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超聲酶提制備膠原蛋白的方法與流程

文檔序號:11893628閱讀:來源:國知局

技術特征:

1.一種超聲酶提制備膠原蛋白的方法,其特征在于,包括以下步驟:

步驟一,取新鮮或冷凍甲魚裙邊按照體積比1:10~30的比例加入質量濃度為0.3~0.6mol/L的酸溶液,按照體積百分比再加入0.25~1.5%的胃蛋白酶制得混合溶液;

步驟二,所述混合溶液進行超聲處理,其中超聲時間為30~50min;其中工作時間2s,停歇時間2~6s,超聲功率為50~300W;

步驟三,超聲結束后,經離心、純化以及干燥制得螺旋結構Ⅰ型膠原蛋白。

2.如權利要求1所述的超聲酶提膠原蛋白的方法,其特征在于,所述步驟一中,所述酸溶液為檸檬酸溶液、鹽酸溶液或乙酸溶液中的一種。

3.如權利要求1所述的超聲酶提膠原蛋白的方法,其特征在于,所述步驟三中,所述離心具體為:于1000~3000rmp離心3~6min后取上清液。

4.如權利要求3所述的超聲酶提膠原蛋白的方法,其特征在于,所述步驟三中,離心后純化具體為:向所述上清液中添加NaCl至鹽濃度為0.6~1.2mol/L,靜置鹽析18~30h后過濾,蛋白沉淀用0.3~0.6mol/L的乙酸復溶后依次對0.1~0.5mol/L的乙酸和蒸餾水透析3~5天,每天更換透析水2~4次。

5.如權利要求4所述的超聲酶提膠原蛋白的方法,其特征在于,所述步驟三中,純化后進行冷凍干燥,具體為:于-70~-80℃下預凍,最后在大氣壓力為10~100Pa、溫度為-55~-70℃條件下冷凍干燥24~72h。

6.如權利要求1所述的超聲酶提膠原蛋白的方法,其特征在于,所述步驟一中,所述新鮮或冷凍甲魚裙邊需先進行預處理,具體為:切碎后除雜,去除脂肪,然后用蒸餾水反復洗滌,充分瀝干后備用。

7.如權利要求1所述的超聲酶提膠原蛋白的方法,其特征在于,包括以下步驟:

步驟一,取新鮮或冷凍甲魚裙邊,按照體積比1:10~30的比例加入質量濃度為0.3~0.6mol/L的檸檬酸溶液,按照體積百分比再加入0.25~1.5%的胃蛋白酶制得混合溶液;

步驟二,所述混合溶液進行超聲處理,其中超聲時間為30~50min;其中工作時間2s,停歇時間2~6s,超聲功率為50~300W;

步驟三,超聲結束后,于1000~3000rmp離心3~6min后取上清液;向所述上清液中添加NaCl至鹽濃度為0.6~1.2mol/L,靜置鹽析18~30h后過濾,蛋白沉淀用0.3~0.6mol/L的乙酸復溶后依次對0.1~0.5mol/L的乙酸和蒸餾水透析3~5天,每天更換透析水2~4次;于-70~-80℃下預凍,最后在大氣壓力為10~100Pa、溫度為-55~-70℃條件下冷凍干燥24~72h,制得螺旋結構Ⅰ型膠原蛋白。

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