一種新型導流柱式抗體結合收集管的制作方法
【專利摘要】本實用新型公開一種新型導流柱式抗體結合收集管。它包括抗體結合收集管管體，在抗體結合收集管管體內還具有圓柱體。本實用新型在抗體結合收集管管體內設置圓柱體，其能夠起到很好的引流作用，使抗體和Protein?A或G瓊脂糖樹脂珠的混合液在低轉速條件下能夠輕易溫和的流動，從而更好的混合均勻，使抗體更加均勻有效的結合到Protein?A或G瓊脂糖樹脂珠上。
【專利說明】一種新型導流柱式抗體結合收集管
【技術領域】:
[0001]本實用新型屬于生物器械領域，具體涉及一種新型導流柱式抗體結合收集管。
【背景技術】:
[0002]目前在科研和檢測工作中驗證蛋白質之間的相互作用的方法主要有，酵母雙雜交，Pulldown和免疫共沉淀等,其中免疫共沉淀(Co-1mmunoprecipitation, Co-1P)是最為有效、直接的證明蛋白之間相互作用的方法，現在幾乎所有的文獻報道中證明蛋白之間相互作用的實驗都是使用免疫共沉淀的方法來證實。其具體的原理是，利用抗體將相應特定分子沉淀的同時，與該分子特異性結合的其他分子也會被帶著一起沉淀出來的技術。這種技術常用于驗證蛋白質之間相互特異性結合。即:先將抗興趣蛋白的抗體與瓊脂糖樹脂珠一起撫育，使其結合到瓊脂糖樹脂珠上的Protein A或G上，即抗體結合實驗部分。然后將含有我們感興趣的蛋白的細胞裂解液加入到之前結合了抗體的瓊脂糖樹脂珠收集管中進行撫育，孵育后若細胞中含有與興趣蛋白結合的目的蛋白，就可以形成這樣一種復合物:“目的蛋白一興趣蛋白一抗興趣蛋白抗體一Protein A或G瓊脂糖樹脂珠”，然后經變性聚丙烯酰胺凝膠電泳，復合物又被分開。然后經免疫印跡或質譜檢測目的蛋白。這種方法得到的目的蛋白是在細胞內與興趣蛋白天然結合的，符合體內實際情況，得到的結果可信度高。這種方法常用于測定兩種目標蛋白質是否在體內結合；也可用于確定一種特定蛋白質的新的作用搭檔。其主要具有一下優點:
[0003](I)相互作用的蛋白質都是經翻譯后修飾的，處于天然狀態。
[0004](2)蛋白的相互作用是在自然狀態下進行的，可以避免人為的影響。
[0005](3)可以分離得到天然狀態的相互作用蛋白復合物。
[0006]然而，現行的免疫共沉淀試劑盒中抗體結合的試驗部分，存在一定的問題即:
[0007]抗體與Protein A或G瓊脂糖樹脂珠結合時由于混合液體表面張力大，難以形成液流，使其難以均勻有效的結合，導致抗體與興趣蛋白的結合效率下降，可能使得結果出現假陰性，進而影響實驗的結論可靠性。
[0008]具體為抗體和Protein A或G瓊脂糖樹脂珠及一些試劑加到抗體結合收集管中時，由于形成的混合液濃度及成分的變化，使其混合液體表面的張力和粘度增大，因此在均勻搖動的過程中需要很高的轉速才能使得液體沖破表面張力，形成液流。但是在這種高轉速的情況下形成的液流速度過大，抗體和Protein A或G瓊脂糖樹脂珠很難結合,導致抗體結合的效率大幅度減小，如果抗體結合的少，將影響其后面的與蛋白結合，進而影響拉下目的蛋白的實驗，可能使實驗出現假陰性或是弱陽性的結果，致使整體實驗的結論受到影響，因此保證抗體與Protein A或G瓊脂糖樹脂珠的結合率對用免疫共沉淀法來驗證蛋白之間的相互作用尤為重要。具體的原因是目前的抗體結合收集管(圖1所示)，由于其內壁光滑，無任何導流裝置，對液體沒有導流作用，抗體與Protein A或G瓊脂糖樹脂珠形成的混合液表面張力很大，不在高轉速條件下，難以形成流動液流，難以搖勻，而在這種高速轉動的條件下，即使形成液體的混合流動，抗體與Protein A或G瓊脂糖樹脂珠也難以均勻有效結合的。
【發明內容】
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[0009]本實用新型的目的是提供一種能夠在低轉速的情況下，也能形成混合液液流，從而使抗體與Protein A或G瓊脂糖樹脂珠能均勻有效結合的新型導流柱式抗體結合收集管。
[0010]本實用新型是通過以下技術方案予以實施的:
[0011]本實用新型的新型導流柱式抗體結合收集管，包括抗體結合收集管管體，其特征在于，在抗體結合收集管管體內還具有圓柱體。
[0012]優選，所述的圓柱體的直徑(橫截面)為抗體結合收集管內壁直徑的1/5，長度為抗體結合收集管管身長度的2/3。
[0013]所述的圓柱體只要放于抗體結合收集管管內都能起到效果，優選豎直貼于抗體結合收集管的內壁上。
[0014]本實用新型在抗體結合收集管管體內設置圓柱體，其能夠起到很好的引流作用，使抗體和Protein A或G瓊脂糖樹脂珠的混合液在低轉速條件下能夠輕易溫和的流動,從而更好的混合均勻，使抗體更加均勻有效的結合到Protein A或G瓊脂糖樹脂珠上。其原理在于，液體對突起弧線有一定的吸附作用，在有突起弧線存在的條件下，液體會對弧形突起有一定的吸附作用更易隨著突起線條流動。這樣就可以減少液體沖破表面張力所需要的動量，減少形成液流所需的轉速，使得搖勻時轉速條件更加溫和，這樣Protein A或G瓊脂糖樹脂珠就能夠在底轉速的條件下，溫和的在混合液中懸浮流動，抗體也更容易均勻地與Protein A或G瓊脂糖樹脂珠有效結合。
[0015]本實用新型的新型導流柱式抗體結合收集管相比于現有技術的抗體結合收集管，其具有以下優點:
[0016]1、相比目前通用的光滑內壁的抗體結合收集管更加容易使得液體在內壁產生流動，這樣可以在搖床上任意轉速下隨意的控制液體的流動速度，更好的控制抗體與瓊脂糖樹脂的撫育結合。
[0017]2、本實用新型的新型導流柱式抗體結合收集管還可以用于其它的實驗用途，如一些藥物的搖勻，防止沉積。溶液的混勻，磁珠的混勻，各種液體物質的均勻混合等。
[0018]3、本實用新型的新型導流柱式抗體結合收集管能夠很好的應用與免疫沉淀實驗中抗體的撫育，有利于更好的純化蛋白質。
[0019]4、本實用新型的新型導流柱式抗體結合收集管能夠更溫和的搖勻，更好的保護抗體和蛋白質的天然活性狀態，進而得到理想的實驗效果。
[0020]5、本實用新型的新型導流柱式抗體結合收集管的結構簡單，增強抗體和ProteinA或G瓊脂糖樹脂珠結合的效果明顯。
【專利附圖】
【附圖說明】:
[0021]圖1是現有技術中的抗體結合收集管的結構示意圖；
[0022]圖2是本實用新型的新型導流柱式抗體結合收集管的結構示意圖；
[0023]其中1、抗體結合收集管管體；2、圓柱體。【具體實施方式】:
[0024]以下是對本發明的進一步說明，而不是對本發明的限制。
[0025]實施例1:
[0026]如圖2所示，本實施例的新型導流柱式抗體結合收集管，包括抗體結合收集管管體I,在抗體結合收集管管體內壁上還豎直貼有一圓柱體2，圓柱體的直徑(橫截面)為抗體結合收集管內壁直徑的1/5，長度為抗體結合收集管管身長度的2/3。
【權利要求】
1.一種新型導流柱式抗體結合收集管，包括抗體結合收集管管體，其特征在于，在抗體結合收集管管體內還具有圓柱體。
2.根據權利要求1所述的新型導流柱式抗體結合收集管，其特征在于，所述的圓柱體的直徑為抗體結合收集管內壁直徑的1/5，長度為抗體結合收集管管身長度的2/3。
3.根據權利要求1或2所述的新型導流柱式抗體結合收集管，其特征在于，所述的圓柱體豎直貼于抗體結合收集管的內壁上。
【文檔編號】B01D15/22GK203494219SQ201320497668
【公開日】2014年3月26日 申請日期:2013年8月14日 優先權日:2013年8月14日
【發明者】李志遠, 尹士魁, 李彩月, 馬文波 申請人:中國科學院廣州生物醫藥與健康研究院