一種紅景天實體小分子肽的提取方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種提取方法，具體涉及一種紅景天實體小分子肽的提取方法。
【背景技術】
[0002]小分子肽是多肽的一種分類，分子量段一般在1000道爾頓以下，也稱作小肽、低聚肽或小分子活性肽，一般由2-6個氨基酸組成，其具有不需要消化、直接吸收，吸收時不需要消耗人體能量、不會增加人體胃腸功能負擔且能在人體吸收功能喪失時迫使人體吸收的優點，此外其還具有載體的功能，能將人食的其它營養載在其本體上，輸送到人體的細胞、組織，將各種微量元素運輸到人體的各個部位。
[0003]但是目前天然存在的肽是很少的，現在小分子肽的生產主要是由蛋白水解而得到的，蛋白水解的方法主要有酸法、堿法和酶法，其中酸、堿法都有成本高、工藝復雜、水解程度不易控制、對環境污染嚴重等缺點，而且在高堿或高酸的情況下，蛋白與糖和油脂等雜質發生反應，產生褐色物質甚至產生有害物質，他們都會影響小分子肽的品質。酶的水解比較溫和，無不良副反應發生，但酶作用的單一性使得通過一種酶很難達到理想的水解效果，而且蛋白提取率低。
[0004]近年來，小分子肽的應用價值越來越受到人們的重視，其相關研究也多有報道，如中國專利CN 103409491 A公開了一種大米蛋白小分子肽的制備方法，其包括以下步驟:原料預處理、粉碎、調槳、洗滌、調漿、反應、濃縮、脫水等步驟。而關于紅景天實體小分子肽的提取還鮮有報道。
【發明內容】
[0005]本發明的目的是提供一種紅景天實體小分子肽的提取方法。
[0006]本發明的目的是通過以下技術方案來實現的:
[0007]—種紅景天實體小分子肽的提取方法，包括以下步驟，
[0008](I)取紅景天進行干燥，再將干燥后的紅景天粉碎成紅景天粉末；
[0009](2)將紅景天粉末與水攪拌混合均勻成混合液，加熱混合液至90-100 0C后，保溫一段時間，再冷卻；
[0010](3)往冷卻后的混合液中加入堿性蛋白酶，并調節pH至8-10，然后加熱混合液到45-55 °C，保溫一段時間，得堿性溶液；
[0011](4)往堿性溶液中加入中性蛋白酶，并調節pH至6.8-7.0，然后加熱至45-55°C，保溫一段時間，得中性溶液；
[0012](5)往中性溶液中加入胃蛋白酶，并調節pH至3.5-3.7，然后加熱至45-55°C，保溫一段時間，得酸性溶液；
[0013](6)將酸性溶液加熱至90-100°C，保溫一段時間，過濾得濾液；
[0014](7)對濾液進行脫色處理得澄清液體，濃縮澄清液體并干燥得紅景天實體小分子肽粉末。
[0015]進一步地，步驟(I)中所述干燥為將紅景天在50_60°C的溫度下干燥15-18h。
[0016]進一步地，步驟(I)中所述紅景天粉末的細度為80-120目。
[0017]進一步地，步驟(2)中紅景天和水的重量比為1:12.5，將紅景天和水在攪拌速度為60-70r/min的條件下混合攪拌均勻;所述加熱的升溫速率為20-30°C/min;所述保溫的時間為10-15min;所述冷卻為冷卻至45-55°C。
[0018]進一步地，步驟(3)中所述堿性蛋白酶的活力為50萬u/g，所述堿性蛋白酶的重量與紅景天粉末的重量比為1:100;步驟(3)中使用質量分數為10%的氫氧化鈉水溶液調節pH;步驟(3)中所述的保溫時間為3-3.5h。堿性蛋白酶指在堿性條件下能夠水解蛋白質肽鍵的酶，它能水解蛋白質分子肽鏈生成多肽或氨基酸，堿性蛋白酶適合的PH范圍為8-10，適宜的溫度范圍為50-60°C，反應的時間大概在3-6小時，所以在加入堿性蛋白酶之后要調節pH并加熱，使其達到適合堿性蛋白酶的pH及溫度，并在適合堿性蛋白酶存活的溫度及pH條件反應 3-3.5h。
[0019]進一步地，所述中性蛋白酶的活力為15萬u/g，所述中性蛋白酶的重量與紅景天粉末的重量比為1: 100;步驟(4)中使用質量分數為1 %的鹽酸水溶液調節pH;步驟(4)中所述的保溫時間為3-3.5h。中性蛋白酶是由枯草芽孢桿菌經發酵提取而得的，屬于一種內切酶，可用于各種蛋白質水解處理，適宜的溫度范圍為45-50 °C、適宜的pH范圍為6.8-7.0。它可把動植物的大分子蛋白質水解成小分子肽或氨基酸，以利于蛋白質的有效吸收和利用，水解度高、風味佳。
[0020]進一步地，步驟(5)中所述胃蛋白酶的活力為5萬u/g，所述胃蛋白酶的重量與紅景天粉末的重量比為1: 100;步驟(5)中使用質量分數為1 %的鹽酸水溶液調節pH;步驟(5)中所述的保溫時間為3-3.5h。胃蛋白酶是一種消化性蛋白酶，由胃部中的胃黏膜主細胞所分泌，功能是將食物中的蛋白質分解為小的肽片段。
[0021]進一步地，步驟(6)中所述保溫的時間為15-20min;所述過濾為用300目-500目的過濾裝置進行過濾。在90-100°C的條件下保溫15-20min為了對酶進行滅活處理，對酶進行滅活處理后用300-500目的粗紗布或濾紙進行過濾，得到濾液。
[0022 ]進一步地，步驟(7)中往濾液中加入占所述濾液重量2 % -3 %的活性炭，在65-75 °C的溫度下攪拌脫色25-35min，然后過濾得澄清液體;濃縮澄清液體至其原有重量的15%-25%，再進行干燥得紅景天實體小分子肽粉末。活性炭是一種黑色多孔的固體炭質，主要成分為碳、并含少量氧、氫、硫、氮氯等元素，具有很強的吸附性能，為用途極廣的一種工業吸附劑。濃縮時將澄清液體加熱到60 °C左右采用真空濃縮，干燥時采用噴霧干燥或冷凍干燥。
[0023]本發明的有益效果為:本發明所述的紅景天實體小分子肽的提取方法利用復合生物酶酶解技術，并通過調節酶解參數，最大程度的發揮了各種酶制劑的作用，從而大大降低了酶制劑的用量，節約了生產成本，而且所得產品的分子量主要分布在100-700D之間，所得的小分子肽多為二肽、三肽、四肽等極易被人體吸收利用的小分子結構，分子量分布于100-700D的小分子肽占蛋白總量的90 %以上；
[0024]經常食用本發明所述的紅景天實體提取的小分子肽具有提高免疫力、改善神經功能、增強記憶力的功效，而且沒有任何已知副作用，過多的攝入會迅速隨尿液和膽汁排出，因此可以廣泛的應用于醫藥原料和保健食品中。
【具體實施方式】
[0025]實施例一
[0026]—種紅景天實體小分子肽的提取方法，包括以下步驟:
[0027](I)將紅景天在50°C的溫度下干燥15h，將干燥后的紅景天粉碎成顆粒細度為80目的紅景天粉末;將紅景天進行粉碎，有利于紅景天和水的充分混合，便于紅景天中有效成分的析出；
[0028](2)將重量比為1:12.5的紅景天和水在攪拌速度為60r/min的條件下混合攪拌均勻成混合液，然后將其加熱至90°C，并保溫1min后再冷卻至45°C，在加熱時保持溫度升高的速率為20 °C /min，因當溫度加熱到90 V時有利于紅景天中有效成分的析出；
[0029 ] (3)往冷卻后的混合液中加入活力為50萬u/g堿性蛋白酶，所加堿性蛋白酶的重量與紅景天粉末的重量比為1: 100，因堿性蛋白酶適合的pH范圍為8-11，所以在加入堿性蛋白酶之后，需調節pH至8，然后加熱混合液到45°C，保溫3h得堿性溶液;作為一種優選的方案，調節PH時使用重量分數為10%的氫氧化鈉水溶液進行調節；
[0030](4)往堿性溶液中加入活力為15萬u/g的中性蛋白酶，所加的中性蛋白酶的重量與紅景天粉末的重量比為1:100，因中性蛋白酶適宜的pH范圍為6.8-7.0，所以在加入中性蛋白酶之后需要調節PH至6.8，然后加熱至45°C，保溫3h時間，得中性溶液;作為一種優選的方案，調節PH時使用重量分數為10 %的鹽酸水溶液進行調節；
[0031](5)往中性溶液中加入活力為5萬u/g的胃蛋白酶，所加的胃蛋白酶的重量與紅景天粉末的重量比為1:100，然后調節pH至3.5，并加熱至45°C，保溫3h，得酸性溶液;作為一種優選的方案，使用質量分數為10%的鹽酸水溶液調節pH;
[0032](6)將酸性溶液加熱至90°C，保溫15min對酶進行滅活處理，然后用300目的濾紙進行過濾得濾液；
[0033](7)對濾液進行脫色處理得澄清液體，濃縮澄清液體并干燥得紅景天實體小分子肽粉末。往濾液中加入占所述濾液重量2%活性炭，在65°C的溫度下攪拌脫色25min，然后過濾得澄清液體；將澄清液體加熱到60°C采用真空濃縮，將澄清液體濃縮至其原有重量的15%，再采用噴霧干燥得紅景天實體小分子肽粉末。
[0034]實施例二
[0035]—種紅景天實體小分子肽的提取方法，包括以