一種用于提取慶大霉素的提純竿的制備方法
【技術領域】
[0001]本發明公開了一種用于提取慶大霉素的提純竿的制備方法，屬于藥物提取領域。
【背景技術】
[0002]慶大霉素是小單孢菌產生的一種氨基糖苷類抗生素，主要用于治療細菌感染，尤其是革蘭氏陰性菌引起的感染。慶大霉素是一種多組分抗生素，其中，主要包含Cl、Cla、C2、C2a四種組分，臨床上常用其硫酸鹽的形式。
[0003]慶大霉素傳統的制備方法是采用柱色譜對含有慶大霉素的發酵液進行一次性的分離處理。該方法雖然簡單易行，但所得產品的純度不高。《中華人民共和國藥典》2010版(以下簡稱《藥典》)對慶大霉素的質量提出了更高的要求。《藥典》規定，慶大霉素中各組分的比例，以質量百分比計為:Cl占25%-50%，Cla占15%-40%，C2和C2a的總量占20%_50%。此外，《藥典》還規定了慶大霉素的雜質限量:以質量百分比計，西索米星<2.0%，小諾霉素<3.0%;單雜< 2.0%，總雜質< 5.0%。《藥典》的上述規定，導致傳統的制備方法很難制備出合格的藥用級慶大霉素。
【發明內容】
[0004]本發明主要解決的技術問題:針對目前傳統慶大霉素的制備方法，雖然方法易行，但所得產品純度不高，達不到合格的藥用級慶大霉素的問題，本發明首先利用竹竿中竹纖維具有良好的透氣性、吸濕除濕及抗紫外線的特性，通過與碳酸鈉溶液預處理，再高壓下進行保持處理，擴大竹竿內部纖維空間結構，隨后將其炭化，形成改性炭化竹纖維，然后與硅酸鈉混合，在強堿環境下，在竹竿內部形成硅凝膠后吸附所添加的生物活性劑，提高吸附特性，最后在慶大霉素所針對的病原體溶液中浸泡，提高對慶大霉素的吸附，從而制備得用于提取慶大霉素的提純竿。
[0005]為了解決上述技術問題，本發明所采用的技術方案是:
(1)取直徑為3?5cm，長為I?1.5m的竹竿浸泡于質量分數為35 %的乙醇溶液中，在溫度為40?45°C，700?900MHz下浸泡I?3h，再將竹竿取出放入90 °C的干燥箱中干燥20?30min，待干燥完成后將竹竿浸泡在質量分數為50%的碳酸鈉溶液中，在80°C下浸泡30?40min；
(2)待上述浸泡結束后，將竹竿取出放入高溫高壓爐中，再進行升壓，待竹竿表面有裂紋出現時，停止升壓，保持壓力40?50s后進行泄壓，在2?3min內泄壓至標準大氣壓，將竹竿取出放入管式炭化爐中，使用氮氣，以20°C/min升溫至400?500°C，保持溫度I?2h;
(3)待上述炭化結束后將竹竿取出放入容器中，向其中加入蒸餾水浸泡竹竿，分別向容器中加入蒸餾水體積5?8 %的質量分數為20 %的硅酸鈉溶液、炭化后竹竿質量I?2 %的琥珀酸二異辛酯磺酸鈉及炭化后竹竿質量0.4?0.9 %的烷基多苷，攪拌均勻；
(4)在上述攪拌結束后，使用質量分數為46%的氫氧化鈉溶液調節pH至10?11，密封容器，使用氫氣將容器內的空氣排出后，再對容器進行加熱，加熱至80?90°C，保持溫度2?3h，停止加熱，自然冷卻至室溫后將竹竿取出放置于紫外燈下40?50min;
(5)待上述照射結束后將竹竿取出，放置在玻璃容器中，向其中加入濃度為1.3 X 15?1.8X 105CFU/mL的大腸桿菌菌液，再將玻璃容器移至培養室內，在30?35°C下放置12?13h后取出，放置于O?4°C下儲藏，即可得到用于提取慶大霉素的提純竿。
[0006]本發明的應用方法:將慶大霉素發酵液放入離心機中，在1300?1500r/min下，離心分離5?7min后收集離心液，將本發明所制得的提純竿的一端密封，將收集的離心液從提純竿的另一端倒入提純竿中后密封提純竿，使用氮氣向其中沖壓至0.2?0.3MPa，在30?35°C下直至提純竿內的液體全部滲出，再將提純竿取出放入容器中，向其中加入混合溶液浸泡提純竿，在22?23KHz下振蕩30?40min后進行過濾，收集過濾液放入旋轉蒸發儀中，在80?90°C下旋轉蒸發10?15min后，將濃縮液放入噴霧干燥機中進行噴霧干燥即可得到純度達到93%以上，雜質小于3%，C1含量為38%?45%，Cla含量為38%?42%的藥用級慶大霉素。
[0007]本發明的有益效果:
(1)本發明所得的提純竿制作成本低，易于操作；
(2)本發明所得的提純竿提取的慶大霉素達到藥用級。
【具體實施方式】
[0008]取直徑為3?5cm，長為I?1.5m的竹竿浸泡于質量分數為35 %的乙醇溶液中，在溫度為40?45°C，700?900MHz下浸泡I?3h，再將竹竿取出放入90 °C的干燥箱中干燥20?30min，待干燥完成后將竹竿浸泡在質量分數為50%的碳酸鈉溶液中，在80°C下浸泡30?40min;待上述浸泡結束后，將竹竿取出放入高溫高壓爐中，再進行升壓，待竹竿表面有裂紋出現時，停止升壓，保持壓力40?50s后進行泄壓，在2?3min內泄壓至標準大氣壓，將竹竿取出放入管式炭化爐中，使用氮氣，以20°C/min升溫至400?500°C，保持溫度I?2h;待上述炭化結束后將竹竿取出放入容器中，向其中加入蒸餾水浸泡竹竿，分別向容器中加入蒸餾水體積5?8%的質量分數為20%的硅酸鈉溶液、炭化后竹竿質量I?2%的琥珀酸二異辛酯磺酸鈉及炭化后竹竿質量0.4?0.9 %的烷基多苷，攪拌均勻;在上述攪拌結束后，使用質量分數為46%的氫氧化鈉溶液調節pH至10?11，密封容器，使用氫氣將容器內的空氣排出后，再對容器進行加熱，加熱至80?90°C，保持溫度2?3h，停止加熱，自然冷卻至室溫后將竹竿取出放置于紫外燈下40?50min;待上述照射結束后將竹竿取出，放置在玻璃容器中，向其中加入濃度為1.3 X 15?1.8 X 105CFU/mL的大腸桿菌菌液，再將玻璃容器移至培養室內，在30?35°C下放置12?13h后取出，放置于O?4°C下儲藏，即可得到用于提取慶大霉素的提純竿。
[0009]實例I
取直徑為4cm，長為1.2m的竹竿浸泡于質量分數為35%的乙醇溶液中，在溫度為42°C，800MHz下浸泡2h，再將竹竿取出放入90 °C的干燥箱中干燥25min，待干燥完成后將竹竿浸泡在質量分數為50 %的碳酸鈉溶液中，在80 0C下浸泡35min;待上述浸泡結束后，將竹竿取出放入高溫高壓爐中，再進行升壓，待竹竿表面有裂紋出現時，停止升壓，保持壓力45s后進行泄壓，在2min內泄壓至標準大氣壓，將竹竿取出放入管式炭化爐中，使用氮氣，以20°C/min升溫至450 0C，保持溫度2h;待上述炭化結束后將竹竿取出放入容器中，向其中加入蒸餾水浸泡竹竿，分別向容器中加入蒸餾水體積7%的質量分數為20%的硅酸鈉溶液、炭化后竹竿質量1.5%的琥珀酸二異辛酯磺酸鈉及炭化后竹竿質量0.6%的烷基多苷，攪拌均勻;在上述攪拌結束后，使用質量分數為46%的氫氧化鈉溶液調節pH至11，密封容器，使用氫氣將容器內的空氣排出后，再對容器進行加熱，加熱至85°C，保持溫度2.5h，停止加熱，自然冷卻至室溫后將竹竿取出放置于紫外燈下45min;待上述照射結束后將竹竿取出，放置在玻璃容器中，向其中加入濃度為I.5 X 105CFU/mL的大腸桿菌菌液，再將玻璃容器移至培養室內，在32°C下放置12h后取出，放置于2°C下儲藏，即可得到用于提取慶大霉素的提純竿。
[0010]將慶大霉素