一種從葡萄籽中提取原花青素的新方法
【專利摘要】本發明涉及一種從葡萄籽中提取原花青素的新方法，其處理步驟包括：超聲波輔助萃取→壓榨法處理→酶解→大孔樹脂純化。使用該方法制得的原花青素收率高于80%，純度高于96%。本發明將超聲波輔助提取與壓榨法、酶解相結合，不僅能夠較為完全的提取葡萄籽中的原花青素，保證了葡萄籽較高的利用率，而且還能夠保證提取的原花青素具有較高的純度。本發明具有反應條件溫和、溶劑用量少、提取溫度低、成本低廉等優點，有利于節能環保，為葡萄籽中原花青素的提取工藝提供了一種新的思路。
【專利說明】一種從葡萄籽中提取原花青素的新方法【技術領域】
[0001]本發明屬于生物技術天然活性物質提取領域，具體涉及一種從葡萄籽中提取原花青素的新方法。
【背景技術】
[0002]原花青素Proanthocyanidins,簡稱PC,是植物王國中廣泛存在的一類多酹化合物的總稱。起初統歸于縮合鞣質或黃烷醇類，隨著分離鑒定技術的提高和對此類物質的深入研究與認識。現已成為獨樹一幟的大類物質并成為原花青素。具有抗氧化、抗衰老、抗腫瘤、抗輻射、防止血小板凝結、增強血管活性等多種生物活性和藥理作用。葡萄籽中原花青素含量可達5%~8%，并且目前葡萄籽提取物已被我國衛生部批準為保健品原料。我國的葡萄資源豐富，每年釀制葡萄酒后的下腳料葡萄籽月產5000t左右，而且最近幾年還在大量增加葡萄的栽培面積，這為提取葡萄籽中的原花青素提供了豐富的原料。
[0003]目前關于葡萄籽提取工藝方面的專利和文獻較多，主要有溶劑提取、索氏提取、超臨界CO2萃取等，這些提取法均存在諸多不足:索氏提取，提取時間長，而且很難放大；溶劑浸提存在提取時間長、溫度高、嚴重影響原花青素產品的純度；超臨界CO2萃取成本高、得率偏低而無法批量生產。
【發明內容】
[0004]本發明的目的是針對現有技術的不足，提供一種從葡萄籽中提取原花青素的新方法，該方法具有工藝簡單、溶劑用量少、反應條件溫和、對環境友好的優點，易于實現工業化生產。
[0005]本發明包括以下步驟:
a.取葡萄籽，加15~20倍重量的50~70%的乙醇，放入超聲波裝置中萃取4(T60min，超聲波功率為55(T650W，溫度為6(T80°C ；
b.將萃取后的葡萄籽連同提取溶劑一起，趁熱壓榨取汁，壓榨壓力為2(T25MPa，待榨汁完全后，所得提取液和殘渣備用；
c.向所得藥渣中加入10倍的50~70%的乙醇，調節PH值為4.0-5.0，向其中加入
0.3~0.5%的纖維素酶，于4(T50°C下酶解5(T70min，經離心，取上清液；
d.將步驟b和c所得的提取液和上清液合并，加50%的氫氧化鈉調節PH為7，過徑高比為1:12的預處理過的大孔吸附樹脂柱，先用蒸餾水淋洗，至洗出液澄明，然后用50-70%的乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮乙醇洗脫液得產物，干燥得原花青素。
步驟c所述的離心的轉速為4000r/min。
[0006]步驟d所述的預處理方法為大孔吸附樹脂濕法裝柱，先用5%的氫氧化鈉溶液清洗，后用蒸餾水洗至中性，再改用5%的鹽酸清洗，后用蒸餾水洗至中性，備用。
[0007]步驟d所述的大孔吸附樹脂的型號為NKA-9、AB_8、D-101。
[0008]本發明將超聲波輔助提取與壓榨法、酶解相結合，充分利用超聲振動的空穴作用與壓榨法的常溫操作和酶解的破壁作用，保護了原花青素的結構，提高了原花青素的提取率，再經大孔樹脂的分離純化得到天然的葡萄籽原花青素產品。本發明保證了原花青素的充分提取，并降低了生產過程中的能源消耗，可操作強，具有顯著的經濟效益，適合工業化生產。
[0009]下面將結合【具體實施方式】進一步說明本發明，但本發明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。
[0010]【具體實施方式】:
實施例1:
取200g葡萄籽，加15倍重量的50%的乙醇，放入超聲波裝置中萃取60min，超聲波功率為650W，溫度為60°C ;將萃取后的葡萄籽連同提取溶劑一起，趁熱壓榨取汁，壓榨壓力為20MPa，待榨汁完全后，向所得藥渣中加入10倍的50%的乙醇，調節PH值為4.0,向其中加入
0.3%的纖維素酶，于40°C下酶解70min，經離心，轉速為4000r/min，取上清液，合并提取液和上清液，加50%的氫氧化鈉調節PH為7，過徑高比為1:12的預處理過的D-101大孔吸附樹脂柱，先用蒸餾水淋洗，至洗出液澄明，然后用50%的乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮乙醇洗脫液得產物，干燥得原花青素產品12.86g，純度為97.6%。
[0011]實施例2:
取200g葡萄籽，加18倍重量的70%的乙醇，放入超聲波裝置中萃取50min，超聲波功率為600W，溫度為70°C ;將萃取后的葡萄籽連同提取溶劑一起，趁熱壓榨取汁，壓榨壓力為25MPa，待榨汁完全后，向所得藥渣`中加入10倍的70%的乙醇，調節PH值為4.5，向其中加入
0.4%的纖維素酶，于45°C下酶解60min，經離心，轉速為4000r/min，取上清液，合并提取液和上清液，加50%的氫氧化鈉調節PH為7，過徑高比為1:12的預處理過的NKA-9大孔吸附樹脂柱，先用蒸餾水淋洗，至洗出液澄明，然后用60%的乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮乙醇洗脫液得產物，干燥得原花青素產品14.69g，純度為98.3%。
[0012]實施例3:
取200g葡萄籽，加20倍重量的60%的乙醇，放入超聲波裝置中萃取40min，超聲波功率為550W，溫度為80°C ;將萃取后的葡萄籽連同提取溶劑一起，趁熱壓榨取汁，壓榨壓力為22MPa，待榨汁完全后，向所得藥渣中加入10倍的60%的乙醇，調節PH值為5.0,向其中加入
0.5%的纖維素酶，于50°C下酶解50min，經離心，轉速為4000r/min，取上清液，合并提取液和上清液，加50%的氫氧化鈉調節PH為7，過徑高比為1:12的預處理過的AB-8大孔吸附樹脂柱，先用蒸餾水淋洗，至洗出液澄明，然后用70%的乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮乙醇洗脫液得產物，干燥得原花青素產品13.69g，純度為96.3%。
【權利要求】
1.一種從葡萄籽中提取原花青素的新方法，其特征在于，包括以下步驟: a.取葡萄籽，加15~20倍重量的50~70%的乙醇，放入超聲波裝置中萃取4(T60min，超聲波功率為55(T650W，溫度為6(T80°C ； b.將萃取后的葡萄籽連同提取溶劑一起，趁熱壓榨取汁，壓榨壓力為2(T25MPa，待榨汁完全后，所得提取液和殘渣備用； c.向所得藥渣中加入10倍的50~70%的乙醇，調節PH值為4.0-5.0，向其中加入0.3~0.5%的纖維素酶，于4(T50°C下酶解5(T70min，經離心，取上清液； d.將步驟b和c所得的提取液和上清液合并，加50%的氫氧化鈉調節PH為7，過徑高比為1:12的預處理過的大孔吸附樹脂柱，先用蒸餾水淋洗，至洗出液澄明，然后用50-70%的乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮乙醇洗脫液得產物，干燥得原花青素。
2.根據權利要求1所述的一種從葡萄籽中提取原花青素的新方法，其特征在于，步驟c所述的離心的轉速為4000r/min。
3.根據權利要求1所述的一種從葡萄籽中提取原花青素的新方法，其特征在于，步驟d所述的預處理方法為大孔吸附樹脂濕法裝柱，先用5%的氫氧化鈉溶液清洗，后用蒸餾水洗至中性，再改用5%的鹽酸清洗，后用蒸餾水洗至中性，備用。
4.根據權利要求1所述的一種從葡萄籽中提取原花青素的新方法，其特征在于，步驟d所述的大孔吸附樹脂的型號為.NKA-9、AB-8、D-101。
【文檔編號】C07D311/62GK103467430SQ201310425454
【公開日】2013年12月25日 申請日期:2013年9月18日 優先權日:2013年9月18日
【發明者】楊存 申請人:南京通澤農業科技有限公司