專利名稱：一種縮宮素的固相合成方法
技術領域：
本發明涉及縮宮素合成技術領域，特別是指一種縮宮素的固相合成方法。
背景技術：
縮宮素，又稱催產素，英文名為Oxytocin,分子式為C43H66N12O12S2,分子量為1007. 2，結構式
權利要求
1.一種縮宮素的固相合成方法，包括以下步驟(I )以 AM Resin 和 Rink Amide Linker 為原料，制備 Rink Amide AM Resin ； (II )在步驟(I )制得的Rink Amide AM Resin上通過固相合成法依次偶聯含Fmoc-氨基酸，脫保護基，裂解得線性縮宮素； (III)將上述線性縮宮素氧化，純化，冷凍干燥得縮宮素。
2.根據權利要求I所述的一種縮宮素的固相合成方法，其特征在于，所述步驟(I)在N，N’ - 二異丙基碳二亞胺DIC+1-羥基苯并三唑H0BT+4- 二甲氨基吡啶DMAP或N，N’ - 二異丙基碳二亞胺DIC+1-羥基苯并三唑HOBT作用下進行反應，其中AM Resin替代度為O.4 L OmmoI /g。
3.根據權利要求I或2所述的一種縮宮素的固相合成方法，其特征在于，所述步驟(II )中的含 Fmoc-氨基酸為Fmoc_Gly-0H、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Cys(Trt)-OH、Fmoc-Asn(Trt)-0H> Fmoc-Gln(Trt) -0H> Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Tyr (tBu) -OH和Boc-Cys (Trt) -OH ;所述固相合成法使用的縮合劑為H0Bt/DIC。
4.根據權利要求3所述的一種縮宮素的固相合成方法，其特征在于，反應介質均為無水N，N- 二甲基甲酰胺DMF ;脫Fmoc使用的試劑為20°/Γ25%的哌啶/ 二氯甲烷DCM或哌啶/N，N- 二甲基甲酰胺DMF ;脫保護基為脫側鏈保護基和叔丁氧羰基，其中Boc脫側鏈保護基、叔丁氧羰基Boc和裂解的試劑均為三氟乙酸TFA/三異丙基硅烷TIS/苯酚PhOH/3-巰基丙酸ΜΡΑ/Η20 ;氨基酸活化、偶聯、脫保護、氧化環化溫度均為(T30°C。
5.根據權利要求4所述的一種縮宮素的固相合成方法，其特征在于，使用的洗滌劑依次為 DMF、MeOH, DCM、DMF。
6.根據權利要求I所述的一種縮宮素的固相合成方法，其特征在于，所述步驟(III)氧化使用的氧化劑為空氣或H2O2，堿中和劑為NH3/K，酸中和劑為HAC。
7.根據權利要求5所述的一種縮宮素的固相合成方法，其特征在于，氧化劑在反應物濃度為10-3 10_411101/1，氧化溫度為2(T30°C。
全文摘要
本發明提出了一種縮宮素的固相合成方法，包括以下步驟(Ⅰ)以AM Resin和Rink Amide Linker為原料，制備Rink Amide AM Resin；(Ⅱ)在步驟(Ⅰ)制得的RinkAmide AM Resin上通過固相合成法依次偶聯含Fmoc保護基氨基酸，脫保護基，裂解得線性縮宮素；(Ⅲ)將上述線性縮宮素氧化，純化，冷凍干燥得縮宮素。本發明的合成工藝簡單，成本低，收率高，易純化，環境污染小，適合于工業化生產。
文檔編號C07K1/06GK102850441SQ20121025692
公開日2013年1月2日 申請日期2012年7月23日 優先權日2012年7月23日
發明者楊毅躍, 姚程成, 康國偉, 蒙相峰, 魯堯 申請人:無錫市凱利藥業有限公司