一種葛根培養基的制作方法
【專利摘要】本發明公開了一種葛根培養基，包括以下原料：西瓜汁、茶多酚、氯化鉀、磷酸鈣、碳酸氫銨、甘氨酸鈣、甘氨酸鎂、碘化鉀、硼酸鉀、鉬酸鉀、氯化鋅、甘氨酸錳、甘氨酸銅、硫酸亞鐵、維生素、氨基酸、水。本發明的葛根培養基，搭配合理，營養全面，能夠快速促根生莖，提高移栽存活率，同時也能促進黃酮類化合物的積累，提高經濟效益；本發明的葛根培養基不添加植物激素，人體食用后可以避免激素帶來的不安全風險。
【專利說明】一種葛根培養基 【技術領域】
[0001 ]本發明屬于葛根種植技術領域，具體涉及一種葛根培養基。 【【背景技術】】
[0002] 野葛(Pueraria lobata)為豆科葛屬，多年生藤本植物。葛根是藥食兩用植物，其 根、莖、葉、花都可入藥，現代醫學表明葛根中的有效成分為異黃酮類(isoflavones)物質， 其中葛根素(puerarin)含量最高。這些異黃酮類化合物具有治療急性心肌梗塞、不穩定性 心絞痛、高粘血癥、急性腦梗塞、頸椎病等疾病，對東莨菪堿和乙醇引起的記憶障礙具有對 抗作用;其食用部分主要是塊根，人們提取其淀粉加工成葛粉絲、葛糕、葛飲料、葛凍、葛酒、 葛餅干等系列產品。同時葛根的莖葉又是良好的動物飼料，而且由于葛根頑強的適應性和 生命力，又是世界各國極為重視的水土保持植物，被譽為"大地良醫"。所以葛根的種植業近 幾年發展得很快，但葛根的種子很難得到且發芽率又不高，而傳統的扦插繁殖又使得病毒 積累嚴重，病毒病已成為粉葛種性退化、產量下降、品質變劣的重要原因。因此近幾年，葛根 的組織培養技術得到迅速發展，主要集中在利用葛根的莖、葉來誘導形成愈傷組織，前人研 究表明以葛根的根、莖、葉、子葉為外植體，都可以產生愈傷組織，且每種組織愈傷組織生長 周期不一樣，分化率也不一樣，普遍認為莖桿的誘導分化率不高且容易褐化，部分學者認為 葛根的成熟葉片為誘導愈傷組織的最適宜外植體。另外，前人還研究了不同激素以及不同 激素組合對葛根各部分誘導分化的影響，結果發現誘導及芽分化率都極低。由于幼莖分生 組織代謝活性很高，不易受微生物的侵染，且莖尖分生組織帶有葉原基，較易誘導愈傷組織 的形成，因此，部分學者采用莖尖脫毒技術，研究了莖尖分生組織誘導愈傷組織，并且對組 織培養的最適培養基進行了研究。他們剝去莖尖外面的芽鱗和幼葉，切取大小〇. 4-0.6_帶 有葉原基的分生組織為外植體，通過誘導、繼代、分化和生根培養，得到了生有少量側根的 組培苗，同時他們也對不同濃度的激素組合的影響作了研究，得到了最佳的激素組合濃度， 但對此，不同學者之間的研究結果差別很大，而且利用此種方法，需要100多天才能得到生 有側根的小苗，在生產上應用很受限制。除此之外，部分學者還嘗試借鑒蘭花的組培經驗， 利用帶有幼芽的莖段為外植體，來進行葛根無菌廟的擴繁試驗，但葛根的幼芽分化率不是 很高，因而此方法也受到限制。
[0003] 專利申請文獻"一種葛根的快速繁殖方法(公開號:CN102144555A)"公開了一種以 MS為基本培養基，添加各種植物激素的培養基，達到了快速組培葛根組培苗的效果，而然， 由于培養基中添加了植物激素，造成食用不安全的風險。現有組織培養技術中未公開采用 茶多酚促進葛根黃酮類化合物積累的報道。 【
【發明內容】
】
[0004] 本發明提供一種葛根培養基，以解決現有組織培養基添加植物激素，造成食用不 安全的風險;如何提高葛根的主要有效成分黃酮類化合物的含量，提高經濟效益等問題。本 發明的葛根培養基，搭配合理，營養全面，能夠快速促根生莖，提高移栽存活率，同時也能促 進黃酮類化合物的積累，提高經濟效益;本發明的葛根培養基不添加植物激素，人體食用后 可以避免激素帶來的不安全風險。
[0005] 為解決以上技術問題，本發明采用以下技術方案：
[0006] 一種葛根培養基，以重量份為單位，包括以下原料:西瓜汁500-1200份、茶多酚40-80份、氯化鉀4-8份、磷酸鈣3-6份、碳酸氫銨3-6份、甘氨酸鈣0.6-0.8份、甘氨酸鎂0.6-0.8 份、碘化鉀0.2-0.4份、硼酸鉀0.2-0.4份、鉬酸鉀0.2-0.4份、氯化鋅0.2-0.4份、甘氨酸錳 0.2-0.4份、甘氨酸銅0.2-0.4份、硫酸亞鐵0.2-0.4份、維生素0.1-0.3份、氨基酸0.1-0.3 份、水6000-12000份；
[0007]所述葛根培養基，其制備方法包括以下步驟：
[0008] S1:將西瓜剝皮后用攪碎機將西瓜肉攪碎，所得榨汁過濾，制得西瓜汁備用；
[0009] S2:茶多酚的制備，包括以下步驟：
[0010] S21:將團羅茶粉碎后過60-80目篩，與質量分數為40%-60 %的乙醇水溶液按質量 比為1:14-18混合，在溫度為32-34°C，微波功率為200-240W下，提取2-3次，每次8-14min，過 濾，合并濾液，濃縮，制得茶多酚粗提取液；
[0011] S22:將步驟S21制得的茶多酚粗提取液加入到KC1溶液中，pH調節至6.8-7.2，在離 心轉速為4000-5000r/min下除去雜質，米用0.2-〇.4μηι濾膜在溫度為34_36°C下對離心后的 溶液進行過濾，制得過濾液；
[0012] S23:將步驟S22制得的過濾液用乙醚提取，冷凍濃縮、干燥后制得茶多酚；
[0013] S3:將步驟S1制得的西瓜汁、步驟S2制得的茶多酚、氯化鉀、磷酸鈣、碳酸氫銨、甘 氨酸鈣、甘氨酸鎂、碘化鉀、硼酸鉀、鉬酸鉀、氯化鋅、甘氨酸錳、甘氨酸銅、硫酸亞鐵、維生 素、氨基酸、水按比例混合均勻，制得混合液；
[0014] S4:將步驟S3制得的混合液pH值調節至5.4-6.2,接著在溫度為134-136Γ，壓力為 210-230KPa下，滅菌l-1.4min，制得葛根培養基。
[0015]進一步地，所述維生素包括生素 A、維生素 B1、維生素 B2、維生素 D中的一種或多種。
[0016] 進一步地，所述氨基酸包括甘氨酸、胱氨酸、脯氨酸、絲氨酸中的一種或多種。
[0017] 進一步地，步驟S1中所述榨汁用3000-6000目篩子過濾。
[0018] 進一步地，步驟S23中所述冷凍濃縮的溫度在-8°c以下。
[0019] 進一步地，步驟S23中所述干燥的溫度為90-102°C。
[0020]進一步地，步驟S4中所述滅菌采用的儀器是脈動真空壓力蒸氣滅菌器。
[0021 ]本發明培養基各個成分的作用如下：
[0022] 西瓜汁的添加有利于多糖含量的積累。
[0023] 茶多酚作為一種抗氧劑，既能使細胞生長緩慢，也可以促進黃酮積累。
[0024] 鉀元素的營養功效可以提高光合作用的強度，促進作物體內淀粉和糖的形成，增 強作物的抗逆性和抗病能力，還能提高作物對氮的吸收利用。
[0025] 磷是形成細胞核蛋白、卵磷脂等不可缺少的元素。磷元素能加速細胞分裂，促使根 系和地上部加快生長，促進花芽分化，提早成熟，提高果實品質。
[0026] 氮是蛋白質構成的主要元素，蛋白質是細胞原生質組成中的基本物質。氮元素能 促進蛋白質和葉綠素的形成，使葉色深綠，葉面積增大，促進碳的同化，有利于產量增加，品 質改善。
[0027] 缺少鈣植物分生組織的生長變慢，缺鈣和癥初在生長點和幼葉，嚴重時，葉子變形 和失綠，在葉子的邊緣出現壞死斑點。
[0028] 鎂是葉綠素的組成成分。如果缺少鎂，葉片失去了綠色，不能制造營養物質。碘是 植物生長不可缺少的元素，被譽為生命元素、智慧元素。
[0029] 硼在植物體內比較集中于莖尖、根尖、葉片和花器官中，雙子葉植物中的含量常常 高于單子葉植物。硼可以提高豆科作物根瘤菌的固氮活性，增加固氮量，缺硼時，根留不發 達，影響固氮量。硼還能增強作物抗逆性。
[0030] 鉬是固氮微生物，特別是與豆科作物共生的根瘤菌固定大氣氮素時所必需的。同 時又能增進葉片光合作用強度。缺鉬時植株矮小，葉片脈間失綠，葉緣枯焦，向內卷曲，成萎 蔫態。
[0031] 鋅能促進作物進行光合作用，它是多種酶的組成成分，缺鋅時作物生長發育出現 停滯。
[0032] 植物葉綠體中含有錳，錳能促進種子發芽和幼苗時期生長，缺錳時影響作物的光 合作用、呼吸作用、硝態氮在體內的積累。表現為葉片脈間失綠黃化，有褐色斑點。
[0033] 銅參加植物的光合作用、呼吸作用、氮代謝、增強植物的抗性。缺銅時植株生長瘦 弱，新葉發黃，凋萎干枯，葉尖卷曲發白，有壞死斑點。
[0034]鐵是葉綠素形成不可缺少的，在植株體內很難轉移，所以葉片"失綠癥"是植物缺 鐵的表現，并且這種失綠首先表現在幼嫩葉片上。
[0035] 維生素對植物的生根有效應，能夠促進植物生根。
[0036] 氨基酸是植物生長所必需的營養物質，由于氨基酸本身的特性，對植物生長特別 是光合作用具有獨特的促進作用，它可以增加植物葉綠素含量，提高酶的活性，促進二氧化 碳的滲透，使光合作用更加旺盛，對提高作物品質，增加 Vc和糖的含量都有著重要作用。 [0037]本發明具有以下有益效果：
[0038] (1)茶多酚能促進葛根黃酮類化合物的積累；茶多酚作為抗氧劑，同時能抑制植物 細胞的生長，然而本發明在其他培養基組分協同作用下，茶多酚的抑制葛根作用較小。
[0039] (2)本發明的培養基有利于提高葛根苗的移栽存活率，達到94%_96%。
[0040] (3)本發明的組織培養基不添加植物激素，人體食用葛根后可以避免激素帶來的 不安全風險。
[0041] (4)采用本發明的葛根培養基制備方法，能夠縮短消毒時間，提高滅菌效果可靠性 和產業化生產效率，降低生產成本。
[0042] (5)本發明的葛根培養基制備方法，操作簡單，易于實現產業化、規范化和標準化 生產。 【【具體實施方式】】
[0043]為便于更好地理解本發明，通過以下實施例加以說明，這些實施例屬于本發明的 保護范圍，但不限制本發明的保護范圍。
[0044]在實施例中，葛根培養基，以重量份為單位，包括以下原料:西瓜汁500-1200份、茶 多酚40-80份、氯化鉀4-8份、磷酸鈣3-6份、碳酸氫銨3-6份、甘氨酸鈣0.6-0.8份、甘氨酸鎂 0.6-0.8份、碘化鉀0.2-0.4份、硼酸鉀0.2-0.4份、鉬酸鉀0.2-0.4份、氯化鋅0.2-0.4份、甘 氨酸錳Ο . 2-0.4份、甘氨酸銅Ο . 2-0.4份、硫酸亞鐵Ο . 2-0.4份、維生素 Ο . 1-0.3份、氨基酸 0 · 1 -0 · 3份、水6000-12000份；
[0045] 所述維生素包括生素 A、維生素 B1、維生素 B2、維生素 D中的一種或多種；
[0046] 所述氨基酸包括甘氨酸、胱氨酸、脯氨酸、絲氨酸中的一種或多種；
[0047] 所述葛根培養基，其制備方法包括以下步驟：
[0048] S1:將西瓜剝皮后用攪碎機將西瓜肉攪碎，所得榨汁用3000-6000目篩子過濾，制 得西瓜汁備用；
[0049] S2:茶多酚的制備，包括以下步驟：
[0050] S21:將團羅茶粉碎后過60-80目篩，與質量分數為40%-60 %的乙醇水溶液按質量 比為1:14-18混合，在溫度為32-34°C，微波功率為200-240W下，提取2-3次，每次8-14min，過 濾，合并濾液，濃縮，制得茶多酚粗提取液；
[0051 ] S22:將步驟S21制得的茶多酚粗提取液加入到KC1溶液中，pH調節至6.8-7.2，在離 心轉速為4000-5000r/min下除去雜質，米用0.2-〇.4μηι濾膜在溫度為34_36°C下對離心后的 溶液進行過濾，制得過濾液；
[0052] S23:將步驟S22制得的過濾液用乙醚提取，在溫度為-8°C以下冷凍濃縮，在溫度為 90_102°C下干燥后制得茶多酸；
[0053] S3:將步驟S1制得的西瓜汁、步驟S2制得的茶多酚、氯化鉀、磷酸鈣、碳酸氫銨、甘 氨酸鈣、甘氨酸鎂、碘化鉀、硼酸鉀、鉬酸鉀、氯化鋅、甘氨酸錳、甘氨酸銅、硫酸亞鐵、維生 素、氨基酸、水按比例混合均勻，制得混合液；
[0054] S4:將步驟S3制得的混合液pH值調節至5.4-6.2，接著采用脈動真空壓力蒸氣滅菌 器在溫度為134-136Γ，壓力為210-230KPa下，滅菌l-1.4min，制得葛根培養基。
[0055] 實施例1
[0056] 一種葛根培養基，以重量份為單位，包括以下原料：西瓜汁800份、茶多酚60份、氯 化鉀6份、磷酸鈣5份、碳酸氫銨5份、甘氨酸鈣0.7份、甘氨酸鎂0.7份、碘化鉀0.3份、硼酸鉀 0.3份、鉬酸鉀0.3份、氯化鋅0.3份、甘氨酸錳0.3份、甘氨酸銅0.3份、硫酸亞鐵0.3份、維生 素 A0.2份、甘氨酸0.2份、水9000份；
[0057]所述葛根培養基，其制備方法包括以下步驟：
[0058] S1:將西瓜剝皮后用攪碎機將西瓜肉攪碎，所得榨汁用5000目篩子過濾，制得西瓜 汁備用；
[0059] S2:茶多酚的制備，包括以下步驟：
[0060] S21:將團羅茶粉碎后過70目篩，與質量分數為50%的乙醇水溶液按質量比為1:16 混合，在溫度為33 °C，微波功率為22〇rf，提取3次，每次12min，過濾，合并濾液，濃縮，制得 茶多酚粗提取液；
[0061] S22:將步驟S21制得的茶多酚粗提取液加入到KC1溶液中，pH調節至6.7.1，在離心 轉速為4500r/min下除去雜質，采用0.3μπι濾膜在溫度為35°C下對離心后的溶液進行過濾， 制得過濾液；
[0062] S23:將步驟S22制得的過濾液用乙醚提取，在溫度為-8°C下冷凍濃縮，在溫度為95 °(：下干燥后制得茶多酚；
[0063] S3:將步驟S1制得的西瓜汁、步驟S2制得的茶多酚、氯化鉀、磷酸鈣、碳酸氫銨、甘 氨酸鈣、甘氨酸鎂、碘化鉀、硼酸鉀、鉬酸鉀、氯化鋅、甘氨酸錳、甘氨酸銅、硫酸亞鐵、維生素 A、甘氨酸、水按比例混合均勻，制得混合液；
[0064] S4:將步驟S3制得的混合液pH值調節至5.8，接著采用脈動真空壓力蒸氣滅菌器在 溫度為135°C，壓力為220KPa下，滅菌1.2min，制得葛根培養基。
[0065] 實施例2
[0066] 一種葛根培養基，以重量份為單位，包括以下原料：西瓜汁500份、茶多酚40份、氯 化鉀4份、磷酸鈣3份、碳酸氫銨3份、甘氨酸鈣0.6份、甘氨酸鎂0.6份、碘化鉀0.2份、硼酸鉀 0.2份、鉬酸鉀0.2份、氯化鋅0.2份、甘氨酸錳0.2份、甘氨酸銅0.2份、硫酸亞鐵0.2份、維生 素 B10.1份、胱氨酸0.1份、水6000份；
[0067]所述葛根培養基，其制備方法包括以下步驟：
[0068] S1:將西瓜剝皮后用攪碎機將西瓜肉攪碎，所得榨汁用3000目篩子過濾，制得西瓜 汁備用；
[0069] S2:茶多酚的制備，包括以下步驟：
[0070] S21:將團羅茶粉碎后過60目篩，與質量分數為40%的乙醇水溶液按質量比為1:14 混合，在溫度為32 °C，微波功率為20〇rf，提取3次，每次14min，過濾，合并濾液，濃縮，制得 茶多酚粗提取液；
[0071] S22:將步驟S21制得的茶多酚粗提取液加入到KC1溶液中，pH調節至6.8,在離心轉 速為4000r/min下除去雜質，采用0.2μπι濾膜在溫度為34°C下對離心后的溶液進行過濾，制 得過濾液；
[0072] S23:將步驟S22制得的過濾液用乙醚提取，在溫度為_10°C下冷凍濃縮，在溫度為 90°C下干燥后制得茶多酚；
[0073] S3:將步驟S1制得的西瓜汁、步驟S2制得的茶多酚、氯化鉀、磷酸鈣、碳酸氫銨、甘 氨酸鈣、甘氨酸鎂、碘化鉀、硼酸鉀、鉬酸鉀、氯化鋅、甘氨酸錳、甘氨酸銅、硫酸亞鐵、維生素 B1、胱氨酸、水按比例混合均勻，制得混合液；
[0074] S4:將步驟S3制得的混合液pH值調節至5.4,接著采用脈動真空壓力蒸氣滅菌器在 溫度為134°C，壓力為210KPa下，滅菌1.4min，制得葛根培養基。
[0075] 實施例3
[0076] 一種葛根培養基，以重量份為單位，包括以下原料:西瓜汁1200份、茶多酚80份、氯 化鉀8份、磷酸鈣6份、碳酸氫銨6份、甘氨酸鈣0.8份、甘氨酸鎂0.8份、碘化鉀0.4份、硼酸鉀 〇. 4份、鉬酸鉀0.4份、氯化鋅0.4份、甘氨酸錳0.4份、甘氨酸銅0.4份、硫酸亞鐵0.4份、維生 素 B20.1份、維生素 D0.2份、脯氨酸0.1份、絲氨酸0.2份、水12000份；
[0077] 所述葛根培養基，其制備方法包括以下步驟：
[0078] S1:將西瓜剝皮后用攪碎機將西瓜肉攪碎，所得榨汁用6000目篩子過濾，制得西瓜 汁備用；
[0079] S2:茶多酚的制備，包括以下步驟：
[0080] S21:將團羅茶粉碎后過80目篩，與質量分數為60%的乙醇水溶液按質量比為1:18 混合，在溫度為34 °C，微波功率為24〇rf，提取2次，每次8min，過濾，合并濾液，濃縮，制得茶 多酚粗提取液；
[0081] S22:將步驟S21制得的茶多酚粗提取液加入到KC1溶液中，pH調節至7.2,在離心轉 速為5000r/min下除去雜質，采用0.4μπι濾膜在溫度為36°C下對離心后的溶液進行過濾，制 得過濾液；
[0082] S23:將步驟S22制得的過濾液用乙醚提取，在溫度為-8°C以下冷凍濃縮，在溫度為 102°C下干燥后制得茶多酚；
[0083] S3:將步驟S1制得的西瓜汁、步驟S2制得的茶多酚、氯化鉀、磷酸鈣、碳酸氫銨、甘 氨酸鈣、甘氨酸鎂、碘化鉀、硼酸鉀、鉬酸鉀、氯化鋅、甘氨酸錳、甘氨酸銅、硫酸亞鐵、維生素 B2、維生素 D、脯氨酸、絲氨酸、水按比例混合均勻，制得混合液；
[0084] S4:將步驟S3制得的混合液pH值調節至6.2，接著采用脈動真空壓力蒸氣滅菌器在 溫度為136°C，壓力為230KPa下，滅菌lmin，制得葛根培養基。
[0085] 實施例4
[0086] 一種葛根培養基，以重量份為單位，包括以下原料：西瓜汁600份、茶多酚50份、氯 化鉀5份、磷酸鈣4份、碳酸氫銨4份、甘氨酸鈣0.6份、甘氨酸鎂0.6份、碘化鉀0.2份、硼酸鉀 0.2份、鉬酸鉀0.2份、氯化鋅0.2份、甘氨酸錳0.2份、甘氨酸銅0.2份、硫酸亞鐵0.2份、維生 素 B 20.1份、脯氨酸0.1份、水7000份；
[0087]所述葛根培養基，其制備方法包括以下步驟：
[0088] S1:將西瓜剝皮后用攪碎機將西瓜肉攪碎，所得榨汁用3500目篩子過濾，制得西瓜 汁備用；
[0089] S2:茶多酚的制備，包括以下步驟：
[0090] S21:將團羅茶粉碎后過60-80目篩，與質量分數為45%的乙醇水溶液按質量比為 1:15混合，在溫度為32 °C，微波功率為210W下，提取3次，每次12min，過濾，合并濾液，濃縮， 制得茶多酚粗提取液；
[0091] S22:將步驟S21制得的茶多酚粗提取液加入到KC1溶液中，pH調節至6.9,在離心轉 速為4000r/min下除去雜質，采用0.2μπι濾膜在溫度為34°C下對離心后的溶液進行過濾，制 得過濾液；
[0092] S23:將步驟S22制得的過濾液用乙醚提取，在溫度為-16°C下冷凍濃縮，在溫度為 92°C下干燥后制得茶多酚；
[0093] S3:將步驟S1制得的西瓜汁、步驟S2制得的茶多酚、氯化鉀、磷酸鈣、碳酸氫銨、甘 氨酸鈣、甘氨酸鎂、碘化鉀、硼酸鉀、鉬酸鉀、氯化鋅、甘氨酸錳、甘氨酸銅、硫酸亞鐵、維生素 B2、脯氨酸、水按比例混合均勻，制得混合液；
[0094] S4:將步驟S3制得的混合液pH值調節至5.5,接著采用脈動真空壓力蒸氣滅菌器在 溫度為135°C，壓力為220KPa下，滅菌1.2min，制得葛根培養基。
[0095] 實施例5
[0096] 一種葛根培養基，以重量份為單位，包括以下原料:西瓜汁1000份、茶多酚70份、氯 化鉀7份、磷酸鈣5份、碳酸氫銨5份、甘氨酸鈣0.8份、甘氨酸鎂0.8份、碘化鉀0.4份、硼酸鉀 0.4份、鉬酸鉀0.4份、氯化鋅0.4份、甘氨酸錳0.3份、甘氨酸銅0.3份、硫酸亞鐵0.3份、維生 素 DO. 2份、絲氨酸0.2份、水10000份；
[0097]所述葛根培養基，其制備方法包括以下步驟：
[0098] S1:將西瓜剝皮后用攪碎機將西瓜肉攪碎，所得榨汁用5000目篩子過濾，制得西瓜 汁備用；
[0099] S2:茶多酚的制備，包括以下步驟：
[0100] S21:將團羅茶粉碎后過60-80目篩，與質量分數為55%的乙醇水溶液按質量比為 1:16混合，在溫度為34°C，微波功率為220W下，提取3次，每次12min，過濾，合并濾液，濃縮， 制得茶多酚粗提取液；
[0101] S22:將步驟S21制得的茶多酚粗提取液加入到KC1溶液中，pH調節至7.1，在離心轉 速為4500r/min下除去雜質，采用0.3μπι濾膜在溫度為35°C下對離心后的溶液進行過濾，制 得過濾液；
[0102] S23:將步驟S22制得的過濾液用乙醚提取，在溫度為-20°C下冷凍濃縮，在溫度為 100°C下干燥后制得茶多酚；
[0103] S3:將步驟S1制得的西瓜汁、步驟S2制得的茶多酚、氯化鉀、磷酸鈣、碳酸氫銨、甘 氨酸鈣、甘氨酸鎂、碘化鉀、硼酸鉀、鉬酸鉀、氯化鋅、甘氨酸錳、甘氨酸銅、硫酸亞鐵、維生素 D、絲氨酸、水按比例混合均勻，制得混合液；
[0104] S4:將步驟S3制得的混合液pH值調節至5.8，接著采用脈動真空壓力蒸氣滅菌器在 溫度為136°C，壓力為230KPa下，滅菌lmin，制得葛根培養基。
[0105]為驗證本發明培養基的效果，通過以下實驗驗證。
[0106]每組選用規格基本一致的2-3cm的葛根帶芽莖段數量100,對照組1以西瓜汁、氯化 鉀、磷酸鈣、碳酸氫銨、甘氨酸鈣、甘氨酸鎂、碘化鉀、硼酸鉀、鉬酸鉀、氯化鋅、甘氨酸錳、甘 氨酸銅、硫酸亞鐵、維生素 D、絲氨酸、水組成的培養基，對照組2單獨以茶多酚為培養基，其 他采用實施例1-5的培養基。培養130天后測量葛根苗黃酮類化合物平均得率和長度，結果 見表1。
[0107]表1培養基組培葛根苗黃酮類化合物平均得率和長度情況
[0109]由表1可知，實施例1-5的葛根苗黃酮類化合物平均得率比對照組1的葛根苗黃酮 類化合物平均得率高11.24%-21.35%;實施例1-5的葛根苗長度比對照組1的葛根苗長度 短3.32%-4.33%，對照組2葛根幾乎不生長，說明了茶多酚的存在能大大提高葛根苗黃酮 類化合物平均得率，但同時茶多酚作為抗氧劑，也抑制植物細胞的生長，然而在其他培養基 組分伍配作用下，茶多酚的抑制作用較小。
[0110] 表2是實施例1-5培養基組培葛根苗移栽存活情況。
[0111] 表2培養基組培葛根苗移栽存活情況
[0113] 由表2可以知道，以本發明的培養基組培葛根苗的平均移栽存活率為94%_96%， 說明了本發明培養基有利于提高葛根苗的移栽存活率。
[0114] 以上內容不能認定本發明的具體實施只局限于這些說明，對于本發明所屬技術領 域的普通技術人員來說，在不脫離本發明構思的前提下，還可以做出若干簡單推演或替換， 都應當視為屬于本發明的保護范圍。
【主權項】
1. 一種葛根培養基，其特征在于，以重量份為單位，包括以下原料:西瓜汁500-1200份、 茶多酚40-80份、氯化鉀4-8份、磷酸鈣3-6份、碳酸氫銨3-6份、甘氨酸鈣0.6-0.8份、甘氨酸 鎂0.6-0.8份、碘化鉀0.2-0.4份、硼酸鉀0.2-0.4份、鉬酸鉀0.2-0.4份、氯化鋅0.2-0.4份、 甘氨酸錳〇. 2-0.4份、甘氨酸銅0.2-0.4份、硫酸亞鐵0.2-0.4份、維生素0.1-0.3份、氨基酸 0 · 1 -0 · 3份、水6000-12000份； 所述葛根培養基，其制備方法包括以下步驟： S1:將西瓜剝皮后用攪碎機將西瓜肉攪碎，所得榨汁過濾，制得西瓜汁備用； S2:茶多酚的制備，包括以下步驟： S21:將團羅茶粉碎后過60-80目篩，與質量分數為40%-60%的乙醇水溶液按質量比為 1:14-18混合，在溫度為32-34°C，微波功率為200-240W下，提取2-3次，每次8-14min，過濾， 合并濾液，濃縮，制得茶多酚粗提取液； S22:將步驟S21制得的茶多酚粗提取液加入至IjKCl溶液中，pH調節至6.8-7.2，在離心轉 速為4000-5000r/min下除去雜質，采用0.2-0.4μπι濾膜在溫度為34-36°C下對離心后的溶液 進行過濾，制得過濾液； S23:將步驟S22制得的過濾液用乙醚提取，冷凍濃縮、干燥后制得茶多酚； S3:將步驟S1制得的西瓜汁、步驟S2制得的茶多酚、氯化鉀、磷酸鈣、碳酸氫銨、甘氨酸 鈣、甘氨酸鎂、碘化鉀、硼酸鉀、鉬酸鉀、氯化鋅、甘氨酸錳、甘氨酸銅、硫酸亞鐵、維生素、氨 基酸、水按比例混合均勻，制得混合液； S4:將步驟S3制得的混合液pH值調節至5.4-6.2，接著在溫度為134-136Γ，壓力為210-230KPa下，滅菌1-1.4min，制得葛根培養基。2. 根據權利要求1所述葛根培養基，其特征在于，所述維生素包括生素 A、維生素 B 1、維 生素 B 2、維生素 D中的一種或多種。3. 根據權利要求1所述葛根培養基，其特征在于，所述氨基酸包括甘氨酸、胱氨酸、脯氨 酸、絲氨酸中的一種或多種。4. 根據權利要求1所述葛根培養基，其特征在于，步驟S1中所述榨汁用3000-6000目篩 子過濾。5. 根據權利要求1所述葛根培養基，其特征在于，步驟S23中所述冷凍濃縮的溫度在-8 °C以下。6. 根據權利要求1所述葛根培養基，其特征在于，步驟S23中所述干燥的溫度為90-102 Γ。7. 根據權利要求1所述葛根培養基，其特征在于，步驟S4中所述滅菌采用的儀器是脈動 真空壓力蒸氣滅菌器。
【文檔編號】C05G3/00GK106045699SQ201610391906
【公開日】2016年10月26日
【申請日】2016年6月6日
【發明人】周澤秀
【申請人】大新縣生產力促進中心