一種治療糖尿病的中藥復方制劑及其制備方法和應用與流程

本發明屬于中藥技術領域，具體涉及一種治療糖尿病的中藥復方制劑及其制備方法和應用。

背景技術：

近年來，隨著經濟、環境、生活方式等各方面因素的改變，糖尿病患病率呈加速上升趨勢，中國目前有超過1億的人口患有糖尿病，該病在任何年齡階段都可發生，并且隨著病程的延長，會導致血管、心、腎等臟器的并發癥，若不在糖尿病早期采取積極的治療措施，致使糖尿病患者得不到良好的治療與管理，我國糖尿病人群將大幅度增加，這將給我國社會和經濟的健康發展帶來沉重的精神壓力和經濟負擔，同時也給患者造成身體和精神上的嚴重傷害。

目前，治療糖尿病的西藥大多涉及到以下幾種：二甲雙胍、胰島素、磺脲類和a-葡萄糖苷酶抑制劑，但這些藥物在降血糖的同時存在著明顯的毒副作用，如肝腎功能的損害、消化道反應、皮膚過敏等，而傳統中藥由于其副作用小、胃腸刺激小、肝腎無損傷等優勢被廣泛應用。糖尿病是由內分泌失調引起的一種慢性疾病，單味中藥往往起不到治標兼治本的作用，而中藥之間相互配伍是中醫的主要特色，在中醫藥認知中占據著十分重要的地位，由此制備的中藥復方可以全方位，多角度、多靶點的治療糖尿病，擁有單味中藥無可比擬的優勢。由黃芪、桑葉、桑椹和荷葉這四種中藥配伍的方劑芪桑降糖方作為民間偏方顯示出了良好的降血糖作用，但缺乏科學依據的支撐，且具體的降血糖作用機制未見任何報道。故立足中醫藥，積極尋找和努力探索高效無毒、攜帶方便的治療糖尿病的中藥制劑，具有重要現實意義。

技術實現要素：

本發明的目的是提供了一種治療糖尿病的中藥復方制劑。

本發明的另一目的是提供了一種治療糖尿病的中藥復方制劑的制備方法。

本發明的進一個目的在于提供中藥復方制劑在制備治療糖尿病腎臟功能疾病的藥物中的用途。

本發明一種治療糖尿病的中藥復方制劑，是由以下重量份的原料制備而成：黃芪6-18份、桑椹6-18份、桑葉5-15份、荷葉5-15份。

優選地，所述各原料的重量份如下：黃芪10-15份、桑椹10-15份、桑葉8-12份、荷葉8-12份。

優選地，所述各原料的重量份如下：黃芪12份、桑椹12份、桑葉10份、荷葉10份。

優選地，由其制成口服液、顆粒劑、膠囊劑、片劑劑型。

本發明一種治療糖尿病的中藥復方制劑的制備方法，包括如下步驟：

步驟(1)：將黃芪、桑椹、桑葉、荷葉參加到其總量8-15倍的水中，煎煮1-3次，每次20-40分鐘，合并煎煮液，過濾、濃縮，得濃縮液，備用；

步驟(2)：將黃芪、桑椹、桑葉、荷葉參加到其總量4-8倍量的30％-80％乙醇中回流提取1-3次，每次1-2小時，合并提取液，減壓濃縮，得濃縮液，備用；

步驟(3)：將步驟(1)和步驟(2)得到的濃縮液和藥學上可接受的載體制備成口服液、顆粒劑、膠囊劑、片劑劑型的藥物。

優選地，步驟(1)中加入10倍量的水煎煮2次，第1次煎煮40分鐘，第二次煎煮30分鐘。

優選地，步驟(2)中分別用濃度為60％的乙醇回流提取2次，每次1小時。

一種治療糖尿病的中藥復方制劑在制備治療糖尿病腎臟功能疾病的藥物中的應用。

本發明提供的中藥復方，按照中醫藥君臣佐使的配伍理論，將中藥黃芪、桑葉、桑椹和荷葉分別相互配伍組合。方中黃芪益氣固表、利水消腫，具有增強機體免疫、保肝、利尿、抗衰老、抗應激、降壓和較廣泛的抗菌作用；桑葉疏散風熱、清肝明目，具有治療頭暈眼花、失眠、涼血、降血壓、降血脂、預防心肌梗塞等作用；桑椹補益肝腎、滋陰養血、生津止渴，可提高人體免疫力，延緩衰老，美容養顏，降低血脂，防止腫瘤細胞的生長；荷葉消暑利濕、健康消脂，具有促進腸道蠕動、排出毒素、排水利尿功效。全方集保肝、益腎、利尿、降壓、降血脂，增強機體免疫于一體，對糖尿病合并腎功能損傷的肝腎陰虛、痰阻血瘀者尤為適應。

本發明的有益效果為：

(1)本發明提供的中藥復方是由以上中藥原料的水提物和醇提物的混合物，在傳統水提物基礎上添加了脂溶性、黃酮類和生物堿等物質，有效成分的提取更加徹底和有效。

(2)本發明提供的中藥復方提取物能方便與藥學載體制備出多種劑型，便于臨床患者的使用，且本發明提供的中藥復方制劑的制備方法工藝簡單、穩定，有效成分含量高，可操作性強，適合工業化生產。

(3)本發明根據中醫藥理論，采用中醫藥辨證論治的理論進行的組方篩選，中藥組分配比科學合理，實驗結果表明，本發明提供的中藥復方在治療糖尿病方面通過多環節、多靶點的綜合作用，達到降低血糖、血脂，bun和scr含量，以及降低腎組織中nf-κb和icam-l的表達，提高胰島素敏感指數，最終起到改善糖尿病腎功能的目的。

附圖說明

圖1是q-s對糖尿病大鼠腎組織icam-1和nf-κb表達的影響。

圖中：nc：正常對照組；dm：糖尿病模型組；pc：拜糖平組；中藥high：中藥復方高劑量組；中藥low：中藥復方低劑量組。

具體實施方式

下面的實施例可以進一步說明本發明，但不以任何方式限制本發明。

實施例1

1、配方(以重量份計)：

黃芪12份、桑椹12份、桑葉10份、荷葉10份

2、制備方法，包括以下步驟：

(1)取黃芪12份、桑椹12份、桑葉10份、荷葉10份，用10倍量的水煎煮2次，第1次煎煮40分鐘，第二次煎煮30分鐘，合并煎煮液，過濾、濃縮，得濃縮液，備用；

(2)取黃芪12份、桑椹12份、桑葉10份、荷葉10份，分別用8倍量的濃度為60％的乙醇回流提取2次，每次1小時，合并提取液，減壓濃縮，得濃縮液，備用；

(3)取步驟(1)和步驟(2)得到的濃縮液混合均勻加蒸餾水溶解，加入適量的矯味劑和防腐劑后過濾，調節ph值，制成口服液。

實施例2

1、配方(以重量份計)：

黃芪12份、桑椹12份、桑葉10份、荷葉10份

2、制備方法，包括以下步驟：

(1)取黃芪12份、桑椹12份、桑葉10份、荷葉10份，用10倍量的水煎煮2次，第1次煎煮40分鐘，第二次煎煮30分鐘，合并煎煮液，過濾、濃縮，得濃縮液，備用；

(2)取黃芪12份、桑椹12份、桑葉10份、荷葉10份，分別用8倍量的濃度為60％的乙醇回流提取2次，每次1小時，合并提取液，減壓濃縮，得濃縮液，備用；

(3)取步驟(1)和步驟(2)得到的濃縮液中加適量的淀粉和木糖醇，混合均勻，整粒，干燥，制成顆粒劑。

實施例3

1、配方(以重量份計)：

黃芪12份、桑椹12份、桑葉10份、荷葉10份

2、制備方法，包括以下步驟：

(1)取黃芪12份、桑椹12份、桑葉10份、荷葉10份，用10倍量的水煎煮2次，第1次煎煮40分鐘，第二次煎煮30分鐘，合并煎煮液，過濾、濃縮，得濃縮液，備用；

(2)取黃芪12份、桑椹12份、桑葉10份、荷葉10份，分別用8倍量的濃度為60％的乙醇回流提取2次，每次1小時，合并提取液，減壓濃縮，得濃縮液，備用；

(3)取步驟(1)和步驟(2)得到的濃縮液中加適量的淀粉和木糖醇，混合均勻，整粒，干燥，裝膠囊，制成膠囊劑。

實施例4

1、配方(以重量份計)：

黃芪12份、桑椹12份、桑葉10份、荷葉10份

2、制備方法，包括以下步驟：

(1)取黃芪12份、桑椹12份、桑葉10份、荷葉10份，用10倍量的水煎煮2次，第1次煎煮40分鐘，第二次煎煮30分鐘，合并煎煮液，過濾、濃縮，得濃縮液，備用；

(2)取黃芪12份、桑椹12份、桑葉10份、荷葉10份，分別用8倍量的濃度為60％的乙醇回流提取2次，每次1小時，合并提取液，減壓濃縮，得濃縮液，備用；

(3)取步驟(1)和步驟(2)得到的濃縮液中加適量的淀粉、潤滑劑和木糖醇，混合均勻，整粒后壓片，制成片劑。

藥理學實驗

一、實驗材料

1.1儀器

dnm9606酶標儀，北京普朗新技術有限公司；dy89-1電動玻璃勻漿機，寧波新芝生物科技股份有限公司；三諾安穩血糖儀，長沙三諾生物傳感股份有限公司；stm100全自動生化分析儀，北京普朗新技術有限公司；

1.2試劑和藥物

stz購于美國sigma公司，批號s0130，拜糖平購于北京拜耳醫藥保健有限公司，批號h19990205。檸檬酸和檸檬酸鈉均為分析純；受試藥物：中藥復方由本試驗中心制備；

二、實驗方法

2.1ⅱ型糖尿病大鼠模型的建立

采用高糖高脂飼料聯合低劑量的stz誘導建立ⅱ型糖尿病大鼠模型，具體如下：取60只wistar大鼠，雌雄各半，(200.0±9.3)g。實驗室溫度22±2℃，光照12h和黑暗12h循環，相對濕度為50％±10％。試驗前先適應性喂養2周，然后隨機分為兩組，即正常對照組(n＝10只)，造模組(n＝50只)。其中正常對照組大鼠給予基礎飼料飼養，自由飲水。造模組大鼠用高脂高糖飼料(35％麩皮、30％熟豬油、20％蔗糖、10％魚粉、3％骨粉、1％酵母和l％食鹽)飼養一個月后，隔夜禁食12h，造模組大鼠一次性空腹腹腔注射stz35mg/kg，3d后禁食(不禁水)8h測血糖，血糖值(fbg)大于或等于16.7mmol/l的大鼠作為建模成功大鼠；小于16.7mmol/l的大鼠禁食12h后再次腹腔注射stz35mg/kg。3d后禁食(不禁水)8h測血糖值，fbg≥16.7mmol/l的大鼠選取為糖尿病大鼠，用于后續試驗，后期試驗大鼠用普通飼料喂養。

2.2動物分組及給藥

將造模成功的40只糖尿病大鼠再隨機分為4組，即糖尿病模型組、拜糖平組、中藥復方高劑量組和中藥復方低劑量組。高劑量中藥復方組和低劑量中藥復方組大鼠分別給予1g/kg和0.5g/kg中藥復方灌胃治療，拜糖平組給予18mg/kg拜糖平，每d一次，連續給藥，實驗周期為42d。正常對照組及糖尿病模型組大鼠每天給予等體積的生理鹽水灌胃，灌胃給藥42d后，將所有動物用乙醚麻醉，分離血清，處死大鼠后解剖，然后分別取出肝組織和腎組織，用生理鹽水洗滌，擦干后置于-20℃冰箱中保存備用。

2.3觀察指標

2.3.1一般情況觀察

試驗過程中，隨時觀察大鼠的活動情況、飲水量、排便、毛發、狀態及有無死亡，并每周記錄其體重的變化。

2.3.2fbg的測定

在給藥前0周，給藥后2周、4周、6周分別將各組大鼠禁食(不禁水)8h尾靜脈采血，用血糖儀測定fbg。

2.3.3血生化指標檢測

采用全自動生化分析儀檢測血清中的tc、tg、bun和scr。

2.3.4血清fins及isi的檢測

采用雙抗體夾心法測定血清fins，并采用以下公式計算isi：

2.3.5腎組織中nf-κb、icam-1和vegf的檢測

采用雙抗體夾心法測定。

2.3.6免疫臟器指數的測定

在給藥42d后，用乙醚麻醉大鼠，分離脾臟與胸腺，采用公式5.2計算免疫臟器指數：

三、結果

3.1一般情況觀察

造模前各組大鼠飲食、飲水、尿量無明顯差異，攻擊性強，反應靈敏；造模后，正常組狀態與開始時一樣，體重增加明顯，而糖尿病模型組大鼠則表現為精神狀況不佳、反應遲鈍、拱背蜷臥，毛色暗淡黃枯燥且毛發稀疏，并出現多尿，多飲，多食，體重減小，大便稀軟。給予拜糖平及qs干預后，各組大鼠的體重、毛色均有所好轉。

試驗過程中(4周)，正常對照組的大鼠體重從(243.57±42.65)g增加到了(286.05±30.57)g，然而糖尿病模型組大鼠的體重從(245.12±37.24)g降低到了(197.13±27.84)g。同時，我們發現，拜糖平及中藥復方組的大鼠體重減輕的趨勢得到改善，尤其經過4周和6周的治療之后，其體重與模型組大鼠體重差異顯著(p<0.01)。此結果提示，本發明所提供的中藥復方可促進糖尿病大鼠的生長。其具體實驗結果如表3.1所示。

表3.1中藥復方對糖尿病大鼠體重的影響(n＝10)

注：與糖尿病模型組相比：**p<0.01。

3.2中藥復方對糖尿病大鼠fbg的影響

如表3.2所示，糖尿病模型組fbg顯著高于正常對照組(p<0.01)，表明長期的高糖高脂飼料和stz的聯合使用可使大鼠胰島β細胞部分受損，導致胰島素代償性分泌障礙，從而使fbg值升高；經中藥復方及拜糖平干預后，其血糖呈現出下降的趨勢，但經處理4周后，與糖尿病模型組相比才呈現出顯著性顯著(p<0.05；p<0.01)，且與陽性藥物拜糖平相比無顯著性差異(p>0.05)，此結果提示，本發明所提供的中藥復方具有良好的降血糖作用，且其效果與陽性藥物拜糖平相似。

表3.2中藥復方對糖尿病大鼠fbg的影響(n＝10)

注：與糖尿病模型組相比：*p<0.05,**p<0.01。

3.3中藥復方對糖尿病大鼠血脂、血肌酐和尿素氮的影響

從表3.3可以看出，與正常對照組相比，糖尿病模型建立成功后tc、tg、bun和scr顯著升高(p<0.01)，表明長期的高糖高脂飼料及stz致使大鼠脂代謝發生紊亂，腎功能受到損傷。經中藥復方及拜糖平保護后，以上指標出現了下降的趨勢(p<0.05,p<0.01)，并且與陽性藥物拜糖平之間未呈現出顯著性差異(p>0.05)。這些結果提示，本發明所提供的中藥復方可糾正糖尿病大鼠紊亂的脂代謝，改善糖尿病大鼠的腎功能。

表3.3中藥復方對糖尿病大鼠血脂、血肌酐和尿素氮影響(n＝10)

注：與糖尿病模型組相比：*p<0.05,**p<0.01。

3.4中藥復方對糖尿病大鼠fins和isi的影響

如表3.4所示，與正常組相比，糖尿病模型組的fins和gsp顯著升高(p<0.01)，isi下降(p<0.01)。經拜糖平及中藥復方干預后，isi升高顯著(p<0.05，p<0.01)，而fins和gsp的水平呈現出與isi相反的趨勢，明顯降低(p<0.05，p<0.01)。同時，我們發現中藥復方與陽性藥物拜糖平之間亦無顯著性差異(p>0.05)。結果提示，本發明所提供的中藥復方不僅僅降低了糖尿病大鼠的血糖，同時還能明顯降低其胰島素和糖化血紅蛋白，改善胰島素的敏感性。

表3.4中藥復方對糖尿病大鼠fins、isi和gsp的影響(n＝10)

注：與糖尿病模型組相比：*p<0.05,**p<0.01。

3.5中藥復方對糖尿病大鼠腎組織中nf-κb和icam-1表達的影響

由圖1可見，與糖尿病模型組相比：**p<0.01。高糖高脂飼料聯合低劑量的stz誘導的糖尿病大鼠腎組織icam-1和nf-κb含量明顯升高(p<0.01)，說明糖尿病大鼠腎臟出現了一定的炎癥改變。中藥復方灌胃治療6周后，拜糖平組及中藥復方高、低劑量組的icam-1和nf-κb含量均顯著下降(p<0.05，p<0.01)，且中藥復方與拜糖平之間未呈現出顯著性差異(p>0.05)。此結果提示，本發明所提供的中藥復方是通過降低糖尿病大鼠腎組織icam-1和nf-κb因子的表達改善腎組織炎癥反應的。

3.6中藥復方對糖尿病大鼠免疫臟器指數的影響

為了初步探究中藥復方對糖尿病大鼠免疫功能的影響，本實驗測定了大鼠的胸腺指數與脾臟指數，結果顯示，stz誘導的糖尿病大鼠胸腺指數與脾臟指數較正常大鼠明顯降低(p<0.05，p<0.01)，中藥復方及拜糖平處理后，其均有不同程度的升高(p<0.05，p<0.01)，且各給藥組之間無顯著性差異(p>0.05)，此結果提示，本發明所提供的中藥復方在改善糖尿病一系列癥狀的同時還可有效增強機體的免疫功能。具體實驗結果如表3.5所示。

表3.5中藥復方對糖尿病大鼠免疫臟器指數的影響(n＝10)

注：與糖尿病模型組相比：*p<0.05,**p<0.01。

本發明按照中醫藥君臣佐使的配伍理論，采用黃芪、桑椹、桑葉和荷葉通過水煎和醇提的方法制備出有效成分含量較高的治療糖尿病、改善糖尿病腎臟功能的中藥復方制劑，本發明所采用的乙醇濃度是通過正交試驗篩選到的最佳乙醇提取濃度，經過以上實驗發現，本發明提供的中藥復方具有多角度、多環節、多靶點的綜合作用，在降低血糖的同時，還能糾正糖尿病所致的脂代謝紊亂，改善胰島素的敏感性，增強機體免疫功能，起到治療保護糖尿病腎臟功能的作用。

本發明不局限于上述最佳實施方式，任何人在本發明的啟示下都可得出其他各種形式的產品，但不論在其形狀或結構上作任何變化，凡是具有與本申請相同或相近似的技術方案，均落在本發明的保護范圍之內。