本發明屬于煙用香料技術領域，尤其涉及一種高靜壓協同酶解制備枇杷花煙用香料的方法和應用。
背景技術：
枇杷花為薔薇科植物枇杷的花，氣味清香、微甘，含有多種維生素。據《本草綱目》記載，枇杷花具有“止渴下氣、利肺、止吐逆、去焦熱、潤五臟”以及“治頭風、鼻涕清涕”等功效。鑒于枇杷花具有潤喉、潤肺、化痰止咳、清火解熱等功能，故多用于泡茶及中藥炮制，但少見應用于卷煙香精香料制備。
高靜壓技術（highhydrostaticpressure,hhp），又稱高壓加工技術，是近十多年來發展起來的一種冷殺菌技術，該技術利用液體介質加壓的物理方式達到滅菌、使酶失活、蛋白質變性的目的。由于高靜壓技術僅作用于食品成分的共價鍵，對非共價鍵沒有影響，且處理溫度溫和，故優于傳統的巴氏消毒法，普遍用于食品行業的滅菌消毒。鑒于高靜壓技術對物料在物理性能方面的作用特點，已有學者利用該技術在農產品、食品方面展開的研究，例如《一種利用高靜壓處理b型淀粉制備抗性淀粉的方法》，專利號201610067856.x；《一種高靜壓結合酶解法制備低敏性白果蛋白粉的方法》，專利號201610161399.0；《一種草莓清汁的非熱加工方法》，專利號201010217124.7；但截止目前，高靜壓技術在煙用香精香料開發方面的應用較少，只見于美拉德反應合成香料的領域，如專利號201310270886.7《一種利用高靜壓制備美拉德反應型煙用香料的方法》，但是在煙用香料的有機提取領域，特別是在花香類熱敏性煙用香料提取中的應用幾乎沒有相關報道。
技術實現要素：
有鑒于此，本發明提供了一種高靜壓協同酶解制備枇杷花煙用香料的方法和應用，通過本發明制得的枇杷花煙用香料，應用于卷煙加料中，可顯著提升卷煙香氣豐富性，增加甜潤感。
為實現上述目的，本發明提供了一種高靜壓協同酶解制備枇杷花煙用香料的方法，包括以下步驟：
（1）酶解處理：以枇杷花為底物，向底物中加入復合酶和水進行酶解；
（2）丙二醇、水復合提取：酶解處理完成后，加入丙二醇進行提取，提取過程中水浴保溫；
（3）高靜壓法二次提取：將提取后的混合液放入密封袋中，將密封袋內抽真空后，并進行高靜壓處理；
（4）過濾封裝：將高靜壓處理后的混合液進行抽濾獲得濾液，向濾液中加入山梨酸鉀，即得枇杷花煙用香料。
進一步來說，上述方法的具體步驟為：
（1）預處理：將新鮮枇杷花洗凈，切碎后備用；
（2）酶解處理：以切碎后的枇杷花為底物，向其中加入底物質量0.2%的復合酶，4倍底物質量的水進行酶解，控制酶解溫度為40~60℃，酶解時間為1~6h；
（3）丙二醇、水復合提取：酶解處理完成后，加入2~6倍底物質量的丙二醇，振蕩搖勻，50~65℃水浴2~4h；
（4）高靜壓法二次提取：將提取后的混合液放入密封的雙層聚乙烯高溫蒸煮袋中，抽真空后，于40~50℃條件下置于高靜壓設備中進行高靜壓處理20～30min；
（5）過濾封裝：將高靜壓處理后的混合液進行抽濾獲得濾液，向濾液中加入濾液質量0.1~0.2%的山梨酸鉀，封裝即得枇杷花煙用香料。
進一步地，所述復合酶由β-葡萄糖苷酶、纖維素酶、糖化酶復配得到，且三者的質量比為1~5：1~5：1~5。
進一步地，所述高靜壓設備以純水為傳壓介質，處理壓力范圍為100～500mpa。
本發明還提供了上述枇杷花煙用香料的應用，所述的枇杷花煙用香料是通過卷煙加料的方式添加到卷煙煙絲中。
進一步地，所述的枇杷花煙用香料的添加量為煙絲重量的0.05~0.2%。
由上可知，本發明提供的枇杷花煙用香料的制備方法，在本發明中，針對枇杷花這種熱敏性花香類底物，優化出了三步法提取工藝，首先通過復合酶處理，破壞植物細胞壁，并釋放其中部分的香氣前體物質；然后采用丙二醇、水復合溶劑最大限度地保證了枇杷花中脂溶性香氣成分的獲取(丙二醇、水復合提取步驟中，添加的丙二醇和酶解后液中的水組成所述丙二醇、水復合溶劑)；最后采用高靜壓法二次提取可顯著地提高提取效率和產品香氣質量，同時起到滅酶作用，免去了高溫滅酶步驟，避免熱敏性的花香成分損失和變質。
另外，本發明還提供了所述枇杷花煙用香料的應用方法，所述的枇杷花煙用香料是通過卷煙加料的方式添加到卷煙煙絲中。該發明制備得到的枇杷花煙用香料用于卷煙加料中，可顯著提升卷煙香氣豐富性，增加甜潤感。
具體實施例
下面將對本發明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例僅僅是本發明一部分實施例，而不是全部的實施例。基于本發明中的實施例，本領域普通技術人員在沒有做出創造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本發明保護的范圍。
為了更詳細說明本發明，下面結合實施例對本發明提供的一種利用高靜壓協同酶解技術制備枇杷花煙用香料的方法和應用，進行具體地描述。
實施例1
取新鮮枇杷花100g，洗凈，切碎，向其中加入400g水、0.2g復合酶（其中β-葡萄糖苷酶0.1g、纖維素酶0.05g、糖化酶0.05g），置于50℃水浴搖床中酶解4h；酶解完成后，加入400g的1,2-丙二醇，振蕩搖勻，置于65℃水浴鍋中溫浸4h；將枇杷花底物、提取液一同放入密封的雙層聚乙烯高溫蒸煮袋中，抽真空后，于50℃條件下置于高靜壓設備中（以純水為傳壓介質）進行高靜壓處理30min，處理壓力為300mpa；最后，將高靜壓處理后的枇杷花提取液進行抽濾獲得濾液，向濾液中加入濾液質量0.2%的山梨酸鉀，封裝即得枇杷花煙用香料1；
實施例2
取新鮮枇杷花100g，洗凈，切碎，向其中加入400g水、0.2g復合酶（其中β-葡萄糖苷酶0.05g、纖維素酶0.1g、糖化酶0.05g），置于50℃水浴搖床中酶解4h；酶解完成后，加入400g的1,2-丙二醇，振蕩搖勻，置于65℃水浴鍋中溫浸4h；將枇杷花底物、提取液一同放入密封的雙層聚乙烯高溫蒸煮袋中，抽真空后，于50℃條件下置于高靜壓設備中（以純水為傳壓介質）進行高靜壓處理30min，處理壓力為300mpa；最后，將高靜壓處理后的枇杷花提取液進行抽濾獲得濾液，向濾液中加入濾液質量0.2%的山梨酸鉀，封裝即得枇杷花煙用香料2；
實施例3
取新鮮枇杷花100g，洗凈，切碎，向其中加入400g水、0.2g復合酶（其中β-葡萄糖苷酶0.1g、纖維素酶0.05g、糖化酶0.05g），置于50℃水浴搖床中酶解2h；酶解完成后，加入300g的1,2-丙二醇，振蕩搖勻，置于60℃水浴鍋中溫浸6h；將枇杷花底物、提取液一同放入密封的雙層聚乙烯高溫蒸煮袋中，抽真空后，于50℃條件下置于高靜壓設備中（以純水為傳壓介質）進行高靜壓處理30min，處理壓力為300mpa；最后，將高靜壓處理后的枇杷花提取液進行抽濾獲得濾液，向濾液中加入濾液質量0.2%的山梨酸鉀，封裝即得枇杷花煙用香料3；
實施例4
取新鮮枇杷花100g，洗凈，切碎，向其中加入400g水、0.2g復合酶（其中β-葡萄糖苷酶0.1g、纖維素酶0.05g、糖化酶0.05g），置于50℃水浴搖床中酶解4h；酶解完成后，加入100g的1,2-丙二醇，振蕩搖勻，置于65℃水浴鍋中溫浸4h；將枇杷花底物、提取液一同放入密封的雙層聚乙烯高溫蒸煮袋中，抽真空后，于45℃條件下置于高靜壓設備中（以純水為傳壓介質）進行高靜壓處理30min，處理壓力為200mpa；最后，將高靜壓處理后的枇杷花提取液進行抽濾獲得濾液，向濾液中加入濾液質量0.2%的山梨酸鉀，封裝即得枇杷花煙用香料4；
實施例5
取新鮮枇杷花100g，洗凈，切碎，向其中加入400g水、0.2g復合酶（其中β-葡萄糖苷酶0.05g、纖維素酶0.1g、糖化酶0.05g），置于50℃水浴搖床中酶解4h；酶解完成后，加入200g的1,2-丙二醇，振蕩搖勻，置于65℃水浴鍋中溫浸4h；將枇杷花底物、提取液一同放入密封的雙層聚乙烯高溫蒸煮袋中，抽真空后，于50℃條件下置于高靜壓設備中（以純水為傳壓介質）進行高靜壓處理20min，處理壓力為100mpa；最后，將高靜壓處理后的枇杷花提取液進行抽濾獲得濾液，向濾液中加入濾液質量0.2%的山梨酸鉀，封裝即得枇杷花煙用香料5；
實施例6
取新鮮枇杷花100g，洗凈，切碎，向其中加入400g水、0.2g復合酶（其中β-葡萄糖苷酶0.05g、纖維素酶0.1g、糖化酶0.05g），置于45℃水浴搖床中酶解6h；酶解完成后，加入400g的1,2-丙二醇，振蕩搖勻，置于65℃水浴鍋中溫浸4h；將枇杷花底物、提取液一同放入密封的雙層聚乙烯高溫蒸煮袋中，抽真空后，于50℃條件下置于高靜壓設備中（以純水為傳壓介質）進行高靜壓處理30min，處理壓力為200mpa；最后，將高靜壓處理后的枇杷花提取液進行抽濾獲得濾液，向濾液中加入濾液質量0.2%的山梨酸鉀，封裝即得枇杷花煙用香料6；
對比例1
一種枇杷花煙用香料的制備方法，其采用的制備工藝、參數和實施例6相同，其區別僅在于：工藝中不包含高靜壓處理步驟，即1,2-丙二醇提取完成后直接進行抽濾獲得濾液，再向濾液中加入濾液質量0.2%的山梨酸鉀，其他的步驟和實施例6完全相同，封裝即得枇杷花煙用香料7。
對比例2
一種枇杷花煙用香料的制備方法，其采用的制備工藝、參數和實施例6相同，其區別僅在于：工藝中不包含酶解處理步驟，即將新鮮枇杷花洗凈切碎后，直接加入1,2-丙二醇提取，提取后繼續進行后續步驟，其他步驟和實施例6完全相同，封裝即得枇杷花煙用香料8。
實施例7
將實施例1~6和對比例1～2制得的枇杷花煙用香料1~8通過卷煙加料的方式，以0.2%的比例灑添加于金圣（滕王閣）系列卷煙中，分別對應制成卷煙產品1~8。另外，直接以未添加枇杷花煙用香料的金圣（滕王閣）系列卷煙作為卷煙產品9。按照卷煙行業通常的評價方法由5位省級評吸員評吸，10分為滿分，滿意度越高，評分越高，計算5位省級評吸員打出分數的平均分，得到的評吸結果平均分見表1。
如表1所示，卷煙產品1～6相比于卷煙產品9來說，香氣豐富性、甜潤感均有明顯的提高，降低雜氣的效果明顯更好，說明本發明所述的高靜壓協同酶解技術制備枇杷花煙用香料的效果顯著，提取的香氣物質用于卷煙添加，能夠顯著地改善卷煙的吸食品質。
對比卷煙產品6和卷煙產品7可知，僅僅通過酶解和丙二醇提取制備出的枇杷花香料對香煙香氣的改善不明顯，可能原因在于單純采用酶解和提取不能充分提取枇杷花內的致香物質，大量致香成分留在枇杷花底物中流失。引入高靜壓工藝處理提取后的枇杷花，能夠將枇杷花中的致香成分大量地提取出來，表現為香料改善香煙煙氣的效果明顯提升，如表1所示。
對比卷煙產品6和卷煙產品8可知，如若不采用酶解而直接通過提取和高靜壓來獲得枇杷花香料，其效果依然不甚良好，這可能是因為復合酶處理后，破壞植物的細胞壁，并釋放其中部分的香氣前體物質，使得后續提取和高靜壓析出致香成分更加容易，但是在植物細胞未經過酶解處理的情況下直接提取，香料成分很難被從細胞中分離，表現為提取后的香料對香煙煙氣改善的效果不佳。
綜上所述，提取枇杷花需要高靜壓和酶解兩個步驟相結合才能取得很好的效果，提取后的枇杷花香料添加入香煙煙絲中，能夠明顯地改善香氣豐富性和甜潤感，同時降低煙氣的雜氣，提高香煙的吸收品質。
表1：評價結果平均分
以上所述僅是本發明的優選實施方式，應當指出，對于本技術領域的普通技術人員來說，在不脫離本發明原理的前提下，還可以做出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也應視為本發明的保護范圍。