個坩堝置于恒溫培養箱中，在第2天、第4天、第6天、第8天和第10天，分別取出試驗組和 對照組合2個，置于105°C烘箱中烘2-3小時，冷卻后稱重，記為W 3,采用烘重法測定其土壤含 水量。
[0052] (3)保苗試驗
[0053]在10個花盆內均裝等量沙子，均噴等量水，向每一花盆內均勻撒種，烏拉爾甘草、 中麻黃各50粒，然后均覆土 40g，置于窗臺使其自然生長，待生長2-3天后，甘草、麻黃均出土 記完數后，噴灑寡營養細菌D0B150菌液。設置不同濃度梯度向花盆中噴灑菌液均30ml，設置 1組對照和4組菌液濃度梯度25 %、50 %、75 %、100 %，每組做三個重復，每天記錄平均存活 苗數，直至第7天，可初步看出菌液是否具有保苗作用。
[0054] 2、實驗結果
[0055] (1)固沙試驗結果
[0056] 噴灑自來水的對照沙盤表面無結皮形成，噴灑寡營養細菌D0B150菌液的試驗沙盤 放置幾天后表面形成了結皮層，該試驗結果表明使用寡營養細菌D0B150菌液噴灑在流沙表 面可以起到固沙、防止流沙表面活化的作用，這將為生物地毯治沙工程提供科學理論依據 及物種資源，因此在防風固沙改善生態環境方面將有重大的應用價值。
[0057] (2)保水試驗效果
[0058] 寡營養細菌D0B150菌制劑噴灑在流沙表面的沙盤和噴灑自來水的對照沙盤在恒 溫的條件下放置2、4、6、8、10天后，測定其土壤含水量，結果表明，實驗組和對照組雖然均有 水分的流失，但隨著時間的延長試驗組水分的流失的速率比對照組要慢，尤其是8天后，對 照組水分流失率迅速加大，因此使用該寡營養細菌D0B150菌液噴灑流沙表面具有一定的保 水作用。
[0059] (3)保苗試驗效果
[0060]寡營養細菌D0B150菌液噴灑在流沙表面的保苗試驗效果。待出苗，噴灑不同濃度 菌液后的第7天，己經出土的幼苗大部分又由于干旱的原因慢慢死去。但可以明顯看出，噴 灑水的幼苗存活天數最短，死得最快，而噴灑寡營養細菌D0B150菌液的幼苗存活天數較長， 死得較慢，但并不是菌液濃度越高幼苗存活的天數越長，因此適宜的菌液濃度可以起到一 定的保苗效果。
[0061 ] 可見，在流沙表面噴灑的本發明提供的寡營養細菌Bacillus SP.D0B150CGMCC NO. 11925的菌液形成結皮，與噴灑等量水的對照相比，可使土壤中水分蒸發速度減慢，延長 土壤持水時間。因此如果將該寡營養細菌D0B150菌液使用于沙漠表面不僅能夠起到固沙作 用，而且可能為發芽速度較慢的一些植物種子的萌發提供較好的水分條件，使一些因為土 壤水分不足不能萌發的植物得到生長發育。
[0062] 實施例四：寡營養細菌Bacillus sp.D0B150CGMCC N0.11925對古爾班通古特沙漠 土壤環境的影響 [0063] 1、實驗過程
[0064]將寡營養細菌D0B150在LB培養基上反復劃線活化后，用于液體菌劑的制備，接種 后置37°C搖瓶培養60h，制備獲得寡營養細菌D0B150菌劑。
[0065]在古爾班通古特沙漠的腹地選擇2個5mX 5m的流沙區作為試驗樣地，設置2個處 理，即噴灑寡營養細菌D0B150菌劑和不噴灑，后者為對照。1個月后分別采集各樣方0-2cm和 2-5cm 土樣進行土壤微生物種群數量、土壤酶活性、孢子植物的測定，每個土樣均設3個重 復。
[0066] 2、實驗結果
[0067] (1)噴灑寡營養細菌D0B150菌劑對不同土層主要微生物分布的影響
[0068]寡營養細菌D0B150菌劑的施加，影響了土壤原有微生物類群的數量特征。對照各 土層，噴灑寡營養細菌菌劑后，各類微生物數量均有較明顯的增加。對細菌而言，對照樣地 0-2cm層的細菌數量顯著小于2-5cm土層，而噴灑寡營養細菌D0B150菌劑的樣地內，細菌的 分布規律表現為表層大于次表層，而且〇-2cm層的細菌數量顯著高于對照。噴灑寡營養細菌 后，各土層的真菌和放線菌數量均有所增加。寡營養細菌D0B150菌劑中的寡營養細菌 D0B150進入土壤后，對其他微生物的生長繁殖起到了一定的促進作用，對土壤微生物活性 的提尚有一定幫助。
[0069] (2)噴灑寡營養細菌D0B150菌劑對不同土層土壤酶活性的影響
[0070]見表1，與對照相比，寡營養細菌D0B150的施加，對測試土壤中5種酶活性均有不同 程度的影響。提高了 〇-2cm和2-5cm 土層的過氧化氫酶和多酚氧化酶活性。脲酶活性的變化 在2個土層中呈相反趨勢，表現為上層脲酶活性升高，而下層活性降低。酶活性的不同響應 可能與土壤養分的改變有關。
[0071] 表1不同實驗樣地的土壤酶活性
[0072]
[0073] (3)噴灑寡營養細菌D0B150菌劑對生物結皮形成的影響
[0074]藍藻是藻結皮中的優勢種，對生物結皮的早期形成與恢復起著非常重要的作用。 本研究表明，見表2，對裸沙區噴灑噴灑寡營養細菌D0B150菌劑后，藍藻數量明顯增加(200-300個/g土），而對照區藍藻極少（10-20個/g土），表明寡營養細菌D0B150具有促進藻結皮形 成的作用，但在2個樣地內均未發現地衣和苔蘚結皮。
[0075] 表2不同處理下土壤中主要孢子植物類群的變化
[0076]
[0077]~從上述評價可以看出，本發明利用自行篩選分離馴化的寡營養細菌Bac i 11 us sp.D0B150CGMCC NO. 11925施加到沙土后，不僅起到了粘連砂粒、防治流沙活化，還能有效 增加土壤中主要微生物數量，提高土壤主要養分含量，增強部分土壤酶活性，并能明顯恢復 藻結皮。因此，寡營養細菌D0B150是一種比較理想的固沙生物材料，這為有效恢復生物結 皮、修復受損沙地提供了新的方法。
[0078]上述實施例僅僅是為清楚地說明本發明所作的舉例，而并非對實施方式的限定。 對于所屬領域的普通技術人員來說，在上述說明的基礎上還可以做出其它不同形式的變化 或變動。這里無需也無法對所有的實施方式予以窮舉。而由此所延伸出的顯而易見的變化 或變動仍處于本發明的保護范圍之中。
【主權項】
1. 一種寡營養細菌Bacillus SP.D0B150,其特征在于，所述的寡營養細菌Bacillus sp.D0B150的保藏編號為CGMCC NO. 11925。2. 如權利要求1所述寡營養細菌Bacillus sp.D0B150的基因序列如SEQUENCE LISTING。3. 如權利要求1所述寡營養細菌Bacillus sp.D0B150在固沙中的應用。
【專利摘要】本發明公開一種沙漠寡營養細菌DOB150及在固沙中的應用。通過在新疆準噶爾盆地古爾班通古特沙漠中分離、篩選、選育、馴化，獲得一株寡營養細菌<i>Bacillus？sp</i>.DOB150？CGMCC？NO.11925，是一種新的菌種，通過利用分離到的寡營養細菌？DOB150菌株制備的菌劑噴施到沙漠中后，不僅能夠起到固沙作用，而且可能為發芽速度較慢的一些植物種子的萌發提供較好的水分條件，使一些因為土壤水分不足不能萌發的植物得到生長發育；制備的菌劑噴施到沙漠中后，不僅起到了粘連砂粒、防治流沙活化，還能有效增加土壤中主要微生物數量，提高土壤主要養分含量，增強部分土壤酶活性，并能明顯恢復藻結皮，具有廣泛的應用性。CGMCC NO.1192520151224
【IPC分類】C09K17/14, C12N1/20, C12R1/07
【公開號】CN105647839
【申請號】
【發明人】毛培宏, 呂杰, 王軍, 錢衛東
【申請人】新疆大學, 毛培宏
【公開日】2016年6月8日
【申請日】2016年3月31日