例，稱取各原料，依次將酵素粉、植物乳桿菌粉、藍莓粉、麥芽糊精、蜂 蜜粉、低聚糖加入V型混合罐均勻混合28min，攪拌轉速25r/min，然后加入改性膳食纖維均 勾混14min，攪拌轉速45r/min，無菌灌裝、密封、包裝即得可降低膽固醇的藍莓復合粉；
[0137] 上述無菌灌裝采用自動粉狀灌裝機灌裝，同時采用6t3Co輻照滅菌，輻照劑量4kGy;
[0138] 上述可降低膽固醇的藍莓復合粉采用鋁塑復合袋灌裝;所述鋁塑復合袋灌裝前采 用臭氧消毒20min。
[0139] 經上述方法制備的可降低膽固醇的藍莓復合粉植物乳桿菌活菌含量為6.84 X IO11CfuZg0
[0140] 實施例六：
[0141] -種可降低膽固醇的藍莓復合粉，主要由以下重量份數的原料制備：
[0142] 藍莓粉50份，蜂蜜粉20份，改性膳食纖維15份，低聚糖12份，植物乳桿菌粉12份，酵 素粉10份，麥芽糊精10份；
[0143] 其中低聚糖為低聚半乳糖；
[0144] 其中藍莓粉的制備方法，包括以下步驟：
[0145] 將藍莓放入盛有0.3%碳酸氫鈉溶液的超聲波清洗機中，于室溫下200W、45KHz清 洗5min，瀝干，每個藍莓果任意切分成四份，單層平鋪在微波干燥機中于功率5kW、溫度120 °C、干燥5s，然后浸泡在質量百分比濃度為8 %的絲膠肽溶液中IOmin，取出，于-18°C冷凍 50min后立即進行粉碎，粉碎物粒徑0.3mm,接著加入粉碎物質量3倍的水，用乳酸調節pH值 為3.5，于室溫下在電場強度35kV/cm，脈沖時間300ys，脈沖頻率300Hz條件下進行高壓脈沖 電場處理20min;然后于室溫在功率300W條件下進行微波輻照提取15min，同時在功率300W， 頻率30KHz條件下進行超聲波輔助提取；加入提取液質量2.5%的混合酶，于40°C酶解 50min，酶解液過濾，濾液減壓濃縮、冷凍干燥至水分含量為5 %即得藍莓粉；
[0146] 上述混合酶為纖維素酶、蛋白酶、果膠酶、單寧酶按質量比4:1:3:1均勻混合。
[0147] 可降低膽固醇的藍莓復合粉的制備方法，包括如下步驟：
[0148] 按照配方比例，稱取各原料，依次將酵素粉、植物乳桿菌粉、藍莓粉、麥芽糊精、蜂 蜜粉、低聚糖加入V型混合罐均勻混合33min，攪拌轉速35r/min，然后加入改性膳食纖維均 勾混17min,攪拌轉速55r/min,無菌灌裝、密封、包裝即得可降低膽固醇的藍莓復合粉；
[0149] 上述無菌灌裝采用自動粉狀灌裝機灌裝，同時采用6t3Co輻照滅菌，輻照劑量4kGy;
[0150] 上述可降低膽固醇的藍莓復合粉采用鋁塑復合袋灌裝;所述鋁塑復合袋灌裝前采 用臭氧消毒40min。
[0151] 經上述方法制備的可降低膽固醇的藍莓復合粉植物乳桿菌活菌含量為6.96 X IO11CfuZg0
[0152] 實驗例七食用藍莓復合粉后總膽固醇的變化
[0153] 選總膽固醇180mg/dl-250mg/dl的成年人48名，男女各半，隨機分成三組；第一組 每天晚餐飲用150毫升礦泉水;第二組每天晚餐沖飲普通市售藍莓復合粉150g，第三組每天 晚餐沖飲本發明實施例2的藍莓復合粉150g，期間每天食用同樣的食物，食物包括肉、蛋、蔬 菜和水果。分別在實驗開始的前一天和第20、40、60天采集試驗者的血液，測定血液中的總 膽固醇含量，結果如表1:
[0154]表1:血液中總膽固醇含量檢測結果
[0156] 由上表可知沖飲本發明實施例2的藍莓復合粉后，成年人血液中的總膽固醇的含 量發生明顯變化。與普通市售藍莓復合粉相比，本發明藍莓復合粉對成年人血液中的總膽 固醇的含量明顯的降低，而礦泉水組成年人血液中的總膽固醇的含量明顯的增加，市售藍 莓復合粉雖然有所降低，但與本發明產品相比，效果不顯著，由此可知，本發明采用具有降 低膽固醇特性的特定菌株制備的藍莓復合粉具有很好的降低膽固醇的保健效果。
[0157] 需要說明的是:本發明實施例3-6所制備的藍莓復合粉同樣具有上述技術效果，各 實施例之間差異性不顯著。
[0158] 實施例八本發明藍莓復合粉保質期內植物乳桿菌活菌含量穩定性試驗
[0159] 取本發明實施例2制備的藍莓復合粉于室溫22-25Γ、通風條件下分別儲藏3個月、 6個月、12個月、24個月、36個月并測定植物乳桿菌活菌含量，結果如表2:
[0160] 表2:保質期內植物乳桿菌活菌含量檢測結果
[0162] 以上結果表明：本發明藍莓復合粉的儲存穩定性較好，抗環境(溫度、適度、氧氣、 光照、水分等)影響因素能力大，保質期植物乳桿菌活菌含量損失率最大(36個月）為15%， 比現有的同類產品活菌含量高、損失率低、保質期長，同時反映出藍莓復合粉的其它生物活 性成分具有同樣的儲存穩定性。
[0163] 需要說明的是:本發明實施例3-6制備的藍莓復合粉同樣具有上述實驗效果，各實 施例之間及與上述實驗效果差異性不大。
[0164] 實施例九本發明藍莓復合粉的感官品評試驗
[0165] 邀請24名人員對本發明實施例2制備的藍莓復合粉與市售兩種同類相同生產日期 的藍莓復合粉進行品評，感官打分，其中專業和非專業人員各12名，專業人員青年、中年、老 年各4名，男女各半，非專業人員少年、青年、中年、老年各3名，男女各半;打分包括外觀(20 分）、質地(25分）、風味(30分）、口感(25分）四個方面，打分人員獨立進行，互不影響，以保證 品評結果準確。對品評結果進行了統計，均分值取近似值，保留整數，具體見表3:
[0166] 表3:感官品評統計結果
[0168] 注：同一行內標不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，標不同大寫字母表示差異 極顯著(P<〇.01)，標有相同字母表示差異不顯著(P>〇.05)。
[0169]以上結果表明，本發明制備的藍莓復合粉從外觀、質地、風味和口感任何一方面都 要明顯優于市售藍莓復合粉，特別是外觀、風味和口感極好，同時也適合不同年齡段、不同 消費層次的消費者食用。
[0170]需要說明的是:本發明實施例3-6制備的藍莓復合粉同樣具有上述實驗效果，各實 施例之間及與上述實驗效果差異性不大。
[0171] 實施例十本發明藍莓復合粉益生性試驗
[0172] 將本發明實施例2制備的藍莓復合粉，用無菌水制備成活菌數為2X101()CFU/mL的 植物乳桿菌溶液，于4°C保存備用；
[0173] 1、取保存好的IOmL植物乳桿菌溶液注入到試管1中，采用十倍逐級稀釋至10Λ取 ImL稀釋液在平板上，將滅菌后冷卻至45°C的MRS瓊脂培養基傾注在平板(滅菌)上，迅速搖 勻。再將裝有IOmL植物乳桿菌溶液的試管2置于80-90°C水浴鍋中加熱15-25min，取加熱后 的植物乳桿菌溶液進行十倍逐級稀釋至10- 8,取ImL稀釋液在平板上，將滅菌后冷卻至45°C 的MRS瓊脂培養基傾注在平板(滅菌）上并迅速搖勻。最后將加熱前和加熱后的平板均在35 °C條件下培養24h，計算加熱前后的數量。
[0174] 結果表明，活菌存活率達到了88%以上。
[0175] 2、模擬胃液及腸液的耐受試驗：取100g/L的鹽酸16.4mL加蒸餾水稀釋，使pH值分 別為1.5、2.5和3.5,取IOOmL稀鹽酸溶液，分別加入Ig胃蛋白酶，使其充分溶解，得模擬胃 液，微孔濾膜除菌(0 · 22μπι)備用。取磷酸二氫鉀6 · 8g，加水500mL使溶解，用0 · ImoL/L氫氧化 鈉溶液調節pH值至6.8;另取胰蛋白酶IOg，加水IOOmL使溶解，將兩液混合后，加水稀釋至 1000ml，得模擬腸液，微孔濾膜除菌(0.22μπι)備用。取ImL保存好的植物乳桿菌溶液加入到 9mL的模擬胃液中（即十倍逐級稀釋），并迅速在振蕩器上充分混勻，然后置于30-45Γ靜置 培養2-4h。分別在11 1、211、311、411的時候取出培養液并立即計數殘存活菌數，與原活菌數進行 比較，結果表明，活菌存活率為98 %。然后取在人工胃液中消化不同時間的培養液各ImL，分 別接種于9mL pH值為6.8的人工腸液中，置于30-45°(：靜置培養2-411，并分別在0、3、6、2411取 樣，測定其活菌數，與原活菌數進行比較，結果表明活菌存活率為99%。
[0176] 3、模擬膽鹽的耐受試驗:用胰液素制成lg/L的溶液，并在溶液中加入0.8%的豬膽 鹽，用10 %的NaOH調整pH為8.0，然后用0.45μπι微濾膜過濾并除菌。將0.5mL保存好的植物乳 桿菌溶液接種到4.5mL模擬膽鹽中，培養24h后得到培養液，計數殘存的活菌數。將培養液在 滅菌生理鹽水中十倍逐級稀釋至10-8,并用MRS傾注，然后置于35°C靜置培養24h。結果表明 活菌存活率為99 %。
[0177]以上試驗結果表明，本發明藍莓復合粉中的植物乳桿菌益生性(耐熱性、耐pH性、 耐膽鹽)較強，非常適合人體胃腸環境，在模擬胃腸環境中存活率大，可有效改善胃腸功能。 [0178]需要說明的是:本發明實施例3-6制備的藍莓復合粉同樣具有上述實驗效果，各實 施例之間及與上述實驗效果差異性不大。
[0179] 實施例十一本發明藍莓復合粉小鼠腸道性能試驗
[0180] 將本發明實施例2制備的藍莓復合粉，用無菌水制備成活菌數為2X101()CFU/mL的 植物乳桿菌溶液，于4°C保存備用；
[0181] 選取普通昆明小白鼠60只，雌雄各半，18-20g，常規詞養。從中隨機挑選40只，每天 早晨9:00灌胃鹽酸林可霉素0.2mL(20mg)/只，其它作為對照組，每天同一時間灌胃等量滅 菌生理鹽水，連續一周，制備腸道菌群失調的小鼠模型。模型組小鼠飲食下降，未出現死亡 和明顯的腹瀉現象，排軟糞，外形正常含水分較多，墊料潮濕。將40只腸道菌群失調小鼠，隨 機分為2組，一組20只作為治療組，每天灌胃保存好的植物乳桿菌溶液0.5ml (2 X IO1t3Cfu/ ml)/只，另20只作為自然恢復組，每天同一時間灌胃等量滅菌生理鹽水，連續兩周。整個試 驗期21天，每天觀察小白鼠的生長和排便情況，于第8、21天對藍莓復合粉治療組和自然恢 復組的小鼠進行稱重，計算各組體重平均增長率，結果如表4;每5天測各組小鼠糞便大腸桿 菌數量，計算平均數，結果如表5。取小鼠糞便約O.lg，于無菌操作臺內加入3粒玻璃珠（以 〇. Ig糞樣加〇. 5mL稀釋液），稀釋并接種麥康凱瓊脂培養基，計算每克濕便中的大腸桿菌數。
[0182] 表4:小鼠增重情況
[0186] 藍莓復合粉治療組小鼠體重平均增長率（67.96 % )顯著高于自然恢復組 (32.14%);飼喂溶液后腸道大腸桿菌數量顯著下降，降低97.07%，顯著低于自然恢復組 (24.78% )，表明本發明藍莓復合粉中的植物乳桿菌在小白鼠腸道內迅速定植，形成優勢菌 群，并有效抑制大腸桿菌等病原菌的生長繁殖，并且定植時間長，持續、有效改善了腸道性 能。
[0187] 需要說明的是:本發明實施例3-6制備的藍莓復合粉同樣具有上述實驗效果，各實 施例之間及與上述實驗效果差異性不大。
[0188]實施例十二本發明藍莓復合粉對機體免疫力的影響
[0189] 1實驗目的
[0190] 通過運動耐力測試(小鼠游泳試驗），驗證本發明藍莓復合粉的提高免疫力、抗疲 勞作用。
[0191] 2實驗材料與試劑
[0192] 2.1供試藥物：
[0193] 市售藍莓復合粉(Gl);市售藍莓復合粉(G2);本發明實施例2-6制備的藍莓復合粉 (G3-G7)。
[0194] 2.2 試劑：
[0195] 肝/肌糖原測試盒，購自南京建成生物制品研究所;濃硫酸(AR)，南京化學試劑有 限公司；生理鹽水，山東長富潔晶藥業有限公司。
[0196] 3.實驗動物
[0197] ICR小鼠，清潔級，體重18_22g，由寧夏醫科大學比較醫學中心提供，實驗期間小 鼠自由飲食。
[0198] 4.主要儀器
[0199] 錯制游泳箱（50cm X 50cm X 40cm)，鉛絲，低溫高速離心機：5804R型，Eppendrof公 司；水浴鍋:DK-S26型，上海精宏實驗設備有限公司；電子稱:BS224S型，Sartorius公司；秒 表，溫度計
[0200] 5.實驗分組
[0201] 5.1劑量分組及受試樣品給予時間隨機將小鼠分為8組，每組10只，第1組至第7組 分別給Gl~G7的藥物，第8組為空白對照組，給予等體積的雙蒸水，每組每日均灌胃1次，灌 胃體積為0.2ml/10g，連續給予受試樣品30天。
[0202] 5.2樣品配制第1組至第7組:稱取2.25g藥物樣品，用蒸餾水配至150ml;空白對照 組:雙蒸水150ml