專利名稱：一種純化銀膠菊酮的方法
技術領域：
本發明屬于生物技術領域，特別是涉及一種采用高速逆流色譜分離技術純化銀膠菊酮的方法。
背景技術：
銀膠菊{Parthenium hysterophorus)為菊科銀膠菊屬植物，一年生草本，生于曠地、路旁、河邊、荒地，從海岸附近到海拔1500m有分布，在西南地區垂直分布上限可達2400m。其原產于美國及墨西哥北部，是一種毒性植物。銀膠菊酮是從銀膠菊中分離出的一種倍半萜類化合物，具有抗真菌活性，在I. Omg/mL濃度時，8天后對黑曲霉生長抑制率為40%。銀膠菊酮為黃色油狀物，[α]25/D-0. 011。(c=0. 475，氯仿)。分子式=C14H18O3,分子量:234. 3，分子結構為
OCH30。
CHs CH3經檢索，尚未見分離純化銀膠菊酮的相關報道。
發明內容
本發明的目的在于解決現有技術的不足和缺陷，提供一種純化銀膠菊酮的方法。為了實現上述目的，本發明的技術方案如下
取銀膠菊粉碎，加80-90%乙醇超聲提取60-100min，提取液減壓回收試劑，依次用石油醚，二氯甲烷萃取，收集二氯甲烷萃取液，用3%碳酸鈉溶液洗滌后，濃縮至小體積，再以正己烷-氯仿-甲醇-水為溶劑系統，采用高速逆流色譜分離，流分減壓濃縮干燥即得銀膠菊酮。本發明在超聲提取時，選用超聲波功率3_20kw，超聲頻率20-60KHZ。本發明在高速逆流色譜分離萃取物時，所述的正己烷-氯仿-甲醇-水溶劑系統比例為 3 :(10-18) (7-13) :8。本發明在高速逆流色譜分離萃取物時，是以溶劑系統上相為固定相，下相為流動相，設備轉速控制在750-950rpm，流動相流速為l_3ml/min。本發明優勢在于本發明采用超聲提取，提取時間短，提取效率高；本發明采用高速逆流色譜分離，分離過程無產品損失，制備周期短，制備量大，易操作，克服了傳統硅膠柱分離過程中樣品死吸附、工藝繁瑣、重現性差的技術缺陷。下面將結合具體實施方式
進一步說明本發明，但本發明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。
具體實施例方式實施例I :
取銀膠菊1kg，粉碎，置于超聲提取罐中，加10L90%乙醇超聲提取60min，啟動功率3kw，超聲頻率 20KHZ，提取液濃縮，加適量水分散，放入分液漏斗，依次用石油醚，二氯甲烷萃取，收集二氯甲烷萃取液，用5倍量3%碳酸鈉溶液洗滌，再回收二氯甲烷得濃縮液。取正己烷-氯仿-甲醇-水按3 :18 13 8比例混合均勻，靜置分層，取上相泵入色譜管，開啟高速逆流色譜儀，調整轉速為700rpm，同時把下相以每分鐘6mL的流速泵入，當所有多余固定相溢出分離柱時，流動相流速調節為3ml/min，注入濃縮液，紫外檢測器監測，收集流分，減壓濃縮干燥即得銀膠菊酮，含量98. 5%，收率83. 5%。實施例2:
取銀膠菊1kg，粉碎，置于超聲提取罐中，加12L80%乙醇超聲提取lOOmin，啟動功率20kw,超聲頻率20KHZ，提取液濃縮，加適量水分散，放入分液漏斗，依次用石油醚，二氯甲烷萃取，收集二氯甲烷萃取液，用3倍量3%碳酸鈉溶液洗滌，再回收二氯甲烷得濃縮液。取正己烷-氯仿-甲醇-水按3 :10 13 8比例混合均勻，靜置分層，取上相泵入色譜管，開啟高速逆流色譜儀，調整轉速為850rpm，同時把下相以每分鐘6mL的流速泵入，當所有多余固定相溢出分離柱時，流動相流速調節為lml/min，注入濃縮液，紫外檢測器監測，收集流分，減壓濃縮干燥即得銀膠菊酮，含量97. 3%，收率78. 5%。
權利要求
1.I. 一種純化銀膠菊酮的方法，其特征在于包括以下步驟取銀膠菊粉碎，加80-90%乙醇超聲提取60-100min，提取液減壓回收試劑，依次用石油醚，二氯甲烷萃取，收集二氯甲烷萃取液，用3%碳酸鈉溶液洗滌后，濃縮至小體積，再以正己烷-氯仿-甲醇-水為溶劑系統，采用高速逆流色譜分離，流分減壓濃縮干燥即得銀膠菊酮。
2.2.根據權利要求I所述純化銀膠菊酮的方法，其特征在于所述的正己烷-氯仿-甲醇-水溶劑系統比例為3 : (10-18) : (7-13) :8。
全文摘要
本發明屬于生物技術領域，特別是涉及一種純化銀膠菊酮的方法。方法步驟如下取銀膠菊粉碎，加80-90%乙醇超聲提取60-100min，提取液減壓回收試劑，依次用石油醚，二氯甲烷萃取，收集二氯甲烷萃取液，用3%碳酸鈉溶液洗滌后，濃縮至小體積，再以正己烷-氯仿-甲醇-水為溶劑系統，采用高速逆流色譜分離，流分減壓濃縮干燥即得銀膠菊酮。采用本發明純化銀膠菊酮，工藝簡單易操作，收率高，易于工業化制備。
文檔編號C07C49/753GK102659548SQ20121012490
公開日2012年9月12日 申請日期2012年4月26日 優先權日2012年4月26日
發明者劉東鋒, 吳艷波 申請人:南京澤朗醫藥科技有限公司