為兼 性好氧菌。
[0033] 最適生長溫度試驗：以無菌操作吸取菌株的菌懸液加入液體培養基中，觀察試驗 菌株在10 °C、20 °C、30 °C、40 °C、50 °C、60 °C、70 °C、80 °C、90 °C時的生長情況，菌體的生長量以 Du800型分光光度計680nm處所測定的光密度值的大小表示。如果遇到不能生長時，則至少 觀察15-20天，以充分肯定其能否生長。每一溫度重復3次。結果表明，寡營養細菌D0B153的 最適宜溫度為28-35 °C
[0034] 以扮〇1〇8 1;[(^08七31:;[011系統的6?111測定卡進行測試，其0-纖維二糖，龍膽二糖， 鹿糖，D-松二糖，α-D-乳糖，蜜二糖，N-乙酰-D-匍糖胺，N-乙酰-β-D-甘露糖胺，α-D-匍糖，D-甘露糖，D-果糖，D-半乳糖，3-甲酰葡糖，D-果糖，D-甘露醇，D-阿拉伯醇，肌醇，甘油，D-葡 糖-6-磷酸，D-果糖-6-磷酸，D-天冬氨酸，D-絲氨酸，明膠，L-谷氨酸，林肯霉素，潔霉素，果 膠，L-半乳糖醛酸內酯，D-葡糖酸，D-葡糖醛酸葡糖醛酰胺，粘酸，粘液酸，奎寧酸，糖質酸， L_蘋果酸，γ -氨基-丁酸，α-羥基-丁酸，β-羥基-D，L丁酸，乙酰乙酸，甲酸利用均呈陽性結 果，判定為芽孢桿菌屬一新種，確定該菌參考芽孢桿菌(Bacillus sp.)，建議的生物學命名 為Bacillus sp.D0B1530
[0035] 通過上述對于菌種寡營養細菌Bacillus sp.D0B153CGMCC NO. 11926的菌體形態、 培養特征觀察及生理生化指標測定，即通過菌體形態觀察、菌株培養特征觀察、生長溫度測 定、耐性試驗等試驗，與常見的芽孢桿菌相比，參照《伯杰氏系統細菌學鑒定手冊》第八版和 《常用細菌系統鑒定手冊》的方法進行分類，從菌種分類角度將菌種編號為D0B153的菌株綜 合鑒定為芽孢桿菌(Bacillus sp.)D0B153。
[0036] 實施例二:寡營養細菌Bacillus sp.D0B153CGMCC NO. 11926的分子水平鑒定
[0037] 1、PCR擴增寡營養細菌D0B153的DNA序列及其測序
[0038]挑取少量寡營養細菌D0B153菌株的單菌落，放入盛有25yL無菌水的EP管中，100°C 煮沸8-10min，后迅速放入冰水混合物中5min，離心10000r/min、5min，4°C保存，用時取上 清。
[0039] 16S r DNA基因序列測定及其系統進化樹的構建：按常規方法提取寡營養細菌 D0B153菌株的總DNA，用去離子水將稀釋通用引物進行16S r DNA區段的PCR擴增。
[0040] 50μ1的反應體系含：10 X PCR緩沖液5μ1，引物各20pmol，模板DNAlyl，TaqTM (TaKaRa公司）0.5U，dNTP SyLPCR擴增條件：95°C預變性5min，94°C45sec，55°Clmin，72°C lmin循環30次，72°C10min修復延伸，4°C終止反應。PCR產物的純化:PCR產物進行1%瓊脂糖 凝膠中電泳，用TaKaRa PCR Fragment RecoveryKit從膠中回收目的片段，溶于30μ1的高純 水中。送至測序公司進行16S r DNA區段序列的測定，菌種寡營養細菌D0B153的基因序列參 見附后的基因序列表。
[0041] aacgctggcggcgtgcctaatacatgcaagtcgagccagttgttgagtttactcaacaattagcggcggacgggtga gtaacacgtgggcaacctgcctataagactgggataacttctggaaaccggagctaataccggatatgttcttctct tgcatgagagaagatggaaagacggtctcggctgtcacttatagatgggcccgcggcgcattagctagttggtgagg taatggctcaccaaggcaacgatgcgtagtcgacctgagagggtgatcggccacactgggactgagacacggcgcag actcctacgcgaggcagcagtagggaatcttccgcaatgaacgaaagtctgacggagcaacgccgcgtgaacgatga aggctttcgggtcgtaaagttctgttgttagggaagaccaagtgccagagtaactgctggtaccttgacggtaccta accagaaagccacggctaattacgtgccagcagccgcggtaatacgtaggtggcaagcgttatccggaattattggg cgtaaagcgcgcgcaggtggttccttaagtctgatgtcagagccaatggctcaaccggggagggtcattggaaactt tggaacttgagtgtagaagagcatagtggaattccacgtgtagcggtgaaatgcgtagagatgtggaggaacaccag tggcgaaggcgactttctggtctataactgacactgaggcgcgaaagcgtggggagcaaacaggattagataccctg ttagtccacgccgtaaacgatgagtgctaagtgttaccgggtttccgccctttagtgctgcagctaacgcattaagc actccgcctgggcgatacggccgcaaggctgaaactcaaaggaattgacgggggcccgcacaagcggtggagcatgt ggtttaattcgaagcaacgcgaagaaccttaccaggttgtgacatcctctgacactcctagagttaggacgttcccc ttcgggggacagagtgacacgtggtgcatgcggtgtcgtcagctcgtgtcgtgagatgttgggttaagtcccgcaac gagcgcaacccttgatcttagttgccagcatccagtaaggcactctacggtgactgcctgtgataaaccggaggaag gtggggatgacgtcaaatcaacatgccccttatgacctgggctacacacgtgctacaatggatggtacaaagagctg caaacccgtgagtgtaagcgaatctcatagagccattctcagttcggattgcaggctgcaactcgcctgcatgaagc tggaatcgctagtaatcgcccatcagcatgccgcggtgaatacgtctccggaccttgtacacaccgcccgtcacacc acgagagtttgtaacacccgaagtcggtgaggtaaccgcaaggagctagccgcctaaggtgggacagatgattgggg tgaagtcgtaacaaggtagccgtatcggaaggtgcggctggatca
[0042] 3、16S r DNA基因序列比對及系統發育分析
[0043] 將測序得到的16S r DNA序列與GenBank數據庫中的核苷酸序列進行BLAST分析， 從中獲取相近的16S r DNA序列，將寡營養細菌D0B153的16S r DNA序列在NCBI數據庫中進 行BLAST分析后，構建系統進化樹。參見附圖1所示，
[0044] 通過16S rRNA基因序列測定及比對，并建立系統發育樹分析，結果表明菌株屬于 芽抱桿菌屬（Bacillus sp·)，其與NCBI報道菌株Bacillus psychrosaccharolyticus ATCC 23296τ同源性最高，最高相似性為96.6%，初步斷定為該屬潛在新種。其屬性類似于短小芽 孢桿菌(Bacillus pumilus)，但是有別于常見的短小芽孢桿菌(Bacillus pumilus)具有新 菌種的典型性，是一種典型的寡營養細菌的新菌種芽孢桿菌(Bacillus sp.)，綜合結合寡 營養細菌D0B153的形態結構特征及生理生化特性，確定其為菌種編號為D0B153綜合鑒定為 寡營養細菌Bacillus sp·。
[0045] 實施例三:寡營養細菌Bacillus sp.D0B153CGMCC NO. 11926的特性研究
[0046] 1、實驗過程
[0047]將寡營養細菌D0B153在LB培養基上反復劃線活化后，用于液體菌劑的制備，接種 后置37°C搖瓶培養60h。
[0048] (1)固沙試驗
[0049]用流沙裝長30cm X寬20cm X高5cm的磁盤2個，將流沙裝入盤中，把經過搖床震蕩 培，養后的寡營養細菌D0B153噴灑在其中一個沙盤的流沙表面，另一個沙盤噴