專利名稱：光學活性的N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸的制作方法
技術領域：
本發明涉及光學活性的N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸及其制備方法，還涉及用于制備代謝改善解毒藥物的用途及藥物制劑。
背景技術：
N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸，通用名為硫普羅寧，臨床用于治療急慢性肝炎、肝硬化等，具有很好的治療肝臟疾病的用途，且制備方法及藥物制劑已多有公開。中國專利申請CN02129300.7公開了硫普羅寧藥物制劑，中國藥物化學雜志1997年3月第七卷第一期55-56頁公開了硫普羅寧的合成工藝。但對于N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸的光學活性即其左、右旋體未有任何報導。大多數藥物單一對映體療效高，不良反應小，這稱為優對映體；而無活性或活性低的對映體稱為劣對映體，在很多情況下，劣對映體不僅沒有療效，而且還可能部分抵消對映體的作用，甚至產生嚴重的不良反應。對映體藥物在體內的藥理活性、代謝過程有顯著差距，表現出不同的生物活性和藥效。在臨床應用中由于沒有認識到手性藥物各對映體藥效學和藥動學行為的不同，因此得出的結論與療效或不良反應的發生有時不一致，甚至會錯誤的指導臨床用藥。因此對藥物光學活性的研究是非常必要的。
發明內容
本發明的目的在于提供光學活性的N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸。
本發明的另一目的還在于提供制備光學活性的N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸的方法。
本發明的又一目的還在于提供光學活性的N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸在制備代謝改善解毒藥物的用途。
本發明的再一目的還在于提供含光學活性的N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸化合物的藥物制劑。
本發明提供一種光學活性的N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸，它是左旋N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸或右旋N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸， 其中 左旋N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸為R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸
R-構型，或其藥學上可接受的鹽或酯，其中鹽可以為氨基酸鹽或金屬鹽。
其中氨基酸鹽的結構通式為
，其中R可以為氨基酸，其中氨基酸可以為精氨酸、賴氨酸、甘氨酸、門冬氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、鳥氨酸、胱氨酸、半胱氨酸、酪氨酸、纈氨酸、絲氨酸、組氨酸、蘇氨酸、色氨酸、蛋氨酸、甲硫氨酸、脯氨酸、谷氨酸、羥脯氨酸等； 其中金屬鹽的結構通式為
，其中R0可以鉀、鈉等。其中酯的結構通式為
，其中R1為C1-C5直鏈烷基。
右旋N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸為S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸
S-構型，或其藥學上可接受的鹽或酯，其中鹽可以為氨基酸鹽或金屬鹽。
其中氨基酸鹽的結構通式為
其中R可以為氨基酸，其中氨基酸可以為精氨酸、賴氨酸、甘氨酸、門冬氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、鳥氨酸、胱氨酸、半胱氨酸、酪氨酸、纈氨酸、絲氨酸、組氨酸、蘇氨酸、色氨酸、蛋氨酸、甲硫氨酸、脯氨酸、谷氨酸、羥脯氨酸等； 其中金屬鹽的結構通式為
，其中R0可以鉀、鈉等。
其中酯的結構通式為
，其中R1為C1-C5直鏈烷基。
本發明還提供了光學活性的N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸的制備方法如下 一、R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸的制備方法 1.將R-(+)-2-氯丙酸與氯化亞砜反應得R-(+)-2-氯丙酰氯， 2.將R-(+)-2-氯丙酰氯與甘氨酸在弱堿性條件下反應得R-(+)-2-氯代丙酰甘氨酸， 3.將硫化鈉與升化硫反應得二硫化鈉，再將R-(+)-2-氯代丙酰甘氨酸與二硫化鈉反應經酸化得R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸； 所得R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸再與酸、堿或醇反應得鹽或酯。
二、S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸的制備方法，如下 1.將S-(-)-2-氯丙酸與氯化亞砜反應得S-(-)-2-氯丙酰氯。
2.將S-(-)-2-氯丙酰氯與甘氨酸在弱堿性條件下反應得S-(-)-2-氯代丙酰甘氨酸。
3.將硫化鈉與升化硫反應得二硫化鈉，再將S-(-)-2-氯代丙酰甘氨酸與二硫化鈉反應經酸化得S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸。
所得S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸再與酸、堿或醇反應得鹽或酯。
本發明還提供了將光學活性的N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸即R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸或S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸或其藥學上可接受的鹽或酯用于制備代謝改善解毒藥物的用途，特別是用于治療急慢性肝病和改善肝功能，包括對肝臟組織細胞的保護作用，治療各種肝炎如急慢性肝炎、病毒性肝炎、酒精性肝炎、藥物性肝炎、重金屬中毒性肝炎等，還可治療脂肪肝、急慢性肝損傷、肝硬化；還用于防治放化療所致外周白細胞減少并加速肝細胞的恢復，降低化療的不良反應；防治老年性早期白內障及玻璃體混濁；及重金屬解毒的用途。
經藥效學試驗得，R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸和S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸對肝損傷均有較好的保護作用，且作用均強于N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸。
經藥物代謝動力學試驗得，R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸和S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸在體內沒有發生相互轉化。具體試驗為受藥動物體內藥代動力學試驗，包括用高效液相-質譜聯用法測定血漿中藥物。
血漿樣本的處理方法，包括血漿酸化，再提取，然后進行衍生化反應，即可配制進樣溶液，具體如下 1.血漿酸化，其中用于酸化的酸可以為鹽酸、磷酸、高氯酸、醋酸等，優選鹽酸，更優選1mol/L鹽酸；其中酸的量血漿樣本的量為(150μl-250μl)(2ml-4ml)，優選為200μl3ml； 2.對已酸化的血漿提取，其中用于提取的有機溶劑可以為乙酸乙酯、氯仿、三氯甲烷、乙醚、正已烷等，優選乙酸乙酯； 3.對提取物進行衍生化反應，其中所用衍生化試劑可以為異硫氰酸苯酯、2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡糖異硫氰酸酯(GITC)溶液等，優選GITC溶液，更優選2mg/mlGITC溶液，最優選2mg/mlGITC的四氫呋喃溶液；其中衍生化溫度為15-45℃，優選25-35℃，更優選30℃；其中衍生化時間為10-30min，優選15-25min，更優選20min； 色譜條件 流動相A甲醇。流動相B水溶液，含0.05-0.20mmol/L氯化鈉和5.0-6.0mmol/L甲酸，優選含0.10mmol/L氯化鈉和5.3mmol/L甲酸。其中A∶B為(40-50∶50-60，優選為44∶56)。
質譜條件 離子化方式電噴霧離子化；選擇性離子監測；曲型脫溶劑裝置(CDL)；溫度200℃-300℃，優選250℃；加熱塊溫度150℃-250℃，優選200℃；CDL電壓20V-30V，優選25V；檢測電壓+1.2kV～+1.8kV，優選+1.50kV；霧化氣流速1.2L/min-1.8L/min，優選1.5L/min；干燥氣流速1.5L/min-2.5L/min，優選2.0L/min；檢測離子為試驗藥物衍生物[M+Na]+(m/z)575.20，內標N-異丁酰基-D-半胱氨酸(NIDC)衍生物[M+Na]+(m/z)603.05； 內標物為NIDC，內標峰與主峰分離度符合中華人民共合國藥典要求即可。
結果顯示，在單獨給予R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸的各時間點的譜圖中，未明顯檢測到S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸存在；同樣，給予S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸后也沒有檢測到R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸的存在，這說明兩者在動物體內沒有發生相互轉化。
由此，將R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸或S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸制為適于臨床使用的藥物制劑具有實用性。
本發明將光學活性的N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸制成適于臨床使用的藥物制劑，該制劑以R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸或S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸或它們的藥學上可接受的鹽或酯為活性成分，同時還含有藥學上可接受的輔料，所說的制劑是口服給藥劑或注射給藥制劑。
所說的口服給藥制劑如一般口服制劑如片劑、膠囊劑、顆粒劑、咀嚼片、泡騰片等，速釋制劑如分散片、口腔崩解片等，緩釋制劑如緩釋片劑、緩釋微丸等；及注射給藥制劑如注射液、注射用濃溶液、注射用無菌粉末等。
所說的口服藥物制劑中，輔料為填充劑、粘合劑、崩解劑，填充劑與崩解劑的重量組成分別為10-60％、2-30％；此外還可含有助流劑、潤滑劑、表面活性劑，三者的重量含量分別為0.1-5％、0.1-5％、0.005-1％。其中所述的填充劑可以為淀粉、預膠化淀粉、羧甲基淀粉、微晶纖維素、乳糖、糊精、蔗糖、葡萄糖、甘露醇、山梨醇、硫酸鈣二水物、磷酸二鈣、磷酸三鈣、碳酸鈣。粘合劑可以為玉米淀粉、預凝膠玉米淀粉、預凝膠淀粉、明膠、蔗糖、阿拉伯膠、聚維酮、各種粘度的甲基纖維素、低粘度的羧甲基纖維素鈉、各種粘度的乙基纖維素、各種粘度的聚乙烯醇、聚乙二醇6000、羥丙基甲基纖維素的水或醇的溶液。崩解劑為淀粉、預膠化淀粉、低取代羥丙基纖維素、微晶纖維素、純木質纖維素、海藻酸、羧甲基淀粉鈉、交聯羧甲基纖維素鈉、瓜耳樹膠、交聯聚乙烯吡咯烷酮、離子交換樹脂、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、以及有機酸(如檸檬酸、酒石酸)和碳酸鹽(如碳酸鈉、碳酸氫鈉)組成的泡騰崩解劑。潤滑劑可以為硬脂酸、硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、硬脂酸鋅、滑石粉、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000、聚乙二醇8000、硫酸月桂酯鎂、苯甲酸鈉、醋酸鈉、氯化鈉、油酸鈉、硼酸、亮氨酸、己二酸、富馬酸、三醋酸甘油酯、聚氧乙烯單硬脂酸酯、單月桂蔗糖酸酯、月桂醇硫酸鎂、月桂醇硫酸鈉。助流劑可以為氣相微粉硅膠、合成微粉硅膠、氧化鎂。表面活性劑為十二烷基硫酸鈉、泊洛沙姆、吐溫類、司盤類、溴化十六烷三甲胺、月桂醇硫酸鈉、硬脂酸磺酸鈉、聚氧乙烯蓖麻油、聚氧乙烯單硬脂酸酯。處方中還可以加入矯味劑，矯味劑為甜菊甙、果糖、蔗糖、葡萄糖、阿斯巴甜、蛋白糖、木糖醇、甘露醇、山梨醇、乳糖、麥牙糖醇、甘草甜素、環己氨基磺酸鈉、香蕉香精、橘子香精、菠蘿香精、薄荷香精、茵香、香蘭素、檸檬香精、櫻桃香精、玫瑰香精。處方中還可包括潤濕劑，即水或者不同濃度的乙醇溶液。本發明的藥物制劑所用的包衣材料可以為纖維素及其衍生物類、丙烯酸樹脂類、乙烯聚合物等。
所說的注射給藥制劑包括注射液、注射用濃溶液以及注射用無菌粉末，輔料為符合注射劑要求的附加劑，所述的附加劑為pH調節劑、等滲等張調節劑、抗氧劑、螯合劑，注射用無菌粉末制劑中還可加入賦形劑。pH調節劑為鹽酸、乳酸、甲磺酸、氫氧化鈉、碳酸氫鈉、磷酸及其鹽、醋酸及其鹽、枸櫞酸及其鹽、氨基酸及其鹽；等滲等張調節劑包括葡萄糖、氯化鈉、甘油、硫酸鈉；賦形劑包括山梨醇、甘露醇、右旋糖酐、乳糖、蔗糖、葡萄糖、水解明膠、氯化鈉；抗氧劑包括焦亞硫酸鈉或鉀鹽0.01％-0.1％、亞硫酸鈉0.01-0.5％、亞硫酸氫鈉0.01％-0.5％、硫代硫酸鈉0.01％-0.5％、甲醛合次硫酸氫鈉0.1-0.2％、硫脲0.05％-0.1％、抗壞血酸0.05％-0.2％、硫代甘油0.1％-0.5％、谷胱甘肽0.01-0.2％、丙氨酸0.01％-0.5％、半胱氨酸0.01％-0.5％、沒食子酸及其丙酯或者辛酯0.01-0.1％、叔丁基對羥基茴香醚0.01-0.1％、二叔丁對甲酚0.01％-0.5％、生育酚α、β、γ 0.01％-0.1％、去甲二氫愈創木酸0.01％-0.5％或抗抗壞血酸棕櫚酯0.01％-0.5％；螯合劑為乙二胺四乙酸二鈉鹽、乙二胺四乙酸鈣鈉鹽。
本發明提供的化合物可用于制備代謝改善解毒藥物。
本發明還提供一種高效液相色譜測定光學活性的N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸光學純度的方法，具體步驟如下 1)色譜條件色譜柱采用3，5-二甲基苯基-氨基甲酸糖肽為固定相的手性柱；流動相為正己烷-乙醇-冰醋酸(80～95∶5～20∶0.01～1.0)，優選(90∶10∶0.1)；檢測波長為200nm～230nm，優選210nm；流動相流速為0.2～3.0ml/min，優選1.0ml/min； 2)樣品溶液的配置采用有機溶劑將樣品配制成為含R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸或S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸0.1～20mg/ml(優選1mg/ml)溶液；所述有機溶劑選自正丙醇、異丙醇、乙醇、正丁醇和甲醇，優選乙醇； 3)測定將溶液注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖并進行分析。
具體實施例方式 實施例1R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸的制備 1)將R-(+)-2-氯丙酸54.3g(0.5mol)，氯化亞砜60g(0.504mol)，加至干燥的100ml反應瓶，隔絕潮氣情況下攪拌回流4h。反應結束，先蒸出過量的氯化亞砜套用，再收集bp 95～105℃的餾分得無色液體R-(+)-2-氯丙酰氯55g，86.6％。
2)將甘氨酸29.9g(0.40mol)，無水碳酸鈉21.2g(0.20mol)及250ml水加至1000ml反應瓶，攪拌溶解。用冰鹽浴冷卻，劇烈攪拌下滴加R-(+)-2-氯丙酰氯50.6g(0.40mol)，同時加入無水碳酸鈉的飽和溶液，使反應液呈弱堿性。加完后繼續攪拌反應3-5h，反應結束。濃鹽酸酸化至pH＝1，乙酸乙酯提取，無水硫酸鎂干燥。過濾，濾液減壓濃縮至有晶體析出，放置。過濾，干燥得白色小針狀晶體R-(+)-2-氯代丙酰甘氨酸38.6g。mp120-124℃，
3)250ml燒杯中加入硫化鈉(Na2S·9H20)26.5g(0.11mol)，升化硫3.52g(0.11mol)及水120ml，加熱攪拌至溶解，得棕紅色二硫化鈉溶液備用。將R-(+)-2-氯代丙酰甘氨酸16.4g(0.10mol)，無水碳酸鈉5.6g加至250ml反應瓶中，緩慢加入100ml水，以免氣泡溢出。冷卻至0-10℃滴加上述二硫化鈉溶液，滴加完畢后于5-15℃反應10-15小時。反應結束，降至0℃左右，滴加濃硫酸，使pH接近于1。過濾，濾液在攪拌下分批加入鋅粉17g，常溫反應3小時，反應結束。過濾，濾液用乙酸乙酯提取，飽和氯化鈉溶液洗滌，無水硫酸鎂干燥。過濾，減壓濃縮，放置析出固體。濾集固體，再用乙酸乙酯重結晶，真空干燥得白色結晶固體R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸，8.4g。mp102-104℃，
含量99.3％(碘滴定液0.1mol/L滴定)，有關物質＜2％(薄層色譜法硅膠G薄層板，氯仿-丙酮-冰醋酸(9∶3∶1)，碘蒸氣顯色)。
1HNMR(DMSO-D6)δppm1.35(d，3H)；2.79(d，1H)；3.54(m，1H)；3.77(m，2H)；8.25(t，1H)；12.5(bs，1H)；MS(m/z)163；元素分析C5H9NO3S(％)C 36.65，H 5.66，N 8.50，S 19.68。
實施例2S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸的制備 1)將S-(-)-2-氯丙酸54.3g(0.5mol)，氯化亞砜60g(0.504mol)，加至干燥的100ml反應瓶，隔絕潮氣情況下攪拌回流4h。反應結束，先蒸出過量的氯化亞砜套用，再收集bp 95～105℃的餾分得無色液體S-(-)-2-氯丙酰氯56g，88.2％。
2)將甘氨酸29.9g(0.40mol)，無水碳酸鈉21.2g(0.20mol)及250ml水加至1000ml反應瓶，攪拌溶解。用冰鹽浴冷卻，劇烈攪拌下滴加S-(-)-2-氯丙酰氯50.6g(0.40mol)同時加入無水碳酸鈉飽和水溶液，使反應液呈弱堿性。加完后繼續攪拌反應3-5h，反應結束。濃鹽酸酸化至pH＝1，乙酸乙酯提取，無水硫酸鎂干燥。過濾，濾液減壓濃縮至有晶體析出，放置。過濾，干燥得白色小針狀晶體S-(-)-2-氯代丙酰甘氨酸37.8g，mp120-124℃，
3)250ml燒杯中加入硫化鈉(Na2S·9H2O)26.5g(0.11mol)，升化硫3.52g(0.11mol)及水120ml，加熱攪拌至溶解，得棕紅色二硫化鈉溶液備用。將S-(-)-2-氯代丙酰甘氨酸16.4g(0.10mol)，無水碳酸鈉5.6g加至250ml反應瓶中，緩慢加入100ml水，以免氣泡溢出。冷卻至0-10℃滴加上述二硫化鈉溶液，滴加完畢后于5-15℃反應10-15小時。反應結束，降至0℃左右，滴加濃硫酸，使pH接近于1。過濾，濾液在攪拌下分批加入鋅粉17g，常溫反應3小時，反應結束。過濾，濾液用乙酸乙酯提取，飽和氯化鈉溶液洗滌，無水硫酸鎂干燥。過濾，減壓濃縮，放置析出固體。濾集固體，再用乙酸乙酯重結晶，真空干燥得白色結晶固體S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸，8.2g。mp102-104℃，
含量99.1％(碘滴定液0.1mol/L滴定)，有關物質＜2％(薄層色譜法硅膠G薄層板，氯仿-丙酮-冰醋酸(9∶3∶1)，碘蒸氣顯色)。
1HNMR(DMSO-D6)δppm1.40(d，3H)；2.80(d，1H)；3.60(m，1H)；3.81(m，2H)；8.28(t，1H)；12.8(bs，1H)；MS(m/z)163；元素分析C5H9NO3S(％)C 36.68，H 5.65，N 8.53，S 19.65 實施例3S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸的制備 1)將S-(-)-2-氯丙酸54.3g(0.5mol)，氯化亞砜60g(0.504mol)，加至干燥的100ml反應瓶，隔絕潮氣情況下攪拌回流4h。反應結束，先蒸出過量的氯化亞砜套用，再收集bp 95～105℃的餾分得無色液體S-(-)-2-氯丙酰氯54.6g。
2)將甘氨酸29.9g(0.40mol)，無水碳酸鈉21.2g(0.20mol)及250ml水加至1000ml反應瓶，攪拌溶解。用冰鹽浴冷卻，劇烈攪拌下滴加S-(-)-2-氯丙酰氯50.6g(0.40mol)同時加入無水碳酸鈉的飽和溶液，使反應液呈弱堿性。加完后繼續攪拌反應3-5h，反應結束。濃鹽酸酸化至pH＝1，乙酸乙酯提取，無水硫酸鎂干燥。過濾，濾液減壓濃縮至有晶體析出，放置。過濾，干燥得白色小針狀晶體S-(-)-2-氯代丙酰甘氨酸38g。
3)250ml燒杯中加入硫化鈉(Na2S·9H2O)28.8g(0.12mol)，升化硫3.84g(0.12mol)及乙醇150ml，加熱攪拌至溶解，得棕紅色二硫化鈉溶液備用。將S-(-)-2-氯代丙酰甘氨酸18.3g(0.11mol)，無水碳酸鈉6.3g加至250ml反應瓶中，緩慢加入100ml水，以免氣泡溢出。冷卻至0-10℃滴加上述二硫化鈉溶液，滴加完畢后于0-10℃反應12小時。反應結束，同溫下滴加濃硫酸，使pH＝1。過濾，濾液在攪拌下分批加入鋅粉17g，常溫反應3小時，反應結束。過濾，濾液用乙酸乙酯提取，飽和氯化鈉溶液洗滌，無水硫酸鎂干燥。過濾，減壓濃縮，放置析出固體。濾集固體，再用乙酸乙酯重結晶，真空干燥得白色結晶固體S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸8.1g，含量99.3％(碘滴定液0.1mol/L滴定)，有關物質＜2％(薄層色譜法硅膠G薄層板，氯仿-丙酮-冰醋酸(9∶3∶1)，碘蒸氣顯色)。
實施例4R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸光學純度測定 儀器高效液相色譜儀，SPD-10Avp紫外檢測器，LC-10AD泵 流動相正己烷-乙醇-冰醋酸(90∶10∶0.1) 流速1.0ml/min 色譜柱CHIRALPAK AD-H(采用3，5-二甲基苯基-氨基甲酸糖肽為固定相) 柱溫25℃ 檢測波長210nm 樣品濃度0.5mg/ml 以上條件測得實施例1所得R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸的光學純度為99.3％。
實施例5S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸光學純度的測定 儀器高效液相色譜儀，SPD-10Avp紫外檢測器，LC-10AD泵 流動相正己烷-乙醇-冰醋酸(90∶10∶0.1) 流速1.0ml/min 色譜柱CHIRALPAK AD-H(采用3，5-二甲基苯基-氨基甲酸糖肽為固定相) 柱溫25℃ 檢測波長210nm 樣品濃度0.5mg/ml 以上條件測得實施例2所得S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸的光學純度為99.2％。
實施例6R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸精氨酸鹽的制備 將按實施例1所得R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸10g、L-精氨酸11.2g、95％甲醇60ml投入反應瓶，攪拌，加熱至回流，反應3小時。反應結束，趁熱過濾，濾液冷至室溫后放置冰箱中冷卻析晶。濾集，干燥即得白色結晶固體19.2g，收率92.8％。
實施例7S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸賴氨酸鹽的制備 將按實施例2所得S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸10g、L-賴氨酸9.4g、95％甲醇60ml投入反應瓶，攪拌，加熱至回流，反應3小時。反應結束，趁熱過濾，濾液冷至室溫后放置冰箱中冷卻析晶。濾集，干燥即得白色結晶固體16.8g，收率88.6％。
實施例8R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸鈉的制備 1)將R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸16.3g(0.10mol)、45ml甲醇置于反應瓶中，15℃加入二硫叔糖醇0.15g，攪拌15分鐘，并加入分子篩5g。
2)將NaOH 4.65g，分6次緩慢加至上述甲醇溶液中。
3)加完，與15℃攪拌反應1小時。然后，再與20-25℃攪拌反應1小時。反應結束，過濾，濾除分子篩，將濾液加至130mL丙酮中，充分振搖，使混合均勻。
4)待反應液中出現大量白色沉淀，抽濾，濾餅于80℃干燥，得無水R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸鈉12.8g。
實施例9S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸鈉的制備 1)將S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸16.3g(0.10mol)、45ml甲醇置于反應瓶中，15℃加入二硫叔糖醇0.15g，攪拌15分鐘，并加入分子篩5g。
2)將NaOH 4.65g，分6次緩慢加至上述甲醇溶液中。
3)加完，與15℃攪拌反應1小時。然后，再與20-25℃2攪拌反應1小時。反應結束，過濾，濾除分子篩，將濾液加至130mL丙酮中，充分振搖，使混合均勻。
4)待反應液中出現大量白色沉淀，抽濾，濾餅于80℃干燥，得無水S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸鈉13.1g。
實施例10R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸片劑的的制備 處方組成為 R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸 100g 微晶纖維素 170g 預膠化淀粉 60g 8％淀粉漿 適量 羧甲基淀粉鈉7g 硬脂酸鎂3g 制備工藝以制備1000片R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸片為例。將原輔料分別粉碎過100目篩，備用；稱取處方量的R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸、微晶纖維素、預膠化淀粉混合均勻后用8％的淀粉漿制軟材，20目篩制粒，干燥，干顆粒用18篩整粒；加入處方量的羧甲基淀粉鈉和硬脂酸鎂，混合均勻，壓片即得。片重約為345mg。
實施例11R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸薄膜衣片的制備 取實施例10所得素片，再配制8％胃溶型歐巴代(OY-C-7000A) 醇溶液；置高效包衣鍋中進行包衣，包衣粉用量為素片重量的2.0-3.0％。
實施例12R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸腸溶片的制備 取實施例10所得素片，再配制8％腸溶型歐巴代乙醇溶液；置高效包衣鍋中進行包衣，包衣粉用量為素片重量的4.0-5.0％。
實施例13R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸緩釋片的制備 處方組成 R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸150g 羥丙甲纖維素(K15M) 150g 乳糖 50g 3％聚維酮80％乙醇溶液適量 硬脂酸鎂 5g 制備工藝以制備1000片R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸緩釋片為例。原輔料分別粉碎過100目篩，備用；取處方量的R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸、羥丙甲纖維素、乳糖混合均勻后用3％聚維酮80％乙醇溶液制軟材，20目篩制粒，干燥，干顆粒用18篩整粒；加入處方量的硬脂酸鎂，混合均勻，壓片即得。片重約為360mg。
實施例14R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸分散片的制備 處方組成 R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸 100g 交聯聚乙烯吡咯烷酮 15g 微晶纖維素 180g 甘露醇50g 60％乙醇溶液 適量 十二烷基硫酸鈉0.2g 微粉硅膠 5g 硬脂酸鎂 3g 甜菊甙5g 制備工藝以制成1000片R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸分散片為例。原輔料分別粉碎過100目篩，備用；稱取處方量的R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸、微晶纖維素、甘露醇混合均勻，用60％乙醇溶液制軟材，制粒，干燥后整粒；加入處方量的交聯聚乙烯吡咯烷酮、十二烷基硫酸鈉、微粉硅膠、硬脂酸鎂、甜菊甙混合均勻，壓片即得。片重約為360mg。
實施例15R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸膠囊的制備 處方組成 R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸150g 淀粉 45g 5％聚維酮60％乙醇溶液適量 硬脂酸鎂 2g 制備工藝以制成1000粒R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸膠囊為例。原輔料分別粉碎過100目篩，備用；稱取處方量的R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸、淀粉混合均勻，用5％聚維酮60％乙醇溶液制軟材，制粒，烘干、整粒；加入處方量的硬脂酸鎂混合均勻，充填膠囊，即得。
實施例16R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸顆粒劑的制備 處方組成 R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸 100g 甘露醇 350g 蔗糖 350g 羧甲基纖維素鈉 50g 阿斯巴甜 10g 麥芽糖糊精 140g 5％聚維酮80％乙醇溶液適量 香精 1g 制備工藝以制備1000袋R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸顆粒為例。將原輔料分別粉碎過100目篩，備用；將香精加入到5％聚維酮80％乙醇溶液中，稱取處方量的R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸、蔗糖、甘露醇、羧甲基纖維素鈉、阿斯巴甜、麥芽糖糊精用5％聚維酮80％乙醇溶液制軟材，16目篩制粒，干燥，14目篩整粒；用60目篩，篩去細粉后分裝，即得。每袋約1g。
實施例17R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸注射液的制備 處方組成 R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸 100g 注射用水加至 2000ml 制備工藝以制成1000支R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸注射液為例。將處方量的R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸加入到1600ml注射用水中，攪拌使溶解完全；補加注射用水至全量2000ml，攪拌均勻；加入0.1％的針用活性炭，攪拌均勻，藥液經鈦棒脫炭后，再依次經過0.45μm和0.22μm的微孔濾膜精濾至澄明度符合要求；檢測中間體，合格后藥液在氮氣流下灌封于2ml安瓿瓶中，每支裝量約2ml，滅菌即得。
實施例18R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸注射劑的制備 處方組成 R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸 100g 右旋糖酐40 50g 亞硫酸氫鈉 1g 乙二胺四乙酸二鈉0.2g 制備工藝以制成1000瓶注射用R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸為例。將處方量的R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸、右旋糖酐40、亞硫酸氫鈉和乙二胺四乙酸二鈉加入到1600ml注射用水中，攪拌使溶解完全；用1mol/L的鹽酸調節溶液pH值至1.5-2.5，補加注射用水至全量2000ml，攪拌均勻；加入0.1％的針用活性炭，攪拌均勻，藥液經鈦棒脫炭后，再在無菌條件下將藥液次經過0.45μm和0.22μm的微孔濾膜進行除菌過濾；檢測中間體pH值、含量和澄明度，合格后藥液灌裝于西林瓶中，每瓶裝量約2ml，半壓塞，冷凍干燥，壓塞軋蓋，燈檢，即得。
實施例19S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸片劑的制備 處方組成 S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸 100g 微晶纖維素 170g 預膠化淀粉 60g 8％淀粉漿 適量 羧甲基淀粉鈉 7g 硬脂酸鎂 3g 制備工藝以制備1000片S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸片為例。將原輔料分別粉碎過100目篩，備用；稱取處方量的S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸、微晶纖維素、預膠化淀粉混合均勻后用8％的淀粉漿制軟材，20目篩制粒，干燥，干顆粒用18篩整粒；加入處方量的羧甲基淀粉鈉和硬脂酸鎂，混合均勻，壓片即得。片重約為345mg。
實施例20S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸薄膜衣片的制備 取實施例19所得素片，再配制8％胃溶型歐巴代(OY-C-7000A)乙醇溶液；置高效包衣鍋中進行包衣，包衣粉用量為素片重量的2.0-3.0％。
實施例21S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸腸溶片的制備 取實施例19所得素片，再配制8％腸溶型歐巴代乙醇溶液；置高效包衣鍋中進行包衣，包衣粉用量為素片重量的4.0-5.0％。
實施例22S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸緩釋片的制備 處方組成 S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸150g 羥丙甲纖維素(K15M) 150g 乳糖 50g 3％聚維酮80％乙醇溶液適量 硬脂酸鎂 5g 制備工藝以制備1000片S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸緩釋片為例。原輔料分別粉碎過100目篩，備用；取處方量的S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸、羥丙甲纖維素、乳糖混合均勻后用3％聚維酮80％乙醇溶液制軟材，20目篩制粒，干燥，干顆粒用18篩整粒；加入處方量的硬脂酸鎂，混合均勻，壓片即得。片重約為360mg。
實施例23S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸分散片的制備 處方組成 S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸 100g 交聯聚乙烯吡咯烷酮15g 微晶纖維素180g 甘露醇50g 60％乙醇溶液 適量 十二烷基硫酸鈉0.2g 微粉硅膠 5g 硬脂酸鎂 3g 甜菊甙5g 制備工藝以制成1000片S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸分散片為例。原輔料分別粉碎過100目篩，備用；稱取處方量的S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸、微晶纖維素、甘露醇混合均勻，用60％乙醇溶液制軟材，制粒，干燥后整粒；加入處方量的交聯聚乙烯吡咯烷酮、十二烷基硫酸鈉、微粉硅膠、硬脂酸鎂、甜菊甙混合均勻，壓片即得。片重約為360mg。
實施例24S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸膠囊的制備 處方組成 S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸150g 淀粉 45g 5％聚維酮60％乙醇溶液適量 硬脂酸鎂 2g 制備工藝以制成1000粒S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸膠囊為例。原輔料分別粉碎過100目篩，備用；稱取處方量的S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸、淀粉混合均勻，用5％聚維酮60％乙醇溶液制軟材，制粒，烘干、整粒；加入處方量的硬脂酸鎂混合均勻，充填膠囊，即得。
實施例25S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸顆粒劑的制備 處方組成 S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸 100g 甘露醇 350g 蔗糖 350g 羧甲基纖維素鈉 50g 阿斯巴甜 10g 麥芽糖糊精 140g 5％聚維酮80％乙醇溶液 適量 香精 1g 制備工藝以制備1000袋S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸顆粒為例。將原輔料分別粉碎過100目篩，備用；將香精加入到5％聚維酮80％乙醇溶液中，稱取處方量的S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸、甘露醇、蔗糖、羧甲基纖維素鈉、阿斯巴甜、麥芽糖糊精用5％聚維酮80％乙醇溶液制軟材，16目篩制粒，干燥，14目篩整粒；用60目篩，篩去細粉后分裝，即得。每袋約1g。
實施例26S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸注射液的制備 處方組成 S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸 100g 焦亞硫酸鈉 1g 乙二胺四乙酸二鈉 0.2g 注射用水加至 2000ml 制備工藝以制成1000支S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸注射液為例。將處方量的S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸、焦亞硫酸鈉和乙二胺四乙酸二鈉加入到1600ml注射用水中，攪拌使溶解完全；補加注射用水至全量2000ml，攪拌均勻；加入0.1％的針用活性炭，攪拌均勻，藥液經鈦棒脫炭后，再依次經過0.45μm和0.22μm的微孔濾膜精濾至澄明度符合要求；檢測中間體，合格后藥液在氮氣流下灌封于2ml安瓿瓶中，每支裝量約2ml，滅菌即得。
實施例27注射用S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸的制備 處方組成 S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸 100g 右旋糖酐40 50g 制備工藝以制成1000瓶注射用S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸為例。將處方量的S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸、右旋糖酐40加入到1600ml注射用水中，攪拌使溶解完全；用1mol/L鹽酸或1mol/L氫氧化鈉溶液調節溶液pH值至1.5-2.5，補加注射用水至全量2000ml，攪拌均勻；加入0.1％的針用活性炭，攪拌均勻，藥液經鈦棒脫炭后，再在無菌條件下將藥液次經過0.45μm和0.22μm的微孔濾膜進行除菌過濾；檢測中間體pH值、含量和澄明度，合格后藥液灌裝于西林瓶中，每瓶裝量約2ml，半壓塞，冷凍干燥，壓塞軋蓋，燈檢，即得。
實施例28靜脈注射光學活性的N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸對撲熱息痛所致小鼠肝損傷血清生化指標及肝臟指標的影響。
將動物按體重隨機分為5組，每組10只，分別為溶劑對照組、模型組(撲熱息痛400mg/kg，10ml/kg，腹腔注射)、硫普羅寧組(MPG)、R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸組、S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸組。禁食12小時后，除溶劑對照組和模型組靜脈注射生理鹽水外，其它各試驗組均分別靜脈注射藥物后，立即腹腔注射400/mg/kg撲熱息痛，造成肝細胞急性損傷，造模后6小時給食，然后禁食16小時，于造模后24h，摘眼球采血，離心，取血清。按照試劑盒方法測定ALT、AST。制備10％肝勻漿，測定肝GSH。同時取肝臟和脾臟稱重，計算臟器系數，結果見表1、2。
表1.靜脈注射MPG及其光學對映體對撲熱息痛所致小鼠肝損傷血清生化指標的影響 *P＜0.05，**P＜0.01與模型組比較 由表1可知，與溶劑對照組比較，模型組小鼠的肝臟系數明顯增加，給藥組均能明顯抑制血清ALT的升高，其中R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸組作用強于S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸組。雖然硫普羅寧組ALT值比R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸組低，但在試驗過程中，造模后硫普羅寧組小鼠死亡4只，模型組小鼠死亡兩只，R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸組未有小鼠死亡，因此R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸組對撲熱息痛所致小鼠肝損傷的保護優于硫普羅寧組。
表2.靜脈注射MPG及其光學對映體對撲熱息痛所致小鼠肝損傷肝臟指標的影響 *P＜0.05，**P＜0.01與模型組比較 由表2可知，與模型組比較，各給藥組均明顯增加肝總蛋白含量，R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸組明顯增加肝臟GSH含量和降低MDA含量，但S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸組和硫普羅寧組無此作用。結果表明R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸具有較強的肝損傷保護作用。
實施例29N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸及其光學對映體對四氯化碳所致大鼠肝損傷的保護作用。
將動物按體重隨機分為5組，每組10只，分別為溶劑對照組、模型組(50％CCl4，2ml/kg，腹腔注射)、硫普羅寧組(MPG)、R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸組、S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸組。除溶劑對照組腹腔注射橄欖油外，其它各試驗組均分別先灌胃(ig)給藥4天，每天一次，于第5天腹腔注射1次CCl4，造成肝細胞急性損傷，造模前30min用藥物進行治療(除模型對照組)，造模后2小時再給藥1次。然后禁食16小時，于注射CCl4后24小時眼球后靜脈叢采血，離心，取血清，按照試劑盒方法測定ALT、AST、白蛋白。結果見表3、4。取肝臟左葉，制備10％肝勻漿，測定GSH和MDA含量，結果見表5。
表3.MPG及光學對映體對CCl4所致大鼠肝損傷ALT、AST的影響 *P＜0.05，**P＜0.01與模型組比較 由表3可知，三種藥物均能明顯下降ALT、AST水平，其中S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸組和R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸組均強于硫普羅寧組。
表4.MPG及光學對映體對CCl4所致大鼠肝損傷血清蛋白含量的影響 **P＜0.01與模型組比較 由表4可知，與模型組比較，R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸組可明顯增加血清總蛋白、白蛋白和球蛋白含量，降低A/G比值；S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸組也可降低A/G比值；但硫普羅寧組對上述指標無明顯影響，與模型組結果一致。
權利要求
1.光學活性的N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸，其特征是左旋N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸；或右旋N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸；
其中
左旋N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸為R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸
R-構型，或其藥學上可接受的鹽或酯；
右旋N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸為S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸
S-構型，或其藥學上可接受的鹽或酯。
2.根據權利要求1的光學活性的N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸，其特征在于其鹽為氨基酸鹽或金屬鹽，其中氨基酸鹽的結構通式為
或
其中R為氨基酸，所說的氨基酸為精氨酸、賴氨酸、甘氨酸、門冬氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、鳥氨酸、胱氨酸、半胱氨酸、酪氨酸、纈氨酸、絲氨酸、組氨酸、蘇氨酸、色氨酸、蛋氨酸、甲硫氨酸、脯氨酸、谷氨酸或羥脯氨酸；
其中金屬鹽的結構通式為
或
，其中R0為鉀或鈉。
3.根據權利要求1的光學活性的N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸，其特征在于其酯的結構通式為
或
，其中R1為C1-C5直鏈烷基。
4.權利要求1的光學活性的N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸的制備方法，其特征是如下步驟
將R-(+)-2-氯丙酸與氯化亞砜反應得R-(+)-2-氯丙酰氯，將R-(+)-2-氯丙酰氯與甘氨酸在弱堿性條件下反應得R-(+)-2-氯代丙酰甘氨酸，再將R-(+)-2-氯代丙酰甘氨酸與二硫化鈉反應經酸化得R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸；或如下步驟
將S-(-)-2-氯丙酸與氯化亞砜反應得S-(-)-2-氯丙酰氯；將S-(-)-2-氯丙酰氯與甘氨酸在弱堿性條件下反應得S-(-)-2-氯代丙酰甘氨酸，再將S-(-)-2-氯代丙酰甘氨酸與二硫化鈉反應經酸化得S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸；
所說的二硫化鈉由硫化鈉與升化硫反應而得。
5.權利要求1的光學活性的N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸酸或其藥物可接受的鹽或酯用于制備治療以下疾病的藥物用途急慢性肝病、放化療所致外周白細胞減少癥、老年性早期白內障或玻璃體混濁癥，所說的急慢性肝病包括急慢性肝炎、病毒性肝炎、酒精性肝炎或藥物性肝炎、重金屬中毒性肝炎、脂肪肝、急慢性肝損傷、肝硬化；所說的藥物是口服給藥制劑或注射給藥制劑。
6.根據要求5的藥物用途，其特征是所說的藥物含有活性成分為R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸或S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸或它們的藥學上可接受的鹽或酯，同時還含有藥學上可接受的輔料。
7.根據權利要求5所述的藥物用途，其特征是所說的制劑是口服制劑，其中包含一般口服制劑、速釋口服制劑或緩釋制劑，所說的一般口服制劑為片劑、膠囊劑、顆粒劑、咀嚼片或泡騰片，所說的速釋口服制劑為分散片或口腔崩解片，所說的緩釋制劑為緩釋片劑或緩釋微丸。
8.根據權利要求5所述的藥物用途，其特征是所說的制劑是注射給藥制劑，包括注射液、注射用濃溶液或注射用無菌粉末。
9.根據權利要求6或7所述的用途，其特征是所說的口服制劑的輔料為填充劑、粘合劑或崩解劑，填充劑與崩解劑的重量含量分別為10-60％、2-30％；此外還可含有助流劑、潤滑劑和/或表面活性劑，三者的重量含量分別為0.1-5％、0.1-5％、0.005-1％。
10.根據權利要求6或8所述的用途，其特征是所說注射給藥制劑的輔料為符合注射劑要求的附加劑，包括pH調節劑、等滲等張調節劑、抗氧劑、螯合劑或/和賦形劑。
11.一種測定光學活性的N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸光學純度的液相色譜法，其特征在于
(1)色譜條件色譜柱采用3，5-二甲基苯基-氨基甲酸糖肽為固定相的手性柱；流動相為正己烷-乙醇-冰醋酸(80～95∶5～20∶0.01～1.0)，優選(90∶10∶0.1)；檢測波長為200nm～230nm，優選210nm；流動相流速為0.2～3.0ml/min，優選1.0ml/min；
(2)樣品溶液的配置將樣品R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸或S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸用有機溶劑配制成濃度為0.1～20mg/ml(優選1mg/ml)的溶液；所述有機溶劑選自正丙醇、異丙醇、乙醇、正丁醇和甲醇，優選乙醇；
(3)測定將溶液注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖并進行分析。
12.一種用于測定光學活性的N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸藥代動力學特性的方法，包括用高效液相-質譜聯用法測定受藥動物血漿中藥物濃度，其特征在于
血漿樣本的處理方法，包括血漿酸化，再提取，然后進行衍生化反應，即可配制進樣溶液，具體如下
(1)血漿酸化，其中用于酸化的酸可以為鹽酸、磷酸、高氯酸、醋酸等，優選鹽酸，更優選1mol/L鹽酸；其中酸的量血漿樣本的量為(150μl-250μl)∶(2ml-4ml)，優選為200μl∶3ml；
(2)對已酸化的血漿提取，其中用于提取的有機溶劑可以為乙酸乙酯、氯仿、三氯甲烷、乙醚、正己烷等，優選乙酸乙酯；
(3)對提取物進行衍生化反應，其中所用衍生化試劑可以為異硫氰酸苯酯、2，3，4，6-四-0-乙酰基-β-D-吡喃葡糖異硫氰酸酯(GITC)溶液等，優選GITC溶液，更優選2mg/mlGITC溶液，最優選2mg/mlGITC的四氫呋喃溶液；其中衍生化溫度為15-45℃，優選25-35℃，更優選30℃；其中衍生化時間為10-30min，優選15-25min，更優選20min；
色譜條件
流動相A甲醇；流動相B水溶液，含0.05-0.20mmol/L氯化鈉和5.0-6.0mmol/L甲酸，優選含0.10mmol/L氯化鈉和5.3mmol/L甲酸；其中A∶B為(40-50∶50-60，優選為44∶56)；
質譜條件離子化方式電噴霧離子化；選擇性離子監測；曲型脫溶劑裝置(CDL)；溫度200℃-300℃，優選250℃；加熱塊溫度150℃-250℃，優選200℃；CDL電壓20V-30V，優選25V；檢測電壓+1.2kV～+1.8kV，優選+1.50kV；霧化氣流速1.2L/min-1.8L/min，優選1.5L/min；干燥氣流速1.5L/min-2.5L/min，優選2.0L/min；
檢測離子為試驗藥物衍生物[M+Na]+(m/z)575.20，內標N-異丁酰基-D-半胱氨酸(NIDC)衍生物[M+Na]+(m/z)603.05；內標峰與主峰分離度符合中華人民共合國藥典要求即可。
全文摘要
本發明提供一種光學活性的N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸，即R-(-)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸或S-(+)-N-(α-巰基丙酰基)甘氨酸，以及它們的制備方法和含有該化合物或其藥學上可接受的鹽或酯的藥物制劑，及其用于制備代謝改善解毒藥物的用途。
文檔編號C07C319/02GK101113141SQ200710137428
公開日2008年1月30日 申請日期2007年7月12日 優先權日2006年7月19日
發明者勇 王, 倉 張, 滕再進, 張文萍, 錢金葉 申請人:南京圣和藥業有限公司