三恒溫部件中72 °C的溫度下將樣品溫育60秒；
[0065]e)將步驟b)至步驟d)重復30次；以及
[0066]f)在第三恒溫部件中保持7 2 °C的溫度下將樣品溫育5分鐘。
[0067]上述核酸擴增儀可以為專用于檢測K-ras基因的核酸擴增儀。
[0068]本發明的另一個目的在于，提供一種檢測特定靶標核酸的方法，所述方法包括使用上述一鍵式核酸擴增儀。
[0069]在本發明的一個優選的實施方式中，當所述恒溫部件的個數為兩個或兩個以上時，通過所述位移部件將樣品與一個恒溫部件分離并置于另一恒溫部件中為恒溫部件靜止，通過所述位移部件使得樣品移動，或者為樣品靜止，通過所述位移部件使得恒溫部件移動，并且
[0070]所述移動為直線移動或圓周移動。
[0071]在本發明的一個優選的實施方式中，所述特定靶標核酸為HPV病毒或尖銳濕疣，所述方法包括如下步驟:
[0072]a)在第一恒溫部件中46-50 V的溫度下將樣品溫育1_5分鐘；
[0073]b)在第二恒溫部件中92_97°C的溫度下將樣品溫育2-6分鐘；
[0074]c)在第二恒溫部件中92_97°C的溫度下將樣品溫育28-32秒；
[0075]d)在第二恒溫部件中46_50°C的溫度下將樣品溫育43-47秒；
[0076]e)在第三恒溫部件中70_74°C的溫度下將樣品溫育18_22秒；
[0077]f)將步驟c)至步驟e)重復28-32次；
[0078]g)在第二恒溫部件中92_97°C的溫度下將樣品溫育28-32秒；
[0079]h)在第四恒溫部件中63-67 V的溫度下將樣品溫育43_47秒；
[0080]i)在第三恒溫部件中70_74°C的溫度下將樣品溫育18-22秒；以及[0081 ]j)將步驟c)至步驟e)重復18-22次。
[0082]在本發明的一個優選的實施方式中，所述特定靶標核酸為HPV病毒或尖銳濕疣，所述方法包括如下步驟:
[0083]a)在第一恒溫部件中48 V的溫度下將樣品溫育2分鐘；
[0084]b)在第二恒溫部件中94°C的溫度下將樣品溫育4分鐘；
[0085]c)在第二恒溫部件中94°C的溫度下將樣品溫育30秒；
[0086]d)在第二恒溫部件中48 0C的溫度下將樣品溫育45秒；
[0087]e)在第三恒溫部件中72°C的溫度下將樣品溫育20秒；
[0088]f)將步驟c)至步驟e)重復30次；
[0089]g)在第二恒溫部件中94°C的溫度下將樣品溫育30秒；
[0090]h)在第四恒溫部件中65 °C的溫度下將樣品溫育45秒；
[0091]i)在第三恒溫部件中72°C的溫度下將樣品溫育20秒；以及[0092 ]j)將步驟c)至步驟e)重復2O次。
[0093]在本發明的一個優選的實施方式中，所述特定革El標核酸為K-ras基因，所述方法包括如下步驟:
[0094]a)在第一恒溫部件中92_97°C的溫度下將樣品溫育3-8分鐘；
[0095]b)在第一恒溫部件中92_97°C的溫度下將樣品溫育28-32秒；
[0096]c)在第二恒溫部件中53_57°C的溫度下將樣品溫育43-47秒；
[0097]d)在第三恒溫部件中70_74°C的溫度下將樣品溫育58-62秒；
[0098]e)將步驟b)至步驟d)重復29-31次；以及
[0099]f)在第三恒溫部件中保持70_74°C的溫度下將樣品溫育2-8分鐘。
[0100]在本發明的一個優選的實施方式中，所述特定革El標核酸為κ-ras基因，所述方法包括如下步驟:
[0101]a)在第一恒溫部件中94°C的溫度下將樣品溫育5分鐘；
[0102]b)在第一恒溫部件中94°C的溫度下將樣品溫育30秒；
[0103]c)在第二恒溫部件中55 °C的溫度下將樣品溫育45秒；
[0104]d)在第三恒溫部件中72 °C的溫度下將樣品溫育60秒；
[0105]e)將步驟b)至步驟d)重復30次；以及
[0106]f)在第三恒溫部件中保持7 2 °C的溫度下將樣品溫育5分鐘。
[0107]本發明的有益效果在于:本發明的單程序、一鍵式核酸擴增儀，可以實現核酸的快速擴增，具備控溫精確、使用壽命長、不同溫度之間轉換快、價格低廉、一鍵式簡單操作等特點。具體的，本發明的核酸擴增儀價格低廉，適用于一些購買力較弱的鄉鎮醫院、縣級醫院、個人醫院等。同時，本發明的核酸擴增儀一鍵式簡單操作，無需專業培訓。本發明的核酸擴增儀特別適用于檢測特定靶標核酸，檢測效果極佳。另一方面，本儀器還可按照任意體外診斷試劑中需要核酸樣本擴增步驟的產品進行定制。
【具體實施方式】
[0108]下面結合非限制性的具體實施例對本發明作進一步說明，但本發明的保護范圍并不局限于下述實施例。以下實施例所使用的檢測樣本為通過江蘇省某醫院采集得到，所用的各種試劑均為本領域常規的材料、試劑，均通過常規市售渠道購買得到。
[0109]實施例1
[0110]為了檢測病人是否感染HPV病毒以及感染的HPV的具體型別，從宮頸脫落細胞中提取DNA，依次做好標記，向各PCR管中加入對應的DNA模板、DNA聚合酶、dNTP等，并混合均勻。將擴增混合液置于本發明的核酸擴增儀中，按下開始按鈕。首先PCR管進入48°C溫控模塊溫育2!!^11，其次進入94°(:溫育41^11，然后進入(941€308，481€458，721€208)溫育循環30次，之后進入(94°C30s，65°C45s，72°C20s)溫育循環20次，反應結束，儀器結束鈴聲響起，取出，進行雜交檢測，以檢測病人是否感染HPV病毒以及感染的HPV的具體型別，并將檢測結果與用其他方法得出的正確結果進行對比。0C 0C 0C 0C 0C 0C 0C 0C用100個樣本上述實驗重復100次，檢測結果的正確率為97%，其中假陰性率為1%，假陽性率為2%。
[0111]實施例2
[0112]為了檢測病人是否感染尖銳濕疣，從病人疣體上取樣提取DNA，依次做好標記，向各PCR管中加入對應的DNA模板、DNA聚合酶、dNTP等，并混合均勻。將擴增混合液置于本發明的核酸擴增儀中，按下開始按鈕，首先PCR管進入48°C溫控模塊溫育2min，其次進入94°C溫育 4min，然后進入(941€308，481€458，721€208)溫育循環30次，之后進入(941€308，651€45s，72°C20s)溫育循環20次，反應結束，儀器結束鈴聲響起，取出，進行雜交檢測，以檢測病人是否感染尖銳濕疣，并將檢測結果與用其他方法得出的正確結果進行對比。用100個樣本上述實驗重復100次，檢測結果的正確率為98%，其中假陰性率為1%，假陽性率為1%。
[0113]實施例3
[0114]為了檢測κ-ras基因，從病人取樣提取DNA樣本，依次做好標記，向各PCR管中加入對應的DNA模板、DNA聚合酶、dNTP等，并混合均勻。將擴增混合液置于本發明的核酸擴增儀中，按下開始按鈕，首先EP管或PCR管進入94°C溫控模塊溫育5min，然后進入(94°C30s，55°C45s，72°Clmin)溫育循環30次，之后進入72°C溫育5min，反應結束，儀器結束鈴聲響起，取出，進行雜交檢測，以檢測病人的K-ras基因，并將檢測結果與用其他方法得出的正確結果進行對比。用100個樣本上述實驗重復100次，檢測結果的正確率為97%，其中假陰性率為1%，假陽性率為2%。
[0115]對比例I
[0116]其他條件與實施例3相同，不同之處僅在于，在EP管進入94°C溫控模塊溫育5min之后，進入(941€308，501€458，72°(:11^11)溫育循環30次，再進入72°(:溫育51^11，即退火溫度較低。將檢測結果與用其他方法得出的正確結果進行對比。用100個樣本上述實驗重復100次，檢測結果的正確率為57%，其中假陰性率為1%，假...