專利名稱：具有α-蒎烯降解能力的維羅納假單胞菌ZW及其應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及一株具有α-菔烯降解能力的新菌株一維羅納假單胞菌 (Pseudomonas veronii) ZW及其應用，屬于環境污染物生物處理技術領域。 背景技術：
α-菔烯(CltlH16)是一種不易生物降解的揮發性有機化合物(VolatileOrganic Compounds, VOCs)，廣泛應用于木材加工業、造紙業和制藥業，是一種重要的有機合成原料。 隨著工業的發展，α-菔烯被隨意排放進入大氣，不僅直接危害人類健康，而且會與大氣中 的臭氧、羥基等自由基發生反應，形成光化學煙霧并破壞臭氧層。因此研究α-菔烯廢氣的 凈化技術就顯得十分迫切和重要。廢氣生物凈化技術具有去除效率高、處理費用低、二次污染小等特點，逐漸被廣泛 應用于VOCs的處理。采用生物技術處理含α-菔烯廢水廢氣的關鍵之一便是獲得具有高 效降解α-菔烯能力的菌株。目前，國內外學者已對烷烴類化合物的生物降解進行了大量 研究，但由于α-菔烯溶解度極低、結構較為復雜，迄今分離到的α-菔烯降解菌還比較 有限，主要包括熒光假單胞菌(Pseudomonas fluorescens)，惡臭假單胞菌(Pseudomonas putida)，諾卡式菌 P18. 3 (Nocardia P18. 3)，白色芽孢桿菌(Bacillus pallidus)等細菌， 黑曲霉菌(Aspergillus niger)，灰霉菌(Botrytis cinerea)等真菌。此外，已分離到的 菌株降解效率也有待于進一步提高。大量研究表明從環境中分離篩選高效的α-菔烯降解 菌，仍然是消除環境中α-菔烯污染的重要環節。本發明中的假單胞菌(Pseudomonas sp.)是一種常見的桿菌，經檢索專利和其他 相關文獻，尚未發現利用維羅納假單胞菌(Pseudomonasveronii)降解α-菔烯的報道。該 降解菌的發現對工業廢水廢氣中α-菔烯等石油烴污染物的高效凈化具有重要意義。
發明內容
本發明的目的是提供一種高效、耐受能力強的具有α -菔烯降解能力的維羅納假 單胞菌及其用途。本發明采用的技術方案是一株具有α-菔烯降解能力的維羅納假單胞菌(Pseudomonas veronii) ZW，保藏 于中國典型培養物保藏中心，地址中國武漢武漢大學，430072，保藏編號CCTCC NO =M 209313，保藏日期2009年12月24日。該降解菌的發現對工業廢水廢氣中烷烴類污染物的
高效凈化具有重要意義。所述維羅納假單胞菌ZW菌落特征如下菌落呈乳白色，不透明，邊緣光滑，具有黏 性。透射電鏡下觀察該菌體的形態為稍長桿菌，具有鞭毛，革蘭氏染色陰性，氧化酶陽性，淀 粉水解和明膠水解陽性，接觸酶陽性。所述維羅納假單胞菌ZW16s rRNA基因序列(GenBank登陸號為⑶357489)如下CAGTCATGAATCACACCGTGGTAACCGTCCCCCCGAAGGTTAGACTAGCTACTT
CTGGTGCAACCCACTCCCATGGTGTGACGGGCGGTGTGTACAAGGCCCGGGAACGTATTCACCGCGACATTCTGATTCGCGATTACTAGCGATTCCGACTTCACGCAGTCGAGTTGCAGACTGCGATCCGGACTACGATCGGTTTTCTGGGATTAGCTCCACC
TCGCGGCTTGGCAACCCTCTGTACCGACCATTGTAGCACGTGTGTAGCCCAGGCCGTAAGGGCCATGATGACTTGACGTCATCCCCACCTTCCTCCGGTTTGTCACCGGCAGTCTCCTTAGAGTGCCCACCATTACGTGCTGGTAACTAAGGACAAGGGTTGCGCTCGTTACGGGACTTAACCCAACATCTCACGACACGAGCTGACGACAGCCATGCAGCACCTGTCTCAATGTTCCCGAAGGCACCAATCCATCTCTGGAAAGTTCATTGGATGTCAAGGCCTGGTAAGGTTCTTCGCGTTGCTTCGAATTAAACCACATGCTCCACCGCTTGTGCGGGCCCCCGTCAATTCATTTGAGTTTTAACCTTGCGGCCGTAC
TCCCCAGGCGGTCAACTTAATGCGTTAGCTGCGCCACTAAGAGCTCAAGGCTCCCAACGGCTAGTTGACATCGTTTACGGCGTGGACTACCAGGGTATCTAATCCTGTTTGCTCCCCACGCTTTCGCACCTCAGTGTCAGTATCAGTCCAGGTGGTCGCCTTCGCCACTGGTGTTCCTTCCTATATCTACGCATTTCACCGCTACACAGGAAATTCCACCACCCTCTACCATACTCTAGTCAGTCAGTTTTGAATGCAGTTCCCAGGTTGAGCCCGGGGATTTCACATCCAACTTAACTAACCACCTACGCGCGCTTTACGCCCAGTAATTCCGATTAACGCTTGCACCCTCTGTATTACCGCGGCTGCTGGCACAGAGTTAGCCGGTGCTTATTCTGTCGGTAACGTCAAAACAATCACGTATTAGGTAACTGCCCTTCCTCCCAACTTAAAGTGCTTTACAATCCGAAGACCTTCTTCACACACGCGGCATGGCTGGATCAGGCTTTCGCCCATTGTCCAATATTCCCCACTGCTGCCTCCCGTAG
GAGTCTGGACCGTGTCTCAGTTCCAGTGTGACTGATCATCCTCTCAGACCAGTTACGGATCGTCGCCTTGGTGAGCCATTACCTCACCAACTAGCTAATCCGACCTAGGCTCATCTGATAGCGCAAGGCCCGAAGGTCCCCTGCTTTCTCCCGTAGGACGTATGCGGTATTAGCGTCCGTTTCCGAACGTTATCCCCCACTACCAGGCAGATTCCTAGGCATTACTCACCCGTCCGCCGCTCTCAAGAGAAGCAAGCTTCTCTCTACCGCTCG。本發明還涉及所述的維羅納假單胞菌ZW在降解石油工業污染物中的應用。優選的，所述石油工業污染物為下列之一或其中兩種以上的混合苯、二甲苯、乙 苯、石油醚。具體的，所述應用為將維羅納假單胞菌ZW經培養獲得的菌懸液投入到含石油工 業污染物的污水中，在溫度為20 40°C，pH值為4 9的條件下培養，獲得處理后的污水。優選的，所述培養在溫度30°C、pH7. 2條件下進行，培養條件為好氧或兼性好氧。所述維羅納假單胞菌ZW用于處理含BTEX類、石油醚類的廢水時，優選的，所述廢 水中這類物質的初始濃度彡200mg/L，所述假單胞菌ZW在廢水中培養溫度為30°C、pH7. 2。 所述假單胞菌ZW在2d內對污水中初始濃度< 200mg/L的BTEX類、石油醚類污染物可實現 不同程度的降解。本發明還涉及所述的維羅納假單胞菌ZW在降解α-菔烯中的應用。具體的，所述應用為將維羅納假單胞菌ZW經培養獲得的菌懸液，加入活性污泥 中，對生物濾塔進行掛膜啟動，掛膜后的生物濾塔通入含α -菔烯的廢氣進行處理。所述維羅納假單胞菌ZW可以大大縮短生物濾塔掛膜啟動的時間，生物膜形成時間為27d左右。最大去除負荷達到43g'nT^tr1,礦化率達到68%。優選的，對濾塔進行生 物量測定，單位填料的生物量達到1. 84X IO14Cfu · πΓ3。本發明的Pseudomonas veronii ZW取自廢水處理單元，能適應復雜的實際條件， 該菌株降解污染物具有一定的廣譜性，因而在工業廢氣廢水的生物凈化中具有廣闊的應用 前景。
圖1為Pseudomonas veronii Zff的透射電鏡照片和革蘭氏染色照片；圖 2 為 Pseudomonas veronii Zff 的系統發育樹圖；圖3為不同pH下菌Pseudomonas veronii ZW對α -菔烯的降解性能比較；圖4為不同溫度下菌Pseudomonas veronii ZW對α -菔烯的降解性能比較；圖5為不同供氧方式下菌Pseudomonas veronii ZW對α -菔烯的降解性能比較；圖6為菌Pseudomonas veronii ZW對不同有機物降解性能的比較；圖7為處理α -菔烯的生物濾塔去除性能的變化曲線。
具體實施例方式下面結合具體實施例對本發明進行進一步描述，但本發明的保護范圍并不僅限于 此實施例1 :Pseudomonas veronii ZW的分離、純化及其鑒定1. Pseudomonas veronii ZW 的分離及純化Pseudomonas veronii ZW是從浙江寧波某煉化廠廢水處理站的活性污泥中馴化、 分離得到的一株革蘭氏陰性菌。具體步驟如下取浙江寧波某煉化廠廢水處理站的活性污泥。自來水淘洗五次后，空曝48h，盡量 去除殘留的有機物。配制無機鹽培養液(下同)，方法如下KH2PO4 150mg, K2HPO4 600mg, NaNO3 2250mg, NH4Cl 2860mg, MgS0460mg, CaCl2 6mg, FeSO4 3mg, ZnCl2 0. 44mg, MnCl2 0. 30mg, KI 0. 05mg, Na2MoO4 0. 50mg 和 H3BO4 0. 25mg,蒸溜水補足至 IOOOmL ；ρΗ7· 0 7· 2。上述無機鹽培養液加入α -菔烯作為唯一碳源對活性污泥進行定向馴化，3d更換 新鮮無機鹽培養液，每天測定培養液的pH，31d 33d pH明顯下降。按上述組成配制無機鹽培養基，分裝于250mL的密封玻璃瓶(50mL/個)，110°C滅 菌40min。待培養基冷卻后，加入α-菔烯(50mg/L)作為唯一碳源，將馴化的污泥按體積分 數為10%的量加入到培養基中，于30°C，160r/min的搖床培養。3d左右以10%的量轉接到 新鮮的滅菌培養基中，搖床培養。結合瓊脂無機鹽(上述無機鹽培養液加入瓊脂15g/L)平 板劃線分離，挑取單菌落接入無機鹽培養基搖床培養，直到獲得在上述培養基中生長快、菌 落規則和性狀穩定的可降解α-菔烯的單菌。2. Pseudomonas veronii ZW 白勺f 胃通過16S rRNA序列分析和生理生化實驗鑒定，確定ZW菌為Pseudomonas veronii。具體步驟如下采用3S柱離心式環境樣品DNA回收試劑盒(V2. 2，上海申能博彩生物科技有限公 司)提取和純化菌的DNA，4°C保存。選用細菌的通用引物BSF8/20和BSR1541/20對純化的DNA進行PCR擴增，引物序列分別為BSF8/20 5' -AGAGT TTGAT CCTGG CTCAG-3'BSR1541/20 5' -AAGGA GGTGA TCCAG CCGCA-3'PCR反應程序設定為先94°C預變性4min ；然后94°C變性lmin，59°C退火lmin， 72°C延伸1. 5min，循環35個周期；然后72°C延伸IOmin ；最后4°C保持lOmin。將PCR產物 進行測序(上海英濰捷基)，測序結果見序列表。將PBT的16S rDNA序列上傳到Genbank，獲得Genbank的登錄號GU357489，同時 同Genbank中的基因序列進行同源性比較，發現其屬于Pseudomonas屬，與Pseudomonas veronii(AF064460)同源性最高，達到97%，圖2 為該菌的系統發育樹圖。為了進一步確定 鑒定結果的可靠性，經過生理生化實驗，最終確定ZW屬于Pseudomonas veronii.因此，將 該菌命名為 Pseudomonas veronii Zff0實施例2 :Pseudomonas veronii ZW對α-菔烯降解性能檢測1.考察不同初始ρΗ條件下菌Pseudomonas veronii ZW對α-菔烯的降解特性在不同初始ρΗ下實施Pseudomonas veronii ZW對α -菔烯的降解實驗，發現其 在ΡΗ7.2具有較高的降解α-菔烯的能力，從實際應用角度看，ΡΗ7.2為最佳ρΗ，此時降解 率最高，具體實施步驟如下分別取600mL無機鹽培養液分裝至30個250mL的厭氧瓶中，分成三組，每組10 瓶，用lmol/L的稀鹽酸和氫氧化鈉調節培養液pH，分別為4、5、6、7、7· 2,7. 4,7. 6,7. 8、8、9， 110°C滅菌40min。待培養液冷卻后，其中兩組每瓶加入生長對數期的ZW菌懸液，使初始細 胞量達到2. 29mg cells/L，加入α -菔烯為唯一碳源，初始濃度為200mg/L，置于30°C的搖 床中160rpm培養；另取10瓶同樣培養液，不加ZW菌懸液，只加入α -菔烯，置于30°C的搖 床中同時培養，作為空白對照。培養3d后，用正己烷萃取培養液中剩余的α-菔烯，采用氣 相色譜分析其中α-菔烯濃度，同時測定菌懸液的生物量，繪制不同初始ρΗ下α-菔烯的 降解率和菌ZW生物量。結果如圖3所示，培養液初始ρΗ值偏酸或是偏堿都不利于菌ZW的生長，α -菔烯 降解率都非常低；培養液ρΗ值中性(7 8)時，菌株ZW表現出良好的生長情況，且降解率 均在90%。當ρΗ為7. 2時，3d內菌株ZW能把200mg/L的α -菔烯降解95%，且生物量達 到 108. 56mg cells/L。2.考察不同培養溫度下菌Pseudomonas veronii ZW對α-菔烯的降解特性在不同培養溫度下實施Pseudomonas veronii ZW對α -菔烯的降解實驗，結果表 明其最佳培養溫度為30°C，具體實施方案如下分別取300mL (pH7. 2)無機鹽培養液分裝至15個250mL的厭氧瓶中，分成三組，每 組5瓶，110°C滅菌40min。待培養液冷卻后，其中兩組每瓶加入生長對數期的ZW菌懸液， 使初始細胞量達到3. 58mgCells/L，加入α -菔烯為唯一碳源，初始濃度為200mg/L，置于 20°C、25°C、30°C、35°C和40 V的搖床中160rpm培養；另取5瓶同樣培養液，不加ZW菌懸液， 只加入(1-菔烯，置于201、251、301、351和401的搖床中同時培養。培養3d后，用正 己烷萃取培養液中剩余的α-菔烯，采用氣相色譜分析其中α-菔烯濃度，同時測定菌懸液 的生物量，繪制不同培養溫度下α -菔烯的降解率和菌ZW生物量。結果如圖4所示，數據表明，在20 30°C之間，隨著培養溫度升高，由于ZW中的降解酶活性增強，生化反應加快，生長及降解率提高；當溫度繼續升高到40°C，細胞中某些 對溫度敏感的物質(如降解酶)受到不可逆的破壞，生長受到了抑制，從而降解率也相應下 降。ZW最佳培養溫度選擇30°C，3d內能把200mg/L的α -菔烯降解97 %，且生物量達到 104.42mg cells/L。3.考察不同供氧方式下菌Pseudomonas veronii ZW對α-菔烯的降解特性
在不同供氧方式下實施Pseudomonas veronii ZW對α -菔烯的降解實驗，結果表 明其最佳生長條件為好氧，具體實施方案如下分別取240mL (pH7. 2)無機鹽培養液分裝至12個250mL的厭氧瓶中，分成三組，每 組4瓶，110°C滅菌40min。待培養液冷卻后，其中兩組每瓶加入生長對數期的PBT菌懸液， 使初始細胞量達到5. 48X 107cells/mL，加入α -菔烯為唯一碳源，初始濃度為200mg/L，采 用以下方式培養(1)靜置；(2)搖床轉動；(3)充氧靜置；(4)充氮后搖床轉動；(5)充氧轉 動。培養2d后，用正己烷萃取培養液中剩余的α-菔烯，采用氣相色譜分析其中α-菔烯 濃度，同時測定菌懸液的生物量，繪制不同供氧方式下α “菔烯的降解率和菌ZW生物量。結果如圖5所示。菌ZW降解α-菔烯的過程需要氧氣的參與，但是氧氣濃度過高 時，反而會使菌ZW對α _菔烯的降解能力下降。充氮轉動是一個相對兼性好氧的環境，菌ZW 也表現出一定的降解能力，但生物量的增長有限；此外，搖床轉動培養也能促進氧氣和降解 底物的傳質過程。因此。菌ZW對α-菔烯的降解能力在好氧的條件下最強，兼性好氧的條 件也有一定的降解能力。實施例3 :Pseudomonas veronii ZW對苯系物、石油醚等物質降解性能檢測分別以苯、甲苯、乙苯、二甲苯和石油醚作為唯一碳源，考察菌ZW對于這些物質的 降解能力。結果表明，菌ZW能降解苯、乙苯、鄰二甲苯、對二甲苯、間二甲苯和石油醚，但不 能降解甲苯。具體實施方案如下分別取360mL(pH7. 2)無機鹽培養液分裝至18個250mL的厭氧瓶中，分成三組，每 組6瓶，110°C滅菌40min。待培養液冷卻后，其中兩組每瓶加入生長對數期的ZW菌懸液，使 初始細胞量達到4. 85mgCells/mL，分別加入α -菔烯、苯、甲苯、乙苯、二甲苯和石油醚作為 唯一碳源，初始濃度均為200mg/L，置于30°C的搖床中160rpm培養；另取6瓶相同培養液， 不加ZW菌懸液，分別只加入以上各種碳源，置于30°C的搖床中同時培養，作為空白對照。培 養2d后，用正己烷萃取培養液中剩余的各種有機碳源，采用氣相色譜分析其濃度，同時測 定菌懸液的生物量，繪制不同有機碳源的降解率和菌ZW生物量。結果如圖6所示。菌ZW能不同程度地降解苯、乙苯、鄰二甲苯、對二甲苯、間二甲 苯和石油醚，但不能降解甲苯，而且在以甲苯為唯一碳源的無機鹽培養基中生物量幾乎沒 有變化。菌ZW能降解多種烴類化合物，擴大了其應用范圍，特別是在石化工業的應用。實施例4 利用Pseudomonas veronii Zff接種生物滴濾塔，處理α -菔烯模擬廢 氣利用ZW菌液和活性污泥對生物滴濾塔進行掛膜啟動，處理α -菔烯模擬廢氣。生 物膜形成時間為大約需27d。穩定運行期，濾塔對于α-菔烯去除性能和礦化性能較好。具 體實施方案如下配制5L無機鹽培養液(ρΗ 7. 2)，裝于5L發酵罐，110°C滅菌40min。冷卻后，接種 處于生長對數期的ZW菌液，使發酵罐內生物量達到5. 08mgcells/L,加入α -菔烯作為生長碳源。在線監測發酵罐內PH和氧飽和狀態，使其始終維持在pH 7.2左右和80%的氧飽和。3d后，發酵罐內生物量達到154. 42mg cells/L。9000rpm離心IOmin獲得菌體，懸浮于 PH 7. 2的磷酸鹽緩沖溶液中。與馴化后的污泥按按體積比1 3混合后，浸泡生物載體填 料，2d后將填料裝入生物滴濾塔中。在營養液液pH6 7、α-菔烯進口濃度386mg*nT3 886mg*nT3、空床停留時間(EBRT) 58s的條件下，采用以α -菔烯為氣相、菌懸液加馴化污泥 為液相的氣液相聯合方法進行掛膜。 結果如圖7(a)所示。滴濾塔在掛膜啟動初期(EBRT58S、進口濃度維持在 400mg · m_3左右)，去除率變化均不明顯。滴濾塔從第13d開始去除率明顯升高，到第17d 達100%。為了確定生物膜生長是否成熟，第19d提高進口濃度至600mg · m_3，滴濾塔的去 除率逐漸升高并穩定在88%左右；當濃度再提高到860mg · m_3左右時，去除率也一直維持 在60%左右，這說明濾塔的掛膜啟動基本完成。生物濾塔穩定運行期去除性能如圖7(b) 所示。當進口濃度較低時，滴濾塔對α-菔烯的去除效率可以達到100%，去除負荷、CO2 出口濃度隨著進口濃度的增大而增大。進口濃度進一步提高后，去除率逐漸變小，濾塔對 α-菔烯的去除能力不再增加，而是維持在一個固定值，此時濾塔的降解性能達到最大值。 當EBRT29S，進口濃度418mg ·πΓ3時，去除負荷達到最大值(43g ·πΓ3 .h—1)。當EBRT為102s 時，模擬廢氣在濾塔內有足夠長的停留時間，生物膜能較為完全地降解底物，因此當α-菔 烯進口濃度為910mg · m_3時，CO2出口濃度達到最大值2780mg · m_3。
權利要求
一株具有α-蒎烯降解能力的維羅納假單胞菌(Pseudomonas veronii)ZW，保藏于中國典型培養物保藏中心，地址中國 武漢 武漢大學，430072，保藏編號CCTCC NOM 209313，保藏日期2009年12月24日。
2.如權利要求1所述的維羅納假單胞菌ZW，其特征在于所述維羅納假單胞菌ZW菌落 特征如下菌落呈乳白色，不透明，邊緣光滑，具有黏性。透射電鏡下觀察該菌體的形態為稍 長桿菌，具有鞭毛，革蘭氏染色陰性，氧化酶陽性，淀粉水解和明膠水解陽性，接觸酶陽性。
3.如權利要求1所述的維羅納假單胞菌ZW，其特征在于所述維羅納假單胞菌 ZW16srRNA基因序列如下CAGTCATGAATCACACCGTGGTAACCGTCCCCCCGAAGGTTAGACTAGCTACTTCTGGTGCAACCCACTCCCATGGTGTGACGGGCGGTGTGTACAAGGCCCGGGAACGTATTCACCGCGACATTCTGATTCGCGATTACTAGCGATTCCGACTTCACGCAGTCGAGTTGCAGACTGCGATCCGGACTACGATCGGTTTTCTGGGATTAGCTCCACCTCGCGGCTTGGCAACCCTCTGTACCGACCATTGTAGCACGTGTGTAGCCCAGGCCGTAAGGGCCATGATGACTTGACGTCATCCCCACCTTCCTCCGGTTTGTCACCGGCAGTCTCCTTAGAGTGCCCACCATTACGTGCTGGTAACTAAGGACAAGGGTTGCGCTCGTTACGGGACTTAACCCAACATCTCACGACACGAGCTGACGACAGCCATGCAGCACCTGTCTCAATGTTCCCGAAGGCACCAATCCATCTCTGGAAAGTTCATTGGATGTCAAGGCCTGGTAAGGTTCTTCGCGTTGCTTCGAATTAAACCACATGCTCCACCGCTTGTGCGGGCCCCCGTCAATTCATTTGAGTTTTAACCTTGCGGCCGTACTCCCCAGGCGGTCAACTTAATGCGTTAGCTGCGCCACTAAGAGCTCAAGGCTCCCAACGGCTAGTTGACATCGTTTACGGCGTGGACTACCAGGGTATCTAATCCTGTTTGCTCCCCACGCTTTCGCACCTCAGTGTCAGTATCAGTCCAGGTGGTCGCCTTCGCCACTGGTGTTCCTTCCTATATCTACGCATTTCACCGCTACACAGGAAATTCCACCACCCTCTACCATACTCTAGTCAGTCAGTTTTGAATGCAGTTCCCAGGTTGAGCCCGGGGATTTCACATCCAACTTAACTAACCACCTACGCGCGCTTTACGCCCAGTAATTCCGATTAACGCTTGCACCCTCTGTATTACCGCGGCTGCTGGCACAGAGTTAGCCGGTGCTTATTCTGTCGGTAACGTCAAAACAATCACGTATTAGGTAACTGCCCTTCCTCCCAACTTAAAGTGCTTTACAATCCGAAGACCTTCTTCACACACGCGGCATGGCTGGATCAGGCTTTCGCCCATTGTCCAATATTCCCCACTGCTGCCTCCCGTAGGAGTCTGGACCGTGTCTCAGTTCCAGTGTGACTGATCATCCTCTCAGACCAGTTACGGATCGTCGCCTTGGTGAGCCATTACCTCACCAACTAGCTAATCCGACCTAGGCTCATCTGATAGCGCAAGGCCCGAAGGTCCCCTGCTTTCTCCCGTAGGACGTATGCGGTATTAGCGTCCGTTTCCGAACGTTATCCCCCACTACCAGGCAGATTCCTAGGCATTACTCACCCGTCCGCCGCTCTCAAGAGAAGCAAGCTTCTCTCTACCGCTCG。
4.如權利要求1所述的維羅納假單胞菌ZW在降解石油工業污染物中的應用。
5.如權利要求4所述的應用，其特征在于所述石油工業污染物為下列之一或其中兩種 以上的混合苯、二甲苯、乙苯、石油醚。
6.如權利要求4或5所述的應用，其特征在于所述應用為將維羅納假單胞菌ZW經培養獲得的菌懸液投入到含石油工業污染物的污水中，在溫度為20 40°C，pH值為4 9的 條件下培養，獲得處理后的污水。
7.如權利要求6所述的應用，其特征在于所述培養在溫度30°C、pH7.2條件下進行，培 養條件為好氧或兼性好氧。
8.如權利要求1所述的維羅納假單胞菌ZW在降解α-菔烯中的應用。
9.如權利要求8所述的應用，其特征在于所述應用為將維羅納假單胞菌ZW經培養獲 得的菌懸液，加入活性污泥中，對生物濾塔進行掛膜啟動，掛膜后的生物濾塔通入含α-菔 烯的廢氣進行處理。
全文摘要
本發明提供了一種具有α-蒎烯降解能力的維羅納假單胞菌(Pseudomonas veronii)ZW及其應用，該菌株保藏于中國典型培養物保藏中心，地址中國武漢武漢大學，430072，保藏編號CCTCC NOM209313，保藏日期2009年12月24日。本發明的Pseudomonas veronii ZW取自廢水處理單元，能適應復雜的實際條件，該菌株降解污染物具有一定的廣譜性，因而在工業廢氣廢水的生物凈化中具有廣闊的應用前景。
文檔編號C02F101/32GK101838623SQ201010108779
公開日2010年9月22日 申請日期2010年2月7日 優先權日2010年2月7日
發明者應佳, 成卓韋, 蔣軼鋒, 陳建孟 申請人:浙江工業大學