0036] 實施例3
[0037] 取8.5kg牛皮清洗，加入蒸煮鍋中，加適量水，用氫氧化鈣將PH值調整至8。升溫至 65°C保溫，按照9xl06U/kg底物的比例加入復合酶(木瓜蛋白酶:胰蛋白酶:枯草芽孢桿菌堿 性蛋白酶= 3:2:1)，進行10小時的水解。酶解中和，酶解完成后，在料液的表面，去掉可看見 的油漂。升溫至90°C保溫5分鐘。放出初道膠液，打入脫色脫苦罐中，加入0.085kg活性炭進 行脫色脫苦，升溫至90°C保溫1小時。將料液，通過板框過濾機進行過濾后進入貯料罐。將貯 料罐中的料液降溫至60°C后，料液才可進入離子交換器，進行離子交換。進膠速度控制在 3m 3/h以下控制溫度55°C的。處理后的料液打入雙效濃縮器中進行濃縮，料液濃度濃縮至 35%。濃縮完成的料液，進行高壓滅菌，溫度控制在100°C，保持1小時。用高壓栗，將料液打 入干燥塔中，控制熱風進風溫度在170°C以上，出風溫度在80°C之間，使用18目不銹鋼絲網 進行過篩。水解后得到牛皮膠原蛋白5.47kg，膠原蛋白中蛋白質含量為97.1%，其平均分子 量為3150Da，測定水解蛋白的苦味值約為2,降低2個苦味值。
[0038] 對照例1
[0039] 取8.5kg牛皮清洗，加入蒸煮鍋中，加適量水，用氫氧化鈣將PH值調整至8。升溫至 65°C保溫，按照9xl06U/kg底物的比例加入復合酶(木瓜蛋白酶:胰蛋白酶:枯草芽孢桿菌堿 性蛋白酶= 1:2:1)，進行10小時的水解。酶解中和，酶解完成后，在料液的表面，去掉可看見 的油漂。升溫至90°C保溫5分鐘。放出初道膠液，打入脫色脫苦罐中，加入牛皮干物質重量的 0.085kg活性炭進行脫色脫苦，升溫至90°C保溫1小時。將料液，通過板框過濾機進行過濾后 進入貯料罐。將貯料罐中的料液降溫至60°C后，料液才可進入離子交換器，進行離子交換。 進膠速度控制在3m 3/h以下控制溫度55 °C的。處理后的料液打入雙效濃縮器中進行濃縮，料 液濃度濃縮至35%。濃縮完成的料液，進行高壓滅菌，溫度控制在100°C，保持1小時。用高壓 栗，將料液打入干燥塔中，控制熱風進風溫度在170°C以上，出風溫度在80°C之間，使用18目 不銹鋼絲網進行過篩。水解后得到牛皮膠原蛋白4.26kg，膠原蛋白中蛋白質含量為88.1%， 其平均分子量為3450Da，測定水解蛋白的苦味值約為3,降低1個苦味值。
[0040] 對照例2
[0041]取5kg牛皮清洗，加入蒸煮鍋中，加適量水，用氫氧化鈣將PH值調整至8。升溫至65 °C保溫，按照8xl06U/kg底物的比例加入復合酶(木瓜蛋白酶:胰蛋白酶:枯草芽孢桿菌堿性 蛋白酶= 2:3:2)，進行2小時的水解。酶解中和，酶解完成后，在料液的表面，去掉可看見的 油漂。升溫至90°C保溫5分鐘。放出初道膠液，打入脫色脫苦罐中，加入牛皮干物質重量的 0.05kg活性炭進行脫色脫苦，升溫至90°C保溫30分鐘。將料液，通過板框過濾機進行過濾后 進入貯料罐。將貯料罐中的料液降溫至60°C后，料液才可進入離子交換器，進行離子交換。 進膠速度控制在2m 3/h以下控制溫度50 °C的。處理后的料液打入雙效濃縮器中進行濃縮，料 液濃度濃縮至35%。濃縮完成的料液，進行高壓滅菌，溫度控制在100°C，保持1小時。用高壓 栗，將料液打入干燥塔中，控制熱風進風溫度在170°C以上，出風溫度在70°C之間，使用18目 不銹鋼絲網進行過篩。水解后得到牛皮膠原蛋白的2.74kg，膠原蛋白中蛋白質含量為89%， 其平均分子量為3500Da，測定水解蛋白的苦味值約為2,降低2個苦味值。
[0042] 對照例3
[0043] 將市售明膠溶液，升溫至65°C保溫，按照10xl06U/kg底物的比例加入復合酶(木瓜 蛋白酶:胰蛋白酶:枯草芽孢桿菌堿性蛋白酶= 3:2:1)，進行10小時的水解。酶解中和，升溫 至90°C保溫5分鐘。放出初道膠液，打入脫色脫苦罐中，加入0. lkg活性炭進行脫色脫苦，升 溫至90°C保溫1小時。將料液，通過板框過濾機進行過濾后進入貯料罐。將貯料罐中的料液 降溫至60°C后，料液才可進入離子交換器，進行離子交換。進膠速度控制在4m 3/h以下控制 溫度55°C的。處理后的料液打入雙效濃縮器中進行濃縮，料液濃度濃縮至35%。濃縮完成的 料液，進行高壓滅菌，溫度控制在100°C，保持1小時。用高壓栗，將料液打入干燥塔中，控制 熱風進風溫度在170°C以上，出風溫度在80°C之間，使用18目不銹鋼絲網進行過篩。水解后 得到牛皮膠原蛋白5.37kg，膠原蛋白中蛋白質含量為86.1 %，其平均分子量為3850Da，測定 水解蛋白的苦味值約為2，降低2個苦味值。
【主權項】
1. 一種復合酶法水解制備牛皮膠原蛋白的方法，其特征在于包含如下步驟： 1) 將牛皮材料堿化處理后，控制溫度60-65 °C，進行復合蛋白酶水解； 2) 將步驟1)獲得的水解產物除去油漂，升溫滅酶； 3) 將步驟2)獲得的水解產物通過離子交換器進行離子交換，去除重金屬及過氧化物； 4) 對步驟3)得到的混合物進行濃縮，控制料液濃度在35 %以上，高壓滅菌； 5) 對步驟4)獲得的濃縮液進行噴霧干燥處理，獲得牛皮膠原蛋白。2. 權利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟1)中堿化處理PH值為8-9。3. 權利要求1或2所述的方法，其特征在于所述步驟1)復合蛋白酶組成為木瓜蛋白酶、 胰蛋白酶、枯草芽孢桿菌兩種或多種混合液。4. 權利要求3所述的方法，其特征在于所述步驟3)復合蛋白酶組成為木瓜蛋白酶:胰蛋 白酶:枯草芽孢桿菌堿性蛋白酶比例為3:2:1。5. 權利要求1或2所述的方法，其特征在于步驟2)后還包括一個脫色脫苦步驟，工藝參 數為:90°C活性炭進行脫色保溫30分鐘。6. 權利要求5所述的方法，其特征在于具體步驟為： (1) 蒸煮酶解:將清洗后的牛皮5-10kg，加入蒸煮鍋中，加適量水，將PH值調至8-9，升溫 至60-65°C保溫，按照8-10xl0 6U/kg的比例加入復合酶，進行水解，酶解時間2-10h; (2) 去脂肪:酶解中和完成后，在料液的表面，去除可看見的油漂； (3) 滅酶:升溫滅酶； (4) 脫色脫苦:滅酶后放出初道膠液，打入脫色罐中，加入0.05-0. lkg活性炭進行高溫 脫色脫苦； (5) 過濾:脫色脫苦后的料液，通過過濾機進行過濾后進入貯料罐； (6) 離子交換:將貯料罐中的料液降溫至37-60°C后，料液才可進入離子交換器，進行離 子交換;進膠速度控制在2-5m3/h以下； (7) 濃縮:將料液打入雙效濃縮器中進行濃縮，料液濃度濃縮至35 %以上； (8) 滅菌:濃縮完成的料液，進行高壓滅菌； (9) 噴霧干燥:噴霧干燥處理，獲得產品。7. 權利要求1或6所述的方法，其特征在于所述噴霧干燥工藝為：用高壓栗，將料液打入 干燥塔中，控制熱風進風溫度在170 °C以上，出風溫度在70-90 °C之間。8. 權利要求1或6所述的方法，其特征在于脫色脫苦工藝為90-100°C，30min以上。
【專利摘要】本發明公開了一種復合酶法水解制備牛皮膠原蛋白的方法，利用復合酶水解制備牛皮膠原蛋白的工藝，以獲取所需的蛋白質產品。經過牛皮浸泡清洗，蒸煮酶解，脫色脫苦，過濾，離子交換，濃縮，滅菌，噴霧干燥，過篩工序。本發明省去傳統制作工藝復雜程序，降低能耗和成本，能直接使用牛皮制備膠原蛋白，獲得的膠原蛋白質量好，分子量位于3050-3300Da之間，苦味顯著降低。
【IPC分類】C12P21/06
【公開號】CN105648011
【申請號】
【發明人】曹祥來
【申請人】上海中新裕祥化工有限公司
【公開日】2016年6月8日
【申請日】2016年3月4日