一種從米糠中提取高純度神經酰胺的方法
【專利摘要】一種從米糠中提取高純度神經酰胺的方法，包括以下步驟：（1）前處理：將米糠原料除雜，粉碎，過篩，然后進行酶解，過濾，得酶解米糠；（2）微波逆流提取：在酶解米糠中加入有機溶劑，進行微波逆流提取，保溫過濾，得米糠提取液；（3）濃縮：濃縮米糠提取液并回收有機溶劑，得米糠濃縮液；（4）有機溶劑萃取分離：將米糠濃縮液用有機溶劑攪拌萃取，減壓濃縮，得焦油狀脂類混合物；（5）硅膠層析吸附分離，有機溶劑洗脫，收集神經酰胺目標餾分；（6）濃縮干燥，得神經酰胺產品。本發明方法工藝簡單，能耗、成本低，適用于工業化連續生產，所得神經酰胺產品純度≥99%，得率≥0.075%。
【專利說明】
一種從米糠中提取高純度神經酰胺的方法
技術領域
[0001]本發明涉及一種從米糠中提取高純度物質的方法，具體涉及一種適應于工業生產的從米糠中提取高純度神經酰胺的方法。
【背景技術】
[0002]米糠就是由稻谷在加工成精米的過程中去掉的外殼和占總重10%左右的種皮和胚加工制成的，是稻谷加工的主要副產品。國內外的研究結果表明，米糠中富含多種營養素和生理活性物質。在日本，早在二十世紀的五、六十年之前，已開始將米糠油用作化妝品。正式對米糠油中的成份進行研究是從1956年才開始，特別是在近期的研究中，發現米糠中含有與皮膚極具親和力的神經酰胺(Eeramide)和角鱉稀(Squalene)，因此，有專利文獻提出可用米糠直接生產化妝品面膜。
[0003]目前，國內對米糠的營養功用及在畜禽生產中的應用研究頗多，而對從米糠中提取高純度米糠提取物的研究較少。現有提取方法主要有95%乙醇回流、水回流提取，其中，95%乙醇提取法，生產成本高，可操作性不強;而水回流提取粗品中雜質太多，極大的影響后續純化工序，造成分離純化困難;現有的純化方法主要有中壓C18鍵合硅膠ODS柱層析純化、制備色譜柱分離純化等，但其工業化投資大，成本高。
[0004]CN102351730A公開了一種從魔芋飛粉中制備神經酰胺的方法，是以魔芋飛粉為原料，用體積分數95%的乙醇溶液提取，然后用石油醚萃取，再用硅膠柱層析純化，最后用中壓C18鍵合硅膠ODS柱層析純化，得純度95%以上神經酰胺。但是，該工藝粗提階段采用體積分數95%的乙醇不適合工業化生產，且后續純化分離采用硅膠層析柱和中壓C18鍵合硅膠ODS柱層析串聯，生產成本較高。
[0005]CN102093244A公開了一種神經酰胺的提取方法，是以海葵為原料，用體積分數95%的乙醇溶液提取，然后用乙酸乙酯萃取，再用大孔樹脂色譜柱純化，最后，結晶得到神經酰胺。但是，該工藝粗提階段采用體積分數95%的乙醇不適合工業化生產，且后續純化+結晶的方法收率低，一般為0.015?0.03%，生產成本高。
[0006]CN102058727A公開了含神經酰胺的茶籽提取物及其制備方法，是用水或低碳醇繼續提取。但是，提取液中雜質多，增加了后續純化處理難度，增加了純化環節，延長了生產周期。
【發明內容】
[0007]本發明所要解決的技術問題是，克服現有技術存在的上述缺陷，提供一種處理量大，工藝簡單，能耗、成本低，適用于工業化連續生產，所得神經酰胺產品純度、收率高的從米糠中提取高純度神經酰胺的方法。
[0008]本發明解決其技術問題所采用的技術方案如下:一種從米糠中提取高純度神經酰胺的方法，包括以下步驟:
(I)前處理:將干燥的米糠原料除雜，粉碎，過篩，得米糠原料粉，然后加入酶解液中進行酶解，過濾，得酶解米糠；
(2)微波逆流提取:在步驟(I)所得酶解米糠中加入有機溶劑，進行微波逆流提取，保溫過濾，得米糖提取液；
(3)濃縮:濃縮步驟(2)所得米糠提取液并回收其中的有機溶劑，至米糠提取液中無有機溶劑，得米糠濃縮液；
(4)有機溶劑萃取分離:將步驟(3)所得米糠濃縮液用有機溶劑攪拌萃取，靜置分層后收集有機溶劑層，減壓濃縮至無溶劑氣味為止，得焦油狀脂類混合物；
(5)硅膠層析吸附分離:將步驟(4)所得焦油狀脂類混合物濕法上硅膠層析柱，用有機溶劑進行洗脫，通過薄層層析檢測，收集神經酰胺目標餾分；
(6)濃縮干燥:將步驟(5)所得神經酰胺目標餾分濃縮，干燥，得神經酰胺產品。
[0009]步驟(I)中，所述過篩后的米糠原料粉粒徑為20?40目。
[0010]進一步，步驟(I)中，所述酶解液中酶制劑為鞘磷脂酶。所述酶解液中酶制劑的濃度為0.2?0.5w/v%(優選0.25?0.40w/v%)，酶解液中水的質量相當于米糠原料粉的2?4倍。所述加入的鞘磷脂酶制劑可催化酶解鞘磷脂，提高原料中神經酰胺的含量，但若添加量小于0.2 w/v%會導致酶解效果明顯下降，而添加量高于0.5 w/v%又無明顯效果提升，繼續增加酶用量只會損耗酶制劑。酶解液中的水主要是將原料濕潤，便于酶解，若水量少于2倍，則濕潤不夠，酶解效果不好，若加水量大于4倍，則稀釋了酶試劑的濃度，降低酶解效果。
[0011 ] 進一步，步驟(I)中，所述酶解的溫度為35?40 0C，時間為60?120min(優選70?lOOmin)。由于需要保證酶試劑的活性，發明人研究發現，在所述溫度下酶解效果最佳，當酶解時間少于60min時酶解不充分，而當酶解時間大于120min后，酶解效率趨于平穩狀態，收率幾乎不增加，繼續延長酶解時間無意義。
[0012]進一步，步驟(2)中，所述微波逆流提取是指:在50?70°C，微波功率為700?900W，微波頻率為5000?7000MHz下，微波逆流提取40?60min。發明人研究發現，當溫度大于70°C時效率趨于平穩狀態，當溫度小于50°C時效率大大下降；當提取時間大于60min后，浸提效率趨于平穩狀態，收率幾乎不增加，繼續延長提取時間無意義。
[0013]進一步，步驟(2)中，所述有機溶劑為體積分數為85?90%的乙醇，用量為米糠原料粉質量的5?7倍。發明人研究發現，在所述提取溶劑下浸提，當提取溶劑用量大于7倍時，浸提效率趨于平穩狀態，收率幾乎不增加，繼續增加無意義，而當提取溶劑用量少于5倍時，浸提效率大大降低。
[0014]步驟(2)中，采用微波逆流提取不同于傳統提取方式，具有連續提取、處理量大、收率高、能耗低的優點，微波逆流提取同時具有微波提取與逆流提取的雙重優勢，大大縮短了提取周期和效率，是傳統熱回流提取技術時間的1/4?1/3，同時也節省了30%以上的提取溶劑，減少了能耗，相對傳統制備是一種高效率、低成本的提取方式，該步驟米糠中神經酰胺的提取率達99%以上。
[0015]進一步，步驟(3)中，所述濃縮為真空濃縮，真空濃縮的溫度為40?60°C，真空度為-0.085?-0.08MPa;濃縮至米糠提取液的波美度為8?12為止。
[0016]由于步驟(2)的逆流提取是在50?70°C下進行的，且步驟(3)中濃縮所需的溫度僅為40?60°C，所以步驟(2)所得米糠提取液無需冷卻，可在保溫過濾后直接進行保溫濃縮，實現了熱能的高效利用。
[0017]進一步，步驟(4)中，首先調節步驟(3)所得米糠濃縮液pH值至10.0?11.0，然后再用有機溶劑攪拌萃取。在用有機溶劑對米糠濃縮液進行萃取分離前，宜先將PH值調節至10.0?11.0，研究表明，這可以使物料中的酸性物質以及大部分色素物質以離子形式存在，從而在進行萃取時，它們的大部分可留在水相中，有利于去除大部分酸性物質與色素；此外，當PH值為10.0?11.0時，有利于使米糠中的神經酰胺以分子狀態存在;調節料液pH值加入的無機堿可增加料液濃度，進一步提高萃取效果。所述PH值優選用氫氧化鈉或碳酸鈉進行調節。
[0018]進一步，步驟(4)中，所述攪拌萃取的時間為I?2h，攪拌萃取的溫度為30?40°C;重復萃取多2次，合并靜置分層后收集的有機溶劑層。
[0019]進一步，步驟(4)中，所述有機溶劑為乙酸乙酯或6號抽提溶劑油，所述米糠濃縮液與有機溶劑的質量體積比為1:1?1.5。
[°02°] 步驟(4)中，所述靜置分層的時間為30?40min。
[0021]進一步，步驟(5)中，所述層析柱的徑高比為1:6?9。發明人研究發現，層析柱當徑高比大于1:6時其色譜帶分離不徹底，當徑高比少于1:9時所用溶劑的量大大增加，但結果是一樣的。
[0022]進一步，步驟(5)中，所述有機溶劑為乙酸乙酯或6號抽提溶劑油，所述洗脫的流速為0.5?1.0 BV/h，洗脫的體積為3.5?4.5BV。發明人研究發現，溶劑洗脫流速小于0.5BV/h時洗脫效率低，需要大量時間，當洗脫流速大于1.0BV/h時洗脫溶劑用量大增，但其效果未明顯提高。最后根據薄層分析結果，確定神經酰胺目標餾分收集段。
[0023]進一步，步驟(6)中，所述濃縮為真空濃縮，真空濃縮的溫度為40?60°C，真空度為-0.06?-0.04MPa，濃縮至波美度為30?40為止。
[0024]進一步，步驟(6)中，所述干燥為真空干燥，真空干燥的溫度為40?50°C，真空度為-0.09?-0.0810^，時間為14?1811。
[0025]本發明所使用的米糠原料產自湖南，米糠中神經酰胺的含量一般為0.018?0.030%ο
[0026]本發明方法具有以下優點:
(1)按照本發明方法所得米糠提取物神經酰胺產品，純度多99%，得率(神經酰胺產品/米糠原料)多0.075%，明顯高于現有技術中所得米糠提取物神經酰胺的純度和得率；
(2)本發明方法通過對米糠原料進行酶解，使米糠原料中的目標產物神經酰胺的濃度由0.026%變為0.070%?0.078%，提高了約2倍；
(3)本發明方法使用微波逆流提取技術代替傳統的熱回流提取技術，具有提取時間短、使用溶劑少，能耗低、生產成本低，并能連續提取等特點，適應工廠連續化生產；
(4)本發明方法將保溫過濾的米糠提取液直接進行濃縮，實現了熱能的高效利用；
(5)本發明的優選方案，在有機溶劑萃取分離前對濃縮液進行調堿處理，去除了大量的酸性物質與色素，達到純化目標成分的目的，為下一步的再純化做好了準備，從而代替了傳統的醇沉、陰陽離子樹脂處理的方式，工藝過程得以簡化，進一步縮短了生產周期。
【具體實施方式】
[0027]下面結合實施例對本發明作進一步說明。
[0028]本發明實施例所使用的米糠原料產自湖南(米糠中神經酰胺的含量為0.026%);所使用的鞘磷脂酶(CAS No:9031-54-3)，購于湖北巨勝科技有限公司；所使用的層析柱規格為Φ40Χ300πιπι，層析柱材質為不銹鋼;所使用的硅膠吸附劑購自上海坪堯貿易有限公司；檢測所得神經酰胺產品的純度所使用的神經酰胺標準品購自上海作舟化工科技有限公司；其它所使用的化學試劑及儀器設備，如無特殊說明，均通過常規商業途徑獲得。
[0029]實施例1
(1)前處理:將干燥的米糠原料除雜，粉碎，過篩，得20?40目的米糠原料粉，然后取500kg米糠原料粉加入鞘磷脂酶制劑酶解液(3kg鞘磷脂酶制劑溶解于1500L純水)中，在36°(:下，酶解70min，過濾，得1849 kg酶解米糠(含水)，酶解米糠原料干燥后檢測目標產物神經酰胺的含量為0.076%;
(2)微波逆流提取:在步驟(I)所得1849kg酶解米糠(含水)中加入2550L乙醇(體積分數為88%)，在55°C，微波功率為700W，微波頻率為7000MHz下，進行微波逆流提取50min，保溫過濾，得2515 kg米糠提取液；
(3)濃縮:在真空濃縮器中，于48°C，真空度為_0.083MPa下，濃縮步驟(2)所得2515kg米糠提取液，至米糠提取液中無乙醇且波美度為9為止，得1326kg米糠濃縮液；
(4)有機溶劑萃取分離:用碳酸鈉調節步驟(3)所得1326kg米糠濃縮液pH值至10.00，然后用1400L乙酸乙酯，在34°C下，攪拌萃取lh，靜置30min分層后收集乙酸乙酯層，重復萃取2次，合并萃取液，減壓濃縮，得65kg焦油狀脂類混合物；
(5)硅膠層析吸附分離:將步驟(4)所得65kg焦油狀脂類混合物濕法上硅膠層析柱，用乙酸乙酯為洗脫劑，以流速0.5BV/h進行洗脫，洗脫體積為4BV，通過薄層層析檢測，收集2.25?3.0OBV段神經酰胺目標餾分；
(6)濃縮干燥:將步驟(5)所得神經酰胺目標餾分在45°C，真空度為-0.055MPa下，真空濃縮至波美度為35，然后將濃縮液在40 0C，真空度為-0.09MPa下，真空干燥16h，得米糠提取物神經酰胺產品0.375kg。
[0030]用HPLC檢測所得神經酰胺產品的純度，具體方式如下:采用高效液相色譜-熒光檢測器分析產品中的神經酰胺，熒光檢測器的激發波長和吸收波長分別為340 nm和455 nm，進樣量50yL(本實施例產品和標準品在I mol.L—1氫氧化鉀乙醇溶液中沸水浴反應2 h脫酰基，再與鄰苯二甲醛衍生試劑反應60?90s，采用Kromasil C18C250 mmX4.5 mm，5ym)色譜柱，流動相為甲醇-0.02 mol.L—1磷酸二氫鉀溶液(體積比90:10)，流速1.0 mL.min—S熒光檢測器的激發波長和吸收波長分別為340 nm和455 nm，進樣量50yL)。
[0031 ] 經HPLC檢測，米糠提取物的產品純度為99.02%，得率為0.075%。
[0032] 實施例2
(1)前處理:將干燥的米糠原料除雜，粉碎，過篩，得20?40目的米糠原料粉，然后取500kg米糠原料粉加入鞘磷脂酶制劑酶解液(4kg鞘磷脂酶制劑溶解于1500L純水)中，在38°(:下，酶解90min，過濾，得1856 kg酶解米糠(含水)，酶解米糠原料干燥后檢測目標產物神經酰胺的含量為0.077%;
(2)微波逆流提取:在步驟(I)所得1856kg酶解米糠(含水)中加入3000L乙醇(體積分數為86%)，在60 °C，微波功率為900W，微波頻率為5000MHz下，進行微波逆流提取45min，保溫過濾，得2985 kg米糠提取液； (3)濃縮:在真空濃縮器中，于550C，真空度為-0.083MPa下，濃縮步驟(2)所得2985 kg米糠提取液，至米糠提取液中無乙醇且波美度為10為止，得1306kg米糠濃縮液；
(4)有機溶劑萃取分離:用氫氧化鈉調節步驟(3)所得1306kg米糠濃縮液pH值至10.30，然后用1500L乙酸乙酯，在36°C下，攪拌萃取70min，靜置35min分層后收集乙酸乙酯層，重復萃取2次，合并萃取液，減壓濃縮，得68kg焦油狀脂類混合物；
(5)硅膠層析吸附分離:將步驟(4)所得68kg焦油狀脂類混合物濕法上硅膠層析柱，用乙酸乙酯為洗脫劑，以流速0.6BV/h進行洗脫，洗脫體積為4BV，通過薄層層析檢測，收集2.35?3.0OBV段神經酰胺目標餾分；
(6)濃縮干燥:將步驟(5)所得神經酰胺目標餾分在50°C，真空度為-0.045MPa下，真空濃縮至波美度為37，然后將濃縮液在45 0C，真空度為-0.085MPa下，真空干燥16h，得米糠提取物神經酰胺產品0.380kg ο
[0033]用HPLC檢測所得神經酰胺產品的純度，具體方式同實施例1。
[0034]經HPLC檢測，米糠提取物的產品純度為99.12%，得率為0.076%。
[0035]實施例3
(1)前處理:將干燥的米糠原料除雜，粉碎，過篩，得20?40目的米糠原料粉，然后取500kg米糠原料粉加入鞘磷脂酶制劑酶解液(5kg鞘磷脂酶制劑溶解于1500L純水)中，在37°(:下，酶解90min，過濾，得1838 kg酶解米糠(含水)，酶解米糠原料干燥后檢測目標產物神經酰胺的含量為0.0775%;
(2)微波逆流提取:在步驟(I)所得1838kg酶解米糠(含水)中加入3200L乙醇(體積分數為88%)，在60 °C，微波功率為900W，微波頻率為5000MHz下，進行微波逆流提取50min，保溫過濾，得3195 kg米糠提取液；
(3)濃縮:在真空濃縮器中，于55°C，真空度為-0.085MPa下，濃縮步驟(2)所得3195kg米糠提取液，至米糠提取液中無乙醇且波美度為9為止，得1336kg米糠濃縮液；
(4)有機溶劑萃取分離:用氫氧化鈉調節步驟(3)所得1336kg米糠濃縮液pH值至10.60，然后用1700L乙酸乙酯，在38°C下，攪拌萃取80min，靜置40min分層后收集乙酸乙酯層，重復萃取2次，合并萃取液，減壓濃縮，得69.6kg焦油狀脂類混合物；
(5)硅膠層析吸附分離:將步驟(4)所得69.6kg焦油狀脂類混合物濕法上硅膠層析柱，用乙酸乙酯為洗脫劑，以流速0.7BV/h進行洗脫，洗脫體積為4BV，通過薄層層析檢測，收集2.45?3.20BV段神經酰胺目標餾分；
(6)濃縮干燥:將步驟(5)所得神經酰胺目標餾分在55°C，真空度為-0.05MPa下，真空濃縮至波美度為38，然后將濃縮液在50°C，真空度為-0.085MPa下，真空干燥16h，得米糠提取物神經酰胺產品0.386kg。
[0036]用HPLC檢測所得神經酰胺產品的純度，具體方式同實施例1。
[0037]經HPLC檢測，米糠提取物的產品純度為99.18%，得率為0.0772%。
[0038]實施例4
(I)前處理:將干燥的米糠原料除雜，粉碎，過篩，得20?40目的米糠原料粉，然后取500kg米糠原料粉加入鞘磷脂酶制劑酶解液(6kg鞘磷脂酶制劑溶解于1500L純水)中，在39°(:下，酶解10min，過濾，得1876kg酶解米糠(含水)，酶解米糠原料干燥后檢測目標產物神經酰胺的含量為0.0772%; (2)微波逆流提取:在步驟(I)所得1876kg酶解米糠(含水)中加入3500L乙醇(體積分數為90%)，在65°C，微波功率為900W，微波頻率為5000MHz下，進行微波逆流提取50min，保溫過濾，得3305 kg米糠提取液；
(3)濃縮:在真空濃縮器中，于60°C，真空度為-0.080MPa下，濃縮步驟(2)所得3305kg米糠提取液，至米糠提取液中無乙醇且波美度為9為止，得1320kg米糠濃縮液；
(4)有機溶劑萃取分離:用氫氧化鈉調節步驟(3)所得1320kg米糠濃縮液pH值至11.00，然后用1800L 6號抽提溶劑油，在400C下，攪拌萃取90min，靜置40min分層后收集乙酸乙酯層，重復萃取2次，合并萃取液，減壓濃縮，得68.6kg焦油狀脂類混合物；
(5)硅膠層析吸附分離:將步驟(4)所得68.6kg焦油狀脂類混合物濕法上硅膠層析柱，用6號抽提溶劑油為洗脫劑，以流速0.8BV/h進行洗脫，洗脫體積為4BV，通過薄層層析檢測，收集2.15?2.90BV段神經酰胺目標餾分；
(6)濃縮干燥:將步驟(5)所得神經酰胺目標餾分在55°C，真空度為-0.05MPa下，真空濃縮至波美度為40，然后將濃縮液在50°C，真空度為-0.085MPa下，真空干燥16h，得米糠提取物神經酰胺產品0.387kg。
[0039]用HPLC檢測所得神經酰胺產品的純度，具體方式同實施例1。
[0040]經HPLC檢測，米糠提取物的產品純度為99.23%，得率為0.0774%。
【主權項】
1.一種從米糠中提取高純度神經酰胺的方法，其特征在于:包括以下步驟: (I)前處理:將干燥的米糠原料除雜，粉碎，過篩，得米糠原料粉，然后加入酶解液中進行酶解，過濾，得酶解米糠； (2 )微波逆流提取:在步驟(I)所得酶解米糠中加入有機溶劑，進行微波逆流提取，保溫過濾，得米糖提取液； (3)濃縮:濃縮步驟(2)所得米糠提取液并回收其中的有機溶劑，至米糠提取液中無有機溶劑，得米糠濃縮液； (4)有機溶劑萃取分離:將步驟(3)所得米糠濃縮液用有機溶劑攪拌萃取，靜置分層后收集有機溶劑層，減壓濃縮至無溶劑氣味為止，得焦油狀脂類混合物； (5)硅膠層析吸附分離:將步驟(4)所得焦油狀脂類混合物濕法上硅膠層析柱，用有機溶劑進行洗脫，通過薄層層析檢測，收集神經酰胺目標餾分； (6 )濃縮干燥:將步驟(5 )所得神經酰胺目標餾分濃縮，干燥，得神經酰胺產品。2.根據權利要求1所述從米糠中提取高純度神經酰胺的方法，其特征在于:步驟(I)中，所述酶解液中酶制劑為鞘磷脂酶;所述酶解液中酶制劑的濃度為0.2?0.5w/v%，酶解液中水的質量相當于米糠原料粉的2?4倍。3.根據權利要求1或2所述從米糠中提取高純度神經酰胺的方法，其特征在于:步驟(I)中，所述酶解的溫度為35?40°C，時間為60?120min。4.根據權利要求1?3之一所述從米糠中提取高純度神經酰胺的方法，其特征在于:步驟(2)中，所述微波逆流提取是指:在50?70°C，微波功率為700?900W，微波頻率為5000?7000MHz下，微波逆流提取40?60min。5.根據權利要求1?4之一所述從米糠中提取高純度神經酰胺的方法，其特征在于:步驟(2)中，所述有機溶劑為體積分數為85?90%的乙醇，用量為米糠原料粉質量的5?7倍。6.根據權利要求1?5之一所述從米糠中提取高純度神經酰胺的方法，其特征在于:步驟(3)中，所述濃縮為真空濃縮，真空濃縮的溫度為40?600C，真空度為-0.085?-0.08MPa;濃縮至米糠提取液的波美度為8?12為止。7.根據權利要求1?6之一所述從米糠中提取高純度神經酰胺的方法，其特征在于:步驟(4)中，首先調節步驟(3)所得米糠濃縮液pH值至10.0?11.0，然后再用有機溶劑攪拌萃取;攪拌萃取的時間為I?2h，攪拌萃取的溫度為30?40°C;重復萃取多2次，合并靜置分層后收集的有機溶劑層。8.根據權利要求1?7之一所述從米糠中提取高純度神經酰胺的方法，其特征在于:步驟(4)中，所述有機溶劑為乙酸乙酯或6號抽提溶劑油，所述米糠濃縮液與有機溶劑的質量體積比為1:1?1.5。9.根據權利要求1?8之一所述從米糠中提取高純度神經酰胺的方法，其特征在于:步驟(5)中，所述層析柱的徑高比為1:6?9;所述有機溶劑為乙酸乙酯或6號抽提溶劑油，所述洗脫的流速為0.5?1.0 BV/h，洗脫的體積為3.5?4.5BV。10.根據權利要求1?9之一所述從米糠中提取高純度神經酰胺的方法，其特征在于:步驟(6)中，所述濃縮為真空濃縮，真空濃縮的溫度為40?60°C，真空度為-0.06?-0.04MPa，濃縮至波美度為30?40為止;所述干燥為真空干燥，真空干燥的溫度為40?50°C，真空度為-0.09?-0.0810^，時間為14?1811。
【文檔編號】C07C233/18GK106008253SQ201610350666
【公開日】2016年10月12日
【申請日】2016年5月25日
【發明人】龍偉岸, 黃華學
【申請人】湖南華誠生物資源股份有限公司