用旋輪蟲培養液促進絮凝性細菌生長的方法
【技術領域】
[0001 ]本發明涉及一種用旋輪蟲培養液促進絮凝性細菌生長的方法。
【背景技術】
[0002]活性污泥法是污水和廢水處理中應用最廣泛的方法。活性污泥的絮凝性是影響活性污泥處理系統的運行穩定性、處理效率和出水水質的關鍵因素之一。活性污泥的絮凝性越好，活性污泥處理系統的性能就越好。活性污泥的絮凝性取決于絮凝性細菌的數量和活性，增加絮凝性細菌的數量或者提高絮凝性細菌的活性均有利于活性污泥絮凝性的提高。
[0003]提高活性污泥絮凝性的方法可以分成兩大類:化學法和生物學法。化學法是通過投加無機絮凝劑或有機絮凝劑，增大活性污泥的體積或增加活性污泥的密度，使活性污泥的絮凝性得到提高。這種方法的副作用是使水中含鹽量增加、易形成二次污染、引起絮凝性細菌活性下降等問題。生物學法是通過促進絮凝性細菌的生長或提高絮凝性細菌的絮凝活性來改善活性污泥的絮凝性。中國發明專利(CN 102816797)公開了通過使用L-半胱氨酸增強光發酵細菌糞紅假單胞菌絮凝性能的方法，但該方法存在著使用對象特定和L-半胱氨酸的價格較高等問題。
[0004]旋輪蟲是活性污泥中常見的一種微型后生動物，在分類學上屬于蛭形輪蟲科。在活性污泥法中當旋輪蟲等蛭形輪蟲數量較多時，會出現活性污泥中絮凝性細菌的數量明顯多、活性污泥的絮凝性明顯良好的現象，其原因與旋輪蟲會分泌含有促進絮凝性細菌生長的活性物質有關。因此，可以通過向活性污泥或絮凝性細菌培養基中添加含有旋輪蟲分泌的活性物質的旋輪蟲培養液來促進絮凝性細菌的生長。
【發明內容】
[0005]本發明的目的在于提供一種利用旋輪蟲培養液促進絮凝性細菌生長的方法，該方法利用旋輪蟲培養液來提高絮凝性細菌的生長，操作簡單、生態、使用方便，可以增加絮凝性細菌的密度，提高細菌的絮凝性，有利于廣泛應用，具有較好的經濟效應。
[0006]—種利用旋輪蟲培養液促進絮凝性細菌生長的方法，其特征在于該方法的具體步驟為:
a.將旋輪蟲置于旋輪蟲培養液中進行繁殖，當旋輪蟲的密度達到100?500ind/mL時，用300目尼龍網過濾去除旋輪蟲；
b.將步驟a所得到的培養液用超濾膜過濾，進一步去除濾液中的細小顆粒物；
c.將斜面保存的絮凝性細菌用接種環接種至10mLLB培養基中，然后置于120rpm的搖床上，于30 °(:連續培養24小時，離心處理培養液，用去離子水洗滌，用無菌水將細菌濃度調節至OD6qq值為0.6-0.8,此溶液即為細菌菌懸液；
d.將步驟c得到的細菌菌懸液以模擬生活污水體積的5%?10%的添加量添加至滅過菌的模擬生活污水中，即得到細菌培養基；
e.將步驟b所得旋輪蟲培養液以細菌培養基體積的0.05%?1%的添加量添加到步驟d所得的細菌培養基中，然后置于120rpm的搖床上，于30°C連續培養48小時，即得到含有細菌絮凝體的培養液。
[0007]上述的絮凝性細菌為:泡囊短波單胞菌、蠟樣芽孢桿菌、蘇云金芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、鮑曼不動桿菌的一種或幾種。
[0008]上述的模擬生活污水配方為:0.17g葡萄糖、0.16g淀粉、0.233g醋酸鈉、0.025g氯化銨、0.158g蛋白胨、0.04g牛肉膏、0.0284g硫酸銨、0.07g磷酸二氫鉀、以及0.06g碳酸鈉，以及100mL去離子水。。
[0009]本發明的顯著優點是:I)本發明利用旋輪蟲培養液來促進絮凝性細菌的生長的方法，具有綠色、環保、無二次污染、使用方便的特點。2)在旋輪蟲培養液的作用下，絮凝性細菌的生長得到了促進，可使絮凝性細菌分泌更多的生物絮凝劑。3)旋輪蟲培養液可促進多種類的絮凝性菌生長，適用范圍廣，可有效地應用于活性污泥法中。
【附圖說明】
[0010]圖1為投加旋輪蟲培養液和未投加旋輪蟲培養液時蠟樣芽孢桿菌的細胞干重大小比較圖。
[0011 ]圖2為投加旋輪蟲培養液和未投加旋輪蟲培養液時泡囊短波單胞菌的細胞干重大小比較圖。
[0012]圖3為投加旋輪蟲培養液和未投加旋輪蟲培養液時蘇云金芽孢桿菌的細胞干重大小比較圖。
[0013]圖4為投加旋輪蟲培養液和未投加旋輪蟲培養液時混合細菌的細胞干重大小比較圖。
【具體實施方式】
[0014]以下結合附圖對本發明的實施例作詳細說明。
[0015]實施例1
利用旋輪蟲培養液促進錯樣芽孢桿菌(BaciI Ius cereus)生長的方法，按以下步驟進行:
(I)蠟樣芽孢桿菌的菌懸液制備:將保存于培養基斜面上的蠟樣芽孢桿菌用接種環接種至LB培養基中，然后置于120rpm的搖床上，于30°C連續培養24小時，離心處理培養液，用去離子水洗滌，由此反復離心、去離子水洗滌三次后，用無菌水將細菌濃度調節至OD600值
0.6。此溶液即為蠟樣芽孢桿菌的菌懸液。
[0016](2)模擬生活污水配制:稱取0.17g葡萄糖、0.16g淀粉、0.233g醋酸鈉、0.025g氯化銨、0.158g蛋白胨、0.04g牛肉膏、0.0284g硫酸銨、0.07g磷酸二氫鉀、以及0.06g碳酸鈉，溶入I OOOmL去離子水。
[0017](3)旋輪蟲培養液制備:用300目尼龍網過濾分離旋輪蟲培養液中的旋輪蟲，用無菌自來水反復5次沖洗截留在尼龍網上的旋輪蟲。將旋輪蟲從尼龍網上轉移至滅菌自來水中，使旋輪蟲密度達到450 ind/mL，然后置于120rpm的搖床上，30°C下培養24h，用尼龍網過濾培養液，并用0.22 μπι濾膜過濾除掉細菌等細小顆粒物，收集濾液，將濾液定容至10mL0此濾液即為旋輪蟲培養液。
[0018](4)實驗組準備:設置兩個實驗組，其中一組為對照組，另一組為旋輪蟲培養液添加組。兩個實驗組均使用250mL三角燒杯為實驗容器，以步驟(I)得到的細菌為實驗對象，以步驟(2)得到的模擬生活污水為細菌培養液。在兩個實驗組的三角燒杯中分別添加90 mL的模擬生活污水，1mL的菌懸液。在添加組的三角燒杯中再添加0.5mL的旋輪蟲培養液。
[0019](5)細菌培養:將按步驟(4)得到的兩個實驗組的三角燒杯均置于120rpm的搖床上，于30 °C連續培養48小時。
[0020](6)細胞干重:采用離心法收集步驟(5)培養的細菌，然后通過干燥、稱重得到兩個實驗組的細菌細胞干重(圖1)。
[0021](7)旋輪蟲培養液促進蠟樣芽孢桿菌的生長效果:由圖1可知，細菌培養液中添加了旋輪蟲培養液的添加組，與未添加旋輪蟲培養液的對照組相比，蠟樣芽孢桿菌細胞干重增加了 60%，表明旋輪蟲培養液對蠟樣芽孢桿菌的生長具有明顯的促進效果。
[0022]實施例2
利用旋輪蟲培養液促進泡囊短波單胞菌(Brevundimonasvesicularis)生長的方法，按以下步驟進行:
I.泡囊短