參照《伯杰氏細菌鑒定手冊》及《常見細菌鑒定手冊》對菌株進行分類鑒定，初步確定為芽孢 桿菌屬菌株，具有較強的生長繁殖能力，生長速率快，遺傳特性穩定。
[0013] (2)本發明提供的菌株Bacillus sp.D0B153D0B153CGMCC N0.11926通過 16S rRNA 基因序列測定及比對，并建立系統發育樹分析，結果表明菌株屬于芽孢桿菌屬(Bacillus Sp·)，其與NCBI報道菌株Bacillus psychrosaccharolyticus ATCC 232961'同源性最高，最 高相似性為96.6%，初步斷定為該屬潛在新種。以Biolog Microstation系統的GPIII測定 卡進行測試，其D-纖維二糖，龍膽二糖，蔗糖，D-松二糖，α-D-乳糖，蜜二糖，N-乙酰-D-葡糖 胺，N-乙酰-β-D-甘露糖胺，a-D-葡糖，D-甘露糖，D-果糖，D-半乳糖，3-甲酰葡糖，D-果糖，D-甘露醇，D-阿拉伯醇，肌醇，甘油，D-葡糖-6-磷酸，D-果糖-6-磷酸，D-天冬氨酸，D-絲氨酸， 明膠，L-谷氨酸，林肯霉素，潔霉素，果膠，L-半乳糖醛酸內酯，D-葡糖酸，D-葡糖醛酸葡糖醛 酰胺，粘酸，粘液酸，奎寧酸，糖質酸，L-蘋果酸，γ -氨基-丁酸，a-羥基-丁酸，β-羥基-D，L丁 酸，乙酰乙酸，甲酸利用均呈陽性結果，判定為芽孢桿菌屬一新種，確定該菌建議的生物學 命名為Baci 1 lus sp.D0B153。具有生物固沙功能，分泌胞外多糖，產生淀粉酶、纖維素酶，水 解淀粉，降解甘露聚糖、木聚糖、纖維素。
[0014] (3)本發明篩選的Bacillus sp.D0B153D0B153CGMCC N0.11926制備的菌液使用于 沙漠表面不僅能夠起到固沙作用，而且可以為發芽速度較慢的一些植物種子的萌發提供較 好的水分條件，使一些因為土壤水分不足不能萌發的植物得到生長發育，
[0015] (4)本發明篩選的Bacillus sp.D0B153D0B153CGMCC N0.11926制備的菌劑噴施到 沙漠中后，不僅起到了粘連砂粒、防治流沙活化，還能有效增加土壤中主要微生物數量，提 高土壤主要養分含量，增強部分土壤酶活性，并能明顯恢復藻結皮。因此，寡營養細菌 D0B153是一種比較理想的固沙生物材料，這為有效恢復生物結皮、修復受損沙地提供了新 的方法。
【附圖說明】
[0016] 圖1顯示為寡營養細菌Bacillus SP.D0B153CGMCC NO. 11926的系統進化發育樹 圖。
[0017] 圖2顯示為寡營養細菌Bacillus SP.D0B153CGMCC N0.11926的保水實驗效果圖。
【具體實施方式】
[0018] 下面，舉實施例說明本發明，但是，本發明并不限于下述的實施例。
[0019] 本發明中選用的所有原輔材料，以及選用的菌種培養方法都為本領域熟知選用 的，本發明中涉及到的％都為重量百分比，除非特別指出除外。
[0020] 實施例一:寡營養細菌Bacillus SP.D0B153CGMCC N0.11926的分離、篩選及鑒定
[0021] 1、菌種的分離和篩選
[0022] 本發明所使用的沙漠寡營養細菌從新疆準噶爾盆地古爾班通古特沙漠取樣分離， 根據菌種作用機理分析，初步篩選出能夠在LB培養基上生長的菌株。利用傳統的平板培養 法分離出新疆準噶爾盆地古爾班通古特沙漠中的微生物，利用初篩和復篩進行篩選菌種， 平板劃線法純化菌株，通過比較菌種在LB培養基上的生長繁殖情況，篩選出一批生長良好 的微生物菌株，從中優選出綜合性能好的一株編號為D0B 153的沙漠寡營養細菌菌株。
[0023] 分離步驟:采用微生物分離的梯度稀釋法得到一系列的梯度稀釋液，用滅菌吸管 分別吸取Π ^-ΚΓ5稀釋度的混合菌稀釋液〇. lmL，分別移放到倒有LB固體培養基的平板上， 用無菌玻璃棒涂布均勻，然后倒置于37°C的恒溫培養箱中培養至長出單菌落，在無菌操作 臺中以無菌接種環挑取平板上長出的單菌落接種到裝有LB固體培養基的平板上劃線分離 待長出單菌落后，再次轉入滅菌試管斜面上，每株菌每次做三個重復，置于37°C條件下培養 3~5天。利用透過光、反射光及暗背景的光線觀察菌落的一致性，涂片染色用光學顯微鏡觀 察菌體的一致性，經多次反復分離純化直到菌落及個體均勻一致后備用。將純化后的菌株 一部分采用凍干物安瓿管、甘油管和液氮等方式保藏，一部分保存于4°C直接用于后續研 究。
[0024] 所述的LB培養基:蛋白陳10g，酵母膏5g，Nacl 10g，10g~15g瓊脂粉，蒸餾1000mL， pH7 · 0，121 °C 滅菌 20min。
[0025]本發明提供的菌株D0B153,可在適合其增殖的固體培養基或液體培養基中進行增 殖培養。利用常規固體斜面培養培養、低溫保藏的方法，每次傳代可保藏3個月以上；以干燥 冷凍法制做的長期保藏菌種，可保藏1年以上;或是以甘油管進行長期保藏。
[0026] 2、菌株D0B153的生理生化鑒定
[0027]具體的，本發明通過對新疆準噶爾盆地古爾班通古特沙漠中的微生物進行分離、 篩選和培養，獲得一批微生物菌株，從中篩選出一株編號為D0B153的菌株，經微生物學分類 與鑒定，該菌株屬于Bacillus sp.。本發明采用菌株編號為D0B153的菌株已于申請日前保 藏于布達佩斯條約微生物國際保藏單位：中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心 (CGMCC)。地址:北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所，郵編：100101。 保藏日期是2015年12月25日，保藏號是CGMCC No. 11926。經微生物學鑒定疑似短小芽孢桿 菌(Bacillus pumilus)，但其屬性特點有別于常見的短小芽孢桿菌(Bacillus pumilus)， 屬于芽孢桿菌(Bacillus sp.)，建議命名為Bacillus sp.D0B153。該菌株為革蘭氏陽性桿 菌，1.2-1.5μπι X 2-4μπι，菌體兩端鈍圓，有鞭毛，無莢膜，單個或呈短鏈狀排列。在LB培養基 上生長8小時以后可以形成芽孢，其芽孢為橢圓形，中生或次端生，芽孢大小為1.0-1.2μπιΧ 1.5-2. Ομπι，可在寡營養培養基上生長，兼性好氧，最適宜溫度為28~35 °C。在LB上可生長良 好，菌落較小，半透明，中間皺褶，邊緣光滑，具有生物固沙功能，分泌胞外多糖，產生卵磷脂 酶、酪蛋白酶、明膠酶、過氧化氫酶;經微生物學鑒定為Baci 1 lus pumilus菌。參照《伯杰氏 系統細菌學鑒定手冊》第八版和《常用細菌系統鑒定手冊》對編號為D0B153菌株進行鑒定， 結合生理生化綜合檢測確定菌種編號為D0B153的菌株為芽孢桿菌(Bacillus sp.)中的成 員，命名為Bacillus sp.D0B153。
[0028]形態特征:該菌種經LB瓊脂培養基分離培養，挑取疑似芽孢桿菌的菌落進行顯微 鏡觀察，革蘭氏染色呈陽性、好氧、產芽孢，最適宜溫度為28~35°C。菌株可在寡營養培養基 R2A培養基及1/5TSA培養基上良好生長，也可在常用細菌培養基，如在LB培養基中生長。其 中，采用R2A培養基平板30°C恒溫培養，菌落呈圓形、邊緣整齊、略凸起、淡黃色、半透明、粘 稠易挑取，培養后期中間有皺褶。形態學顯微觀察，菌體呈桿狀，1.2~1.5μπιΧ2~4μπι，菌體 兩端鈍圓，有鞭毛，無莢膜。培養8h菌體有芽孢形成，其芽孢芽孢為橢圓形，中生或次端生， 菌體不膨大。菌種形態參照《伯杰氏細菌鑒定手冊》及《常見細菌鑒定手冊》對菌株進行分類 鑒定，初步確定為芽孢桿菌屬菌株。
[0029] R2A培養基:配方:酵母浸出粉0.5g，蛋白胨0.5g，酪蛋白水解物0.5g，葡萄糖0.5g， 可溶性淀粉〇 · 5，磷酸氫二鉀0 · 3g，K2HP〇4〇 · 3g，MgS〇4〇 · 024g，丙酮酸鈉0 · 3g，瓊脂15 · 0，蒸餾 水 1000mL，pH值7.2 左右。
[0030] 1/5TSA培養基：胰蛋白胨5.0g，大豆胨1.0g，NaCl 10g 15.0g，瓊脂15.0,蒸餾水 100〇1^4田直7.2左右。
[0031] LB培養基:胰蛋白胨10g，酵母提取物5g，NaCl 10g，瓊脂15 · 0，蒸餾水1000mL，pH值 7.2左右。
[0032] 氧利用試驗:將瓊脂培養基裝入試管后滅菌，待冷卻至45-50 °C時做好標記，無菌 操作吸取菌株的菌懸液加入試管中，雙手快速搓動試管，避免振蕩使過多的空氣混入培養 基，待菌種均勻分布于培養基內后，將試管置于冰浴中，使瓊脂迅速凝固，將其靜置于37°C 恒溫培養箱保溫48h后開始連續進行觀察記錄，直至結果清晰為止。結果表明：該菌均