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一種磷酸鹽誘導啟動子降低黑曲霉β?葡萄糖苷酶表達酶活的方法與流程

文檔序號:12097524閱讀:來源:國知局

技術特征:

1.一種磷酸鹽誘導啟動子降低黑曲霉β-葡萄糖苷酶表達酶活的方法,其特征在于:包括如下步驟:

(1)將由磷酸鹽誘導啟動子或含磷酸鹽誘導啟動子的DNA序列、表達與β-葡萄糖苷酶mRNA互補的反義mRNA的DNA序列和終止子序列組成的DNA片段構建到表達載體上;

(2)將步驟(1)所構建的重組載體轉化到黑曲霉中;

(3)往培養基中加入磷酸鹽后對轉化有重組載體的黑曲霉菌株進行培養。

2.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟(1)中所述的含磷酸鹽誘導啟動子的DNA序列如SEQ ID NO.1所示。

3.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟(1)中所述的表達與β-葡萄糖苷酶mRNA互補的反義mRNA的DNA序列如SEQ ID NO.2所示。

4.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟(1)中所述的終止子序列如SEQ ID NO.3所示。

5.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟(1)中所述的表達載體為pMW1載體。

6.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟(1)為:將序列如SEQ ID NO.4所示的DNA片段通過限制性內切酶EcoI、KpnI及DNA連接酶構建到pMW1載體上,得到重組載體。

7.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟(2)中所述的黑曲霉為黑曲霉ATCC16404。

8.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟(3)中所述的培養基的配方為:麩皮10g,蛋白胨1g,牛肉膏1g,水1L。

9.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟(3)中所述的磷酸鹽為磷酸鈉。

10.一種黑曲霉菌株,其特征在于:為權利要求1-7任一項中構建的轉化有重組載體的黑曲霉菌株。

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