一種中藥組合物在制備抗抑郁藥物中的應用
【專利摘要】本發明公開了一種中藥組合物在制備抗抑郁藥物中的應用，所述中藥組合物的主要活性成分的原料的重量份為：烏鱧3～16份、黃芪2～7份、大棗2～7份、生姜0.5～3份和甘草0.5～3份。該中藥組合物為復方烏鱧口服液。
【專利說明】
一種中藥組合物在制備抗抑郁藥物中的應用
技術領域
[0001] 本發明屬于醫藥技術領域，具體涉及一種中藥組合物在制備抗抑郁藥物中的應 用。
【背景技術】
[0002] 產后抑郁癥(pro)是發生于產褥期的一種抑郁癥。我國pro的發病率為1〇%-2〇%， 不僅危害產婦的健康，影響嬰兒的發育，也給家庭與社會帶來沉重的負擔。對于pro的治療， 西醫存在藥物治療副作用大、價格昂貴等諸多缺點，因此挖掘副作用小，安全性高的中藥制 劑具有重要的研究意義和價值。
[0003] PPD不同于典型的抑郁癥，臨床上主要表現為焦慮、激動、易激惹、失眠和意識錯 亂，而抑郁的典型癥狀主要在疾病的后期出現。目前西醫對pro的治療主要包括藥物治療和 心理治療，心理療法主要是配合pro藥物發揮抗抑郁的作用，但該治療方案和流程需要進行 即時選擇和調整，且存在可控性較差和一致性不均的缺點，臨床治療方法難以控制，缺乏可 比性，無法評判臨床療效。
[0004] 復方烏鱧口服液(其配方和制備方法已獲得國家專利，專利號200910042795.1)是 湖南明瑞制藥有限公司生產的用于促進創傷、外科手術、婦人分娩后的傷口愈合及傷后頭 面虛腫、心悸氣短、神疲自汗等癥中藥復方制劑。
【發明內容】
[0005] 本發明中所述的中藥組合物的主要活性成分的原料的重量份為:烏鱧3~16份、黃 芪2~7份、大棗2~7份、生姜0.5~3份和甘草0.5~3份。優選地，其主要活性成分的原料的 重量份為:烏鱧8~13份、黃芪3~5份、大棗3~5份。更優選地，其主要活性成分的原料的重 量份為:烏鱧1 〇份、黃芪4份、大棗4份、生姜1份和甘草1份。所述中藥組合物是由中藥組合物 活性組分與藥學中的輔料制備成的口服劑型和經皮給藥劑型。優選地，所述中藥組合物是 口服液。本發明所述中藥組合物的配方及制備方法與專利號為200910042795.1的專利中所 述生肌活血的中藥組合物的配方及制備方法相同，即，本發明所述中藥組合物的配方與復 方烏鱧口服液相同，也就是說，本發明通過研究表明復方烏鱧口服液可用于制備抗抑郁藥 物。
[0006] 下面對本發明作進一步說明：
[0007] 本發明發明人將60只SPF級受孕SD大鼠（體質量250-280g)隨機分為空白對照組、 模型對照組、鹽酸帕羅西汀組、復方烏鱧口服液低、中、高劑量組。觀察母鼠對幼崽的關愛行 為，及應用曠場實驗、懸尾實驗、強迫游泳實驗研究復方烏鱧口服液抗抑郁作用。結果表明， 與空白對照組比較，模型組大鼠對幼崽關愛行為減少，懸尾實驗及強迫游泳實驗大鼠絕望 不動時間延長，曠場實驗大鼠活動性減少(P〈〇.05);與模型組大鼠比較，復方烏鱧口服液組 和氟西汀組大鼠對幼崽關愛行為增多，懸尾實驗及強迫游泳實驗大鼠絕望不動持續時間減 少，曠場實驗大鼠活動性及興趣性增加(p〈〇. 〇5)。因此，復方烏鱧口服液能夠改善pro模型 大鼠的行為學指標，具有抗抑郁作用。
【具體實施方式】
[0008] 1材料與方法
[0009] 1.1藥物:復方烏鱧口服液，規格：10ml/支，含量1.062g生藥/ml，批號：160109。由 湖南明瑞制藥有限公司提供。鹽酸帕羅西汀片，規格:20mg/片，由浙江尖峰藥業有限公司提 供，批號：150101。地塞米松磷酸鈉注射液，規格：lml: 5mg，濟南利民制藥有限責任公司，批 號：15120602-1。
[0010] 1.2動物:受孕SD大鼠，60只，180-240g，SPF級，由湖南斯萊克景達實驗動物有限公 司提供，動物生產許可證號：SCXK(湘）2013-0004。使用單位為湖南斯萊克景達實驗動物有 限公司，使用許可證號為S Y X K (湘）2 0 1 4 - 0 0 1 2。實驗動物質量合格證號為 No. 43004700015835。實驗動物設施使用證明編號為No. 00074325。
[0011] 1.3方法:將受孕大鼠60只，隨機分為6組，對照組，模型組，鹽酸帕羅西汀組，復方 烏鱧口服液低、中、高劑量組，獨籠飼養，除空白對照組自然飼養外，其余各組大鼠自受孕第 1天起，皮下注射注射用水lml/kg;至受孕成功第15天開始，皮下注射地塞米松磷酸鈉 〇.2mg/kg，直到產崽；產崽后繼續給藥:模型組(蒸餾水），鹽酸帕羅西汀組(3.6mg/kg)，復方 烏鱧口服液低、中、高劑量組（1.8、3.6、7.2ml/kg)，連續給藥15天，產后4天觀察母愛行為 (噙崽潛伏期、集窩時間、舔崽時間、噙崽頻率）。產后10天進行曠場實驗(活動性及興趣性）。 產后12天進行懸尾實驗(絕望不動持續時間）。產后15天進行強迫游泳實驗（自救持續時間、 絕望不動持續時間）。
[0012] 1.4檢測指標[3-4]:
[0013] 1)關愛行為:于分娩后的第4天，母鼠給藥lh后，將幼鼠分散于鼠籠四角，母鼠置于 鼠籠中央，在鼠籠正上方l〇〇cm處懸掛攝像機進行記錄，記錄時間為30min，每只母鼠關愛幼 崽行為。噙崽潛伏期，母鼠噙起第1只幼鼠的時間；集窩時間，母鼠將所有幼鼠集中的時間； 舔崽時間，母鼠用舌頭舔或頭部在幼鼠頭背和肛門生殖器周圍持續3s以上的總時間；噙崽 頻率，母鼠噙起幼鼠的總次數。
[0014] 2)曠場實驗：于分娩后的第10天，母鼠給藥lh后，用自制OPEN-FIELD敞箱(80cmX 80cmX4〇Cm)。四周箱壁為黑色，底面用黑線均勻劃分為相等面積的25塊方格。以動物穿越 方格數作為水平活動的得分（以動物四爪均進入方格為準），以直立次數為垂直活動得分 (兩前肢離地為準）。每只動物僅測定一次，每次3min。每次測試前保持敞箱內干凈。曠場試 驗水平運動的得分反映了大鼠的活動性，垂直活動的得分則反映大鼠的興趣性。
[0015] 3)懸尾實驗:于分娩后的第12天，末次給藥1小時后，距大鼠尾尖部約lcm處用膠布 貼于懸尾箱(40cm X 50cm X 30cm)支架上，使大鼠成倒掛狀態，其頭部離箱底約10cm，一次懸 掛1只小鼠。懸掛時間為6min，計錄大鼠4min內懸尾累積不動時間（不動狀態即為大鼠停止 掙扎不動或無任何活動）。
[00?6] 4)強迫游泳實驗：于分娩后的第15天，末次給藥1小時后，在約60cm高的水桶內放 人約30cm高度的37 °C溫水，距離桶上方100cm處懸掛攝像機進行記錄。計錄大鼠自救持續時 間，大鼠往桶緣上爬和用前爪在水中做大幅度水平運動的時間總和;大鼠持續游泳力竭后 繼續觀察6分鐘，記錄游泳不動時間，即大鼠只在水中做少量輕微擺動保持頭部不下沉的時 間。
[0017] 1.5統計學方法:實驗數據以X±S表示，用SPSS17.0軟件進行單因素方差分析，P〈 〇. 05具有統計學意義，P〈〇. 01具有高度統計學意義。
[0018] 2 結果
[0019] 2.1關愛幼崽行為：與空白對照組比較，模型組母鼠噙崽潛伏期明顯增加 （P = 0.019，P〈0.05)，模型組母鼠集窩時間顯著增加 (P = 0.003，P〈0.01)，模型組母鼠舔崽時間 明顯減少(P = 〇. 026，P〈0.05)，模型組母鼠噙崽頻率顯著降低(P = 0.007，P〈0.01);與模型 組比較，復方烏鱧口服液低劑量組噙崽潛伏期具有降低趨勢，但無統計學意義(P = 〇. 528，P >0.05)，與模型組比較，復方烏鱧口服液中、高劑量組及鹽酸帕羅西汀組噙崽潛伏期明顯降 低(P值分別為〇.〇36,0.027,0.026，P〈0.05)，復方烏鱧口服液低劑量組母鼠集窩時間具有 減少趨勢，但無統計學意義(P = 〇. 263，P>0.05)，復方烏鱧口服液中劑量組母鼠集窩時間具 有減少趨勢，但無統計學意義(P = 〇.065，P>0.05)，復方烏鱧口服液高劑量組母鼠集窩時間 明顯減少（P = 〇 . 040，P〈0.05)，鹽酸帕羅西汀組母鼠集窩時間明顯減少（P = 0.040，P〈 0.05)，復方烏鱧口服液低、中、高劑量組及鹽酸帕羅西汀組母鼠舔崽時間具有增加趨勢，但 無統計學意義(P值分別為0.513,0.493,0.189,0.187，P>0.05)，復方烏鱧口服液低劑量組 母鼠噙崽頻率具有增加趨勢，但無統計學意義(P = 0.260，P>0.05)，復方烏鱧口服液中、高 劑量組及鹽酸帕羅西汀組母鼠噙崽頻率均明顯增加（P分別為0.030，0.022，0.025，P〈 0.05)。見表 1。
[0020] 表1復方烏鱧口服液組對母鼠關愛幼崽行為的比較
[0021] (J±5Sn = 10)
[0022]
[0023] 注:與空白對照組比較，*P〈0.05，，〈0.01;與模型組比較，#P〈0.05，##P〈0.01。
[0024] 2.2曠場實驗：與空白對照組比較，模型組母鼠水平運動（活動性）顯著減少(P = 0.005，P〈0.01 )，與模型組比較，復方烏鱧口服液低、中劑量組母鼠水平運動具有增加趨勢， 但無統計學意義(P值分別為0.061，0.053，P>0.05 )，鹽酸帕羅西汀組和復方烏鱧口服液高 劑量組母鼠的活動性明顯增加(P值分別為0.039，0.037，P〈0.05);與空白對照組比較，模型 組母鼠垂直運動(興趣性)具有降低趨勢，但無統計學意義(P = 0.099，P>0.05);與模型組比 較，復方烏鱧口服液低、中、高劑量組及鹽酸帕羅西汀組母鼠興趣性具有增加趨勢，但無統 計學意義(P值分別為0 · 727，0 · 535，0 · 332，0 · 190，P>0 · 05)，見表2。
[0025] 表2復方烏鱧口服液組對母鼠曠場實驗中的行為比較
[0026] (^ + ^^ = 10)
[0027]
[0029] 注:與空白對照組比較，*P〈0.05，，〈0.01;與模型組比較，#P〈0.05， ##P〈0.01。
[0030] 2.3懸尾實驗:與空白對照組比較，模型組母鼠不動狀態的持續時間明顯增加 (P = 0.042，P〈0.05);與模型組比較，復方烏鱧口服液低、中劑量組母鼠不動狀態的持續時間具 有減少趨勢，但無統計學意義(P值分別為〇. 252，0.242，P>0.05)，鹽酸帕羅西汀組和復方烏 鱧口服液高劑量組不動狀態的持續時間明顯縮短(P值分別為〇. 042，0.031，P〈0.05)，見表 3〇
[0031] 表3復方烏鱧口服液組對母鼠懸尾不動時間的影響
[0032] (Χ±5·，η = 10)
[0033]
[0034] 注:與空白對照組比較，*Ρ〈0 · 05，**Ρ〈0 · 01;與模型組比較，#Ρ〈0 · 05，##Ρ〈0 · 01。
[0035] 2.4強迫游泳實驗：與空白對照組比較，模型組母鼠自救持續時間明顯減少（Ρ = 0.014，？〈0.05)，而絕望不動持續時間明顯增加(？ = 0.012，？〈0.05)。與模型組比較，復方烏 鱧口服液低劑量組母鼠自救持續時間具有增加趨勢，而絕望不動持續時間具有減少趨勢， 但無統計學意義(P值分別為0.137，0.204，P〈0.05);復方烏鱧口服液中劑量組母鼠自救持 續時間明顯增加(？ = 〇.〇37，？〈0.05)，而絕望不動持續時間明顯減少(？ = 0.032，？〈0.05); 復方烏鱧口服液高劑量組母鼠自救持續時間具有明顯增加 (P = 0.048，P〈0.05)，而絕望不 動持續時間具有減少趨勢，但無統計學意義(P = 〇. 078，P>0.05);鹽酸帕羅西汀組自救持續 時間明顯增加 (P = 〇. 〇 19，P〈0.05)，而絕望不動持續時間明顯減少(P = 0.017，P〈0.05)，見 表4。
[0036] 表4復方烏鱧口服液組對母鼠強迫游泳實驗的行為比較
[0037] (夏土S，n = 10)
[0038]
[0039] 注:與空白對照組比較，*P〈0.05，，〈0.01;與模型組比較，#P〈0.05，##P〈0.01。
[0040] 2.5 5-HT含量檢測：與空白對照組比較，模型組母鼠5-HT濃度明顯降低(P〈0.05)。 與模型組比較，復方烏鱧口服液低、中劑量組母鼠5-HT濃度具有增加趨勢，但無統計學意義 (P>0.05);復方烏鱧口服液高劑量組母鼠5-HT濃度明顯增加(P〈0.05);鹽酸帕羅西汀組5-HT濃度明顯增加(P〈0.05)，見表5。
[0041 ] 表5復方烏鱧口服液對母鼠血清5-HT含量的影響 [0042] (X土SD，n = 10)
[0043]
[0045] 與空白對照組比較，_表示P〈0.05, 表示P〈0.01;與模型組比較，"#"表示P〈 0.05, "表示Ρ〈0·01。
[0046] 本實驗主要是借助低劑量的地塞米松，對孕晚期母鼠進行短期（7d)注射，進而成 功模擬Pro動物模型。目前抑郁癥動物模型建立成功與否，主要依靠曠場實驗，懸尾實驗和 強迫游泳實驗等評價指標進行評估，同時選擇母鼠關愛幼崽行為和消極行為與積極行為作 為進一步評估pro動物模型抑郁行為的標準。實驗過程中發現，抑郁模型的母鼠關愛幼崽行 為減弱，在行為上主要表現為:噙崽潛伏期延長，集窩速度表現緩慢，噙崽頻率減少，舔崽持 續時間縮短，并且呈現自身積極行為減少，消極行為增多，抑郁模型母鼠活動性及興趣性降 低，懸尾實驗及強迫游泳實驗中絕望不動持續時間延長的抑郁癥表現，母鼠的上述諸多表 現說明，此次pro模型復制是成功的。而給予復方烏鱧口服液后，母鼠關愛幼崽行為增強，曠 場實驗中大鼠活動增加，并呈劑量依賴。懸尾實驗及強迫游泳實驗中絕望不動持續時間縮 短，提示復方烏鱧口服液具有一定的抗抑郁作用。另外，現代研究發現，抑郁的產生是由于 單胺類神經遞質5-羥色胺(5-HT)功能降低，目前大部分治療抑郁癥的藥物都以5-羥色胺HT 作為的靶點，主要通過增加單胺類遞質的濃度、增強單胺類神經的功能而起到抗抑郁的療 效。本實驗中，復方烏體口服液能夠使產后抑郁癥(postpartum depression，PPD)母鼠抑郁 行為減輕，同時能夠使母鼠血清5-HT含量增強提高，進一步提示復方烏鱧口服液具有抗抑 郁作用。
【主權項】
1. 一種中藥組合物在制備抗抑郁藥物中的應用，所述中藥組合物的主要活性成分的原 料的重量份為:烏鱧3~16份、黃芪2~7份、大棗2~7份、生姜0.5~3份和甘草0.5~3份。2. 如權利要求1所述的應用，其特征在于，所述中藥組合物的主要活性成分的原料的重 量份為:烏鱧8~13份、黃芪3~5份、大棗3~5份。3. 如權利要求2所述的應用，其特征在于，所述中藥組合物的主要活性成分的原料的重 量份為:烏鱧10份、黃芪4份、大棗4份、生姜1份和甘草1份。4. 如權利要求1至3任一項所述的應用，其特征在于，所述中藥組合物是由中藥組合物 活性組分與藥學中的輔料制備成的口服劑型和經皮給藥劑型。5. 如權利要求1至3任一項所述的應用，其特征在于，所述中藥組合物是口服液。
【文檔編號】A61P25/24GK106039276SQ201610640280
【公開日】2016年10月26日
【申請日】2016年8月8日 公開號201610640280.1, CN 106039276 A, CN 106039276A, CN 201610640280, CN-A-106039276, CN106039276 A, CN106039276A, CN201610640280, CN201610640280.1
【發明人】蔡輝
【申請人】湖南明瑞制藥有限公司