基配體，該配體能夠選擇性的識別只表達于哺乳動物 肝細胞表面的去唾液酸糖蛋白受體（ASGR)，使微球通過配體-受體相互作用選擇性地粘附 于肝細胞表面，表現出主動肝靶向功能。這種肝靶向性使微球選擇性地聚集于肝組織中，在 癌化區域pH、還原雙重刺激下快速釋放藥物，使肝癌細胞長時間浸潤于高濃度的化療藥物 中，增強了藥效，減輕了不良反應、耐藥性等；
[0049] (3)本發明的優點還在于原料廉價易得、制備工藝簡單、制備條件要求低、包封率 高、微球粒徑適宜，所用的明膠和聚（β-氨基酯）具有良好的生物相容性，是作為藥物傳遞 體系的優選材料。
【附圖說明】
[0050] 圖1實施例1中所制備的載DOX/galG-PBAE微球在ρΗ5· 5、ρΗ 7· 4、ρΗ 5. 5和DTT 10mM溶液中累積釋藥量隨時間的關系
[0051] 圖2實施例1中所制備的載DOX/galG-PBAE微球與表達ASGR的Η印G2細胞和 不表達ASGR的Hela細胞的粘附倒置熒光顯微鏡照片，其中（a)為!fepG2細胞與載D0X/ galG-PBAE 微球，（b)為 Hela 細胞與載 DOX/galG-PBAE 微球
【具體實施方式】
[0052] 下面結合具體實施例，進一步闡明本發明。這些實施例僅用于說明本發明而不用 于限制本發明的范圍。
[0053] 實施例1
[0054] (1)制備半乳糖改性明膠（II)
[0055] 1-溴代_2, 3,4,6-四乙酰氧基-β-D-半乳糖（lib)的制備：16ml乙酸酐在0°C攪 拌下加入〇. 〇8ml HC104，然后在30min內緩慢加入4g β -D-半乳糖（Ila)，升溫至35~40°C 反應30min。在冰浴冷卻下依次加入1. 2g紅磷、2. 3ml Br2和1. 5ml水，升高溫度至18~ 20°C反應2h。加入20ml氯仿，攪拌后倒入冰水中。過濾、分液，水相用20ml氯仿萃取兩次， 合并氯仿，用飽和NaHC0 3、蒸餾水洗滌至水相為中性。加入無水MgS04干燥過夜，減壓旋蒸 除去氯仿得到黃色糖漿樣物。用乙醚溶解并加入石油醚至產生的白色沉淀恰好不再溶解時 為止，置于冰箱中結晶，得到白色晶體Ilb，熔點為78~80°C。
[0056] 2, 3,4,6_四乙醜氧基-1-硫代-β-D-半乳糖基_2' -異硫脈氧漠酸鹽（lie)的 制備：2. 79g lib和0. 515g硫脲加入到預先加有5ml無水丙酮并帶有回流裝置的干燥三頸 燒瓶中，60°C回流30min，稍冷后置于冰箱中結晶。得到白色晶體lie，熔點為168~170°C。
[0057] 2, 3,4,6-四乙酰氧基-1-腈甲基硫代-β-D-半乳糖（lid)的制備：1. 9g的lib 和lml氯乙腈加入到10ml體積比為1 : 1的丙酮和水的混合溶劑中，攪拌至固體全部溶解 后加入0. 8g K2C03和lg NaHS03，在室溫下繼續攪拌30min。然后加入70ml冰水并劇烈攪 拌2h。過濾收集固體、真空干燥后，經10ml甲醇重結晶得到Ild，熔點為95~97°C。
[0058] 2-亞氣基甲氧乙基硫代-β半乳糖（lie)的制備：1. 209g lie和 0. 016g甲醇鈉加入到30ml的無水甲醇中，37°C下反應9h。減壓旋蒸除去甲醇得到黃色糖 漿物（lid)。
[0059] 半乳糖改性明膠（II)的制備：0. 5g明膠加入到50ml硼酸緩沖溶液（pH 8. 0)中 配成明膠溶液，加入〇.5g Ild，室溫下反應24h。加入醋酸調節pH至4~5淬滅反應，然后 用半透膜透析48h，凍干得到半乳糖改性明膠（II)。
[0060] (2)制備端基為仲胺基含有二硫鍵的線性聚（β -氨基酯）（III)
[0061] 雙（烯丙酰氧乙基）二硫醚（Ilia)的制備：0· 60g雙（2-羥乙基）二硫醚用15ml 無水四氫呋喃溶解，冷卻至-10°C，加入2. 2ml三乙胺攪拌lOmin。滴加1. 45g丙烯酰氯溶 于5ml無水四氫呋喃的溶液，緩慢升溫至20°C繼續反應12h。反應結束后過濾除去產生的 固體，減壓旋蒸除去四氫呋喃，得到的黃色粘稠液體用CHC1 3溶解，分別用飽和Na2C03溶液 和蒸餾水洗滌至中性。CHC1 3層經無水MgS04過夜干燥后，過濾，旋蒸，粗產物經硅膠柱層析 分離（洗脫劑為乙酸乙酯：正己烷=1 : 3的混合溶劑），得到淡黃色液體Ilia。
[0062] 端基為仲胺基含有二硫鍵的線性聚氨基酯（III)的制備：115mg Ilia溶解于 10ml無水四氫呋喃，在N2保護下加入52. 8mgN，Ν' -二甲基乙二胺，升溫至50°C避光反應 48h。旋蒸除去四氫呋喃，殘余物緩慢滴加至劇烈攪拌的冷的無水乙醚中，析出得到淡黃色 粘稠物III。
[0063] (3)制備微球
[0064] 空載微球的制備：
[0065] 將40. 5mg質量比為1 : 1的半乳糖改性明膠（II)和聚β-氨基酯（III)溶于 lml蒸餾水。用飽和Na2C03溶液調節pH至9,得到水相。
[0066] 將0· 15ml span 80加入到15ml液體石錯中，于50°C和轉速600rpm攬泮30min， 得到油相。
[0067] 在600rpm的攪拌速度下，將水相逐滴加入到油相中。冷卻至0°C，加入0· 5g 25% 的戊二醛，于〇°C下避光反應2h。然后加入15ml異丙醇，繼續攪拌30min，過濾，固形物經異 丙醇、石油醚洗滌3~4次后得到空載微球。
[0068] 所得空載微球為球形，分散性好，平均粒徑為7. 9 μ m，對人肝癌細胞Η印G2和人子 宮瘤細胞Hela兩類細胞間的粘附有高選擇性，能夠通過表面的半乳糖基特異性識別ASGR 而具有主動肝靶向功能。
[0069] 載藥微球的制備：
[0070] 除水相配制時加入4. 5mg鹽酸阿霉素外，其余按本實施例中空載微球的制備方 法。該水相的配制過程為：將40. 5mg質量比為1 : 1的半乳糖改性明膠（II)和聚β-氨 基酯（III)溶于lml蒸餾水，加入4. 5mg鹽酸阿霉素，攪拌均勻。用飽和Na2C03溶液調節pH 至9,得到水相。
[0071] 所得載藥微球為球形，分散性好，平均粒徑為7. 0 μ m ;載藥量為6. 61 %，包封率為 66.08%。該載DOX/galG-PBAE微球在降低pH或增大還原劑二硫蘇糖醇（DTT)的濃度時均 能加快藥物的釋放，同時降低pH和增大DTT的濃度時釋放速度加快且釋藥量顯著增加（見 圖1);對人肝癌細胞ifepG2的粘附能力強，而對人子宮瘤細胞Hela細胞的粘附能力弱（見 圖2)，說明制備的載DOX/galG-PBAE微球能夠通過表面的半乳糖基特異性識別ASGR而具有 主動肝靶向功能。
[0072] 實施例2
[0073] 按實施例1的方法制備半乳糖改性明膠。
[0074] 按實施例1的方法以69. 6mg Ν，Ν' -二甲基丁二胺代替Ν，Ν' -二甲基乙二胺，制 備兩端為仲胺基重復單元中含有二硫鍵的線性聚（β -氨基酯）。
[0075] 空載微球的制備：
[0076] 將45mg質量比為2 : 1的半乳糖改性明膠和聚β -氨基酯溶于lml蒸餾水。用 飽和Na2C03溶液調節pH至9,得到水相。
[0077] 將0· 25ml span 80加入到50ml液體石錯中，在85°C和轉速550rpm攬泮30min， 得到油相。
[0078] 在550rpm的攪拌速度下，將水相逐滴加入到油相中。繼續攪拌20min后，冷卻 至-5°C，加入0. lg 25%的戊二醛，于-5°C下避光反應2h。然后加入15ml乙醇，繼續攪拌 30min，過濾，固形物經乙醇、石油醚洗滌3~4次后得到空載微球。
[0079] 所得空載微球為球形，分散性好，平均粒徑為26. 1 μ m，對Η印G2和Hela兩類細胞 間的粘附有高選擇性，能夠通過表面的半乳糖基特異性識別ASGR而具有主動肝靶向功能。
[0080] 載藥微球的制備：
[0081] 除水相配制時加入9mg鹽酸阿霉素外，其余按本實施例中空載微球的制備方法。
[0082] 所得載藥微球為球形，分散性好，平均粒徑為27. 4 μ m ;載藥量為10. 38 %，包封率 為63. 78%。該載藥微球在pH 5. 5和10mM DTT的環境中釋藥，24h累積釋放藥量78. 36%; 對Η印G2和Hela兩類細胞間的粘附有高選擇性，能夠通過表面的半乳糖基特異性識別ASGR 而具有主動肝靶向功能。
[0083] 實施例3
[0084] 按實施例1的方法制備半乳糖改性明膠。
[0085] 按實施例1的方法以86. 4mg Ν，Ν' -二甲基己二胺代替Ν，Ν' -二甲基乙二胺，制 備兩端為仲胺基重復單元中含有二硫鍵的線性聚（β -氨基酯）。
[0086] 空載微球的制備：
[0087] 將50mg質量比為1 : 2的半乳糖改性明膠和聚β -氨基酯溶于2ml蒸餾水。用 飽和Na2C03溶液調節pH至9,得到水相。
[0088] 將0· 5ml span 80加入到10ml液體石錯中，在25°C和轉速50rpm攪拌30min，得 到油相。
[0089] 在50rpm的攪拌速度下，將水相逐滴緩慢加入到油相中。繼續攪拌20min后，冷卻 至5°C，加入62. 5mg40%的乙二酸，于5°C下避光反應2h。然后加入15ml甲醇，繼續攪拌 30min，過濾，固形物經甲醇、石油醚洗滌3~