專利名稱：：兩種大環內酯類新化合物及其制備方法
技術領域：
：本發明屬于抗生素領域，具體涉及兩種大環內酯類抗生素及其制備方法。經結構鑒定，這兩種新化合物的結構分別具有全新的結構式，分別命名為新化合物1和新化合物2。
背景技術：
：本發明的化合物具有強的殺螨活性，能殺滅，例如寄生在果樹、蔬菜和花上的四爪螨屬、全爪螨屬和銹螨屬的成螨和卵。它們對于寄生于動物身上的硬蜱科、皮刺螨科和疥螨科也有活性。它們還能殺滅外寄生物，如寄生于動，和鳥，尤其是家畜和家禽身上的狂蠅屬、綠蠅屬、皮蠅屬、胃蠅屬，虱和蚤；家庭昆蟲，如蟑螂和家蠅；以及農業和園藝地里的各種有害昆蟲，如蚜蟲和鱗翅目幼蟲。它們也能有效殺滅土壤中的螻屬。它們也能有效殺滅以下種類的昆蟲鞘翅目，同翅目，異翅目，雙翅目，纓翅目，直翅目，虱目，蚤目，食毛目，纓尾目，等翅目，膜翅目等。本發明的化合物同樣可用以控制其他會損害植物的昆蟲，尤其通過吃植物而使之損害的昆蟲。這些化合物可用以保護觀賞植物和生產性植物，尤其棉花(如殺滅煙芽夜蛾)，以及蔬菜作物(如殺滅馬鈴薯甲蟲和桃蚜)和水稻作物(如殺滅二化螟和稻虱)。
發明內容本發明的目的是提供二種大環內酯類抗生素，它具有新的分子結構，而且對螨蟲和其他損害植物的昆蟲具有很高的抑制活性。本發明的另一個目的是提供二種大環內酯抗生素的制備方法。本發明的技術方案如下-二種大環內酯抗生素，命名分別為新化合物1和新化合物2，它們的分子結構如下<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>新化合物1CH3OH新化合物2CH2CH3OH該抗生素的制備方法，包括下列步驟-1.發酵(1)發酵菌種發酵菌種的分類命名為冰城鏈霉菌(浙e;^琴c"W"gc&"g^平"ov)，于2006年06月12R保藏于"中國生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心"，其保藏登記號為CGMCCNCU734。(2)斜面培養采用高氏一號培養基(可溶性淀粉20g，KNO3lg，K2HPO40.5g，MgSO47H200.5g，FeS04*7H20O.Olg，瓊脂20g,蒸餾水1000ml,pH值7.27.4)于lXl()5pa下滅菌30min，接菌后在2832t:下培養4d;(3)種子培養培養基(葡萄糖510g，可溶性淀粉510g，牛肉膏510g，蛋白胨1018g，氯化鈉58g,蒸餾水1000ml，pH值7.2)，用250ml的三角瓶每瓶分裝100ml，然后用lml無菌水將斜面的冰城鏈霉菌孢子洗下并制成孢子懸浮液，使其濃度為1X106~1X107個/ml。每瓶加lml孢子懸浮液，置于搖床上2832。C培養2436h;(4)發酵采用液體搖瓶發酵,培養基(小米1030g加蒸餾水1000ml煮沸15min后濾去米粒，加入葡萄糖1530g，碳酸鈣215g，氯化鈉512g，蛋白胨515g，pH值7.27.4)于lX105Pa下滅菌30min，分裝于250ml三角瓶，每瓶20100ml。接種量10%(V/V)，搖床轉速150240r/min，2832。C振蕩培養45d。2發酵液處理(1)發酵液經100200目篩網過濾后，用95%甲醇浸提；(2)將得到的浸提物進行溶劑萃取，硅膠柱層析和RP-18大孔樹脂吸附后，得到二種無色的粉末狀化合物。圖1化合物1的質譜圖圖2化合物1的'HNMR圖圖3化合物1的'3CNMR圖圖4化合物1的C90NMR圖圖5化合物1的C135NMR圖圖6化合物1的H-H畫R圖圖7化合物1的C-HNMR圖圖8化合物2的質譜圖圖9化合物2的'H醒R圖圖10化合物2的"CNMR圖圖11化合物2的C90NMR圖圖12化合物2的C135廳R圖圖13化合物2的H-HNMR圖譜圖14化合物2的C-HNMR圖譜具體實施例方式下面結合實施例，對本發明作詳細說明。實施例1:化合物制備1發酵(1)種子培養培養基(葡萄糖8g，可溶性淀粉8g，牛肉膏6g，蛋白胨15g,氯化鈉5g,蒸餾水1000ml，pH值7.2),用250ml的三角瓶每瓶分裝100ml，然后用lml無菌水將斜面的冰城鏈霉菌孢子洗下并制成孢子懸浮液，使其濃度為lXl()SlXl(^個/inl，每瓶加lml孢子懸浮液，置于搖床上30土rC培養24h;(2)發酵采用液體搖瓶發酵，培養基(小米10g加蒸餾水1000ml煮沸15min后濾去米粒，加入葡萄糖15g,碳酸鈣2g，氯化鈉5g，蛋白胨5g，pH值7.2)于1X105Pa下滅菌30min，分裝于250ml三角瓶，每瓶50ml。接種量10%(V/V)，搖床轉速210r/min,30土rC振蕩培養4d。2化合物的分離50L發酵液經200目篩網過濾，并且用水清洗發酵液，發酵液和清洗用的水全都棄掉，用30升甲醇浸提過濾后得到的濾渣，通過減壓蒸餾的方法最后將甲醇溶液濃縮到大約2升，再將濃縮液用相同體積的EtOAc浸提3次，將得到的EtOAc相減壓蒸餾會產生25g油狀物質。將所得油狀物上硅膠柱(粒徑200300目)進行層析，分別用石油醚丙酮=9:1-3:1兩種洗脫液進行洗脫，得到了五個組分，將組分二上RP-18硅膠柱進行層析，用甲醇水=80:20-93:7二種洗脫液進行洗脫，會得到化合物1U8mg)和化合物2(50mg)。3結構鑒定新化合物l物態白色粉末元素分析C72.94%,H8.24%，018.82%;分子量509.2273;分子式C31H4206;新化合物2元素分析C73.43%,H8.22%,O18.35%;分子量523.2273;分子式C32H4306;新化合物1和新化合物2的1HNMR(CDC13,400MHz)and13C-NMR(CDC13,100MHz)的數據見表l。表1新化合物1和新化合物2的1H-and13CNMR數據<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>ByDEPTsequence4抗菌活性測定對植物有致命性的螨類的觸殺作用OP—敏感的棉紅蜘蛛。在試驗開始前16小時，用一片長滿了棉紅蜘蛛的葉片放在菜豆植株上，使菜豆植株感染上紅蜘蛛后，再將葉子移走，在侵染的植株上就會出現有各種齡期和蟲態的紅蜘蛛，于是用含有試驗化合物0.4ppm或1.6w)m的溶液噴霧至有藥液滴下為止。室溫的溫度大約是25攝氏度。七天后，在立體顯微鏡下統計活動期(成蟲和若蟲)和卵的為分率。新化合物1和2在0.4ppm時能使紅蜘蛛全部殺死。權利要求1、兩種大環內酯類新化合物，其特征在于該抗生素具有如下的分子結構R1R2新化合物1CH3OH新化合物2CH2CH3OH2、根據權利要求1所述抗生素的制備方法，其特征在于包括下列步驟(1)發酵菌株發酵菌種的分類命名為冰城鏈霉菌(S/re/7/o附7c^W"gc^"g^印."ov)，于2006年06月12日保藏于"中國生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心"，其保藏登記號為CGMCCNO.1734。(2)斜面培養采用高氏一號培養基(可溶性淀粉20g，KN03lg，K2HPO40.5g，MgS047H200.5g，FeS04'7H20O.Olg,瓊脂20g，蒸餾水1000ml，pH值7.27.4)于lXl()5pa下滅菌30min，接菌后在2832。C下培養4d;(3)種子培養培養基(葡萄糖510g，可溶性淀粉510g，牛肉膏510g，蛋白胨1018g，氯化鈉58g，蒸餾水1000ml,pH值7.2)，用250ml的三角瓶每瓶分裝lOOrnl，然后用1ml無菌水將斜面的冰城鏈霉菌孢子洗下并制成孢子懸浮液，使其濃度為1X1061X107個/ml，每瓶加lml孢子懸浮液，置于搖床上2832。C培養2436h;(4)發酵:采用液體搖瓶發酵，培養基(小米1030g加蒸餾水1000ml煮沸15min后濾去米粒，加入葡萄糖1530g，碳酸鈣215g，氯化鈉512g，蛋白胨515g，pH值7.27.4)于lXl()Spa下滅菌30min，分裝于250ml三角瓶，每瓶20100ml;接種量10%(V/V)，搖床轉速150240r/min，2832。C振蕩培養45d;(5)發酵液處理50L發酵液經200目篩網過濾，并且用水清洗發酵液，發酵液和清洗用的水全都棄掉，用30升甲醇浸提過濾后得到的濾渣，通過減壓蒸餾的方法最后將甲醇溶液濃縮到大約2升，再將濃縮液用相同體積的EtOAc浸提3次，將得到的EtOAc相減壓蒸餾會產生25g油狀物質。將所得油狀物上硅膠柱(粒徑200300目)進行層析，分別用石油醚丙酮=9:1-3:1兩種洗脫液進行洗脫，得到了五個組分，將組分二上RP-18硅膠柱進行層析，用甲醇水=80:20-93:7二種洗脫液進行洗脫，會得到化合物1(18mg)和化合物2(50mg)。得到權利要求1的化合物的純品。3、根據權利要求1所述抗生素用于農業病蟲害防治
技術領域：
的用途。全文摘要本發明公開了兩種大環內酯類新化合物及其制備方法，具有如下圖所示的分子結構，其產生菌分類命名為冰城鏈霉菌(Streptomycesbingchengsissp.nov)。本發明的兩種新化合物的制備方法包括種子培養和液體發酵，發酵液經過濾后大孔吸附樹脂吸附，洗脫，再經硅膠柱層析可得化合物。本發明的新化合物具有強的殺螨活性，同樣可用以控制其他會損害植物的昆蟲。文檔編號C07H17/00GK101096371SQ20061001024公開日2008年1月2日申請日期2006年6月30日優先權日2006年6月30日發明者向文勝,冰姜,王相晶申請人:東北農業大學