高另一治療的有效性，或通過產生另一有益效果)，或降低受試者體內疾病發生或惡化的可能性就足夠了。本發明的一個實施方式涉及包括向患者施用cxcr3拮抗劑的方法，其施用量和時間足以使得反映特定障礙的嚴重程度的指標得到超過基線的持續改善。如相關領域中理解的，含有本公開的抗體及其片段的藥物組合物以適用于其適應癥的方式向受試者施用。可以用任何適當的技術施用藥物組合物，包括但不限于，腸胃外、局部或通過吸入。如果注射，則藥物組合物可以通過例如關節內、靜脈內、肌肉內、病灶內、腹膜內或皮下途徑，通過濃注或持續輸注來施用。可設想局部施用，例如在疾病或損傷的部位，如作為經皮遞送和從植入物持續釋放。通過吸入遞送包括例如經鼻或經口吸入、使用噴霧器、吸入氣霧劑形式的拮抗劑，等等。其他可選形式包括眼藥水；口服制劑包括丸劑、糖漿劑、錠劑或咀嚼膠；和局部制劑如洗劑、凝膠劑、噴霧劑和油膏劑。也設想抗原結合蛋白在活體外過程中的用途。例如，可以使患者的血液或其他體液在活體外與結合cxcr3的抗原結合蛋白接觸。該抗原結合蛋白可以與適當的不溶性基質或固體支持材料結合。有利地，抗原結合蛋白以包含一種或多種附加組分(如生理學可接受的載體、賦形劑或稀釋劑)的組合物的形式施用。任選地，該組合物還包含一種或多種生理活性藥劑，例如，第二炎癥或免疫抑制物質、抗血管生成物質、鎮痛物質等等，本文中提供了其非窮盡的實例。在各種特定實施方式中，該組合物除cxcr3結合抗原結合蛋白外，還包含1、2、3、4、5或6種生理活性藥劑。聯合療法在另一個方面，本公開提供了用cxcr3抑制性抗原結合蛋白和一種或多種其他治療來治療受試者的方法。在一個實施方式中，這種聯合療法通過例如攻擊腫瘤中的多個位點或分子靶標來實現協同效應或累加效應。可以與本發明結合使用的聯合療法的類型包括抑制或活化(在適宜情況下)單一疾病相關途徑中的多個節點、靶細胞中的多個途徑或靶組織中的多個細胞類型。在另一個實施方式中，聯合治療方法包括向受試者施用本文所述的2、3、4、5、6或更多種cxcr3激動劑或拮抗劑。在另一個實施方式中，該方法包括向受試者施用共同抑制或活化(直接或間接地)cxcr3介導的信號轉導的兩種或更多種治療。這些方法的實例包括使用兩種或更多種cxcr3抑制性抗原結合蛋白的組合、cxcr3抑制性抗原結合蛋白和一種或多種其他具有抗癌性質的治療部分(例如，細胞毒素劑和/或免疫調節劑)的組合，或cxcr3抑制性抗原結合蛋白和一種或多種其他治療(例如，手術或放療)的組合。此外，可以將一種或多種抗cxcr3抗體或抗體衍生物與一種或多種分子或其他治療結合使用，其中所述其他分子和/或治療并不直接結合或影響cxcr3，但該組合有效地治療或預防所治療的病癥。在一個實施方式中，一種或多種分子和/或治療治療或預防在治療期間由一種或多種其他分子或治療引起的病癥，例如惡心、疲乏、脫發、惡病質、失眠等。在其中使用分子和/或其他治療的組合的每種情況中，單個分子和/或治療可以在有效的任意時間長度上以任意順序施用，例如同時、相繼或交替施用。在一個實施方式中，治療方法包括完成以第一分子或其他療法完成的第一療程，接著開始第二療程。治療的第一療程結束和第二療程初始之間的時長可以是允許總療程有效的任意時長，例如數秒、數分鐘、數小時、數天、數周、數月或甚至數年。在另一個實施方式中，該方法包括施用一種或多種本文所述的cxcr3拮抗劑和一種或多種其它治療(例如，治愈性或緩解性治療)。在方法包括向受試者施用超過一種治療的情況下，應理解施用的順序、時機、次數、濃度和體積僅受到醫學需要和治療限度的限制，即，兩種治療可施用于受試者，例如，同時、相繼、交替或按照任何其它方案。實施例1本實施例顯示測定抗-cxcr3抗體與穩定細胞系上表達的cxcr3的特異性結合的細胞結合分析。cho-cxcr3細胞使用非酶celldissociationbuffer–pbs基的(lifetechnologies#13151-014)從培養瓶脫離。細胞以1x106細胞/ml重懸在facs緩沖液(pbs中的2％胎牛血清)中且50μl(0.5x105細胞)等分到96-孔板的孔中。同時，表達不相關蛋白的cho細胞以相同的方式處理。給出兩種不同的終濃度(最通常5和10g/ml)的等份抗體添加到細胞并在4℃下孵育1小時和然后用facs緩沖液洗滌兩次。細胞重懸在以1:500在facs緩沖液中稀釋的50μl山羊抗-人igg(γ-鏈特異性的)-pe偶聯二抗(southernbiotech#2040-09)中。細胞在4℃下再孵育30min且然后用facs緩沖液洗滌1x。細胞重懸在30μl最終體積的facs緩沖液中并使用intellicytflowcytometer分析。fl-2h通道中的中位熒光使用flowjo軟件確定。各抗體和cho-cxcr3細胞系的結合與其和對照cho細胞系的結合進行比較。顯示出與cho-cxcr3細胞的特異性結合的抗體列表顯示于表1中。表1.結合cho-cxcr3的抗體名稱與hu-cxcr3cho的結合b2是c12是f7是2a3是3a3是3a11是3c11是4d5是32b12是32d12是h1是c4是3a7是3a8是3a5是實施例2本實施例顯示測定抗-cxcr3抗體與人cxcr3的結合的ec50的細胞結合分析。本實施例顯示這些抗體在最大細胞結合和達到50％結合飽和的濃度(ec50)方面的結合特性。在本實施例中，cho-cxcr3細胞使用非酶celldissociationbuffer–pbs基的(lifetechnologies#13151-014)從培養瓶脫離。細胞以1x106細胞/ml重懸在facs緩沖液(pbs中的2％胎牛血清)中且50μl(0.5x105細胞)等分到96-孔板的孔中。鋪板的細胞離心且丟棄上清液。細胞一式三份重懸在含有系列稀釋濃度的抗體的30μlfacs緩沖液中。板在4℃下孵育1小時和然后用facs緩沖液洗滌兩次。細胞重懸在以1:500在facs緩沖液中稀釋的50μl山羊抗-人igg(γ-鏈特異性的)-pe偶聯二抗(southernbiotech#2040-09)中。細胞在4℃下再孵育30min且然后用facs緩沖液洗滌1x。細胞重懸在30μl最終體積的facs緩沖液中并使用intellicytflowcytometer分析。fl-2h通道中的中位熒光使用flowjo軟件確定，且ec50值通過在graphpadprism中對數據作圖和使用可變斜率非線性回歸分析來確定。結果顯示于表2中。表2.抗-cxcr3抗體對人cxcr3的ec50名稱ec50(nm),hu-cxcr3chob20.7c1215f752a3113a30.53a111.23c110.64d5732b12132d124實施例3本實施例顯示測定抗-cxcr3抗體與鼠cxcr3的結合的ec50的細胞結合分析。本實施例顯示這些抗體在最大細胞結合和達到50％結合飽和的濃度(ec50)方面的結合特性。在本實施例中，鼠b16-f10細胞(atcc,#crl-6475)使用非酶celldissociationbuffer–pbs基的(lifetechnologies#13151-014)從培養瓶脫離。收獲細胞、洗滌和以1x106細胞/ml重懸在facs緩沖液(pbs中的2％胎牛血清)中且50μl(0.5x105細胞)等分到96-孔板的孔中。鋪板的細胞離心且丟棄上清液。細胞一式三份重懸在含有系列稀釋濃度的抗體的30μlfacs緩沖液中。板在4℃下孵育1小時和然后用facs緩沖液洗滌兩次。細胞重懸在以1:500在facs緩沖液中稀釋的50μl山羊抗-人igg(γ-鏈特異性的)-pe偶聯二抗(southernbiotech#2040-09)中。細胞在4℃下再孵育30min且然后用facs緩沖液洗滌1x。細胞重懸在30μl最終體積的facs緩沖液中并使用intellicytflowcytometer分析。fl-2h通道中的中位熒光使用flowjo軟件確定，且ec50值通過在graphpadprism中對數據作圖和使用可變斜率非線性回歸進行分析來確定。結果顯示于表3中。表3.抗-cxcr3抗體對鼠cxcr3的ec50名稱ec50(nm),murcxcr332b1225實施例4在本實施例中，cho-cxcr3細胞使用非酶celldissociationbuffer–pbs基的(lifetechnologies#13151-014)從培養瓶脫離。細胞以1x106細胞/ml重懸在具有疊氮化鈉的facs緩沖液(pbs中的2％胎牛血清)中且對于各抗體將800μl等分到管中。添加抗體到5μg/ml的終濃度并在室溫下孵育1h。樣品置于冰上且在各個不同時間點將105μl等份加入到96-孔板中的190μlfacs緩沖液中和離心3min。丟棄上清液，細胞重懸于105μl的facs緩沖液中，重復的等份(50μl)添加到含有150μlfacs緩沖液的另一96-孔板并在室溫下孵育。在收集所有時間點后，板離心3min，丟棄上清液且細胞重懸于以1:500在facs緩沖液中稀釋的50μl山羊抗-人igg(γ-鏈特異性的)-pe偶聯二抗(southernbiotech#2040-09)中。細胞在4℃下孵育30min且然后用facs緩沖液洗滌1x。細胞重懸在30μl最終體積的facs緩沖液中并使用intellicytflowcytometer分析。克隆32b12隨時間的結合顯示于圖1中。實施例5本實施例顯示使用抗-cxcr3抗體的鈣分析。cho-cxcr3細胞(用人cxcr3基因轉染的cho細胞)用于鈣分析中。等份的0.1x105細胞接種到384孔板(#781091,greiner)每孔的20μl生長培養基中并孵育20小時。生長培養基是f-12k(#21127,lifetechnologies)加10％fbs。5μl的系列稀釋的抗體添加到20μl細胞中并在室溫下孵育20min。然后25μl的calcium4assay試劑盒(r8142,moleculardevices)，包括0.5mm丙磺舒(sigma#p8761-25g)，添加到與抗體預孵育的25μl細胞。在37℃5％co2下1h孵育接著在室溫下15分鐘孵育后，12.5μl的5x劑量的配體作為挑戰激動劑在flexstation3上檢測過程中添加到板的各孔。分析中使用的各配體的終濃度是200nm的cxcl9(#300-26,peprotech)、164nm的cxcl10(#300-12,peprotech)和60nm的cxcl11(#300-46,peprotech)。表中顯示的各抗體的ic50值使用prism5計算。各抗體與相應的配體的ic50顯示于表4中。各ic50值代表平均值(n＝2)。對照抗體來自r&d(cat#mab160,r&d)。表4:使用cho-cxcr3細胞的鈣流分析中抗-cxcr3抗體的ic50[nm]cxcl9cxcl10cxcl11r&dmabn.d.n.d.2332b123771632d12n.d.n.d.19n.d.＝未測定實施例6本實施例描述了使用激活的人t細胞的趨化分析。通過抗-cd3(1ng/ml)激活2天的人原代t細胞用于制備。趨化分析使用具有2個通過5-μm聚碳酸酯膜分隔的隔室的96-孔趨化室(chemotx；neuroprobe,gaithersburg,md)建立。用于趨化性的分析緩沖液是rpmi加0.5％bsa。系列稀釋濃度的抗體在室溫下與激活的t細胞(25μl分析緩沖液中的0.1x106細胞)預孵育20min。配體cxcl9(30nm)、cxcl10(12.5nm)和cxcl11(0.3nm)分別加載到下室中的板的孔中，而與抗體預孵育的細胞加載到膜的頂部上。在37℃,5％co2下2h孵育后，下室中遷移的細胞轉移到不透明的白色96-孔板并在室溫下與celltiterglo(cat#g7571,promega)孵育10min。從各孔中的細胞產生的發光信號通過熒光板閱讀儀(flexstation3,moleculardevice)檢測。表中所示的各mab的ic50值通過prism5計算。各mab針對相應的配體的ic50在表5中顯示。各ic50值表示平均值(n＝2)。對照抗體來自r&d(cat#mab160,r&d)。表5：使用激活的t細胞的趨化分析中抗-cxcr3抗體的ic50[nm]cxcl9cxcl10cxcl11r&dmab11.80.432b120.60.20.332d122.50.033.4序列表當前第1頁12