一種專門用于茭白生態種植的微生物生長促進劑及其制備方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及微生物領域，具體涉及一種微生物生長促進劑，尤其涉及一種專門用于茭白生態種植的微生物生長促進劑及其制備方法。
【背景技術】
[0002]茭白是一種無性繁殖的水生宿根禾本科作物，俗稱:茭筍、茭瓜，其肉質莖含糖4%，蛋白質1.5%，而且還富含多種維生素，因此，深受消費者的喜愛。茭白原產中國及東南亞，是一種較為常見的水生蔬菜，為禾本科植物菰的嫩莖桿被菰黑粉菌刺激而形成的紡錘形肥大部分。目前，把茭白作為蔬菜栽培的只有中國和越南，其中又以中國栽培最早。茭白分布于我國南北各地，河北、江蘇、浙江、安徽、江西、福建、臺灣、香港、河南、湖南、湖北、海南、廣東、廣西、四川、云南、黑龍江等地均有種植。其中，余姚茭白以河姆渡鎮最為聞名，現年產茭白5萬噸，河姆渡鎮萬畝無公害茭白基地先后被列為寧波市二級蔬菜基地、上海蔬菜集團茭白供應基地、浙江省優質高效農業示范基地。
[0003]茭白的生育期較長、適應性強、不擇土壤，因此，一般的水田、低洼地、淺水塘、溝河邊有水的地方皆可種植。盡管茭白對土質要求不高，但不宜連作，而且最好以耕作層深、富含有機質的粘土和粘質土壤種植。進一步地，由于茭白植株高大、生長期長、需肥量大，因此，還需要多施基肥，分次追肥，要求有充足的氮肥和適當的磷鉀肥。另外，在茭白的生長發育過程中，溫暖濕潤的生長發育環境也是必要條件。
[0004]本申請發明人發現，由于茭白的根系發達、需水量多，因此適宜水源充足、灌水方便、土層深厚松軟、土壤肥沃、富含有機質、保水保肥能力強的黏壤土或壤土。但是在茭白傳統的種植方法中，由于人們大量使用化學肥料，從而導致土壤結塊、板結等問題格外嚴重，進而導致土壤土質惡化、茭白產量低、經濟效益差等問題的產生。事實上，土壤通氣的好壞直接影響到根部的生長與養分的吸收。與大氣比較，土壤中的空氣特點是含氧量較低，一氧化碳含量高，據報道，土壤表層的含氧量比大氣中少1_2%，而二氧化碳則比大氣中高6-30倍，這是由蔬菜根系呼吸和土壤微生生物活動所致。
[0005]進一步地通過研究，本申請發明人發現，蔬菜根系的正常生命活動，要求土壤空氣中含氧量大于10%，當含氧量低于10%時，生長量就急劇下降，養分吸收也受到影響;而且，蔬菜對氮、磷、鉀的吸收也與土壤含氧量有關系，當土壤空氣中含氧量在10-20 %時，氮、磷、鉀的吸收幾乎沒有差異，而當土壤含氧量降到5%時，氮、磷、鉀的吸收也急劇下降，其吸收量甚至下降到2 %。
【發明內容】
[0006]基于上述的現有技術以及本申請發明人的研究發現，本發明提供了一種專門用于茭白生態種植的微生物生長促進劑及其制備方法。其中，以茭白廢棄物為主要原料，就地全量還田，是一種養分含量高的高效生物有機肥，其特殊的基質載體可以保證土壤透氣疏松，便于有益菌生長，而且可以抑制土傳病害，改善土壤其它交換及形成穩定的有益菌生態土壤系統等，從而全面地解決或預防土壤連作難題，是一種新型微生物農業技術產品。
[0007]本發明的技術方案包括一種專門用于茭白生態種植的微生物生長促進劑的制備方法，其特征在于，包括:
[0008]1)從茭白種植土壤中分別初步篩選出假單胞菌、原褐固氮菌、枯草芽孢桿菌、甲基單胞菌以及鏈霉菌，并通過進一步篩選分別得到生長速度快的菌種；
[0009]2)將步驟1)中得到的菌種在液體培養基中進行混合培養，得到混合菌液；
[0010]3)將步驟2)得到的混合菌液在固體擴大培養基中進行固體擴大培養，得到發酵初
τ?: 口廣PR ；
[0011]4)將步驟3)得到的發酵初產品進行干燥、添加基質載體、過篩、分裝，得到所述微生物生長促進劑。
[0012]在本發明的一個實施例中，所述初步篩選的具體步驟為:用無菌水浸泡茭白種植土壤得到浸出液;從浸出液中分別用光合細菌培養基篩選出假單胞菌，用固氮培養基篩選出原褐固氮菌，用牛肉膏蛋白胨瓊脂培養基篩選出枯草芽孢桿菌、甲基單胞菌，用馬鈴薯蔗糖瓊脂培養基篩選出鏈霉菌，從而分別得到所述的假單胞菌、原褐固氮菌、枯草芽孢桿菌、甲基單胞菌以及鏈霉菌。
[0013]更加優選地，選用生長良好的種植土壤，并采用常規方法進行微生物滅菌，將滅菌后的土壤中加入其10倍重量份的無菌水浸泡24-26小時，在浸出液中分別用光合細菌培養基篩選出假單胞菌，用固氮培養基篩選出原褐固氮菌，用牛肉膏蛋白胨瓊脂培養基篩選出枯草芽孢桿菌、甲基單胞菌，用馬鈴薯蔗糖瓊脂培養基篩選出鏈霉菌，從而分別得到所述的假單胞菌、原褐固氮菌、枯草芽孢桿菌、甲基單胞菌以及鏈霉菌。
[0014]在本發明的一個優選實施例中，所述進一步篩選具體為:將初步篩選得到的所述菌種分別稀釋至10—5-10—7，然后分別在營養瓊脂平板中倒置培養，選出生長速度快的菌落，然后分別進行搖瓶實驗，篩選出生長速度更快的菌種;進一步地，然后將各個菌種分別轉接入裝有營養瓊脂培養基的茄子瓶進行培養，待茄子瓶表面菌苔布滿并白中帶黃時，取出待用。
[0015]更加優選地是，將初步篩選得到的所述菌種分別用質量濃度為0.9%的生理鹽水稀釋至10—5-10—7，得到的菌懸液分別在營養瓊脂平板中于35°C條件下倒置培養48小時，選出生長速度快的菌落，然后進行搖瓶實驗，觀察菌種生長速度，篩選出數量高于50億/ml的菌種;將假單胞菌、原褐固氮菌、枯草芽孢桿菌、甲基單胞菌、鏈霉菌分別轉接入裝有營養瓊脂培養基的茄子瓶中，在35-40°C條件下培養45-50小時，待茄子瓶表面菌苔布滿并白中帶黃時，即可取出，然后放入2-6°C的冰箱中保存，待用。
[0016]其中，篩選得到的所述假單胞菌為熒光假單胞菌。
[0017]進一步地，在一個實施例中，步驟2)中的所述混合培養具體為:將步驟1)中得到的菌種在液體培養基中進行混合培養，當活菌總數達到50億/ml，pH值達到7.5-8.0時停止發酵，得到發酵初產品。
[0018]更加優選的是，按以下重量配比稱取各菌種:假單胞菌10-13份、原褐固氮菌20-23份、枯草芽孢桿菌30-33份、甲基單胞菌10-13份、鏈霉菌18-30份;進一步地，所述混合培養是將稱取的以上菌種的混合菌苔按照1:25-30的重量比例接種于經過120-130°C、30-40min高溫滅菌的液體培養基中，在發酵罐中攪拌培養，其轉速為220-240r/min，發酵通氣量維持在1:1，溫度為30-32°C ；發酵24小時后每隔2小時監測發酵液pH值和活菌總數，當活菌總數達到50億/ml，pH值達到7.5-8.0時停止發酵。
[0019]在另一個實施例中，步驟3)中的所述固體擴大培養為將步驟2)中的所述混合菌液接入固體擴大培養基中進行密封發酵培養，待水分為30-40%，pH值為7—8.5時停止發酵。
[0020]更加優選地，將步驟2)中得到的混合培養的混合菌液按1:25—30的比例接入經過120-130°C，30-45min高溫滅菌的固體擴大培養基中，攪拌30_45min至均勻，倒入消毒雙層塑封袋中密封發酵，溫度25-35°C，時間8-15天;發酵7天后每隔6小時取樣，測定水分和pH值，待水分為30-40%，pH值為7—8.5時停止發酵。
[0021 ]在其中一個實施例中，所述干燥是在培養箱中干燥，溫度控制在35_45°C，時間12_18小時，干燥完成的發酵初產品的水分控制在20%以下。
[0022]進一步地，添加基質載體，按照干燥后的發酵初產品45-50份、基質載體50-55份的重量比例進行混合，其中，所述基質載體為滅菌木肩與滅菌茭白廢棄物。
[0023]進一步地，進行過篩并裝入帶有內袋的桶或者塑封袋中，扎緊袋口，系好標示牌，轉入成品庫中有序堆放。
[0024]優選地，所述制備方法還包括取樣檢測，主要檢測參數為:水分<11.8 %，活菌數25-30億/g，物理性狀為棕色粉末狀固體。
[0025]進一步地，優選地，所述液體培養基為無菌水再加玉米漿、大麥淀粉、硫酸氫銨、糖蜜、磷酸鉀、硫酸鉀、微量元素溶液中至少三種混合物的組合，優選地，其組分及其重量配比為玉米漿2-3份、大麥淀粉1-2份、硫酸氫銨0.1-0.3份、糖蜜10-14份、磷酸鉀1.2_2份、硫酸鉀0-0.8份、微量元素溶液0.3-0.5份、無菌水75-85份。
[0026]優選地，所述固體擴大培養基為無菌水再加清糠、豆柏粉、酵母粉、玉米粉、磷酸二氫鉀、硫酸錳、大蒜汁中至少四種混合物的組合，優選地，其組分及其重量配比為:清糠40-40份、豆柏粉10-12份、酵母粉1-1.2份、玉米粉8-10份、磷酸二氫鉀0.8-1份、硫酸錳0-0.4份、大蒜汁1_1.2份、無菌水32.3~39.2份。
[0027]進一步地，所述的基質由滅菌木肩、滅菌茭白廢棄物組成，其重量配比為:木肩55-60、茭白廢棄物40-45。
[0028]本發明的技術方案還包括一種上述所述的制備方法制備得到的微生物生長促進劑。
[0029]申請發明人對現有茭白種植方法進行改進，根據茭白生長過程中對肥料的需求規律，設計種