專利名稱:靈芝浸膏片原料全自動化發酵工藝的制作方法
技術領域：
本發明涉及靈芝浸膏片原料全自動化發酵工藝，屬生物制藥技術領域：
。
背景技術：
靈芝及其制劑是中國醫藥學寶庫中的瑰寶，其治療疾病和保健、滋補作用眾所周 知，被譽為"神奇的東方蘑菇"。靈芝及其制劑的功效之所以備受推崇，與其含有不同于其 他任何一種藥物或保健品的多種生理活性物質有關。其在臨床上治療的疾病涉及呼吸、循 環、消化、神經、內分泌及運動等系統，涵蓋內、外、婦、兒各科。其神奇療效使任何藥物無法 替代。
公開號CN 101390885公開了一種靈芝浸膏片及其制備方法，該方法制備靈芝浸 膏片所采用的原料為靈芝發酵液和靈芝菌絲體經干燥處理制成發酵物干粉末，傳統工藝生 產靈芝浸膏片所需的原料存在工藝技術落后，依靠人工看罐，不能很好地控制發酵溫度、發
酵物ra值、溶氧量等缺點。
授權公告號CN 1055723公開了靈芝10噸罐發酵工藝，該專利也未涉及如何控制 發酵工藝參數的問題。
發明內容
本發明的目的是，改變原有靈芝浸膏片原料發酵依靠人工看罐，不能自動控制發 酵，不能控制發酵溫度、發酵物pH值、溶氧量；發酵物缺少營養物料依靠人工判斷進行補料 的狀況，在對原有工藝進行改進的基礎上，通過設置全自動化發酵控制裝置，能夠對靈芝浸 膏片原料發酵過程中的溫度，溶氧量，pH進行自動控制，對發酵物缺少營養物料進行自動補 料。
本發明的技術方案是，通過在靈芝浸膏片原料發酵裝置上設置全自動化發酵控制
系統，在種子罐培養和大罐發酵培養時對發酵過程中的溫度，溶氧量，PH進行自動控制，對
發酵物缺少營養物時進行補料控制，選擇發酵物有效成份達到最高時放料。
發酵溫度是靈芝浸膏片原料發酵過程的重要參數，全自動化控制系統通過溫度傳
感器快速傳至控制裝置的微處理器，由微處理器發出指令進行調整，溫度高了，自動進行降
溫；溫度低了，自動進行升溫，始終保證溫度在所設定的需要范圍內；
發酵時容器中的溶氧量也是靈芝浸膏片原料發酵過程的一個重要參數，因為微生 物生長需要一定的氧氣，當氧氣不夠時，全自動化控制系統通過氧傳感器所測得的容器中 的溶氧量，隨時對容器自動進行氧氣補給，始終保持發酵容器內的溶氧量在所設定需要的 范圍內；
發酵過程中pH應保持一定范圍內，pH或高或低了 ，都會影響靈芝浸膏片原料發酵 物的產率，通過在線酸堿度測試儀測得發酵液的pH后，全自動化控制系統進行判斷并自動 加酸或加堿進行調節，確保發酵液在設置所需要的pH范圍內。
當靈芝浸膏片原料發酵物缺少營養物時，通過全自動化控制系統進行補料控制，可以根據需要選擇補料形式(分為時比補料和自動分時分段自動流加補料)，任意設定補
料周期；進行蠕動泵時間的設定與補料量的設定、補料量的清零等。
本發明靈芝浸膏片原料全自動發酵工藝流程為
1、搖瓶種子培養
(1)母瓶(一級種子)配方
馬鈴薯20% ;KH2P040. 1 % ;MgS040. 05% ;蛋白胨O. 2% ;維生素Bi微量；葡萄糖
2% ;其余水；PH自然。
(2)子瓶(二級搖瓶)配方
黃豆餅粉1% ;KH2P040. 1% ;MgS040 . 05% ;玉米粉1.5% ;維生素Bi少量；葡萄糖 1. 5% ;酵母粉0. 5% ;其余水；PH自然。
(3) —級種子搖瓶制備(母瓶種子)
按上述母瓶、子瓶配方，配好培養基，分裝于500ml三角瓶為200ml， 1000ml三角瓶 為600ml，瓶口用松軟棉塞塞好，再用牛皮紙包扎，以12rC濕熱消毒，(0. lMPa流通蒸汽)保 壓30分鐘，待冷卻后，方可接種。
選新鮮或活化了大試管生產斜面或平皿菌種，以無菌手續挖0.5cm2大小，接入 500ml或1000ml搖瓶，每分鐘旋轉150-200轉的搖瓶機上，28± rC培養5 8天，待培養液 清香，菌球密布時，選擇生長正常，無污染的搖瓶種子，作為一級種子搖瓶(母瓶種子)，備 用。
(5) 二級搖瓶種子培養(子瓶種子)
選擇新鮮的一級搖瓶種子(母瓶種子)，以無菌手續按10%接種量接入1000ml搖 瓶，置搖瓶機(150-200轉/分鐘)，28± 1 t:培養3 4天，待培養液清香，菌絲球密布時，選 擇生長正常，無污染的搖瓶種子作為二級搖瓶種子，備用。
(6)工藝條件
①一級搖瓶種子培養5 8天，二級搖瓶種子培養3 4天。
②一般500ml —級搖瓶配制量為200ml ， 1000ml —級搖瓶配制量300ml 。子瓶均為
用1000ml為配制量600ml 。
③培養溫度為28 ± 1°C 。
2、種子罐培養
(1)種子罐培養基配制
葡萄糖2% ;KH2P040. 1 % ;MgS040. 05% ;酵母粉1.5% ;黃豆餅粉1.5% ;玉米粉 2% ;消沫油適量；其余水。
(2)種子罐培養
①一級種子罐定容100L，消后培養基體積50L， 二級種子罐定容1000L，消后培養 基體積500L。
②一級種子罐，二級種子罐培養基消毒均采用實消121°C (0. IMPa流通蒸汽)保 壓25分鐘，冷卻至28°C 3(TC，將二級搖瓶種子以無菌方式接種于一級種子罐內，接種量 一般為2% 5%，培養56 72小時，待培養液清香，菌絲球密布時，選擇生長正常，無污染 的菌絲作為種子罐的一級種子。二級種子罐接種量為10% 20%左右，接種時可視等傳種 菌種生產情況而定。接后攪拌均勻為止。[0032] ③一級、二級種子罐培養條件為罐溫為28士rC，罐壓為0. 05MPa，通氣量微量， 以使培養基均勻翻動為宜。消沫油用量一級種子罐為0.5 1.5L，二級種子罐為1.5 2. 5L。
④種子罐培養周期一級種子罐二級種子罐培養24 48小時。
(3)工藝條件
①菌絲態菌絲長分枝，菌絲壁易見芽頭和鎖狀聯合，培養液清香，濃稠。
②pH值下降至3. 5 4. 5 。 ③鏡檢和平面培養無污染。
培養周期一級種子罐56 72小時，二級種子罐24 48小時。
⑤培養溫度為28 ± 1°C 。 3、大罐發酵培養
(1)大罐培養基配制
葡萄糖2% ;KH2P040. 1 % ;MgS040. 05% ;酵母粉1.5% ;黃豆餅粉1.5% ;玉米粉 2% ;消沫油適量；其余水。
(2)大罐發酵培養
①大罐容IOOOOL，消后培養基體積5000L。
②大罐消毒，121°C (0. 1Mpa流通蒸汽)保壓25分鐘，冷卻至9(TC左右，開動攪拌
加速冷卻，冷至28°C 3(TC接種。
接種量按10 20%，接種后開攪拌。
④大罐培養條件
罐溫28t: 士rC，罐壓O. 05MPa，空氣量以使發酵液均勻翻動為宜；培養周期48
72小時左右。
(3)工藝條件
①大罐放罐標準菌絲形態，菌絲易見空泡，菌絲無集凝并開始自溶；發酵液消 香，濃稠；
②pH值降至4 4.5;
③培養溫度為28士rC，罐壓0. 05MPa，空氣量以使發酵液均勻翻動為宜。 在種子罐培養和大罐發酵培養時本發明采用全自動化控制裝置，根據發酵過程中 的溫度，溶氧量，PH的變化進行自動控制，對發酵物缺少營養物料進行自動補料，以實現靈 芝浸膏片原料的全自動化發酵工藝。
本發明與現有技術比較的有益效果是，由于本發明采用了全自動發酵工藝，對發 酵的溫度、氧量、pH值及對發酵物缺少營養物時的補料實現全自動控制，大大提高了發酵物 的產率和產品質量，減輕了工人的勞動強度，提高了生產效率。 本發明適用于靈芝浸膏片原料的全自動發酵。
附圖為本發明靈芝浸膏片全自動化發酵工藝流程圖具體實施方式
[0057]
本發明實施例工藝流程如附圖所示。
本發明實施例實施步驟如下 1、搖瓶種子培養
(1)母瓶( 一級種子)配方
馬鈴薯20% ;KH2P040. 1 % ;MgS040. 05% ;蛋白胨O. 2% ;維生素Bi微量；葡萄糖
2% ;其余水；PH自然。
(2)子瓶(二級搖瓶)配方
黃豆餅粉1% ;KH2P040. 1% ;MgS040 . 05% ;玉米粉1. 5% ;維生素Bi少量；葡萄糖 1. 5% ;酵母粉0. 5% ;其余水；PH自然。
(3)種子搖瓶制備
按上述母瓶、子瓶配方，配好培養基，分裝于500ml三角瓶為200ml， 1000ml三角瓶 為600ml，瓶口用松軟棉塞塞好，再用牛皮紙包扎，以12rC濕熱消毒，(0. lMPa流通蒸汽)保 壓30分鐘，待冷卻后，方可接種。 [ooee]
(4) —級搖瓶種子培養(母瓶種子)
選新鮮或活化了大試管生產斜面或平皿菌種，以無菌手續挖0.5cm2大小，接入 500ml或1000ml搖瓶，每分鐘旋轉150-200轉的搖瓶機上，28± rC培養5 8天，待培養 液清香，菌球密布時，選擇生長正常，無污染的搖瓶種子，直接供接二級種子搖瓶，或再行傳 種。暫時不用的搖瓶，放0 4t:冰箱保存備用。保存時間不得超過30天。 [ooes]
(5) 二級搖瓶種子培養(子瓶種子)
選擇新鮮的一級搖瓶種子(母瓶種子)，以無菌手續，按10%接種量接入1000ml 搖瓶，置搖瓶機(150-200轉/分鐘)，28士rC培養3 4天待培養液清香，菌絲球密布時， 選擇符合質量標準的搖瓶直接進一級種子灌。暫時不用的二級搖瓶種子(子瓶)放入0 4t:左右保存備用，保存時間不得超過30天。
本實施例一級搖瓶種子培養5 8天，二級搖瓶種子培養3 4天。
本實施例母瓶采用1000ml，一級搖瓶配制量300ml。子瓶采用1000ml，配制量
600ml。
本實施例搖瓶培養溫度為28 ± 1°C 。
2、種子罐培養
(1)種子罐培養基配制
葡萄糖2% ;KH2P040. 1 % ;MgS040. 05% ;酵母粉1.5% ;黃豆餅粉1.5% ;玉米粉 2% ;消沫油適量；其余水。
(2)種子罐培養
①一級種子罐定容IOOL，消后培養基體積50L， 二級種子罐定容IOOOL，消后培養 基體積500L。
②一級種子罐，二級種子罐培養基消毒均采用實消121°C (0. lMPa流通蒸汽)保壓 25分鐘，冷卻至28°C 3(TC接種，一級種子罐接種量一般為2% 5%，二級種子罐接種量 為10% 20%左右，接種時可視等傳種菌種生產情況而定。接后攪拌均勻為止。
③一級、二級種子罐培養條件為罐溫為28士rC，罐壓為0. 05MPa，通氣量微量， 以使培養基均勻翻動為宜。消沫油用量一級種子罐為0.5 1.5L，二級種子罐為1.5
62. 5L。
④種子罐培養周期一級種子罐培養56 72小時，二級種子罐培養24 48小 時。
本發明實施例種子罐培養pH值控制為3. 5 4. 5 ;培養周期為一級種子罐56 72小時，二級種子罐24 48小時；培養溫度度為28± 1°C 。菌絲態菌絲長分枝，菌絲壁易 見芽頭和鎖狀聯合，培養液清香，濃稠。 3、大罐發酵培養
(1)大罐培養基配制
葡萄糖2% ;KH2P040. 1 % ;MgS040. 05% ;酵母粉1.5% ;黃豆餅粉1.5% ;玉米粉 2% ;消沫油適量；其余水。
(2)大罐發酵培養
①大罐容10000L，消后培養基體積5000L。
②大罐消毒，121°C (0. 1Mpa流通蒸汽)保壓25分鐘，冷卻至9(TC左右，開動攪拌
加速冷卻，冷至28°C 3(TC接種。
接種量按10 20%，接種后開攪拌。
④大罐培養條件
罐溫28t: 士rC，罐壓O. 05MPa，空氣量以使發酵液均勻翻動為宜；培養周期48 72小時左右。
本發明實施例pH值控制在4 4. 5 ;培養溫度為28± rC，罐壓0. 05MPa，空氣量 以使發酵液均勻翻動為宜；大罐放罐標準為菌絲形態，菌絲易見空泡，菌絲無集凝并開始 自溶；發酵液消香，濃稠。
本發明實施例在種子罐培養和大罐發酵培養時采用全自動化控制裝置，根據種子 罐培養和大罐發酵過程中的溫度，溶氧量，pH的變化進行自動控制，并對發酵物缺少營養物 料時進行自動補料，以實現靈芝浸膏片原料的全自動化發酵。
權利要求
一種靈芝浸膏片原料全自動化發酵工藝，其特征在于，所述工藝通過在靈芝浸膏片原料發酵裝置上設置全自動化發酵控制系統，在種子罐培養和大罐發酵培養時對發酵過程中的溫度，溶氧量，pH進行自動控制，對發酵物缺少營養物時進行補料控制，選擇發酵物有效成份達到最高時放料。
2. 根據權利要求
1所述的靈芝浸膏片原料全自動化發酵工藝，其特征在于，所述對發 酵物缺少營養物時進行補料控制，可以根據需要選擇補料形式，任意設定補料周期；進行蠕 動泵時間的設定與補料量的設定、補料量的清零等。
3. 根據權利要求
1所述的靈芝浸膏片原料全自動化發酵工藝，其特征在于，所述對pH 進行自動控制，通過在線酸堿度測試儀測得發酵液的pH后，自動加酸或加堿進行調節，確 保發酵液在設置所需要的pH范圍內。
4. 根據權利要求
1所述的靈芝浸膏片原料全自動化發酵工藝，其特征在于，所述對溶 氧量進行自動控制，通過氧傳感器所測得的容器中的溶氧量，隨時對容器自動進行氧氣補 給，始終保持發酵容器內的溶氧量在所設定需要的范圍內。
專利摘要
一種靈芝浸膏片原料全自動化發酵工藝，該工藝在靈芝浸膏片原料發酵裝置上設置全自動化發酵控制系統，在種子罐培養和大罐發酵培養時對發酵過程中的溫度，溶氧量，pH進行自動控制，對發酵物缺少營養物時進行補料控制。所述對pH進行自動控制，通過在線自動測試pH后，自動加酸或堿進行調節，確保在所需要的pH范圍內；所述對溶氧量進行自動控制，通過傳感器所測得的容器中的溶氧量，隨時對容器自動進行氧氣補給，始終保持發酵容器內的氧氣量在所設定的范圍內；所述對發酵物缺少營養物時進行補料控制，可以根據需要選擇補料形式，任意設定補料周期；進行蠕動泵的時間設定與補料量設定、補料量的清零等。本發明適用于靈芝浸膏片原料的全自動發酵。
文檔編號A61K9/20GKCN101791322SQ201010114757
公開日2010年8月4日 申請日期2010年2月26日
發明者付志高 申請人:江西百神藥業集團有限公司導出引文BiBTeX, EndNote, RefMan