一種預防污染的平板培養方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及植物病理學和微生物學技術領域，具體是一種預防污染的平板培養方法。
【背景技術】
[0002]在植物病理學和微生物學技術領域中，利用培養基培養植物病原菌/微生物是相關實驗研究和產品研發的基本技術工作，培養病原菌/微生物的培養基形態，主要有平板培養基、斜面培養基、及液體培養基。平板培養基是指將已滅菌的培養基熔化后倒入普通培養皿，冷卻凝固后形成整齊的培養基平板;斜面培養基是指將培養基裝入試管，滅菌后擺成的培養基斜面;液體培養基是指培養基中不含凝固物而處于液體狀態的培養基。通常將利用平板培養基培養病原菌/微生物的培養方式稱為平板培養;同理稱，利用斜面培養基的斜面培養;利用液體培養基的液體培養。實驗室的日常工作，往往以平板培養最為常用。
[0003]病原菌/微生物培養的設備主要是培養箱，當前的培養箱各式各樣，大小容量差別也大，但按維持恒溫功能的方式可將其分為兩大類，一類是隔水式培養箱，其培養作業空間處在一個恒溫的水箱內，該類培養箱一般沒有降溫功能。另一類是循環空氣式培養箱，在培養箱的作業空間內，增溫/降溫空氣處于流動循環狀態，該類培養箱能實現升溫/降溫功能，四季可用，因而成為普通實驗室的主要培養設備。
[0004]當前的常規平板培養方法，是用紗布把培養皿捆包、或用實驗室常用的方盤、籃框類器具載裝培養皿后，再放入培養箱內培養，或者將培養皿直接放入培養箱內培養。在培養實踐中發現，利用循環空氣式培養箱進行常規平板培養，容易出現雜菌污染;一些需要較長時間的培養工作，不僅污染率高，還導致培養基干燥化;尤其是，連續長期培養作業的培養箱，容易繁殖積累螨類實驗室小昆蟲，這些螨蟲的蟲體微小，能自由進出普通培養皿，其周身攜帶的細菌和霉菌，能快速導致培養基污染雜菌，嚴重者可在2?3天內造成整批培養工作作廢。顯然，在當前的培養技術條件下，平板培養的雜菌污染問題突出。
[0005]當前的解決方法通常是用Parafilm封口膜封貼培養皿的方法，用該方法進行平板培養，能有效地降低污染率，但在培養量較大時，封口程序工作效率低，實踐操作非常不便；而且，在循環空氣式培養箱中Parafilm封口膜容易開裂形成缺口，因此預防材料污染和干燥的效果仍不理想。
【發明內容】
[0006]本發明的目的提供一種預防污染的平板培養方法，用一套簡單的配套工具和技術操作，大幅度降低植物病原菌/微生物日常培養的污染可能性，提高平板培養的效率與效果O
[0007]本發明解決上述技術問題的技術方案如下:
[0008]—種預防污染的平板培養方法，用一套簡單的配套工具和技術操作，大幅度降低植物病原菌/微生物日常培養的污染可能性，操作步驟如下:
[0009]1.配套工具準備:取潔凈的密封式塑料保鮮盒和未啟用過的普通塑料袋備用。
[0010]2.培養平板植入生物:按常規的無菌操作方式，在超凈工作臺上用培養皿將培養基倒成培養平板，并在平板上植入培養對象生物。
[0011]3.培養平板置入配套工具:將步驟I備用的保鮮盒與塑料袋置入超凈工作臺，在無菌條件下，先將步驟2操作完畢的培養平板置入塑料袋內，再將塑料袋及袋內培養平板整體置入保鮮盒內，蓋上并扣緊保鮮盒的密封蓋，形成盒內裝載培養平板的保鮮盒。
[0012]4)轉入培養箱培養:將步驟3)操作完畢的、內裝培養平板的保鮮盒，從超凈工作臺轉到常規恒溫培養箱，在需要的溫度下培養。
[0013]5)培養結果調查:到達計劃設定的培養時間后，將步驟4)的培養材料從培養箱取出，進行結果的調查和檢測。
[0014]本發明的優點:
[0015]本發明的最大特色是預防污染的功效高，尤其是防止螨蟲污染非常突出，同時還具有如下優點:
[0016]1.由于保鮮盒的密封性能好，培養基不容易干燥，很適合于長時間培養的需要。
[0017]2.保鮮盒可疊加放置，使得培養箱內的有效作業空間能充分利用，而且由于保鮮盒的保護，能有效減少培養皿的碰翻跌摔意外。
[0018]3.批量培養時，便于培養平板的轉移操作，如從工作臺轉移到培養箱;或由培養箱轉移到結果檢驗平臺。
【附圖說明】
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[0019]圖1是采用不同培養方法在循環空氣式培養箱培養稻曲病菌10天后的表現；圖中A圖與B圖是采用常規培養方法的結果，A呈現雜菌污染和培養基干燥開裂，B未出現雜菌污染，但培養基呈現干燥開裂;C圖是采用本發明培養方法的結果，未出現任何污染和干燥現象。a是稻曲病菌，b是污染雜菌，c是培養基干縮形成的裂縫。
[0020]圖2是空白培養基在螨蟲滋生的培養箱培養3天后的表現圖。
[0021]圖中，A圖是采用常規方法的平板培養，培養平板被雜菌污染，并呈現螨蟲爬行的軌跡;B圖是采用本發明方法的平板培養，培養平板未出現污染和異常。
[0022 ]圖3是本發明配套用的塑料保鮮盒。
[0023]圖中a是合蓋后的完整保鮮盒;b是保鮮盒的裝載主體;c是保鮮盒蓋;d是保鮮盒蓋上的密封膠。
[0024]圖4是本發明配套用的保鮮盒裝載培養皿后的形態圖。
[0025]圖中，a是保鮮盒直接裝入培養皿后封蓋狀態;b是保鮮盒直接裝入培養皿后開蓋狀態;c是先將培養皿裝入塑料袋，再將塑料袋與培養皿一起放入保鮮盒內，封蓋狀態;d是先將培養皿裝入塑料袋，再將塑料袋與培養皿一起放入保鮮盒內，開蓋狀態。
【具體實施方式】
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[0026]下面結合附圖與實施例對本發明作進一步描述。
[0027]當前植物病理學/微生物學常規實驗室的培養設備主要是循環空氣式培養箱，雖然箱內的循環空氣可以實現快速增溫/降溫的功能，但對于常規的平板培養來說，由于培養皿不具備有效的無菌化阻隔條件，培養皿內外空氣直通無阻，而且培養皿外環境空